菌酶协同发酵水解大米蛋白ACE抑制肽及其活性的研究

使用植物乳杆菌2-18和枯草芽孢杆菌Y、枯草芽孢杆菌Y4-2联合蛋白酶共同水解大米蛋白,测定大米蛋白的水解溶出率及脱除液的血管紧张素转换酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制活性。在利用菌酶联合水解大米蛋白的组合中,植物乳杆菌2-18+风味蛋白酶/菠萝蛋白酶+胃蛋白酶/酸性蛋白酶组合对大米蛋白的水解溶出率最高,蛋白脱除率为(91.32±1.60)%。大米蛋白水解溶出液中必需氨基酸占总氨基酸含量的39.62%。通过对分子量分布分析,大米蛋白水解溶出液的多肽分子量分布主要在1 kDa～1.5 kDa部分。经植物乳杆菌2-18+风味蛋白酶/菠萝蛋白酶+胃蛋白酶/酸性蛋白酶组合对大米蛋白的水解溶出液ACE抑制率达(91.95±1.63)%,具有良好的ACE抑制活性。     

酶解丝素蛋白制备ACE抑制肽的研究

本研究首次探讨利用Alcalase酶解丝素蛋白制备高活性ACE抑制肽.以水解度为主要评价指标,研究了温度、浓度、pH、加酶量以及反应时间对酶解反应的影响.分析了不同水解度下的酶解产物与ACE体外抑制活性、肽得率和蛋白回收率的关系.确定了制备ACE抑制肽的最佳酶解反应DH值为17.12％,此时所得丝素蛋白肽的肽得率为50...     

逆流超声辅助酶解法制备大米ACE抑制肽

研究逆流超声预处理大米蛋白对其碱性蛋白酶酶解制备血管紧张素转换酶(Angiotensin-I Converting Enzyme,ACE)抑制肽的影响。首先从米渣中提取大米蛋白,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、时间、温度、加酶量和pH进行参数优化,在此基础上筛选逆流超声模式的最佳超声参数。结果表明最佳酶解参数为底物浓度30 g/L、加酶量(E/S)7.5%、温度50 ℃、pH8.5和酶解时间60 min,此时酶解产物ACE抑制率为45.59%,水解度为21.49%。最佳超声参数为超声频率20 kHz、功率密度170 W/L、时间12.5 min。此时酶解液ACE抑制率达72.24%,水解度为21.64%,相较于未超声组ACE抑制率提高了57.42%,相较于传统超声组,ACE抑制率提高了11.36%。结果表明逆流超声波辅助酶解法能有效提高酶解效率、减少能耗、促进ACE抑制肽制备。     

微生物发酵法制备大豆ACE抑制肽菌种的筛选

以大豆分离蛋白为底物,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和肽含量为检测指标,选择5株乳酸菌、3株霉菌和1株枯草芽孢杆菌为出发菌种,通过微生物发酵筛选出具有高ACE抑制活性的发酵菌株。结果表明:乳酸菌中具有强ACE抑制活性的菌株为保加利亚乳杆菌,ACE抑制率和肽含量分别为57.93%和3.27mg/mL;霉菌中具有强ACE抑制活性的菌株为米曲霉,ACE抑制率和肽含量分别为41.23%和2.17mg/mL;枯草芽孢杆菌ACE抑制率和肽含量分别为45.02%和2.25mg/mL。综合比较9种菌株的发酵特性,选用保加利亚乳杆菌作为制备大豆抗高血压活性肽优良菌株。     

利用海洋生物蛋白制备ACE抑制肽的研究进展

血管紧张素转化酶(angiotensin convert enzyme,ACE)在血压调节方面起着重要作用,当其受到抑制时血压就会降低。本文综述了A C E抑制肽的降压原理、活性检测方法、分离提纯和海洋生物蛋白源A C E抑制肽的国内外最新研究进展,并对其应用前景进行了展望。     

大米ACE抑制肽制备工艺优化和生物活性研究

采用胰蛋白酶从大米蛋白中酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,在单因素实验的基础上,采用响应面法(RSM)对工艺条件进行了优化.在最佳酶解条件下,大米蛋白水解液ACE抑制率可达75.17％.酶解产物经大孔树脂脱盐,97.99％的大米ACE抑制肽的分子质量主要分布在1000 U以下,大米ACE抑制肽的IC50值为1....     

