胃癌印戒细胞超微结构酶细胞化学研究：五种细胞器标志酶的电镜观察

胃印戒细胞癌多见于30岁以下的女性,其侵袭力强,转移率高,这种生物学行为的发生机理日益受到关注。但从酶学特别是对多种细胞器标志酶进行超微结构水平的研究,文献中未见报告。本文应用酶细胞化学技术对胃癌印戒细胞五种细胞器标志酶(碱性磷酸酶AKPaee,酸性磷酸酶Acpace,葡萄糖-6-磷酸酶G6Pase,焦磷酸硫胺素酶TPPaee和细胞色素氧化酶Coaee)进行了细胞和超微结构水平的定位观察,并以正常胃粘膜作为对照,探讨了胃癌印戒细胞五种细胞器标志酶的分布特点及其与生物学行为间的关系。结果发现:正常胃粘膜上皮细胞AKPace均阴性;Acpase活性以主细胞为最强,旦分布于自噬及分泌溶酶体中;胃粘膜上皮细胞的核周间隙和粗面内质网(RER)G6paee均阳性,主细胞富于RER     

胃癌超微结构酶细胞化学研究：五种细胞器标志酶的电镜观察

本文应用超微结构酶细胞化学方法对14例胃癌细胞和1例正常胃粘膜上皮细胞ALPase、ACPase、G6Pase、TPPase和CCOase等五种细胞器标志酶进行了超微结构水平的定位观察,结果表明:1.正常胃粘膜上皮无ALPase反应,ACPase、G6Pase、TP-Pase和CCOase均见于相应细胞器,与其功能代谢相一致。2.部分管状腺癌细胞AL-Pase定位于腔缘及肠型微绒毛,提示它们可能来源于肠化上皮或癌细胞具有向肠上皮分化的倾向;部分管状腺癌细胞ALPase无反应,但保留着胃粘膜上皮的某些特征,表明可能来源于胃固有粘膜上皮。粘液腺癌TPPase和ACPase反应明显,其高尔基体较发达,浣酶体泌噬作用活跃,说明其分泌和消化功能均较强。低分化腺癌各标志酶无反应或反应微弱,与其相应细胞器功能低下或结构异常有关。     

细胞表面标志及髓过氧化物酶的电镜双重定位

细胞表面标志及髓过氧化物酶的电镜双重定位杨怡，郭宁，施巍，艾辉胜（军事医学科学院仪器测试中心，基础医学研究所，北京１００８５０）本研究应用单克隆抗体免疫金标记及酶细胞化学技术，对ＨＬ－６０细胞的细胞膜表面分化抗原及细胞内髓过氧化物酶（ＭＰＯ）进行双重...     

小脑浦肯野细胞酶细胞化学的超高压电镜观察

本研究采用电镜酶细胞化学方法显示小脑浦肯野细胞酸性磷酸酶活性分布,在超高压电镜下进行了观察,探讨了线状溶酶体的存在。实验动物采用 wistar 成年健康大鼠,体重150克左右,乙醚麻醉,用30mM pipes 缓冲液(PH7.4,8％蔗糖)缓冲配制的2％PFA(多聚甲醛)和GLA(戊二醛)混合固定液进行心脏灌流10分钟,立即取小脑切1mm×2mm小块,于4℃继续浸泡固定1小时后,同种缓冲液洗净。用 microslicer(微组织切片机)作成40μm非冻结切片,置入 Gomori’s 改良法配制的孵育液中,37℃恒温振荡孵育40分钟。对照组去除底物,在孵育液中加入氟     

大鼠心肌偶联的电镜及酶细胞化学研究

大鼠心肌偶联的电镜及酶细胞化学研究王仁鹏，吕银慧，陈希炜（第三军医大学中心实验室，重庆６３００３８）本文应用常规电镜和葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ６Ｐ酶）细胞化学技术对大鼠心房及心室心肌细胞的心肌偶联进行了超微结构观察，以期为心肌细胞的兴奋－收缩偶联功能提...     

X射线能谱分析方法及其在电镜酶细胞化学中的应用

近年来,X射线能谱分析和电镜酶细胞化学在许多领域中得到了广泛的应用.两者的结合把超微分析和超微观察密切结合起来,为超微结构的研究提供了可靠的分析手段.本文对X射线能谱分析的原理作简单地介绍,同时对X射线能谱分析在电镜酶细胞化学中的应用和实验方法进行了分析和讨论.     

