黑曲霉As．n.XEC-1液体发酵产β-葡萄糖苷酶条件及酶学性质研究

实验分离得到一株具有较高胞外分泌β-葡萄糖苷酶能力的黑曲霉（Aspergillus niger）菌株As．n．XEC-1,并对其液体发酵产伊葡萄糖苷酶的条件及酶学性质进行了研究．结果表明,发酵温度32℃,发酵周期7d,摇床震荡频率200r／min,装液量500mL的三角瓶中装量为60mL,接种量8％,伊葡萄糖苷酶的活性最高．经过发酵条件优化后酶活由原来的130u／mL提高到192u／mL．β-葡萄糖苷酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH值为4．6,在45℃以下时酶稳定性较好,在pH3．0～6．0之间较稳定．     

Zn^2＋对轮枝链霉菌SK4．001生长及转谷氨酰胺酶合成的影响

研究了Zn^2 在SK4．001发酵生产转谷氨酰胺酶中的作用．在发酵培养基中加入不同质量浓度的Zn^2 ，检测菌体量、PH、残余甘油及转谷氨酰胺酶(TGase)酶活的变化，发现Zn^2 在SK4．001发酵生产转谷氨酰胺酶中除满足菌体生长需要外，还具有提高转谷氨酰胺酶酶活的作用．发酵培养基中含有3．15μg／mLzn^2 时，菌体生长正常，菌体量较高；当zn^2 质量浓度增加到8．15μg／mL时，菌体量改变不明显，但转谷氨酰胺酶酶活迅速上升，达到4．723U／mL，是Zn^2 质量浓度为3．15μg／mL时的2．06倍。     

水解淫羊藿苷糖基的土壤细菌筛选

从20种土壤细菌中筛选出了对淫羊藿苷水解能力高的菌株Rhodanobncter sp．GS3054．该菌株30℃下发酵3～4d的发酵液提酶后对淫羊藿苷水解能力最佳；水解淫养藿苷成低糖基苷的最适反应条件为：50℃、pH6．0、底物20mg／mL，反应时间24h．     

腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

吸附交联法和包埋法固定化混合酶研究

对从自然界分离得到的Microbacterium sp．OU01进行发酵,制得粗酶液（壳聚糖酶和伊肛氨基葡萄糖苷酶混合液）,采用吸附交联法及包埋法对其进行固定,研究其固定化的最优条件和固定化酶的酶学性质。结果表明,游离混合酶液的最佳PH为5．6,最适反应温度为50℃。吸附交联法固定化酶的最佳条件为：戊二醛体积分数5．0％,加酶量15mL（49．51U／mL）,固定化时间6h。该条件下制得的固定化酶的最适pH为4．5,最适反应温度为60℃。包埋法固定化酶的最佳条件为：海藻酸钠质量浓度10g／L,CaCl。质量浓度15g／L,加酶量为1mL（50．35U／mL）／5mL质量浓度10g／L海藻酸钠,固定化时间20min。该条件下制得的固定化酶的最适PH为5．0,最适反应温度为50℃。固定化酶酶解壳聚糖所得产物中含D-氨基葡萄糖,说明粗酶液中的壳聚糖酶和外切-β-D-氨基葡萄糖苷酶被同时固定。通过对游离酶和固定化酶稳定性的研究,表明吸附交联固定化酶更适于工业化应用生产D-氨基葡萄糖。     

聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件

对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行亚硝基胍和^60Co诱变，获得一株)γ-PGA的高产菌株C9．γ-PGA质量浓度由9．44g／L提高到19．76g／L，提高了109％．突变株传代10次，质量浓度保持基本稳定．通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化．当发酵培养基中含柠檬酸12g／L、甘油80g／L、L-谷氨酸23g／L、氯化铵7g／L，pH7．0，装液量为50mL／250mL三角瓶。接种体积分数为5％时。37℃摇瓶发酵72h。γ-PGA达到23．32g／L。     

豆豉纤溶酶生产菌液体发酵条件的优化

以DCFM9突变株为出发菌株,对其液体发酵条件进行了优化,得到了最佳发酵条件.优化后发酵培养基组成:木糖为20 g,大豆蛋白胨为20 g,KH2PO4为1g,K2HPO4·3H2O为4 g,Ca-Cl2为0.4 g,MgSO4·7H2O为0.5 g,水为1 000 mL;摇瓶发酵的最佳工艺条件为pH7.4,接种量2%,种龄24 h,装液量50 mL/250 mL,37℃,180 r/min,发酵12 h加入1g/L的Tween 40.在此条件下发酵72 h,产酶量最高可达3011.08 U/mL.     

