桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、^1H—NMR、^13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14．2×10^3,22．2×10^3的多糖PL—A及蛋白聚糖PL—B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71％,蛋白质占7％;PL—A,PL—B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL—B中还有部分鼠李糖;PL—B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL—B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14.2×103,22.2×103的多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71%,蛋白质占7%;PL-A,PL-B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL-B中还有部分鼠李糖;PL-B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL-B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

桑黄多糖分离纯化及其结构初步鉴定

本文用离子交换和凝胶层析对桑黄多糖进行了纯化,并对多糖的结构、组成及理化常数进行了分析。结果表明,经弱碱性阴离子和弱酸性阳离子交换树脂一次串联脱蛋白,蛋白脱除率达94.96%,多糖回收率为77.77%。再经凝胶层析,得到大分子量多糖组分HHM(2.84×106Da)和小分子量多糖组分HLM(5.33×104Da),HLM和HHM的旋光度分别为[α]D25= 64.8°和[α]D25= 58.4°,由IR分析,初步推测该HHM和HLM多糖为β型吡喃多糖,由TLC法测得的HHM的单糖组成为葡萄糖,HLM单糖组成分别为葡萄糖和半乳糖。     

桑黄子实体与桑黄菌丝多糖抗氧化活性研究

桑黄是我国一种非常珍贵的功能性真菌,多糖是其的主要生物活性成分,试验提取桑黄子实体多糖和二种不同生长期的菌丝多糖,对其进行抗氧化试验,以总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除羟基自由基能力、对Fe~(2+)螯合能力、超氧阴离子自由基清除能力测定5种方法评价其抗氧化活性,试验结果表明桑黄子实体多糖表现出较强的抗氧化活性,对比桑黄子实体多糖与桑黄菌丝多糖,子实体多糖抗氧化效果显著高于菌丝体多糖,不同生长期的菌丝多糖也呈现出不同的抗氧化性,生长期短的菌丝多糖表现出更强的抗氧化性。试验结果为今后桑黄产业提供重要的理论基础。     

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及理化性质分析

研究桑黄粗多糖的分离和纯化工艺,并对多糖组分进行理化性质分析。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到两个组分P-47000和P-8700;经高效液相色谱分析证明,两组分均为纯品,且不含蛋白质、核酸,为非淀粉类多糖,分子质量分别为4.74×104D和8.71×103D,均由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成,P-47000中各单糖物质的量比为3.47:1.99:1:63.27:13.44,P-8700中各单糖物质的量比为10.46:1:1.03:182.75:30.94。     

桑黄子实体与菌丝多糖抗肿瘤活性研究

多糖是桑黄的主要生物活性物质之一,存在于桑黄子实体,发酵液以及其菌丝体中。本试验提取了桑黄子实体多糖和二种不同生长期的桑黄菌丝多糖,研究其分子结构,并且对其抗肿瘤活性进行了研究。试验结果表明,桑黄子实体多糖单糖组成为:半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖;桑黄菌丝多糖的单糖组成为:半乳糖、葡萄糖和甘露糖,桑黄子实体多糖和桑黄菌丝多糖结构存在较大差异。桑黄子实体多糖对人肝癌细胞、人肺癌细胞和人宫颈癌细胞的抑制率IC_(50)值分别为:0.34 mg/mL、0.65 mg/mL、0.95mg/mL,表现出很强的抗肿瘤活性。体内和体外试验表明,桑黄子实体多糖抗肿瘤效果显著高于桑黄菌丝体多糖,不同生长期的菌丝多糖也呈现出不同的抗肿瘤活性,生长期长的菌丝多糖表现出更强的抗肿瘤活性。     