六胺银多糖定位的电镜细胞化学技术运用

本文运用过碘酸——六亚甲四胺银的电镜细胞化学技术,分别显示出团头鲂(Megalobrama ambly cephala)脑下垂体促性腺激素(GTH)细胞分泌颗粒中的糖蛋白和莼菜(Brasemia schreberi)表皮腺毛细胞高尔基体内含物中的多糖,为这两种材料的细胞生物学研究提供了一些有意义的资料。     

一种改进的细胞色素氧化酶电镜细胞化学方法

一种改进的细胞色素氧化酶电镜细胞化学方法迟月明陆炎吴振铎（哈尔滨医科大学克山病研究所、附属二院核医学科、电镜室，哈尔滨１５００８６）用电镜细胞化学方法研究细胞色素氧化酶活性产物定位，对了解细胞超微结构及功能状态十分重要。Ｓｅｌｉｇ－ｍａｎ等［１］建立...     

人脑膜瘤磷酸酶电镜细胞化学研究

碱性磷酸酶和5＇—核苷酸酶活性主要定位于脑膜瘤毛细血管内皮细胞膜上。碱性磷酸酶活性还定位于砂粒型脑膜瘤细胞质膜和内质网上。Na~+-K~+-ATP酶活性定位于脑膜瘤细胞质膜上。酸性磷酸酶和胞嘧啶单核苷酸酶活性定位于瘤细胞溶酶体。焦磷酸硫胺素酶活性定位于高尔基体和内质网。文中对不同亚型脑膜瘤酶活性强度和定位差异进行了讨论。     

急性砷中毒大鼠心肌的电镜细胞化学观察

本实验是把显示葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的电镜细胞化学技术应用于研究急性砷中毒大鼠心肌G-6-Pase活性的变化,目的在于从亚显微水平上进一步探讨砷对心肌结构和功能的影响。选用健康wistar大鼠20只,随机分成实验组和对照组,每组10只。实验组大鼠每天自由饮用含As_2O_350PPm的蒸馏水,对照组饮用蒸馏水。35天后急性处死取其心尖部组织,置于4％多聚甲醛+1％戊二醛内前固定,入孵育液,37℃下孵育60min,1％锇酸后固定,常规脱水包埋,超薄切片,不经电子染色进行电镜观察。     

植物叶肉细胞内果糖1.6—二磷酸酶（FDPase）的电镜细胞化学定位法

本义在探讨果糖1.6—二磷酸酶(FDPase,EC3.1.3.11)细胞化学反应条件的基础上,初步建立了植物叶肉细胞内FDPase的电镜细胞化学定位法。本研究表明:FDPase的最适pH约为8.6;最适底物浓度约为1mM;mg～(+2)是FDPase活性绝对必需的;FDPase是一种膜束缚酶,它特异性地定位于叶绿体的类囊体膜。     

慢性乙型肝炎和肝硬变中肝细胞微体的电镜细胞化学及其定量研究

用过氧化氢酶电镜细胞化学和立体定量方法，观察分析慢性乙型肝炎及肝炎肝硬变时肝细胞微体的改变。分别选取慢性迁延性肝炎、非活动性肝硬变、轻度慢性活动性肝炎、重度慢性活动性肝炎、活动性肝硬变及正常对照组标本各５例。结果表明，慢性迁延性肝炎和非活动性肝硬变时微体的体密度无改变，而轻、重度慢性活动性肝炎及活动性肝硬变的微体数密度、体密度均不同程度地增加，是慢性肝病活动性的表现。微体增多可作为慢性活动性肝炎与慢性迁延性肝炎之间的区分和肝硬变活动性判定的指标。文章提出病毒性肝炎时微体增多是肝细胞针对毒氧素进行解毒的慢性代偿性反应．     

电镜在消化道疾病诊断中的应用

本文应用透射及扫描电镜结合冷冻断裂技术，免疫组化、免疫电镜技术及电镜酶细胞化学技术等对消化道疾病－－慢性萎缩性胃炎，胃癌及其癌前病变进行了细胞及超微水平的定位观察，重点探讨其发病机理及病变特点，为诊断及预防提供形态依据。     

