纳他霉素与山梨酸复配改良MRS培养基的研究

对不同浓度纳他霉素（Natamycin）与山梨酸（Sonic Acid）及其复配后在MRS培养基中防止杂菌生长的情况进行了研究,结果表明,单独使用10mg／L纳他霉素可防止MRS培养基中真菌的生长;单独使用2000mg／L山梨酸可抑制真菌及常见细菌的生长;纳他霉素与山梨酸复配后可适当降低二者的使用浓度并具有协同增效的作用;但均没有抑制乳酸菌的生长,由此初步得到了一种新的改良MRS培养基。     

纳他霉素提高酸菜感官品质的研究

研究纳他霉素对酸菜发酵过程中所污染霉菌、酵母菌等杂菌的影响及对酸菜感官品质的影响。将不同质量浓度的纳他霉素添加到酸菜发酵液中,通过微生物生长情况考察纳他霉素对不同种类微生物生长的影响。结果表明：当纳他霉素用量达到20mg/L 时,乳酸菌的生长没有受到影响,但是抑制了杂菌的生长,使酸菜的感官品质显著提高。     

自然发酵肉制品中乳酸菌的分离及特性研究

以MRS和改良TJA(改良番茄汁琼脂培养基)培养基为基础培养基,从自然发酵肉品中分离得到8个菌株,其中4株为乳酸菌,3株为杆菌,1株为球状菌。进一步测试表明:4株乳酸菌在30℃培养时,生长最好;在pH3.5～4.0时生长良好;4株乳酸菌在10%NaCl的环境中均能生长,其中以2%～6%的NaCl浓度内生长最适宜;属兼性厌氧菌;对大肠杆菌产生一定的抑制作用。分离出的4株乳酸菌均适宜作为发酵肉制品的发酵剂。     

PI因子结构类似物对恰塔努加链霉菌发酵产纳他霉素的影响

以恰塔努加链霉菌(Streptomyces Chattanovgensis)为发酵菌种,向发酵培养基中添加PI因子结构类似物,经过初筛,获得能正向调控纳他霉素发酵产量的PI因子结构类似物;应用Box-Behnken设计建立单因素与纳他霉素产量之间的回归模型,经由响应面分析得到最优组合条件。实验结果表明:1,2-丙二醇、丙三醇和三乙醇胺都能有效提高纳他霉素的发酵产量,向每50 m L培养基中添加0.42 m L 1,2-丙二醇、0.43 m L丙三醇、1 m L三乙醇胺,发酵时间为120 h时,发酵培养基中纳他霉素的产量为2.5 g/L,是空白对照组(1.567 g/L)的1.60倍。由此可知一定添加量的PI因子结构类似物可以提高纳他霉素产量。     

调控Streptomyces sp菌株生长、代谢提高纳他霉素产量的研究

本文研究了不同碳源、氮源、培养基起始pH和D.O值等对Streptomyces sp菌株生长、代谢提高纳他霉素(Natamycin)产量的影响,用正交试验确定了该菌株的最佳培养基配方为:2%的葡萄糖,3%的玉米淀粉,2%的大豆蛋白胨,0.5%的酵母粉,并确定了该菌株产纳他霉素的最佳pH、D.O值以及糖、氮比例,在50升发酵罐中纳他霉素产量高达6.6g/L。     

红皮萝卜泡菜自然发酵过程中乳酸菌的动态变化

以红皮萝卜为原料,用自然发酵法泡渍,研究其发酵过程中各优势乳酸菌的消长变化规律。从四种培养基中筛选出改良的MC培养基为各类乳酸菌计数培养基,总共得到了七种明显的菌落形态特征的乳酸菌,将其依次鉴定为乳明串珠菌(Leuconostoc lactis)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、食窦魏斯氏(Weissella cibaria)、植物乳杆菌(L.plantarum)、发酵乳杆菌(L.fermentum)。对发酵过程中各种乳酸菌计数,结果显示:泡萝卜发酵前期球菌比较旺盛,发酵后期以杆菌为主。泡菜液p H达到3.5后,球菌开始消失。     

葡萄酒中酒类酒球菌的分离——抑制剂对酵母菌生长的抑制效应

从葡萄酒中分离酒类酒球菌时 ,酵母菌是最主要的干扰菌。作者通过在ATB和改良MRS琼脂培养基中添加放线菌酮、山梨酸和制霉菌素 ,研究了不同抑制剂对酵母生长的抑制效应。结果表明 ,采用ATB + 5 0mg/L放线菌酮、改良MRS + 5 0mg/L放线菌酮、改良MRS + 10 0mg/L山梨酸、改良MRS + 5 0mg/L制霉菌素选择性培养基 ,能够完全抑制酿酒酵母的生长。     

