人组织激肽释放酶基因的克隆及融合蛋白的表达

目的 开发激肽释放酶基因工程产品,为开展基因治疗高血压奠定基础。方法 采用RT-PCR的方法合成人胰腺 cDNA,从中扩增出Kallikrein(KK)基因。经 XhoI和EcoR I双酶切后,连接到pET-28b(+)载体上,酶切鉴定后,进行核苷酸序列分析和融合蛋白的表达。结果 将IPTG诱导表达的菌体进行SDS-PAGE电泳,与蛋白标准品比较,在相对分子质量31800处可见明显的高表达带。免疫印迹实验表明重组蛋白具有KK的抗原性。结论 已成功克隆并表达了人胰腺组织激肽释放酶基因,为进一步开发基因工程产品及进行基因治疗高血压研究打下了基础。     

人组织激肽释放酶成熟蛋白的纯化及活性分析

目的　制备纯化人组织激肽释放酶 ,并检测其生物活性 ,为中试放大及纯化工艺奠定基础。方法　使用麦芽糖 (MBP)融合分泌载体pMBP P ,构建并筛选出 1株工程菌株 ,在 6L培养基中经IPIG诱导表达人组织激肽释放酶融合蛋白。目的蛋白经亲和层析纯化及凝血酶切割后 ,采用电位滴度法测定其活力。结果　筛选出的工程菌株表达相对分子质量约 70 0 0 0的激肽释放酶融合蛋白 ,大小与预计大小相符。纯化后共获得 2 8mg蛋白 ,并具有水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力。结论　成功进行了人组织激肽释放酶融合成熟蛋白的小量制备 ,经纯化后的产物具有生物活性 ,为中试放大、纯化工艺研究奠定了基础。     

用盐析与疏水层析相偶合快速分离提纯猪胰激肽释放酶

将疏水层析技术用于从猪胰脏中分离纯化激肽释放酶,建立了一种简便、快速的分离提纯方法：将粗品溶解后经过硫酸铵沉淀处理,然后经过Butyl Sepharose FF疏水层析后得到目标蛋白,分析其纯度大于500U／mg,盐析和疏水两步纯化的收率大于85．0％,同时比较了Phenyl Sepharose FF,Octyl Sepharose FF和Butyl Sepharose FF三种疏水介质分离纯化胰K的效果,本实验工艺与传统工艺相比,具有操作简单、快速、回收率和纯化倍数高等优点,有望成为一种从动物组织中快速分离纯化药用蛋白质的有效技术平台。     

聚肽类组织工程材料研究进展

从生物合成聚肽、自组装聚肽和肽／非肽聚合物3个方面,综述了与组织工程相关的聚肽研究的最新进展,并展望了此类材料的优势及发展方向。     

PKA国家参考品的制备

本文应用 PKA 微量滴定板方法,用 WHO1984年建立的 PKA 国际标准品进行标定,制备了我国第一批 PKA 国家参考品。     

酶解大豆粕蛋白制备大豆低分子肽的研究

以小分子肽得率为考察指标,研究了由枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶制备大豆低分子肽的工艺条件。通过单因素实验和正交实验确定AS1.398中性蛋白酶酶解大豆粕蛋白制备大豆低分子肽的最佳条件为:底物浓度6%、温度45℃、加酶量17 000 U.g-1、pH值7.5。检测了在最佳条件下水解不同时间所得酶解液的活性,发现水解2.5 h的大豆肽液的抗氧化活性最强。     

抑肽酶的提取及活性研究

以牛肺为原料,经酸沉淀,胰蛋白酶亲和层析,分离提纯抑肽酶。并建立了二种抑肽酶活性测定方法(UKIU法及PKAIU法)。提纯后抑肽酶纯度提高88.3倍。得率为96.8％。活性抑制试验表明,该抑肽酶可抑制PKA对前激肽释放酶(PK)的作用,以及尿激酶对纤溶酶原的作用,对纤溶酶原的活化及纤溶酶活性也有较强抑制作用。     

用双水相系统释放大肠杆菌L-天门冬酰胺酶

引　言Ｌ 天门冬酰胺酶 (ＥＣ3 5 1 1)能催化Ｌ 天门冬酰胺水解为Ｌ 天门冬氨酸和氨 ,是治疗白血病的药物 .目前Ｌ 天门冬酰胺酶主要由微生物发酵生产 ,属于胞内酶 .传统的提取纯化Ｌ 天门冬酰胺酶的过程包括制备丙酮粉和缓冲液萃取[1] .这种方法要使用大量的丙酮 ,产生细胞碎     