电镜技术在耳形态学研究方面的应用

自本世纪 30年代电子显微镜技术建立以来 ,特别是 5 0年代建立了生物组织超薄切片技术以后 ,病理形态学研究逐渐深入到亚细胞领域或分子水平。近 2 0年来 ,电镜技术在耳形态学观察、爆震性聋、老年性聋等方面开展工作 ,并取得一些成果 ,现分述如下。1 .电子显微镜技术建立和完善了内耳常规扫描电镜样品制备技术 ,在此基础上进行技术改进 ,能够同时用一侧颞骨制备完整的耳蜗和前庭两个囊斑及三个壶腹嵴的扫描电镜观察样品。获得了极佳的观察效果。由于内耳结构精细复杂 ,取出标本后极易受损变形 ,给制备透射电镜样品带来一定困难 ,我们在常规…     

干旱逆境下小麦幼苗细胞叶绿体内钙离子浓度变化的电镜细胞化学研究

采用改进的焦锑酸钙沉淀的细胞化学方法，探讨了在干旱逆境条件下叶绿体与Ca^2 水平变化的关系。结果表明：在正常水分下生长的小麦幼苗，其叶绿体中含有少量Ca^2 ；水分胁迫24、48h，叶绿体膜上密布Ca^2 ；随着胁迫时间的增加，叶绿体超微结构受到的伤害越发严重，最后解体。     

大鼠肺巨噬细胞iNOS电镜细胞化学定位显示法

目的;对大鼠肺泡巨噬细胞NOS进行细胞内定位显示。方法：由大鼠支气管肺泡灌洗液中获取肺泡巨噬细胞,富集制备成单层细胞爬片。在37℃,5％CO2的二氧化碳培养箱中,用LPS（1g/L）刺激24h以诱导肺泡巨噬细胞NOS表达。采用NADPH－d电镜细胞化学术对肺泡巨噬细胞NOS进行定位显示。结果：活化的AM胞浆内可见大量颗粒状电子密度沉淀。结论：NADPH－d电镜细胞化学方法所显示的AM诱导型NOS是胞浆酶。     

电镜酶细胞化学技术及其应用

电镜酶细胞化学是在超微结构水平上研究酶的活性定位和变化的新技术。用此技术,有利于综合分析细胞的超微结构特征与酶活性分布之间的相互联系,对研究各种生理病理情况下酶的定位和代谢特征有很重要的意义。近年来,我们摸索、引用或改进了十八种酶(5′—核苷酸酶、核苷二磷酸酶、钠—钾—ATP酶、Mg~(++)-ATP酶、Ca~(++)-ATP酶、细胞色素氧化酶、腺苷酸环化酶、糖原合成酶、LDH、MAO、ALP、ACP、AChE、SDH、CMP酶、TPP酶、G-6-P酶、NADP酶)的电镜细胞化学方法,并应用于高压氧医学和脑肿瘤酶活性定位研究。在应用中我们体会到:(1)用2％多聚甲醛—0.5％戊二醛(0.1M二甲砷酸缓冲液或PBS配成,加6.5％蔗糖)混合固定液固定对大多数酶是合适的。少数酶如SDH不耐固定,须用     

我国电镜诊断学的现状与展望

电子显微镜用于临床研究和诊断已有三十多年历史，但国内起步较晚。电镜在疾病诊断中所起的作用主要是：①光镜不能替代；②对某些肿瘤的诊断有其独到之处；③对某些疾病的诊断起决定作用；④电镜所获得的信息对光镜诊断结果补充或修正；⑤综合运用电镜技术可对临床颖难疾病作出明确诊断。     

胆小管超微细胞酶学研究

以电镜细胞化学的方法,观察了小鼠胆小管酶的分布。观察的12种酶中,NDPase和G6Pase三种酶分布于胆小管微绒毛;AlPase、Na~+-K~+ATPase、Mg~(++)-ATPase、Ca~(++)-ATPase、CMPase、ACase和5＇-Nase等7种酶分布于胆小管微绒毛,也分布于肝细胞邻接面细胞膜和Disse间隙微绒毛;ACPase、细胞色素氧化酶以及线粒体ATPase不分布胆小管微绒毛,也不分布Disse间隙微绒毛和肝细胞膜。据信,胆小管微绒毛上的酶参与胆汁成份的转运,提供转运所需能量以及还可能与某些代谢过程有关。本实验中磷酸水解酶类使用的铈基法及亚铁氰化钾半还原的锇酸后固定法,效果优于铅法。