一株耐热纤维素酶菌株的筛选及酶学性质的研究

研究从西双版纳采集的10份土壤样品,用自行设计的选择培养基,37℃恒温培养72小时,分离到18株产纤维素酶的细菌菌株。经过复筛,得到纤维素酶活性较高产酶菌株YN5。通过对其形态、生理生化特性研究,将菌株YN5初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilissp.)。对酶的性质研究表明,其最适pH值为5.0,最适温度为60℃,在pH值4.0～7.0范围内具有良好的稳定性。     

耐热纤维素酶产酶条件的优化

在原始发酵培养条件下,枯草芽孢杆菌的酶活力达到1.0U/ml。对影响其产酶水平的培养基中的碳源、氮源、无机盐等发酵培养条件进行了单因子试验研究,并对碳、氮、磷三因素进行正交试验,对原始培养基进行了优化,结果在CMC-Na1.5%,酵母粉1.0%,K2HPO 40.15%,NaCl0.5%,MgSO 40.05%,蛋白胨1.5%,初始pH为7.0的优化培养基中,于37℃,200转/分的转速下,培养48小时,产生的纤维素酶活力达到1.5U/ml。     

一株纤维素酶真菌的筛选鉴定及产酶条件优化

以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,从自然界筛选出一株纤维素酶高产菌HJC-79,通过单因素试验和正交试验对其培养基成分和发酵条件进行优化。结果表明,经形态观察和ITS序列分析,菌株HJC-79被鉴定为杂色曲霉（Aspergillus versicolor）。最佳培养基成分为蔗渣、麸皮和Mandels营养盐液的添加量分别为2%、9%、89%;最佳发酵条件为发酵温度33 ℃,初始pH值为4,接种量9.0%,发酵时间48 h。在此优化条件下,葡聚糖内切酶、β-葡萄糖苷酶和滤纸酶酶活分别为2.22 U/mL、1.93 U/mL、1.53 U/mL,分别比优化前提高了125.55%、76.37%和172.47%。     

1株耐热脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件研究

通过固体平板法,从食堂下水道污泥中筛选到1株耐热脂肪酶产生菌LJM-1,采用摇床培养法对该菌株的产酶条件进行了研究,结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜培养基组成是:玉米粉淀粉6.0%﹑酵母粉3.5%﹑KH2PO40.3%﹑MgSO4.7H2O0.05%、(NH4)2SO40.5%﹑NaCl0.1%;适宜培养条件:培养温度40℃,初始pH7.7,摇床转速150r/min,装液量100mL/250mL三角瓶,接种量2.5%(体积分数),种龄72h,发酵时间48h。在此条件下,脂肪酶最高酶活为112.6U/mL。在单因素试验的基础上,采用正交试验对棉粕发酵脱毒条件进行了优化,得到最佳发酵条件是:初始pH7.7,培养温度40℃,接种量1.5%,发酵周期2d,酶活力达131.6U/mL。     

产纤维素酶真菌的筛选及其酶学性质的研究

采用DNS法从土壤中分离出1株高产纤维素酶的真菌,将其命名为S5,经形态学初步鉴定为绿色木霉菌.研究结果表明,当碳源为羧甲基纤维素钠、氮源为硝酸铵时,产酶效果最佳,测得其滤纸酶活为200 U/mL.该酶最适反应温度为45℃,在温度为400℃～55%热稳定性较高,其最适反应pH值为5.5,在pH值为5.0～6.5时较稳定.     

产纤维素酶菌株的筛选及产酶条件的优化

为了得到产酶性能好且稳定的菌株,利用CMC平板初筛和摇瓶发酵复筛,从采自不同地区的样品中筛出5株产酶较高的菌株。采用液体发酵方法对其中产酶最好的菌株A6产酶条件进行研究。结果表明,该菌株最适产酶温度为32℃,初始pH值为5.5,接种量为5%,培养时间为4d,微晶纤维素与麸皮配比为7:3,氮源为复合氮源。     

