小剂量长春新碱和恩度联合用药对横纹肌肉瘤皮下移植瘤的抑制作用

目的研究小剂量长春新碱(Vincristine,VCR)和恩度(Endostar,Endo)联合用药对横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RMS)BALB/c裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用,并探讨其机制。方法经BALB/c裸鼠右侧腋部皮下注射RMS细胞PLA-802悬液,建立RMS的皮下移植瘤动物模型;接种RMS后第8天,将选模成功的裸鼠随机分为对照组(注射生理盐水)、VCR组、Endo组和联合组,注射部位均为腹腔,注射体积均为0.2 ml/(只.日),每3 d称重1次,并测量肿瘤的长短径,计算肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,2周后处死裸鼠,称量瘤重,并计算抑瘤率;RT-PCR和Western blot法检测移植瘤细胞中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;免疫组化法检测VEGF和CD31的分布和表达。结果裸鼠接种PLA-802细胞第8天,RMS裸鼠模型复制成功,裸鼠成瘤率为84%(42/50);联合组裸鼠体重和移植瘤的体积、重量均明显小于对照组、VCR组和Endo组(P<0.01);VCR组、Endo组和联合组抑瘤率分别为31.41%、20.75%和48.41%;与对照组相比,VCR组、Endo组和联合组裸鼠移植瘤细胞中VEGF基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平均显著下降,且以联合组下降最明显(P<0.05);免疫组化结果显示,联合组VEGF和CD31的表达水平明显低于其他3组。结论小剂量VCR和Endo对RMS的皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用,而联合用药能起到增效作用,其机制可能是通过抑制肿瘤的血管生成而发挥其抑制作用。     

纳米氧化铈对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的探讨纳米氧化铈(nm-Ce O2)对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法建立人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为阴性对照组(等体积双蒸水)、阳性药组[九州虫草2 000 mg/(kg·次)]、nm-Ce O2高、中、低剂量组[300、100、33.33 mg/(kg·次)],共5组,各组荷瘤裸鼠均经口灌胃给药,每天1次,共17 d,观察各组裸鼠移植瘤生长情况,计算肿瘤体积(VT)、肿瘤生长抑制率,称量肿瘤重量,观察移植瘤组织病理变化,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(terminal dexynucleotidyl transferase mediated d UTP nick end la beling,TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡率。结果与阴性对照组比较,nm-Ce O2各剂量组均具有抑制人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用,并能促进瘤细胞的变性、坏死和凋亡(P<0.05)。nm-Ce O2高剂量组的肿瘤生长抑制作用低于阳性药组(P<0.05),但nm-Ce O2高、中剂量组促进肿瘤细胞凋亡的作用高于阳性药组(P<0.05)。结论 nm-Ce O2对人乳腺癌Bcap-37细胞裸鼠皮下移植瘤具有显著的生长抑制作用。     

木香烃内酯对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响及其作用机制

目的 探讨木香烃内酯（costunolide,Cos）对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 将SMMC-7721细胞随机分为对照组、10、20、30μmol/L Cos剂量组。采用流式细胞术检测Cos对SMMC-7721细胞凋亡的影响,Western blot检测SMMC-7721细胞中凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2、Caspase-3）及内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）通路相关蛋白（GRP78、CHOP、ATF4）的表达水平。结果 10、20和30μmol/L Cos剂量组SMMC-7721细胞凋亡率（apoptosis rate,AR）均明显高于对照组（P <0.05）,且各Cos剂量组SMMC-7721细胞AR随剂量增加明显上升（P <0.01）。与对照组比较,20和30μmol/L Cos剂量组SMMC-7721细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P <0.05）,Bax蛋白表达水平均明显增加（P <0.05）,10μmol/L Cos剂量组的Bcl-2及Bax蛋白表达水平差异无统计学...     