醛固酮合酶基因多态性与原发性高血压的研究进展

醛固酮在调节电解质和水的体内平衡以及维持血压方面起着重要作用。在醛固酮的生产中特别重要的是醛固酮合酶(CYP11B2),其催化该激素合成中的最后三个反应。许多研究表明,醛固酮合酶基因变异,尤其是-344C/T多态性,与高血压病有关。本文是对评估醛固酮合酶基因的-344 C/T多态性对高血压病发展的影响的研究的简短综述。本文还提供了有关醛固酮产生的分子调控基础信息。     

酶解羊胎盘抗氧化肽的分离及在护肤品中的应用

为开发酶解法制备的羊胎盘抗氧化肽在化妆品中的应用,采用木瓜蛋白酶酶解羊胎盘下脚料,通过DA201-C型大孔吸附树脂、超滤膜和Sephadex G-10葡聚糖凝胶色谱分离纯化,并对各组分进行抗氧化活性的测定,筛选得到具有较高DPPH自由基清除率的羊胎盘抗氧化肽S12。配制不同S12质量分数的护肤乳液和润肤晚霜,采用MC750型皮肤测试仪评价样品的保湿和弹性功效。结果表明,15名志愿者持续使用添加质量分数4% S12的护肤乳液和润肤晚霜60 d后,角质层含水量分别增长了27和31,皮肤水分流失量分别降低了12.0和13.2 g/(m~2·h),皮肤弹性参数R_2分别升高了38%和45%。研究表明,添加了羊胎盘抗氧化肽的护肤品具有良好的保湿和提高皮肤弹性的功效。     

胰岛素释放实验与血管性疾病的关系

目的通过对血管性疾病的检测,探讨其相应指标与疾病间的关系。方法分别用葡萄糖氧化酶法、检测空腹血糖和糖耐量;用放射免疫分析法检测胰岛素和C—肽,并通过计算求得胰岛素敏感指数,各组间比较差异性。结果3种疾病组较正常对照组比较,均有不同程度的升高变化。结论血管性疾病患者均伴有不同程度的高胰岛素血症和胰岛素抵抗及ISI降低的实验室检查结果,故胰岛素释放实验(IRT)可作为高血压,冠心病,脑梗死等血管性疾病的危险因素之一,并作为其诊疗监测的实验室指标,应引起临床的重视和应用。     

生物活性小肽的研究进展

生物活性小肽是生物活性好、利用率较高的一类蛋白质。本文详细总结了部分效果明显的活性小肽的来源、功能和典型的合成路线。     

抗氧化肽的研究进展

动植物蛋白源的抗氧化肽,有着来源广泛、天然、安全、活性优良等诸多优点,而备受人们重视.因此对目前抗氧化肽的种类、活性机理、制备方法、检测方法以及实际应用等方面进行简述,为抗氧化肽的进一步研究奠定一定的理论基础.     

脲类受体酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

蛋白络氨酸激酶抑制剂作为目前治疗效果明显而且应用前景广阔的抗肿瘤药物备受青睐。本文以近5年的文献为主要参考,对已经上市的和处于研究阶段的脲类酪氨酸激酶抑制剂进行了综述。     

Aurora A激酶抑制剂的研究进展

恶性肿瘤给人类的生命健康带来了重大威胁,人们正在寻找更有效的靶点来攻克肿瘤。研究发现Aurora A激酶在人类多数血液恶性肿瘤和实体瘤中均有较高的表达特性,表明Aurora A激酶是抗肿瘤药物的一个新靶点。近几年国内外研制出了一些Aurora A激酶抑制剂,处在不同的研究阶段。文章简要对Aurora A激酶抑制剂的研究进展作一综述。     

控制释放肥料养分释放特性的研究

采用水溶法和模拟土壤中养分溶出的方法对控制释放肥料中氮磷钾的释放特性进行了研究,给出一些实测例,并通过计算机模拟出水溶出率和土壤溶出率之间的关系。     

脲醛树脂粘合剂中低甲醛释放的研究进展

本文概述了脲醛树脂(UF)粘 合剂的合成原理及树脂在应 用过程中释放甲醛的来源和 控制释放的方法,并论述了开 发低甲醛释放粘合剂的意义 和必要性。     

酶稳定性的研究进展

酶稳定性的研究已经取得了令人瞩目的成就。尤其在化学修饰方面：交联酶结晶技术、多聚体共价结合以及表面修饰等成果显著。综述了用化学修饰法和添加剂使酶稳定的最新研究进展。     

聚肽共聚物实现药物控制释放为新药和医药材料开发提供了新途径

由华东理工大学林嘉平教授等承扭的“聚肽共聚物纳米胶束药物控释性能研究”项目日前通过上海市科委验收。专家一致认为，该项目在研究聚肽共聚物的化学结构与自组装行为和载药性能的关系、通过不同化学结构聚肽共聚物的共混控制纳米胶束的结构与形态等方面具有创新性，