一株耐盐纤维素酶海洋曲霉的筛选及产酶条件研究

从东海海底泥中分离到了一株耐盐和高产内切葡聚糖酶(CMCase)及β-葡萄糖苷酶(β-Gluase)的海洋曲霉ZJUBE-1,根据形态特征及18S rDNA分析,初步鉴定该菌为黑曲霉(Aspergillus niger).通过液体发酵产酶优化,获得最佳培养基组成,质量分数分别为:麸皮2.5％,氯化铵(或蛋白胨、磷酸二氢铵)1％,含NaCl 3.0％～3.6％的人工海水作无机盐液.发酵条件为100mL三角瓶装培养液30 mL,在起始pH 6.0、37℃,接种量为6％,180 r/min条件下振荡培养7d,测得发酵液中CMCase、β-Gluase.酶活及滤纸酶活(FPA)分别为5.3、5.4、0.75 U/mL.该菌在NaCl质量分数24％下仍具产酶能力,所产3种纤维素酶的最适反应温度均为65℃,最适反应pH分别为4.0、5.0、5.0;在NaCl质量分数为2％～12％(-Gluase在2％～16％)范围内,3种酶活力维持较高水平.该菌及其所产纤维素酶的高度耐盐性预示着其在废水处理、纺织业、海洋养殖、海产品加工或海藻的能源化利用等高盐环境下可能有较好的应用前景.     

红树林土壤纤维素酶产生菌筛选及产酶条件研究

采用CMC唯一碳源平板法和内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等3种酶平板鉴别法从海南红树林土壤中分离到109个有阳性信号的菌株,经发酵产酶复筛选出一株产纤维素酶活相对较高的真菌HBZ003。经鉴定该菌为产紫青霉(Penicillium purpurogenum)。通过发酵产酶条件优化,获得最佳培养基组成为:麸皮8 g/L,CMC 2 g/L,(NH4)2SO43 g/L,KNO32 g/L,KH2PO43 g/L,NaCl 6 g/L,CaCl20.5 g/L;发酵条件为250mL三角瓶中装培养液100mL,在pH4.0、30℃,160 r/min条件下振荡培养5 d,测得发酵液中CMCase和FPA分别为16.04U和4.08 U。     

纤维素酶产生菌的筛选鉴定和产酶条件优化

筛选得到1株纤维素酶产生菌TC1,根据真菌的分类鉴定方法,鉴定为根霉属菌(Rhizopus sp.)。正交实验确定该菌株的优化培养条件为:稻草采用15%的醋酸预处理,稻草与麸皮比为3:7,固液比为1:3,接种量10%,温度28℃,稀释1倍的Mandels营养液作为培养基液体。在优化培养条件下培养96h,发酵终点时滤纸酶活FPA、CMC酶活分别达到25.5、249.0 U/g(干物质),较优化前的17.8、187.0 U/g(干物质)分别提高了43%和33%。     

产纤维素酶牛瘤菌的分离及产酶条件研究

本研究从牛瘤胃内容物干粉中分离得到一株高产纤维素酶的菌株.经进一步鉴定表明,该菌株为革兰氏阳性芽孢杆茵,兼性厌氧,最适生长pH值6.0～8.0,最适生长温度为37℃左右.经产酶条件研究表明,该菌株在37℃培养下,48小时左右发酵液的PFA酶活性达最高值19.8.实验证明该茵株产酶周期短,酶活性较高,具有一定的工业应用价值.     

产纤维素酶真菌的筛选及其产酶条件的研究

从腐朽的玉米秸秆上及土壤中筛选出了1株维素酶高产菌株HY-07,并以玉米芯和麸皮为主要原料,通过单因子试验和正交试验对该菌的产酶条件进行了研究.其最佳产酶条件为250mL三角瓶装料量6g,玉米芯麸皮为1114,固液比 10.8,吐温-80添加量为0.2%,K2HPO4含量0.05%,MgSO4·7H2O含量0.025%,(NH4)2SO4含量1%,pH值自然,30℃恒温培养7d,其酶活力达到674.44U/g,比初始增加了50.8%.     

浓香型白酒产糖化酶菌株筛选及产酶条件研究

利用透明圈法从浓香型白酒曲房空气中筛选得到1株产糖化酶能力较强的菌株（J8M．53）,液体培养96h后,糖化酶活性可以达到887u／mL。研究发酵条件对该菌株产糖化酶能力影响,结果表明：虽然该菌株产糖化酶的最适初始pH值、培养温度和最佳碳源分别为5℃、30℃和可溶性淀粉,但在pH值为4,培养温度为40℃时酶活依然保持在较高的水平,且菌株对其他各碳源都有一定的利用。该菌株属于好氧菌或者兼性厌氧菌,对氧的需求量较大。另外,该菌株对酒精有一定的依赖性,并具有较强的耐酒精能力,当培养液中酒精浓度6％vol时,菌株的糖化酶活性最高,酒精浓度为12％vol时的糖化酶活性是最大值的74％。     

