磺胺甲恶唑酶联免疫分析法的建立

建立了磺胺甲恶唑(Sulfamethoxazole,SMX)酶联免疫分析方法,用以检测动物源性食品中SMX的残留。利用辣根过氧化物酶(HRP)标记SMX,兔抗SMX抗体制备固相抗体,通过标本中的SMX和一定量酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗,标本中SMX的量和显色后的OD450呈负相关的原理检测标本中的SMX含量。经方法学鉴定,本方法的灵敏度为0.067μg/L,批内变异系数<10%,批间变异系数<20%。牛奶、肉类、鸡蛋、蜂蜜样品的回收率分别为94.9%~116.0%、82.0%~107.6%、81.6%~94.9%、89.0%~93.0%,符合免疫分析方法的要求。     

磺胺甲恶唑酶联免疫分析方法的建立

本方法建立了磺胺甲恶唑酶联免疫分析方法用以检测动物源性食品中磺胺甲恶唑的残留。利用辣根过氧化物酶（HRP）标记SMX（Sulfamethoxazole ），兔抗SMX抗体制备固相抗体，通过标本中的SMX和一定酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗，标本中SMX的量和显色后的OD450值呈负相关的原理来检测标本中的SMX含量。经方法学鉴定，本方法的灵敏度为0.067μg/L，批内变异<10%，批间变异<20%。牛奶、肉类、鸡蛋、蜂蜜样品的回收率分别为94.9%~116.0%、 82.0%~107.6%、 81.6%~94.9%、89.0%~93.0%，符合免疫分析方法的要求，     

磺胺喹噁啉酶联免疫分析方法的建立

利用抗磺胺喹噁啉(SQ)多抗建立酶联免疫分析方法，以测定SQ在动物源食品中的残留。方法学鉴定结果表明，灵敏度为0.2ng/mL，批内、批间变异分别为7.8%～10.0%、10.5%～12.0%；牛奶、蜂蜜、鸡肉、鸡蛋样品的添加回收率分别在93.1%～107.0%、69.0%～104.0%、40.0%～73.6%、50.0%～84.0%之间。牛奶稀释实验表明，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数R=0.997。     

磺胺喹噁啉酶联免疫分析试剂盒的研制

磺胺喹噁啉（sulfaquinoxaline），简称SQ，相对分子质量为300．4，是一种在国内需求量极大的磺胺类高效抗球虫、抗菌药，对禽球虫病、兔艾美耳球虫病有较好的疗效，并具有一定的抑菌作用。由于养殖场在饲养动物过程中向饲料或动物饮用水中大量添加SQ，     

人胰岛素酶联免疫分析法的建立

采用两株抗胰岛素单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯板、另一株标记辣根过氧化物酶,建立了测定人胰岛素的双抗体夹心酶联免疫分析法。方法学研究表明,本方法的灵敏度为1.7mIU/L,曲线范围5~160mIU/L,批内、批间变异系数分别小于11%、15%,回收率96.4%~111.1%;高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.998;38例健康人血清样品测定值为3.6~10.8mIU/L。该方法与人胰岛素放射免疫分析法测定结果的相关性良好,r=0.97。     

氯霉素酶联免疫分析方法的建立

以兔抗氯霉素多抗为包被抗体,氯霉素（CAP）辣根过氧化物酶连接物为标记物,四甲基联苯胺（TMB）为显色底物,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析（CAP-EIA）方法.本方法灵敏度为0.046 μg /L,批内变异系数＜10%,批间变异系数＜24%,回收率62%～145%.用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀释实验,相关方程为y=3.988x-0.234, 相关系数为0.999.标准曲线范围为0.1～10 μg /L.     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立

采用抗恩诺沙星单克隆抗体建立酶联免疫吸附法（ELISA）用以检测恩诺沙星在动物源性食品中的残留。经方法学鉴定,本方法的检测范围为0．5～50μg／L,灵敏度为0．2μg／L,批内变异系数〈10％,批间变异系数〈20％。鸡肉、鱼肉、虾和蜂蜜样品的回收率分别为95．5％～107．5％、80．0％～101．3％、105．7％～122．7％和93．3％～111．3％。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

癌胚抗原（CEA）酶联免疫分析试剂盒的研制

以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为99.4%～108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用.     

TG Ab酶联免疫分析试剂盒的研制

固相包被TG,TG与辣根过氧化物酶偶联制备TG酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了TG Ah酶联免疫分析(ELISA)试剂盒制备方法。本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异因数<10.0％,批间变异因数<15.0％,特异性鉴定显示与TM无明显交叉反应。正常参考值<50.0IU/mL(n=100)。该方法具有简便、快速和定量准确的特点,适用于临床检测和科研应用。     

癌胚抗原（CEA）酶联免疫分析试剂盒的研制

一株CEA单克隆抗体（McAb）用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺（TMB）为底物,采用二步法,建立了CEA酶联免疫分析（ELISA）试剂盒制备方法。 本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数<10.0％,批间变异系数<15.0％,回收率为99.4％～108.7％,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应。正常参考值小于10.0μg/L。该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用。     

游离三碘甲腺原氨酸(FT3)生物素-亲合素酶联免疫分析

采用T3抗体包被酶标板微孔、生物素化T3和辣根过氧化物酶(HRP)标记链亲合素作为信号放大体系,一系列定量游离T3(FT3)为标准品,并以四甲基联苯胺-过氧化氢为显色底物,建立了FT3的生物素-亲合素(BA)酶联免疫分析(FT3-BA-EIA)法。其灵敏度为0.90pmol/L,标准曲线范围0.9～45.0pmol/L,批内变异系数3.1%～8.1%,批间变异系数4.9%～10.6%。测定了101例临床血样,其中正常人46例,实测范围2.5～11.1pmol/L,均值为5.1±2.0pmol/L;27例甲亢病人,实测范围9.7～37.3pmol/L,均值为20.5±7.1pmol/L;20例甲低病人,实测范围0.9～3.8pmol/L,均值为2.0±0.9pmol/L;8例孕妇,实测范围为3.4～8.5pmol/L,均值为6.0±2.5pmol/L。通过对临床血样的检测,本法与化学发光法(CIA)及放免法(RIA)的测定结果有良好的相关性。应用本法可有效地诊断甲状腺疾病,具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用。     

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T₃抗体包被微孔,T₃生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T₃）生物素-亲合素酶联免疫分析(T₃-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1％～8.3％和6.5％～10.5％,回收率为98.1％～107.2％;高浓度T₃血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

滤纸干血-新生儿促甲状腺素酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),两株识别人促甲状腺素(hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了滤纸干血-新生儿促甲状腺素生物素-亲合素酶联免疫分析(NeonatalTSH-BA-ELISA)试剂盒的制备方法。本方法的灵敏度为0.5mIU/L,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%,回收率为90.1%～103.3%。本方法所制备的试剂盒与NeonatalTSH-IR-MA(磁颗粒法)试剂盒具有良好的相关性,相关方程为y=1.01x+0.34,相关系数为r=0.873。本试剂盒无放射性,操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。