联氨基姜黄素对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其机制

目的探讨联氨基姜黄素对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法检测联氨基姜黄素对MCF-7细胞的抗增殖效应,Hochest33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞术分析细胞的周期分布和凋亡情况,Western blot检测MCF-7细胞中Bcl-2、Bax、Cyclin D1和Survivin蛋白的表达变化。结果联氨基姜黄素可抑制MCF-7细胞的增殖,IC50为2.56μmol/L,而姜黄素的IC50为21.22μmol/L;联氨基姜黄素染色24 h后,MCF-7细胞出现核荧光强度增强、颗粒状荧光等凋亡特征;凋亡细胞比率明显增加,并可阻滞细胞周期于G1期,且呈一定的剂量依赖性;联氨基姜黄素可使MCF-7细胞中Bcl-2、Cyclin D1、Survivin蛋白表达水平明显降低,而Bax表达增加。结论联氨基姜黄素具有抑制MCF-7细胞增殖、促进凋亡、阻滞细胞周期于G1期的作用,其机制可能与Bcl-2、Bax、Cyclin D1、Survivin蛋白的表达改变有关。     

大豆多肽对前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨大豆多肽对前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响,为临床应用大豆多肽治疗前列腺癌提供实验依据。方法用不同浓度的大豆多肽(5、10、15、20μmol/L)处理前列腺癌PC-3细胞不同时间(24、48、72 h),采用MTT法检测细胞的增殖活力,倒置显微镜观察细胞的形态,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期。结果大豆多肽可抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,将细胞周期阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡,中晚期细胞凋亡趋势明显,且呈明显的剂量与时间依赖性;随着大豆多肽浓度的增加,前列腺癌PC-3细胞密度逐渐降低,边缘趋于圆滑,细胞间隙逐渐增大,局部可见部分已固缩的细胞及死亡的细胞碎片。结论大豆多肽可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,诱导细胞凋亡,在临床治疗前列腺癌方面具有广阔的应用前景。     

Survivin基因干扰和过表达对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

目的观察凋亡抑制蛋白Survivin基因干扰和过表达对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响。方法将Survivin基因shRNA干扰质粒和过表达质粒pcDNA3.1-GFP-Survivin在脂质体介导下转染MCF-7细胞,并设空白对照组和脂质体对照组,转染后48 h,荧光显微镜下观察转染效率;荧光定量RT-PCR法检测转染细胞中Survivin基因mRNA的转录水平;MTT法检测转染细胞的凋亡率。结果转染MCF-7细胞后48 h,Survivin基因RNAi质粒和过表达质粒的转染效率为50%～60%;shRNA质粒转染组MCF-7细胞中Survivin基因mRNA的转录水平明显低于空白对照组和脂质体对照组,而过表达质粒转染组明显高于空白对照组和脂质体对照组(P<0.05);shRNA质粒转染组MCF-7细胞的凋亡率明显高于空白对照组和脂质体对照组,而过表达质粒转染组明显低于空白对照组和脂质体对照组(P<0.05)。结论 Survivin基因对人乳腺癌MCF-7细胞的凋亡具有一定的抑制作用,可作为人乳腺癌生物治疗的候选基因。     

白藜芦醇对人腺泡横纹肌肉瘤细胞株PLA-802增殖和凋亡的影响及其分子机制

目的观察白藜芦醇(Resveratrol,Res)对人腺泡横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)细胞株PLA-802增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养PLA-802细胞,用不同浓度的Res(25、50、100、200μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)。MTT法检测Res对PLA-802细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测Res对PLA-802细胞周期和凋亡的影响;采用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3酶的活性;Western blot法检测PLA-802细胞中与凋亡密切相关的Bax、Bcl-2、Survivin和Caspase-3酶蛋白的表达水平。结果 Res可明显抑制PLA-802细胞的增殖(P0.05)及提高Caspase-3酶活性(P0.001),且呈剂量-时间依赖性;同时可明显提高处于G0/G1及G2/M期的细胞比例(P0.01),减少S期细胞比例(P0.001),促进PLA-802细胞的凋亡,且可显著增加促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达水平(P0.05),降低抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin的表达水平(P0.05)。结论 Res可通过上调Bax、Caspase-3及下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平及激活Caspase-3酶活性,诱导PLA-802细胞的凋亡并抑制其增殖,为治疗RMS提供了实验依据。     

