冰核活性细菌中冰核活性蛋白质的分离与纯化的研究

解决生物冰核应用中的安全问题,从产冰核活性的细菌中分离纯化天然冰核活性蛋白质是一条重要途径,对其应用具有重要价值。本研究以冰核活性细菌(Erwinia herbicola 10025A)为实验菌种,经培养获得高浓度发酵液,离心处理后,采用超声波破碎、凝胶层析的方法,分离纯化得到了Erwiniaherbicola10025A的I型冰核活性蛋白质。该蛋白质经SDS-PAGE的分析鉴定,证实了该冰核活性蛋白质的分子量为150kD左右。     

冰核活性细菌发酵生产冰核活性蛋白产物的研究进展

对国内外关于冰核活性细菌 (简称INA细菌 )发酵生产冰核活性蛋白的条件 ,发酵过程的调控手段 ,及其对发酵生产的相关技术方法进行了较为详尽的综述 ,为研究开发这一新型蛋白资源提供较为全面的背景材料     

冰核活性细菌发酵培养基的优化筛选

研究了不同营养构成及添加不同营养物质对冰核细菌生长和冰核活性的影响 ,采用正交试验优化了培养基组成。优化后的培养基最佳配方为 :在MPDA培养基中添加 0 4%半乳糖、1 5 %酵母粉、0 0 1%粗磷脂。在优化后的培养基中培养供试菌 ,菌体收获量 (干重 )比在MPDA培养基中培养增加 2 4g/L ,冰核活性增加 2 4 3 %。     

天津市蔬菜叶表冰核活性细菌的调查与分离鉴定

从天津市不同地点的36个蔬菜叶表样本中分离获得58株冰核活性细菌,发现它们的分布与蔬菜的类别及生长环境有关。同时对冰核活性较高的14株菌进行了常规鉴定,结果表明这些菌分别属于3个属6个种。     

植物抽取物对冰核活性细菌表达冰核活性蛋白的影响

植物提取物对于冰核活性细菌表达冰核活性蛋白具有明显的促进作用。通过添加适量的芥菜籽热水抽取物培养冰核活性细菌 (XanthomonasampelinaTS2 0 6) ,细菌的冰核活性比原来提高了 37.5 %,菌体的生物量提高了 36.2 %。芥菜籽抽提物作为一种效应物分子激活启动子 ,在冰核蛋白基因的表达中起到了重要作用 ,从而显著地提高了细菌高水平表达冰核活性蛋白的能力。     

冰核细菌及其在食品工业中的应用

冰核细菌是一类在较低温度(-2.5～-5)℃下具有很强冰核活性的细菌,目前在植物冻害防治、促冻杀虫、人工降雪、食品冷冻浓缩等领域已成为研究热点。本文介绍了冰核细菌的成冰机制和影响因素,以及在食品工业中的应用,井对未来冰核细菌的研究趋势作一展望。     

冰核活性细菌灭活方法的初步研究

探讨了几种灭活方法对冰核活性细菌死亡率和冰核活性的影响。结果表明:超声波破碎法使冰核细菌10025A的死亡率达到98%以上,但冰核活性有所下降。辐射处理可使冰核细菌达到100%的死亡率,不同菌种对辐射的敏感程度不同,冰核活性的变化也有所不同。其它方法处理的冰核细菌死亡率较低。     

冰核活性细菌及其在食品冻结浓缩中的应用

介绍冰核细菌的成冰机制、预处理工艺及在食品中的冷冻效率、冰晶形成结构与应用方面的最新进展 ,最后展望未来的发展趋势     

冰核活性细菌特有动力学初探

自1974年发现冰核活性细菌（ice nucleation active bacteria,简称INA细菌）以来，对冰核活性细菌及冰核蛋白特有动力学的研究就已经开始了，但主要集中在数据的经验积累方面，在细胞生长、冰核活性鉴定、成冰特性等方面都缺乏可靠的公认的数学模型。本文从已知的冰核活性细菌和冰核活性蛋白的特性出发，对其独特的动力学性质进行总结、实验性探讨并提出相关的假说。这项研究跨越了多个学科领域，是一门崭新的边缘科学。冰核活性细菌及其产生的冰核活性蛋白在农业、娱乐业、食品行业等领域具有广泛的应用，随着其动力学研究的深入，人们将能更有效地控制和利用它们为自己服务。     