谷氨酰胺发酵条件研究

采用诱变获得的谷氨酰胺高产菌株SH77，对谷氨酰胺发酵条件进行研究，在最优化发酵条件下，该菌株产谷氨酰胺平均为53．0mg／mL，，最高达56．2mg／mL     

黑曲霉产木聚糖酶的特性

研究了木聚糖酶产生菌黑曲霉(A．niger)238的产酶特性和麸曲的浸提条件。并对其浸提酶液进行浓缩．结果表明，菌株黑曲霉(A．niger)238产木聚糖酶受诱导物的影响，发酵时间在68～72h期间达到产酶高峰，酶活力为286U／mL．最佳氮源为(NH4)2SO4，装料量为每瓶10g，接种量为每瓶0．3mL．其发酵麸曲用固液比为1：5的2g／dL CaCl2溶液，30℃浸提1．5h；浸提液采用25℃，40kPa，冷却水温度18℃条件超滤浓缩可获得90％以上回收率．     

响应面法优化重组枯草芽孢杆菌发酵生产青霉素G酰化酶

利用响应面法优化重组枯草芽孢杆菌pAUB-BmPGA／BS168发酵生产青霉素G酰化酶的条件。通过Plackett-Burman设计法对碳源、氮源、无机盐、温度等19个因素对发酵产青霉素G酰化酶的影响进行评价。筛选出发酵温度和酵母膏为影响产酶的显著因素。采用了中心组合设计实验对两种显著影响因素进行了优化,应用响应面分析确定了显著因素的最佳水平。结果表明,当温度为34℃,酵母膏为8．8g／L时,最终的酶活达到28．2U／mL,比初始发酵条件提高了1．19倍。在最佳条件利用15L的发酵罐对重组枯草芽孢杆菌进行扩大培养,最终酶活可达51．0U／mL,相对于摇瓶发酵又有大幅度的提高。     

枯草芽孢杆菌D—核糖摇瓶发酵条件的研究

对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）S21进行了摇瓶条件下的D－核糖发酵条件的研究,主要考察了添加木糖、pH、溶氧水平以及采用补糖方式对发酵的影响,确定了D－核糖发酵的最佳工艺条件：D－木糖50g／L初始pH7.0,初始葡萄糖浓度为150g／L,碳酸钙20g/L,并在发酵36h后,在装液置为35mL的500mL三角瓶中添加0.75g/mL的葡萄糖溶液2mL,S2菌可积累D－核糖达51.1g/L.     

34种中药对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

测定34种中药水提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果显示，药液浓度为50mg／mL时，巴戟天、牛膝、黄精、白芍、何首乌、五味子、川芎、虎杖、穿山龙对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率达50％以上。进一步研究发现五味子、川芎和虎杖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较强。虎杖抑制α-葡萄糖苷酶活性的IC50约为27．5mg／mL，属非竞争性抑制。     

Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件

脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilisLFS-8611合成的β-D-半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力，脆壁克鲁维酵母(K，fragilis)LFS-8611细胞生长和β-D-半乳糖苷酶的合成同步，该茵株生长和产酶的最适碳源为半乳糖，乳糖次之；最适氮源为蛋白胨F403；最适培养条件为：发酵培养基的初始PH值为7，0，摇床的转速为200r／min，培养基中碳源和氮源质量浓度对茵体生物量和β-D-半乳糖苷酶活力有重要影响，以12mg／mL乳糖为碳源，16mg／mL蛋白胨(F403)为氮源，在最适培养条件下培养32h后，茵体生物量和β-D-半乳糖苷酶活力分别为7，56g／L和18，83U／mL。     