蛇床子素对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗作用的影响及作用机制

目的探讨蛇床子素(osthole)对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗作用的影响及其可能的机制。方法将鼻咽癌CNE2细胞株经NU/NU裸鼠右腋皮下接种,2×10~8个/只,待移植瘤长至150mm~3时,随机分为对照组(隔1 d经腹腔注射无菌生理盐水,0.2 m L/只)、单纯蛇床子素组[隔1 d经腹腔注射,1.5μg/(g·10μL)]、单纯放疗组(5 Gy/次,隔3 d X射线照射1次)、蛇床子素联合放疗组(经腹腔注射蛇床子素2 h后进行放射治疗,剂量与方法同单纯蛇床子素组及单纯放射组)。每3 d测量移植瘤体积,首次给药后第21天取出移植瘤,称瘤重;流式细胞术检测移植瘤细胞凋亡率;荧光定量PCR及Western blot法分别检测移植瘤细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及乏氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因m RNA转录和蛋白表达水平。结果与对照组比较,单纯蛇床子素组、单纯放疗组及蛇床子素联合放射组裸鼠移植瘤体积及瘤重均明显下降(P0.05),细胞凋亡率明显升高(P0.05),其中蛇床子素联合放射组最显著,且该组裸鼠移植瘤中VEGF及HIF-1α基因m RNA转录及蛋白表达水平明显低于单纯蛇床子素组及单纯放疗组(P0.05)。结论蛇床子素可增强鼻咽癌裸鼠移植瘤对放疗的敏感性,其机制可能与下调VEGF及HIF-1α表达,抑制血管生成有关。     

姜黄素对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨姜黄素对HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法分别用10、20、40μmol/L姜黄素处理HeLa细胞24h后,MTT法检测细胞的增殖,光镜观察细胞形态,TUNEL技术检测细胞的凋亡,免疫细胞化学法检测Cytochrome C和Caspase-9蛋白的表达,Western blot法检测XIAP蛋白的表达。结果姜黄素对HeLa细胞的增殖有抑制作用,并呈剂量依赖性;部分细胞呈现典型的凋亡形态学改变;姜黄素作用后,Cytochrome C和Caspase-9蛋白的表达显著增强,XIAP蛋白的表达显著下降,且均呈剂量依赖性。结论姜黄素能抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡,Cytochrome C和Caspase-9的表达上调及XIAP的表达下调可能参与凋亡过程。     

人参多糖对鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及其可能的机制

目的探讨人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞,经裸鼠背部皮下注射,1×107个/(0.2 ml·只),待瘤体最大径为4~6 mm时,取20只模型裸鼠,随机分为4组:对照组(经腹腔注射生理盐水)、放疗组(每次每只裸鼠经肿瘤局部给予5 Gy X射线照射,每3 d照射1次,共3次)、GPS组(经腹腔注射GPS,30 mg/kg,每次0.3 ml,每72 h给药1次,共5次)和GPS联合放疗组(经腹腔注射GPS,30 mg/kg,每次0.3 ml,每72 h给药1次,共5次;末次给药48 h后开始放疗,每只每次经肿瘤局部给予5 Gy X射线照射,每3 d照射1次,共3次)。开始给药3周后处死裸鼠,取瘤体,称重,测量肿瘤的长、短径,计算肿瘤体积及抑制率;HE染色观察移植瘤组织病理学改变;Real-time PCR检测移植瘤组织中β-catenin基因mRNA的转录水平;免疫组织化学和Western blot法检测移植瘤组织中β-catenin蛋白的表达水平。结果与对照组相比,GPS组、放疗组和GPS联合放疗组的肿瘤体积及瘤重均明显下降(P0.05),抑制率分别为29.87%、52.60%和74.68%;镜下观察可见,GPS联合放疗组细胞凋亡明显,多数细胞核完全溶解,细胞结构消失,坏死的肿瘤组织呈现均质红染表现;GPS联合放疗组移植瘤中β-catenin mRNA及蛋白的表达水平均显著下降(P均0.05)。结论 GPS可抑制CNE-2细胞在裸鼠体内的生长,且对鼻咽癌的放疗具有增敏作用,其机制可能与抑制β-catenin的表达有关。     

Myricanol Induces Apoptotic Cell Death and Anti-Tumor Activity in Non-Small Cell Lung Carcinoma in Vivo

