增乳方对左旋多巴诱导的哺乳大鼠低泌乳素血症的逆转作用

目的: 研究增乳方(CLD) 对左旋多巴诱导的低泌乳素血症哺乳大鼠乳汁分泌的促进作用。方法: 采用左旋多巴(L-Dopa) 诱导建立哺乳大鼠乳汁分泌低下模型;大鼠ig 给予CLD, 观察不同剂量(3 、6 、20 g·kg^-1·d^-1) CLD 对哺乳期大鼠的仔鼠体重以及母鼠血清泌乳素(PRL) 和乳腺组织学的影响。结果: 大鼠给予CLD 3 、6 、20 g·kg^-1 ·d^-1, 血清PRL 值显著高于模型组(P<0.05, P<0.01), 呈量-效关系;CLD 可明显增加母鼠泌乳量, 促进仔鼠体重的增长(P<0.05) 并促进母鼠乳腺的发育。结论: CLD对L-Dopa 诱导的哺乳大鼠低泌乳素血症具有逆转作用, 且促进乳汁的分泌。     

苯那普利干预Wnt信号通路抑制UUO大鼠肾纤维化的实验研究

目的: 探讨苯那普利对肾纤维化的拮抗作用。方法: 将54只SD大鼠随机分为3组：假手术组、模型组、苯那普利组,除假手术组外,其他各组均采用单侧输尿管结扎手术方法建立大鼠肾纤维化模型,取手术侧肾组织做病理检测,Masson染色观察其病理变化,冰冻切片免疫荧光染色检测转化生长因子-β1（TGF-β1）、IV 型胶原蛋白（Col-IV）、 Wnt1、Wnt4在肾组织的阳性染色表达。实时荧光定量 PCR检测TGF-β1、Col-IV、Wnt1、Wnt4的mRNA 在肾组织中的表达情况。结果: Masson染色显示：与假手术组比较,各造模组胶原纤维蓝染部分明显增多、肾纤维化程度显著增加;与模型组比较,苯那普利组胶原纤维蓝染部分明显减少、肾纤维化程度相对减少。免疫组化和PCR结果显示：与模型组相比,苯那普利组Wnt1、Wnt4、TGF-β1、Col-IV阳性表达及mRNA表达显著下降。结论: 苯那普利能通过降低TGF-β1、Col-IV、Wnt1、Wnt4的表达,有效降低肾纤维化水平,从而达到改善肾纤维化的作用。     

人参皂苷诱导骨髓间充质干细胞对急性肝功能衰竭大鼠肝组织再生及Wnt/β-catenin信号表达的影响

目的:分析人参皂苷诱导骨髓间充质干细胞（BMSC）对急性肝功能衰竭（ALF）大鼠肝组织再生及Wnt/β-catenin信号表达的影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠66只,其中1只行BMSCs培养,随机选取50只大鼠制备ALF模型,24 h后随机选取其中5只断颈处死,依据大鼠肝功能与组织病理学判别其是否成功造模。剩余15只大鼠将等剂量0.9%氯化钠溶液腹腔注入,作为正常组。成功造模的45只大鼠随机分成3组,分别为BMSCs组、模型组及人参皂苷诱导BMSCs组,每组各15只。造模后6 h,模型组和正常组大鼠由尾静脉注入1 mL细胞培养液,BMSCs组注入1 mL BMSCs悬液（细胞浓度2.0×109/L）,人参皂苷诱导BMSCs组注入1 mL人参皂苷诱导分化BMSCs悬液（细胞浓度2.0×109/L）,连续给药10 d。观察大鼠肝脏组织病理状况,血清总胆红素（TBil） 、AST、ALT、TNF-α、IL-6含量,肝组织内Wnt7b、Wnt7a及Wnt2基因表达。结果:正常组大鼠肝细胞无坏死、变性,整齐排列,肝小叶结构清晰,汇管区内没有炎性细胞浸润;模型组大鼠肝细胞表征为广泛坏死,肝小叶内全部肝细胞溶解坏死,网状的支架发生塌陷,汇管区和周边存在大量粒细胞、单核细胞与淋巴细胞的浸润,残余肝细胞变性、肿胀且伴随胆汁淤积;BMSCs组及人参皂苷诱导BMSCs组大鼠肝小叶结构趋向完整,肝细胞坏死、变性数量减少,汇管区内有少许炎性细胞浸润,人参皂苷诱导BMSCs组又优于BMSCs组。和正常组相比,模型组大鼠血清TBil、AST、ALT、IL-6及TNF-α含量上升;和模型组相比,BMSCs组、人参皂苷诱导BMSCs组大鼠血清TBil、AST、ALT、IL-6及TNF-α含量降低;和BMSCs组相比,人参皂苷诱导BMSCs组大鼠血清TBil、AST、ALT、IL-6及TNF-α含量降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。和正常组相比,模型组大鼠肝组织内Wnt7b、Wnt7a、Wnt2 mRNA相对表达量降低;和模型组相比,BMSCs组、人参皂苷诱导BMSCs组大鼠肝组织内Wnt7b、Wnt7a、Wnt2 mRNA相对表达量升高;和BMSCs组相比,人参皂苷诱导BMSCs组大鼠肝组织内Wnt7b、Wnt7a、Wnt2 mRNA相对表达量升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:人参皂苷诱导BMSCs可显著改善ALF大鼠肝功能,其作用机制可能为激活Wnt/β-catenin信号通路加速肝脏再生。     