冰核活性细菌的研究进展及其开发前景

自1974年发现冰核活性细菌（ice nucleation active bacteria,简称INA细菌）以来,美国、日本等20多个国家分别对冰核活性细菌及冰核活性蛋白进行了多方面的研究。并且逐步将其应用于农业、娱乐业、食品行业等领域。我国自1986年起开始了对冰核细菌的研究。研究主要集中在种群分布、植物保护、人工降雪等方面。本文从冰核活性蛋白的分子生物学基础出发,对冰核活性细菌的研究进展及开发应用前景进行论述。     

冰核活性(INA)细菌安全应用的研究进展

自1974年发现冰核活性细菌（简称INA细菌）以来，国内外对冰核活性细菌及冰核蛋白在包括食品行业在内的多个领域的应用进行了多方面的研究。由于食品行业对菌物安全性的特殊要求，有关冰核活性细菌安全应用的研究越来越受到重视，高压冷灭菌、蛋白纯化、固定化、助冻蛋白粉、辐照、转基因等技术逐渐出现。本文综合国内外关下地对冰核活性细菌的安全应用技术的研究进展进行论述。     

冰核活性细菌在5L发酵罐上培养条件的研究

对5L发酵罐上培养冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206的发酵工艺条件进行了系统的研究,确定了最适的工艺条件为:通气量2L/(L·min),搅拌速度500r/min,接种量10%,最适培养时间48h,所获得的Xan-thomonasampelinaTS206菌体干重为12·934g/L,冻滴率为100%。     

冰核细菌在食品工业中的应用

Pseudomonoas,Erwinia和Xanthomnoas属的种或变种细菌产生细菌冰核,在-2～-5℃有冰核活性,能使水冻结。这一特性使得这些微生物在食品冷冻（冰核为限制步骤）中非常有用。在国外,冰核活性（INA）细菌及其胞外冰核应用于食品冷冻浓缩、冷冻干燥和改善食品的冷冻质地（freeze texturing）中已有一些报道,国内尚未见同类报道。我们与华南农业大学食品科学系合作进行了初步的冰核细菌在食品冷冻加工中的应用研究。本文结合我们的初步结果就冰核细菌及其在食品冷冻加工中应用作一综述,并展望该技术未来的发展趋势。1　冰核活性细菌一般地,一小滴纯水能过冷却到-39℃而不结冰[1],甚     

盐渍与水发海参的细菌分离鉴定

从盐渍与水发刺参中分离到10株菌,6株革兰氏阴性菌,4株革兰氏阳性菌。形态及生理生化反应测试结果表明,10株菌分别为3种棒状杆菌(Corynebacterium sp.)、嗜冷杆菌(Psychrobacter phenylpyruvica Bowman)、华氏葡萄球菌(Staphylococcus warneri)、奥斯陆莫拉氏菌(Moraxella osloensis)、鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)、栖稻黄色单胞菌(Flavimonas oryzihabitans Holmes)、脲放线杆菌(Actinobacillus ureae Mutters)和少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis Yabuuchi),后5株为致病菌或条件致病菌。检测了10株菌的胞外酶活性,实验结果表明10株菌对酯均无分解能力,9株菌具有胶原蛋白酶活性,7株菌具有淀粉酶活性,6株菌具有酪蛋白酶活性。多种致病菌严重影响了刺参的食用安全,也是刺参易腐败降解的一个重要因素。     