This study explored the inhibiting effect and mechanism of myricanol on lung adenocarcinoma A549 xenografts in nude mice. Forty nude mice with subcutaneous A549 xenografts were randomly divided into five groups: high-dose myricanol (40 mg/kg body weight) group; middle-dose myricanol (20 mg/kg body weight) group; low-dose myricanol (10 mg/kg body weight) group; polyethylene glycol 400 vehicle group (1 mL/kg); and tumor model group. Nude mice were sacrificed after 14 days of treatment and the tumor inhibition rate (TIR, %) was then calculated. The relative mRNA expression levels of Bax, Bcl-2, VEGF, HIF-1α, and survivin in the tumor tissues were determined by real-time PCR. TUNEL assay was applied to determine cellular apoptosis, while IHC test was performed to detect the protein expression levels of Bax, Bcl-2, VEGF, HIF-1α, and survivin. The TIR of the three myricanol-treated groups ranged from 14.9% to 38.5%. The IHC results showed that the protein expression of Bcl-2, VEGF, HIF-1α, and survivin were consistently downregulated, whereas that of Bax was upregulated after myricanol treatment. Myricanol also significantly upregulated the mRNA expression of Bax and downregulated that of Bcl-2, VEGF, HIF-1α, and survivin in a dose-dependent manner (p < 0.05 to 0.001). These results are consistent with those of IHC. The TUNEL assay results indicated that apoptotic-positive cells significantly increased in the myricanol-treated tumor tissues compared with the cells of the vehicle control group (p < 0.01 to 0.001). These data suggest that myricanol could significantly decelerate tumor growth in vivo by inducing apoptosis.     

Induction of Endoplasmic Reticulum Stress-Mediated Apoptosis by Aminosteroid RM-581 Efficiently Blocks the Growth of PC-3 Cancer Cells and Tumors Resistant or Not to Docetaxel

Aminosteroid derivative RM-581 was previously identified as an endoplasmic-reticulum (ER) stress inducer with potent in vitro and in vivo anticancer activities. We report its evaluation in androgen-independent prostate cancer (PC-3) cells. RM-581 efficiently blocks PC-3 cell proliferation with stronger activity than that of a selection of known antineoplastic agents. This later also showed a synergistic effect with docetaxel, able to block the proliferation of docetaxel-resistant PC-3 cells and, contrary to docetaxel, did not induce cell resistance. RM-581 induced an increase in the expression level of ER stress-related markers of apoptosis, potentially triggered by the presence of RM-581 in the ER of PC-3 cells. These in vitro results were then successfully translated in vivo in a PC-3 xenograft tumor model in nude mice, showing superior blockade than that of docetaxel. RM-581 was also able to stop the progression of PC-3 cells when they had become resistant to docetaxel treatment. Concomitantly, we observed a decrease in gene markers of mevalonate and fatty acid pathways, and intratumoral levels of cholesterol by 19% and fatty acids by 22%. Overall, this work demonstrates the potential of an ER stress inducer as an anticancer agent for the treatment of prostate cancers that are refractory to commonly used chemotherapy treatments.     

慢病毒介导的人乳头瘤病毒16型E6基因shRNA对荷瘤裸鼠宫颈癌生长的抑制作用

目的探讨慢病毒介导的人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)16型E6基因shRNA在体内对荷瘤裸鼠宫颈癌生长的抑制作用。方法将BALB/c-nu裸鼠随机分为空白对照组、干扰组和无义干扰组,经皮下接种宫颈癌Caski细胞(2×106个),移植瘤直径达0.5 cm时,空白对照组于瘤体局部注射PBS,干扰组和无义干扰组分别于瘤体局部注射靶向HPV16型E6基因的shRNA-PLL3.7干扰慢病毒和无义干扰慢病毒(3×108TU/ml),2周后检测瘤体大小和重量的变化,采用免疫组化法检测肿瘤组织中HPV16型E6、P53和P21蛋白的表达。结果与无义干扰组和空白对照组比较,干扰组裸鼠体内肿瘤明显缩小,瘤体重量明显降低(P<0.000 1),无义干扰组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);干扰组肿瘤组织中HPV16型E6蛋白的表达被抑制,P53和P21蛋白的表达水平明显升高。结论慢病毒介导的HPV16型E6基因shRNA能有效抑制动物体内宫颈癌的生长,具有潜在的开发应用前景。     