植物激素对纳塔尔链霉菌发酵产纳他霉素的影响

以纳塔尔链霉菌（Streptomyces natalensis）为发酵菌种,在摇瓶培养基中添加植物激素,通过单因素试验初筛,获得能够有效提高纳他霉素的产量的植物激素;采用Box-Behnken试验设计建立数学模型,进行响应面分析优化确定最优组合。结果表明：吲哚乙酸、赤霉素和6-苄氨基嘌呤均能够有效提高纳他霉素的产量,在5.5 mg/L吲哚乙酸、14.8 mg/L赤霉素和20.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤的条件下发酵120 h时,发酵液中纳他霉素的发酵产量可达到1.805 g/L,为对照组的1.63 倍。     

响应面法优化褐黄孢链霉菌ZM701产纳他霉素发酵培养基

为了提高褐黄孢链霉菌（Streptomyces gilvosporeus）ZM701生产纳他霉素的产量,该文通过单因素试验,研究碳源、氮源及无机盐对菌体生长和纳他霉素产量的影响,采用响应面分析法优化发酵培养基中葡萄糖、豆粕、CaCO3的添加量。结果表明,褐黄孢链霉菌（S. gilvosporeus）ZM701产纳他霉素最佳发酵培养基组成为：葡萄糖52.6 g/L,酵母蛋白胨3.0 g/L,豆粕23.3 g/L,MgSO4·7H2O 2.0 g/L,CaCO3 3.2 g/L。在此条件下,纳他霉素产量达到5.41 g/L,比优化前提高了77.8%。     

纳他霉素效价测定方法的改良及含量的快速测定

为了确定固体发酵过程中纳他霉素含量快速测定和生物效价准确测定方法,本文采用高效液相色谱法、紫外分光光度法和管碟法测定了同一批褐黄孢链霉菌固体发酵产物纳他霉素的含量。其中高效液相色谱法和紫外分光光度法测定纳他霉素固体发酵产物含量分别为2351.52 mg/L和1979.87 mg/L,前者结果准确而稳定。后者测定准确率为96.97%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。适用于固体发酵过程中的纳他霉素含量的快速测定。管碟法测定纳他霉素平均效价为1979.87 mg/L。改良管碟法采用正己烷封盖纳他霉素溶剂甲醇后,测定的平均效价达到1990.29 mg/L,准确率由84.20%提高到84.64%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。采用正己烷封盖能有效控制纳他霉素溶剂甲醇的挥发性并提高管碟法的准确性和测定的浓度范围,而正己烷本身不具有抑菌效果。     

应用Illumina MiSeq测序技术比较传统发酵乳、肉食品中细菌多样性

为全面了解内蒙古特色发酵食品中细菌微生物多样性,比较不同发酵食品的细菌群落结构。运用高通量测序技术,对发酵乳制品(饼状奶酪、棒状奶酪及奶豆腐)和发酵肉制品(发酵香肠、风干羊肉和风干牛肉)中细菌群落组成和多样性进行分析。本研究中共获得194568条有效序列,237个OTU。菌群多样性分析表明:发酵肉制品中菌群Shannon指数较高于发酵乳制品,乳肉制品之间的菌群组成差异较大。发酵乳制品中主要以厚壁菌门为主,而发酵肉制品则以厚壁菌门和变形菌门为主;在属水平上,发酵乳制品的优势菌属为乳杆菌属,而发酵肉制品中的优势菌属为假单胞菌属,次优势菌属为乳杆菌属。在种水平上,由于未检测到的菌群含量较高,所以不能确定乳、肉制品优势菌种,而在发酵乳、肉食品中可检测到的菌群中清酒乳杆菌含量较高。通过16s预测功能分析,发酵乳、肉食品中的绝大部分细菌与转运代谢有关,如脂肪代谢、氨基酸代谢等功能。     

Identification of potential probiotic starter cultures for Scandinavian-type fermented sausages