植物乳杆菌和蛋白酶协同发酵水解大米蛋白ACE抑制肽高活性组分的氨基酸序列分析

利用低大米蛋白制备过程发酵水解液中富含大米蛋白和肽。以乳杆菌L2-18+风味蛋白酶/菠萝蛋白酶+胃蛋白酶/酸性蛋白酶分步获得的大米蛋白水解液为研究对象,通过超滤获得小于3 kDa蛋白肽。经阳离子交换、凝胶柱层析和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)三步分离纯化,确定出高活性ACE抑制肽组分,IC_(50)值为33.81μg/mL。经液质联用(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)鉴定分析,其多肽序列为VVFFAAAL。     

ACE抑制肽研究进展

该文对目前国内外有关ACE抑制肽研究进展进行综述,重点介绍制备ACE抑制肽原料、分离提取方法、结构与活性关系、活性测定方法和功能性评价方法,并简介其在食品中应用及发展前景,以期为对ACE抑制肽进一步研究提供参考。     

牡蛎功能短肽的制备及ACE抑制活性

以新鲜无壳牡蛎为原料,采用酶水解的方法制备牡蛎短肽,经SephadexG 15分离,并用HPLC测定其相对分子质量分布,通过HPLC法定量马尿酸测定各组分的ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。结果表明,牡蛎水解液中相对分子质量较大和较小部分的ACE抑制活性偏低,只有相对分子质量在一定范围内的短肽,对ACE具有较好的抑制作用,质量浓度为0.4mg/mL的牡蛎功能短肽的ACE抑制率为51.4%.     

魔芋ACE抑制肽的分离纯化及活性检测

利用碱溶酸沉法从魔芋飞粉中提取魔芋蛋白,以魔芋蛋白为原料,利用碱性蛋白酶酶解制备魔芋ACE抑制肽粗品;其粗品通过超滤法除去大分子杂质,再经过Sephadex G-15柱层析分离,最后经过RP-HPLC纯化后得到纯度较高的魔芋ACE抑制肽,并且对超滤膜进行选择、Sephadex G-15柱层析分离进行条件优化;以马尿酸含量为指标,紫外分光光度法测其活性。实验结果表明:选择规格为1 kDa超滤膜;Sephadex G-15最佳分离条件为浓度为120 mg/mL、流速为0.8 mL/min、上样量为1.0 mL;经过RP-HPLC纯化后得到魔芋ACE抑制肽抑制率可达到92.85%。空白液中Hip含量为22.50 mg,反应液中Hip含量为9.22 mg,说明魔芋ACE抑制肽抑制活性较好。     

碎米蛋白ACE抑制肽制备工艺的研究

研究了以碎米为原料,酶法制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的工艺。采用不同的蛋白酶对碎米蛋白进行水解,以水解液对ACE抑制率为评价指标,结果得出风味蛋白酶为最佳水解酶;通过单因素和正交试验,确定最佳的酶解工艺条件:pH为7.0,酶解温度为55℃,料液比为3%,酶解时间3h,风味蛋白酶酶添加量4000U/g。在此条件下ACE抑制肽的抑制率为85.4%。     

米糠蛋白ACE抑制肽在大鼠体内降压效果的研究

采用灌胃和静脉注射的方法,观察了米糠蛋白ACE抑制肽对应激性高血压(SHR)大鼠的降压效果,并与卡托普利的降压效果进行了比较。分别以50、100、150 mg/kg·bw剂量的米糠蛋白ACE抑制肽一次性给药后,每2 h测量大鼠血压,连续测量8 h;实验持续4周,每天灌胃一次,每周测量血压及体重一次。SHR大鼠给予米糠蛋白ACE抑制肽后,血压均显著下降(p<0.05),并均在灌胃后2 h达到最低值,血压下降最大幅度为(31±6.8)mm Hg;而正常大鼠灌胃米糠蛋白ACE抑制肽后血压无显著变化,灌胃卡托普利则会明显降低其血压;长期灌胃米糠蛋白ACE抑制肽可使SHR大鼠血压下降明显(p<0.05),且降压效果稳定。      

米糠蛋白富含谷氨酰胺活性肽营养液制备研究

以米糠蛋白为原料,采用蛋白酶水解制备谷氨酰胺活性肽营养液。以谷氨酰胺含量和水解度为指标,通过单因素试验和正交试验得到最佳制备条件为:采用碱性蛋白酶、t=3h、T=45℃、pH=10.5、[S]=10%、E/S=6%;经HPLC法测定,产物谷氨酰胺含量为14.6%;总氮得率为40.2%。     