枸杞多糖的分离纯化及结构研究

枸杞子经提取,醇沉,得到枸杞水溶性多糖粗品(LBP)。最佳乙醇沉淀添加量为50 m L浓缩液中添加80 m L体积分数95%乙醇;最佳乙醇醇沉时间为12 h;Sevag法除蛋白次数为6次,脱除率为83.45%。枸杞粗多糖经DEAE-52纤维素(OH-)色谱柱、Sephedex G-50柱层析纯化后,得到LBP1和LBP2。采用紫外光谱扫描和Sephedex G-100柱层析鉴定LBP1和LBP2均为分子质量相对均一的组分。高效液相色谱检测LBP1和LBP2的相对分子质量分别为367和358。苯酚-硫酸法测得:LBP1和LBP2的中性糖含量分别为82.20%和74.50%;咔唑-硫酸法测得LBP1和LBP2的半乳糖醛酸含量为7.50%和14.30%。气相色谱测得LBP1的单糖组成摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.79∶1.00∶3.08;LBP2的单糖组成的摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.32∶1.00∶7.38。红外光谱测定结果显示,LBP1和LBP2均由吡喃糖构成。β消去反应检测得LBP1和LBP2与氨基酸是通过O-糖苷键相连。刚果红实验证明LBP1和LBP2均不存在三股螺旋结构。粒度实验表明,溶液酸碱度会影响枸杞多糖的粒度分布。     

阿魏菇多糖的分离纯化与结构分析

通过对新疆阿魏菇多糖进行提纯及分析,了解其基本理化性质,在理论上为深入探究阿魏菇多糖的结构以及构效活性奠定了基础。阿魏菇的热水提取液经乙醇沉淀、去蛋白、逆向流水透析、DEAE-Cellulose和SephadexG-100柱层析得纯品阿魏菇多糖。薄层色谱分析表明阿魏菇总多糖是由半乳糖,葡萄糖,果糖,甘露糖组成。以红外和电泳为基础,分析了阿魏菇多糖组分的结构,表明其是一种较纯的多糖,原子力显微镜分析表明阿魏菇多糖分子具有高度分枝结构。     

金耳多糖的分离纯化与结构分析

对金耳粗多糖的提取方法作了探讨，筛选出了最佳的工节条件，并采用了较新颖的去蛋白工艺与纯化手段，获得了金耳多糖的纯品ＡＰ３。对ＡＰ３的纯度、分子结构、单糖组成进行了初步分析。     

山药多糖的分离纯化及其结构鉴定

以山药为原料,经分离提取纯化等一系列步骤得到山药水溶性多糖,用Sephadex G-100柱层析,发现经DEAE层析后的多糖为均一组分,其比旋光度为+162.5°,属于水溶中性多糖。经薄层层析以及GC-MS分析测定该中性糖为葡萄糖和甘露糖组成,其摩尔比为0.56:0.44。红外光谱和NMR谱分析显示该中性糖有α-异构体吡喃己糖环,它们归属为α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖。     

超声波复合酶法提取桑黄多糖研究

采用单因子分析和正交试验,以桑黄菌丝体提取物中多糖得率为指标,对超声波复合酶法中影响多糖提取效果的主要因素进行研究。结果表明：超声波提取优化工艺条件为超声处理时间20min、料液比1:25(g/mL)、功率500W,在此基础上提取多糖得率为3.356%,在超声波优化结果基础上,进一步进行复合酶法处理,酶解最佳提取条件是pH6.5,酶解温度50℃,纤维素酶添加量2.5%、果胶酶添加量2.5%、蛋白酶添加量1%,酶解时间120min,多糖得率为6.619%,由此可见,超声波和复合酶法双重处理提取桑黄多糖是一种有效的提取方法,适合大规模生产运用。     

碱提桑黄菌丝体多糖的抗氧化活性

为了研究碱提桑黄菌丝体多糖PL-N的抗氧化活性。利用物理、化学方法分析了PL-N的化学组成及基本理化性质,在此基础上,通过体外抗氧化模型、细胞试验和D-半乳糖所致的小鼠亚急性衰老模型综合评价了PL-N对DPPH和羟自由基的清除作用、过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞的保护作用及体内抗氧化活性。结果表明:PL-N的总糖和糖醛酸含量分别为84.92%和16.92%,不含蛋白质,主要由D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其分子摩尔比为5.5:7.8:1.8:1。PL-N具有明显的清除自由基能力,且呈剂量依赖关系,在2.0 mg/mL时,PL-N的DPPH和羟自由基清除率分别为72.1%和83.3%。同时,在80 μg/mL时,PL-N预处理对氧化损伤细胞的存活率达到88.7%,揭示其突出的体外抗氧化活性。与模型组相比,灌胃高剂量PL-N的小鼠脏器指数、血清和肝脏中的抗氧化酶活性和总抗氧化能力均极显著增加(P<0.01),丙二醛含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,PL-N具有突出的抗氧化活性,可作为功能性食品应用于膳食、理疗中。     