Potential probiotic cultures suitable as starter cultures for the Scandinavian-type fermented sausages were identified among strains well-adapted to fermented meats as well as strains originating from a culture collection. From 15 different fermented meat products, 22 strains were isolated as dominant non-starter lactic acid bacteria (NSLAB). The isolates were identified by RAPD, API and sequence analysis of 16S rRNA and showed to be five strains of Lactobacillus sakei, five strains of Lactobacillus farciminis, five strains belonging to the group of Lactobacillus plantarum/pentosus, four strains of Lactobacillus alimentarius, two strains of Lactobacillus brevis and one strain of Lactobacillus versmoldensis. Heterofermentative strains as well as strains not growing at 37 degrees C and not lowering pH below 5.1 in a meat model were excluded leaving 9 strains for further studies. These strains together with 19 strains from a culture collection were evaluated by in vitro methods including survival upon exposure to pH 2.5 or 0.3% oxgall and adhesion to the human colon adenocarcinoma cell line Caco-2 as well as antimicrobial activity against potential pathogens. Strains that fulfilled all the probiotic criteria and showed to be fast acid producers in a meat model included three strains belonging to the group of Lb. plantarum/pentosus (MF1291, MF1298, MF1300) which originated from the dominant NSLAB of fermented meat products. MF1291 and MF 1298 were further identified as Lb. plantarum and MF1300 as Lb. pentosus. The three strains were all successfully applied as starter cultures for the production of fermented sausage. The viable count at the end of the processing period reached high cell numbers (4.7x10(7)-2.9x10(8) cfu/g) and pH of the sausages decreased to pH 4.8-4.9 without any flavour deviation compared to sausage fermented by a commercial meat starter culture.     

荧光定量PCR法检测益生菌饮料中Lactobacillus casei Zhang和Bifidobacterium lactis V9

益生菌活菌数是益生菌产品最重要的指标,而检测益生菌方法的准确性和科学性则至关重要.本文采用荧光定量PCR法同时定量检测益生菌饮料中Lactobacillus casei Zhang(L.casei Zhang)和Bifidobacterium lactis V9(B.lactis V9)的活菌数,并与平板菌落计数法进行比较.结果表明,荧光定量PCR法测得L.casei Zhang活菌数与平板菌落计数法测得活菌数差异不显著;而采用荧光定量PCR法测得B.lactis V9活菌数显著高于平板菌落计数法.荧光定量PCR法灵敏、特异、简便快速,可定量检测并真实反应L.casei Zhang和B.lactis V9的活菌数.     

用于乳酸菌分离鉴定的几种培养基的筛选及应用

发酵乳产品中益生菌活菌数的正确评价,对保障发酵乳制品的质量和功效具有重大意义。本研究通过对三种不同的益生菌在五种不同的培养基上的生长状况进行了评价和观察,结果发现嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌在改良TJA培养基上生长状况很好,瑞士乳杆菌在溴甲酚绿指示剂培养基上长势良好。研究结果为以这些菌种研究开发新型发酵乳产品提供了技术和品质的保证,也为益生菌及益生菌制品深入研究打下了基础。     

A selective medium for the enumeration and differentiation of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus

Modified reinforced clostridial medium (mRCM) was developed and evaluated for the differential enumeration of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus. Lactobacillus bulgaricus, an important species of lactic acid bacteria with health benefits, is used in the production of yogurt and other fermented foods. Our results showed that supplementing reinforced clostridial medium with 0.025% CaCl₂, 0.01% uracil, and 0.2% Tween 80 (mRCM) significantly enhanced the growth rate of L. bulgaricus RR and ATCC 11842 strains as measured by the optical densities of these strains after 12 h of incubation at 42°C. The bacterial populations (plate count) of the RR and ATCC 11842 strains were 0.76 and 0.77 log cfu/g higher in mRCM than in de Man, Rogosa, and Sharpe and reinforced clostridial medium media, respectively. Conversely, the population counts for other bacterial species (Bifidobacterium, Lactobacillus rhamnosus, and Lactobacillus reuteri) were significantly inhibited in the mRCM medium. The addition of aniline blue dye to mRCM (mRCM-blue) improved the selectivity of L. bulgaricus in mixed lactic bacterial cultures compared with de Man, Rogosa, and Sharpe medium and lactic agar with regard to colony appearance and morphology. The mRCM-blue performed better than the conventional medium in culturing, enumerating, and differentiating L. bulgaricus. Therefore, mRCM-blue could be used as a selective medium to enhance the growth and differentiation of L. bulgaricus in order to meet the increasing demand for this beneficial species of bacteria.     