STAT3过度表达和激活对骨髓间充质干细胞瘤样转化的作用

目的探讨在体外模拟的肿瘤微环境中,骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)中STAT3的过度表达和激活对其恶性转变的影响。方法通过MSCs分别与C6胶质瘤及星型胶质细胞间接共培养,模拟MSCs生长的肿瘤微环境,实验设实验组、阳性和阴性及空白对照组,MTT法检测各组细胞的增殖情况;RT-QPCR检测各组细胞中STAT3、CyclinD1及BCL-xl基因mRNA的表达水平;Western blot检测各组细胞中STAT3、P-STAT3、CyclinD及BCL-xl的蛋白表达水平;病理HE染色检测各组细胞注入裸鼠皮下成瘤情况。结果实验组MSCs生长接触抑制明显减弱,增殖活性增高;实验组STAT3、CyclinD1及BCL-xl基因mRNA的表达水平均明显高于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组STAT3、P-STAT3、CyclinD1及BCL-xl的蛋白表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);HE染色结果显示,实验组与阳性对照组细胞深染,聚集明显,排列不规则,细胞核大深染,瘤内有大量新生血管增生,可见组织坏死。结论 STAT3及P-STAT3的过度表达和激活,可能是造成MSCs在肿瘤微环中恶性转变的重要原因之一。     

骨桥蛋白反义基因对乳腺癌荷瘤裸鼠肿瘤生长及肺转移的影响

目的探讨骨桥蛋白反义基因(ANOPN)对乳腺癌荷瘤裸鼠肿瘤生长及肺转移的影响。方法构建人骨桥蛋白反义基因真核表达质粒pcDNA3.1-ANOPN,将质粒pcDNA3.1-ANOPN、空载体pcDNA3.1(+)和等量的脂质体分别转染人乳腺癌细胞系MDA-MA-231,将转染细胞分别命名为MDA-ANOPN、MDA-vect和MDA,接种至裸鼠,观察肿瘤的生长、转移情况,并用免疫组化法检测肿瘤组织切片中OPN的表达。结果重组质粒pcDNA3.1-ANOPN经酶切、PCR及测序,证明构建正确。MDA-ANOPN组裸鼠出瘤时间、肿瘤体积及重量较MDA-vect和MDA组均显著降低,肿瘤肺转移灶数量减少,OPN表达较低。结论ANOPN可抑制裸鼠移植瘤的生长及肺转移。     

Cell Adhesion Regulates Expression of the Androgen Receptor and Coregulators in Different Prostate Cancer Cells

Prostate cancer cells adhere to a tumor basement membrane, while secretory epithelial cells reside in a suprabasal cell compartment. Since tumor cells are derived from suprabasal epithelial cells, they experience de-novo substratum adhesion in the context of oncogenesis. We therefore analyzed whether cell-matrix adhesion could affect the protein expression and activity of the AR. In this study, AR protein expression declined upon suspension of BPH-1-AR cells, but not in PC-3-AR cells shown by Western blot. In a time course study, BPH-1 cell lost AR expression within 6 hours, and the synthetic androgen, R1881 reduced the loss of AR expression. We further explored the mechanism of AR loss in suspended BPH-1 cells. BPH-1-AR cells underwent apoptosis (anoikis) when suspended for 2 – 5 hours. Suspension did not induce significant apoptosis or decreasing of AR expression in PC-3 cells. Inhibition of apoptosis in suspended BPH-1-AR cells, either by expression of Bcl-2 or Bcl-xl or by treatment with Z-VAD, a caspase inhibitor, prevented loss of AR protein. In contrast, the calpain protease inhibitor, ALLN, accelerated the loss of AR protein expression. Additionally, cell-matrix adhesion changed the expression of coregulators of AR in the mRNA level of prostate cancer cells. Our results demonstrate that AR protein expression was reduced through activation of cell death pathways, and thus indirectly through cell suspension in BPH-AR cells. The activity of AR can also be regulated by adhesion in PC-3-AR and LNCaP cells through affecting the coregulators level.     