耐高温酒精酵母菌株的筛选及发酵能力比较

采用酵母菌富集培养方法和选择性培养基从中国传统大曲酒等基质中共分离得到58株具有一定的酒精发酵能力的酵母菌株。经过初筛和复筛,从中筛选获得1株能在33℃～42℃生长良好,并具有良好酒精发酵性能的酵母菌株XG-1,经分类鉴定为酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）。40℃液体摇瓶培养条件下,XG-1菌株活菌数占总菌数的比率较安琪耐高温酿酒高活性干酵母（TRADY）高15％。将其与TRADY菌株进行木薯酒精发酵比较,33R2条件下两者的酒精发酵能力相当,但在42℃时进行酒精发酵,XG-1菌株的酒精度比TRADY菌株高20％。     

木聚糖酶高产菌株的筛选及产酶条件研究

从酿造大曲中，筛选诱变出1株木聚糖酶高产菌株U6-5，菌体固态发酵产酶条件研究表明，最佳发酵培养基配方为麸皮50g，花生壳粉30g，玉米芯粉20g，NH4NO3 0．5g，水110mL，接种量3‰，最适发酵温度28℃～30℃，培养26h-28h，木聚糖酶活力达到6105U／g。该木聚糖酶具有较高的耐热性和耐储藏性能。     

产几丁质降解酶菌株的筛选及其产酶条件

采用平板透明圈法从土壤中分离筛选到一株产几丁质降解酶菌株L12酶活力为0．63U／mL。通过产酶条件优化，初步确定了该菌株较适产酶培养基和摇瓶发酵条件。条件优化后酶活力提高约1．6倍，达到1．06U／mL。     

纤维素酶产生菌YZB46的产酶条件研究

为提高纤维素酶产生菌YZB46的产酶能力,在单因素试验基础上,通过正交试验筛选最佳发酵培养基组成和最佳发酵条件。结果表明,菌株YZB46的最佳发酵培养基碳源为1.5%麸皮,氮源为0.6%黄豆粉,无机盐为0.1%MgSO4和0.4%KH2PO4;最佳发酵条件为接种量8%,发酵液初始pH 5.0,发酵温度30 ℃,发酵时间72 h,在此优化的发酵条件下,菌株YZB46的产酶活力达37.75 U/mL,是优化前的2.21倍。     

大围山森林土壤中高产纤维素酶菌株的筛选及鉴定

通过初筛（刚果红纤维素水解试验和滤纸条分解试验）和复筛（利用3,5-二硝基水杨酸法测定内切纤维素酶活,滤纸酶活和β-葡萄糖苷酶活）,从大围山原始森林土壤中筛选高产纤维素酶菌株,获得4株具有高产纤维素酶活性的菌株。其中一株真菌16-7分解纤维素能力最强且酶活稳定,其内切羧甲基纤维素酶活为265.76U/mL,滤纸酶活为86.44 U/mL,β-葡萄糖苷酶活为39.16 U/mL;对真菌16-7分别进行形态学观察、分子生物学鉴定,初步确认为小刺青霉（Penicilliumspinulosum）。     

一株耐酒精纤维素酶产生菌的筛选、鉴定及其特性研究

利用乙醇-CMC-Na平板初筛,经摇瓶发酵复筛,从谷酒成熟酒醪中筛选获得1株耐酒精纤维素酶活力较高的细菌Lys-1249。经生理生化测定、形态观察及16S rDNA 基因序列的同源性分析,将其鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ）。经正交试验优化该菌株的产酶条件,表明该菌株在麸皮2.0%,蛋白胨0.6%,K2HPO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,FeSO4·7H2O 0.02%,MnSO4 0.01%,培养基初始pH值为7.0,培养温度37 ℃,发酵周期48 h的条件下,其耐酒精纤维素酶活力达到158.54 U/mL。该菌株在6.0%vol乙醇培养基中生长良好,活性可保持65.95%。     

产中性植酸酶菌株的筛选及产酶条件的优化

对菌BA8的产酶条件进行了单因素和正交试验,探讨了碳源、氮源、磷源等培养基成分和温度、接种量、装液量等培养条件对产酶的影响.结果表明,每1000mL液体培养基最佳组成为可溶性淀粉40g、胰蛋白胨10g、亚硝酸钠8.6g、硝酸铵5.0g、磷酸氢二钾0.10g、氯化钾0.10g、氯化镁0.10g、氯化锰0.09g.摇瓶培养的最佳条件为初始pH值6.0,发酵温度30℃,装液量100mL,接种量7%.优化后酶活可达到241.1U/mL,比未优化前提高了2.21倍.