大豆生理活性肽的研究(Ⅱ)--抗氧化性和ACE抑制活性的初步研究

采用AS1.398和Alcalase两种蛋白酶,制备了水解度为10%～24%的大豆多肽,对其抗氧化性、ACE抑制活性和相对分子质量的分布进行了研究,结果表明采用AS1.398酶水解的DH为12%的产品抗氧化活性最高,添加量为6 mg/mL时使亚油酸的氧化诱导期延长2.92倍,其相对分子质量分布在1 000以上的组分较多;采用Alcalase酶水解的DH为14%的大豆多肽产品,ACE抑制活性最高,IC50为0.144 mg/mL,其相对分子质量分布大多在200～600之间.     

米蛋白短肽抗氧化活性研究

以米渣为原料,通过蛋白酶酶解,并进行膜分离,得到米蛋白短肽。通过对样品蛋白分子量及短肽含量测定可知:米蛋白短肽分子量大部分集中在1 ku下,短肽含量为77.87%;并对米蛋白短肽抗氧化活性测定,结果显示:样品对样品对DPPH.、.O2-及.OH 3种自由基均具有一定清除能力,当米蛋白短肽浓度为10 mg/mL时,清除率分别为62.36%、82.07%、35.41%。     

利用米糠蛋白制备类阿片拮抗肽和降血压肽的研究

采用离体豚鼠回肠(GPI)检定法测定不同米糠蛋白胰蛋白酶水解物的类阿片拮抗活性,结果发现跟新鲜米糠一样,低温脱脂米糠蛋白的酶解物具有较高的类阿片拮抗活性,高温脱脂米糠蛋白的酶解物无类阿片拮抗活性。采用低温脱脂米糠蛋白为原料,研究其制备类阿片拮抗肽后的残留蛋白酶解物的ACE抑制活性,结果发现在6种酶解物中,水解度(DH)为15.4%的碱性蛋白酶水解物的ACE抑制活性最高。     

大海马ACE抑制肽制备及其抗氧化能力的测定

为了从大海马蛋白中制备出ACE抑制肽及分析肽的抗氧化能力,本文通过比较小分子肽与ACE间的关系对蛋白酶进行了选择,筛选出木瓜蛋白酶作为海马蛋白的水解酶。然后,在单因素实验基础上采用响应面法对木瓜蛋白酶制备ACE抑制肽的关键参数进行了优化,结果为酶底比（E/S）为5%、时间7.5 h、p H7.7、温度59℃,测得其水解度为20.41%±0.12%,ACEIPs的IC₅₀值为1.897±0.072 mg/m L。经Sephadex G-15分离纯化后,得到五个组分,其中第三个组分（PH-I3）、第4个组分（PH-I4）和第5个组分（PH-I5）的活性最好,IC₅₀分别为0.896、0.982、0.814 mg/m L;并对这五个组分进行了抗氧化实验,各组分均能显著的清除DPPH自由基、羟基自由基,具备与Fe2+的螯合能力。所以,由PH-I制备的ACE抑制肽同时具有降血压和抗氧化的功能,在功能性食品开发中具有重要的意义。      

King Boletus mushroom-derived bioactive protein hydrolysate: characterisation,antioxidant, ACE inhibitory and cytotoxic activities

The enzymatic-bromelain King Boletus mushroom protein hydrolysate (eb-KBM) was determined in terms of the biological properties (antioxidant, antihypertensive and cytotoxic activities) and compared with unhydrolysed or water-soluble King Boletus mushroom extract (ws-KBM). The eb-KBM showed high antioxidant activities, as assessed by ABTS (70.9%), DPPH (60.9%) assays and hydroxyl radicals (66.0%) scavenging method. Angiotensin-I converting enzyme (ACE) inhibitory activity of eb-KBM was 21.1% at 1 mg protein mL⁻¹. Anticancer activity-relevant cytotoxicity of eb-KBM in ChaGo-K1 (undifferentiated lung carcinoma) and HEP-G2 (hepatocarcinoma) cells was higher than that of ws-KBM, with lower IC₅₀ values (6.43 and 6.35 µg mL⁻¹, respectively). The great biological activities of eb-KBM were related to its amino acid composition, with high contents of hydrophobic amino acids and aromatic amino acids. These results indicate that King Boletus mushroom protein hydrolysate or bioactive peptide could be used as natural antioxidative, ACE inhibitory and anticancer activities in the nutraceutical and pharmaceutical industries.