培养基及培养条件对普鲁兰酶的影响

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶的菌株，初步鉴定为芽孢杆菌，通过优化发酵培养基及发酵培养条件，在２５０ｍＬ的摇瓶中可达到４．５μｍｏｌ／（ｍｉｎ．ｍＬ）的普鲁兰酶酶活。优化后的发酵培养基成分如下：玉米支链淀粉２ｇ／ｄＬ，蛋白胨２ｇ／ｄＬ，牛肉膏１．５ｇ／ｄＬ，ＮａＣｌ０．５ｇ／ｄＬ，ＭｎＳＯ４２μｍｏｌ／Ｌ。摇瓶发酵工艺条件：接种量１７％，温３７℃，摇瓶转速２２０ｒ／ｍｉｎ，ｐＨ６．０，发酵周期３２ｈ     

姬松茸液态发酵的研究

通过2次L27(3^13)正交实验对姬松茸液态发酵的碳源、氮源、生长因子的种类和浓度、培养基的酸碱度、接种量、通气量、培养温度和培养时间等影响因子进行全面实验研究、经极差分析和方差分析，得到姬松茸液态发酵的培养基配方(g／dL)：玉米淀粉3，豆粕0．8，麸皮0．15；发酵条件：pH5，接种量10％，摇瓶装量50mL培养基／250mL三角瓶，培养温度30℃，培养时间7d，在此培养条件下，姬松茸液体培养的生物量可达15．6g／L。     

酶法水解珠蛋白制备血管紧张素I转换酶抑制肽

分别用3种不同的蛋白酶对珠蛋白进行水解，测定不同水解时间所得产物对血管紧张素I转换酶（ACE）的抑制活性，并对抑制活性最高的水解液进行分离．结果表明：胃蛋白酶水解珠蛋白所得的水解液对ACE的抑制率最高，其半抑制浓度（IC50）为1．19mg／mL，用Sephadex—LH20对其进行分离，所得的第5组分的IC50为0．10mg／mL，活性比水解液提高了12倍．     

产耐温漆酶菌的筛选及培养基优化

采用愈创木酚CPDA平板法对由广州地区多个不同场所采集的土样进行了菌种分离纯化,筛选出1株产耐温漆酶的菌株Tr0702,通过形态学观察初步判断该菌为木霉属．该菌所产漆酶的最适反应温度为65℃,在70℃下保温60min后残余酶活保留60％以上;发酵培养基经响应面法优化后关键参数如下：可溶性淀粉44．40g／L、吐温（80）9．00g／L、愈创木酚15．04mmol／L,以此优化培养基发酵酶活可达50．15U／mL     

流加葡萄糖对L—天冬酰胺酶发酵的影响及其动力学特性

着重讨论了葡萄糖对Ｌ－天冬酰胺酶发酵过程的影响，并对其发酵动力学特性进行了分析，采用自动流加葡萄控制发酵ｐＨ的工艺，可使Ｌ－天冬酰胺酶活力达到６４ｕ／ｍｌ，比添加葡萄糖的摇瓶发酵提高了１４６％，流加葡萄控制ｐＨ的Ｌ－天冬酰胺酶发酵是生长相关的，维持２～５ｍｇ／ｍｌ和１．２～１２．４ｍｇ／ｍｌ的葡萄糖浓度，可分别使比生长速率和比产酶速率达到０．８１／ｈ和１２００ｕ／ｇ．ｈ。     

红曲霉液态发酵产洛伐他汀条件的研究

对红曲霉GM026产洛伐他汀的液态发酵培养基成分和发酵条件进行了研究．结果表明。最佳培养基组成：甘油9％,大豆粉0．75％,NANO30．2％,MgSO4·7H2O0．05％。KH2PO40．15％;最佳发酵条件：培养温度26℃,初始pH=5．0,接种量7％,250mL三角瓶装液量为50mL,摇床转速170rad／min。在上述条件下。发酵培养14d,洛伐他汀产量达到375．853mg／L．     

细菌BK2产壳聚糖酶的发酵条件及壳寡糖的制备

优化了菌株BK2发酵产壳聚糖酶的条件：葡萄糖20g／L，壳聚糖0．3g／L，硝酸铵15g／L．接种量1，5％（10^7 cell／mL），发酵起始pH6．0．发酵温度30℃．培养时间48h．BK2发酵液中的壳聚糖酶活力可达到1．29U／mL．用酶液降解壳聚糖，分离提取粗产品，采用薄板层析法进行组分分析．分析结果表明．壳聚糖已被降解成含有不同分子质量的壳寡糖混合物，