小米乳酸菌发酵饮料胀罐微生物的分离及鉴定

目的 对小米乳酸菌饮料胀罐微生物进行分离和菌株鉴定,并对所分离菌株的产气特性进行研究。方法 使用孟加拉红琼脂培养基、营养肉汤琼脂培养基和改良MRS琼脂培养基对小米乳酸菌饮料胀罐微生物进行分离和纯化,根据菌落形态观察、菌体形态观察、16S rRNA 序列分析并结合基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(ALDI-TOF MS)技术对分离菌株进行鉴定。最后将分离菌株接种到无菌小米乳酸菌饮料产品中,培养观察产气现象。结果 共分离出6株细菌,编号为B001、B002、B003、B003、B005、B006,菌种鉴定结果均为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei),6株细菌均具有产气现象。结论 副干酪乳杆菌是引起本研究产品胀罐的主要原因。     

乳酸菌菌粉定量计数方法研究

目的:以9株乳杆菌、6株双歧杆菌、3株球菌、1株凝结芽孢杆菌菌粉为研究对象,在国标GB 4789.35-2016的基础上,对稀释倍数、稀释液成分、培养基成分进行比较研究,考察对乳酸菌菌粉计数活菌数的影响。方法:采用稀释平板计数的方法,对不同的乳酸菌菌粉进行活菌计数。结果:初始乳酸菌菌粉样品稀释倍数对最终计数活菌数无明显影响,ISO稀释液对部分乳杆菌、双歧杆菌菌粉的活菌计数结果有显著提高(P<0.05);双歧杆菌菌粉采用TOS琼脂培养基的计数结果显著优于国标培养基(P<0.05);凝结芽孢杆菌菌粉采用改良芽孢计数培养基计数结果优于PCA和NA计数培养基。结论:平板计数方法中,稀释液中含有酪蛋白胨能提升双歧杆菌菌粉的活菌计数数量;TOS琼脂培养基更有利于双歧杆菌的增殖培养;改良芽孢计数培养基更有利于凝结芽孢杆菌的芽孢萌发增殖。     

核桃粕发酵乳菌种筛选及发酵条件优化研究

该试验对乳酸菌发酵核桃粕乳的不同菌株进行筛选,通过pH值、酸度及感官评定分析,从9株乳酸菌中筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)两株优良菌种。研究两株乳酸菌的复配比例,并与传统发酵剂发酵的核桃粕乳进行品质对比。结果表明,以嗜酸乳杆菌:植物乳杆菌(1∶1)接种发酵后得到的发酵核桃粕发酵乳综合品质最佳,其感官评分90分,氨基酸态氮含量57.0 mg/L,活菌总数7.35×107 CFU/mL,经发酵后的营养价值明显优于传统发酵剂发酵的核桃粕乳。     

恩施市泡萝卜中乳酸菌的分离鉴定及其对品质的影响

对5份恩施地区泡萝卜中的乳酸菌进行了分离鉴定,同时对其分离株在以萝卜为原料的泡菜中的发酵特性进行了评价。结果表明:分离出18株乳酸菌菌株,分别为隶属于片球菌属(Pediococcus)的戊糖片球菌(P.pentosaceus)和隶属于乳酸杆菌属(Lactobacillus)的食品乳杆菌(L.alimentarius)、短乳杆菌(L.brevis)、副干酪乳杆菌(L.paracasei)、发酵乳杆菌(L.fermentum)和植物乳杆菌(L.plantarum),其中8株分离株为L.plantarum。通过质构分析发现,乳酸菌纯种发酵制备的多数泡萝卜样品硬度和脆性均明显高于自然发酵样品。通过电子鼻分析发现,W1C、W3C和W5C对多数乳酸菌纯种发酵泡萝卜水的响应值明显偏高。通过主成分分析发现,菌株L.paracasei HBUAS51063和L.plantarum HBUAS51053具有相对较佳的发酵特性。由此可见,恩施市泡萝卜中乳酸菌以L.plantarum为主,乳酸菌纯种发酵可提升多数泡萝卜的品质。     

大豆酸乳发酵菌种的驯化及营养因子的研究

选择保加利亚杆菌（Lactobacillus bulgaricus）和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）作为发酵菌种,通过逐步提高牛奶中豆乳的比例对菌种进行驯化的方法和改变培养基中营养成分的含量,研究大豆酸乳发酵过程中酸度值和菌落总数的变化情况。结果表明,经过驯化后的保加利亚杆菌发酵大豆酸乳过程中,酸度值从37.5 °T上升至40.0 °T,活菌数量提高了0.5倍;经过驯化后的嗜热链球菌发酵大豆酸乳过程中,酸度值从35.0 °T上升至37.5 °T,活菌数量提高了1.67倍;经过驯化后的混合菌种（保加利亚杆菌∶嗜热链球菌比例为1∶1）发酵大豆酸乳过程中,酸度值从42.5 °T升至48.5 °T,活菌数量提高了1.85倍;5种营养因子对大豆酸乳酸度的提高作用顺序为大豆肽＞氨基酸＞胡萝卜汁＞低聚果糖＞西红柿汁。