凋亡细胞对巨噬细胞中白细胞介素-27表达的影响

目的探讨凋亡细胞对巨噬细胞中白细胞介素-27(Interleukin-27,IL-27)表达的影响。方法分别将小鼠巨噬细胞系RAW264.7(RAW细胞)和小鼠腹腔巨噬细胞分为6组:空白对照组、LPS刺激组、凋亡细胞刺激组、LPS+凋亡细胞刺激组、IFNγ+LPS刺激组及IFNγ+LPS+凋亡细胞刺激组。用IL-27 p28启动子荧光素酶报告基因瞬时转染RAW细胞,检测各组细胞中IL-27 p28启动子荧光素酶活性;RT-PCR法检测各组RAW细胞中IL-27 p28基因mRNA的转录水平,实时定量PCR法检测各组小鼠腹腔巨噬细胞中IL-27 p28基因mRNA的转录水平;Western blot法检测各组小鼠腹腔巨噬细胞中IL-27的表达水平。结果瞬时转染的RAW细胞中,IFNγ+LPS刺激组中IL-27 p28启动子荧光素酶活性明显高于空白对照组及IFNγ+LPS+凋亡细胞刺激组(P<0.05);RAW细胞与腹腔巨噬细胞中,LPS刺激组和IFNγ+LPS刺激组中IL-27 p28基因mRNA的转录水平明显高于空白对照组、LPS+凋亡细胞刺激组和IFNγ+LPS+凋亡细胞刺激组(P<0.05);LPS刺激组和IFNγ+LPS刺激组细胞中IL-27的表达水平明显高于LPS+凋亡细胞刺激组和IFNγ+LPS+凋亡细胞刺激组。结论巨噬细胞在摄取凋亡细胞后,IL-27 p28亚基的表达水平下降,从而导致IL-27的表达水平下降,为进一步研究其机制及临床应用奠定了理论基础。     

siRNA介导NF-κB p65沉默联合5-Fu诱导胃癌细胞SGC7901凋亡

目的运用siRNA抑制胃癌细胞株SGC7901中NF-κB p65基因的表达,探讨其对细胞增殖和凋亡的影响,并分析该基因对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性的作用。方法将SGC7901细胞分为空白对照组、脂质体组、5-Fu组、siRNA组和联合组,除空白对照组外,各组分别给予相应的药物。Western blot法检测各组细胞NF-κBp65蛋白的表达;Annexin V-PI法检测细胞凋亡;MTT法检测各组细胞的增殖水平。结果NF-κBp65蛋白在空白对照组和脂质体组中高表达,在5-Fu组、siRNA组和联合组中低表达,其中以联合组表达量最低;各组细胞早期凋亡率分别为1.40%±0.20%、2.36%±0.58%、6.68%±0.34%、6.60%±0.64%和21.62%±1.12%,其中以联合组最高;细胞的增殖活性随着siRNA浓度的增加和作用时间的延长而下降。结论siRNA能有效抑制NF-κBp65基因的表达,从而抑制SGC7901细胞增殖,促进其凋亡,并增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。     

野生型着丝粒蛋白-E基因沉默对人结肠癌HCT116细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响

目的利用RNA干扰技术下调野生型着丝粒蛋白E(Wild type centromere protein E,CENP-EWT)基因的表达,观察CENP-EWT基因沉默对结肠癌HCT116细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法将HCT116细胞分为空白对照组、空载体转染组和CENP-EWT shRNA转染组,转染48 h后,采用巢式PCR检测细胞中CENP-EWT基因mRNA的转录水平;MTT法检测细胞的增殖活力;Hoechst法检测细胞的凋亡比例;Transwell小室试验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果与空白对照组和空载体转染组相比,CENP-EWT shRNA转染组可有效抑制CENP-EWT基因的转录水平(P<0.05);CENP-EWT shRNA转染组细胞的增殖活力明显下降(P<0.05);细胞凋亡比例明显增加(P<0.01),细胞的迁移和侵袭能力明显增强(P<0.01)。结论 CENP-EWT基因沉默能够抑制人结肠癌HCT116细胞增殖,诱导细胞凋亡,但同时能增强细胞的迁移和侵袭能力。