Isolation,Purification, and Structural Features of a Polysaccharide from Phellinus linteus and Its Hypoglycemic Effect in Alloxan‐Induced Diabetic Mice

Phellinus linteus is a medicinal mushroom that has been used in Oriental countries for centuries for its antitumor, antioxidant, immunomodulatory, and biological activity on hyperglycemia. A water‐soluble crude polysaccharide was extracted using hot water from P. linteus mycelia grown under submerged culture. An orthogonal experiment was used to optimize the extraction conditions of P. linteus mycelia polysaccharides (PLP). The crude polysaccharide was purified using DEAE Sephadex A‐50 and Sephadex G‐200 chromatography. Fourier transform infrared (FT‐IR) spectroscopy and nuclear magnetic resonance (¹H NMR) spectroscopy were used to investigate the structure of the purified P. linteus polysaccharide (PLP‐I), revealing that it was mainly a branched‐type glycan with both α‐ and β‐linkages and a pyranoid sugar ring conformation. PLP orally administered at 100 mg/kg body weight/d could significantly reduce the blood glucose level by 35.60% in alloxan‐induced diabetic mice. The results of an oral glucose tolerance test (OGTT) revealed that PLP had an effect on glucose disposal after 28 d of treatment. The result revealed that PLP from a submerged culture of P. linteus mycelia possessed potent hypoglycemic properties. The polysaccharide may be useful as a functional food additive and a hypoglycemic agent.     

桑黄子实体多糖、黄酮和多酚含量与抗氧化活性相关性

探讨子实体抗氧化的物质基础。通过提取和萃取得到7种组分:水提物(WE)、醇提物(AE)、粗多糖(CP)、醇沉上清干物(RL)和二氯甲烷(MCE)、乙酸乙酯(EAE)、正丁醇(n BE)萃取物,采用FRAP值法测定体外抗氧化能力,分光光度法测定多糖、黄酮和多酚含量。结果表明:抗氧化活性物存在于醇提物中,抗氧化活性和多酚、黄酮含量有关,并呈线性正相关(R2为0.9977和0.9950),多糖在抗氧化中所起作用小,酚类、黄酮类为其主要抗氧化活性物质。      

鹰嘴豆多糖分离纯化和结构表征

以鹰嘴豆为原料，对其全豆、子叶、种皮等不同部位多糖分布和理化性质进行分析、比较，并研究鹰嘴豆种皮多糖(Cicer arietinum hull polysaccharide,CAHP)结构特征。根据得率和化学组成等结果，可推测鹰嘴豆多糖集中分布于其种皮部位；进一步采用柱层析分离法对CAHP纯化获得6个组分，并对其中得率较高且具有良好均一性的多糖组分CAHP-F_0.2进行结构表征。结果表明，CAHP-F_0.2以HG型果胶多糖为主，其主链由1,4-Galp A连接而成，并含有少量的RG-I型果胶结构域，同时存在阿拉伯聚糖侧链和阿拉伯半乳聚糖-II侧链。本研究将为鹰嘴豆多糖结构、生物活性研究和资源开发提供一定理论依据。     

藤茶水溶性多糖的分离纯化及性质的研究

经水提、醇沉、Sevag法脱蛋白的藤茶多糖(AGP),通过DEAE-SephadexA-25和SephadexG-200柱层析,得到多糖AGP-3和AGP-4。HPLC和SephadexG-200柱层析鉴定AGP-3和AGP-4为分子量相对均一的蛋白多糖,硫酸-咔唑反应、考马斯亮蓝G-250反应均呈阳性。