荸荠表面拮抗细菌的分离鉴定及其表面抑菌活性

为探究荸荠表面泥土中拮抗微生物的作用,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作为筛选测试菌株,对泥土中的拮抗细菌进行分离,采用菌体形态、生理生化特征及16S rDNA基因序列分析对筛选菌株进行鉴定,并考察其发酵滤液对荸荠表面微生物的影响。结果表明,从带泥荸荠表面泥土中分离出2株拮抗细菌WB22、WB39,经鉴定其分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和弯曲假单胞菌(Pseudomonas geniculata)。2株细菌发酵滤液对荸荠表面的细菌、酵母菌和霉菌数均有一定的抑制作用。其中,B.amyloliquefaciens对细菌、酵母菌、霉菌的抑菌率分别为17.42%、9.05%和13.74%,且对球菌的抑制作用强于杆菌,对G+菌的抑制作用强于G-菌。而P.geniculata对细菌、酵母菌、霉菌的抑菌率分别为20.29%、4.64%和16.14%,对球菌和杆菌、G+菌和G-菌均具有较强的抑制作用。本研究为今后荸荠生物贮藏保鲜技术的开发提供一定的理论依据。     

冰核活性细菌Xanthomonas ampelinaTS206实验室水平发酵生产工艺条件优化的研究

优化冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206实验室水平发酵生产的工艺条件为将冰核活性细菌应用在工业化生产提供了重要的技术资料。本文对冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206实验室水平的发酵生产工艺条件进行了系统的研究,结果表明这种冰核活性细菌的最适培养条件为:培养温度18℃,装液量40ml/250ml,摇床转速180r/min,接种量3%,发酵液的初始pH8。实验还确定了冰核活性细菌在发酵48h时达到对数生长期。采用上述发酵条件培养XanthomonasampelinaTS206可以使细菌在冰核活性不降低的条件下发酵液的菌体浓度达到2.87×1010个/ml,菌体干重增加了37.7%。     

污水中絮凝细菌的分离及鉴定

为了阐明污泥中絮凝细菌的种类和特性,利用常规培养技术通过絮凝率测定和多次富集从污水水渠中分离和筛选絮凝菌,并对筛选得到的菌株进行形态学观察、生理生化特征分析、分子生物学鉴定以及絮凝率特性分析。结果利用营养琼脂培养基分离出絮凝菌20株,筛选出絮凝性能稳定且活性良好的两株微生物絮凝菌ZF1和ZF18,其絮凝率分别为57.68%和57.20%,超过其余18株的絮凝率。经鉴定可知,ZF1为志贺氏菌属(Shigella sp.),ZF18为荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens)。此研究不仅为研究絮凝微生物提供良好的菌种资源,更对于研究污水治理具有很好的应用潜力。     

冰核活性细菌Erwinia herbicola发酵培养条件的研究

研究了不同培养条件对冰核活性细菌冰核活性和菌体生物量的影响。结果表明：培养时间、温度、低温诱导和培养基pH值对培养液中冰核活性细菌的总活性有不同的影响。研究确定的最适发酵条件组合为培养温度18℃，培养基pH6．5，培养时间32h。     

活性污泥中二鞘细菌的分离纯化及其初步鉴定

从厦门污水处理一厂的１０份工业及生活污水样品中，经要培养，分离纯化出二株鞘细菌，编号为ＦＣ９９０１和ＦＣ９９０２。这２株菌株在形态及生理上基本一致，但在Ｗｉｎｏｇｒａｄｓｋｙ铁细菌培养基上，。ＦＣ９９－１可形成红褐色的菌落，而ＦＣ９９０２则不能。经过初步鉴定一菌株均属于球衣菌属。     

黄单胞冰核活性细菌发酵制备的初步研究

应用正交设计与均匀设计对黄单胞冰核活性细菌的发酵制备条件进行了初步研究。结果表明 ,琥珀酸抑制了黄单胞菌生长与冰核活性的表达 ,甘油、蔗糖、乳糖、谷氨酸钠不同程度地促进了冰核活性和单胞菌的生长。较优培养基配方为酵母粉 1%、大豆蛋白胨 1%、MgSO4 ·7H2 O 0 0 5%、甘油 1%、蔗糖 2 %、乳糖 1%、谷氨酸钠 0 3% ,pH 7 0 ;较优发酵组合为细菌种龄 72h ,发酵时间 4 5h