不同剂量和不同给药次数的链脲霉素对大鼠胰岛的影响

目的: 研究不同剂量和不同给药次数的链脲霉素(STZ) 诱发胰岛炎和损害α、β细胞的程度。方法: 将Wistar大鼠分成6组:对照组;A组:STZ 50mg·kg^-1·d^-11 次给药;B 组:STZ 50 mg·kg^-1 ·d^-连续2 d 给药;C组:STZ 50 mg·kg^-1·d^-1 连续3 d 给药;D 组:STZ 30 mg·kg^-1·d^-1 连续5 d 给药;E 组:STZ 80 mg·kg^-1·d^-1 1 次给药。观察各组大鼠的体重和末梢血糖变化, 择期摘取大鼠的胰腺制作成组织切片, 进行HE, Azan 和免疫组织化学染色, 并在光学显微镜下进行组织学比较。结果: 与对照组相比, 各组大鼠的胰腺均存在明显的胰岛炎, D 组胰岛的炎细胞浸润、空洞形成和组织纤维化较其他各组显著严重, 各组残留胰岛数量、胰岛平均面积、β 细胞面积和β 细胞面积/胰岛平均面积之比均显著减少, 尤其是C 、D 和E 组最明显;相反, 各组的α细胞面积和α细胞面积/胰岛平均面积之比因α细胞的显露而显著增大。结论: STZ 可同时诱发化学性胰岛炎和自身免疫性胰岛炎, 破坏α细胞和β 细胞, 使胰岛出现空洞形成和组织纤维化。STZ 80 mg·kg^-1 ·d^-11 次给药可造成最严重的胰岛损害。     

经典Wnt信号途径相关因子与大肠癌分期的关系

目的: 探讨经典Wnt信号途径相关因子与大肠癌分期的关系。方法: 搜集2013年1月1日至2014年1月1日皖南医学院第一附属医院胃肠外科收治的46例大肠癌患者的临床资料、血清样本及病理组织标本,根据Dukes分期分为四组。搜集10例正常的肠黏膜组织标本作为对照组1,应用免疫组化法检测大肠癌及正常肠黏膜组织中Wnt-2蛋白、β-catenin蛋白、Axin蛋白、APC蛋白的表达。搜集15例健康人的血清样本作为对照组2,应用酶联免疫吸附试验检测大肠癌患者和对照组2血清中Wnt-2蛋白、Axin蛋白的表达。结果: Wnt-2、β-catenin在大肠癌组织中高表达,Axin、APC在大肠癌组织中低表达,且各个分期之间差异有统计学意义;46例大肠癌患者血清中Wnt-2浓度明显高于健康人,各个分期之间的差异也有统计学意义。Axin血清浓度低于健康人,但是各个分期之间的差异无统计学意义。结论: 经典Wnt信号途径相关蛋白的表达与大肠癌Dukes分期有关,经典Wnt信号途径相关因子可作为大肠癌筛查的血清学辅助指标,有助于提高大肠癌检出的灵敏度。     

地佐环平诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织去甲肾上腺素、5-羟色胺及代谢产物的浓度变化

目的: 通过对地佐环平(MK-801)诱导的精神分裂症(Schizophrenia, SZ)发育和慢性给药模型大鼠脑组织去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)及相关代谢产物浓度的比较研究,探讨围产期N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)受体阻断致SZ的神经生化机制。 方法: 24只新生雄性SD大鼠于出生后 6 d 随机分为SZ发育模型组(MK-801F)、SZ慢性给药模型组(MK-801M)和正常对照组(Control);SZ发育模型大鼠于出生后7～10 d 皮下注射MK-801(0.1 mg/kg,bid),SZ慢性给药模型大鼠于出生后47～60 d 腹腔注射MK-801(0.2 mg/kg,qd),对照组大鼠于相应时段注射 0.9%的生理盐水(Normal saline,NS)。出生后 63 d 取各组大鼠大脑内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex , mPFC)和海马组织并匀浆,以高效液相色谱-库仑阵列电化学法检测组织匀浆中的NE、甲氧基羟基苯乙二醇(Methoxyhydroxyphenylglycol, MHPG)、5-HT和5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid, 5-HIAA),并计算分析NE和5-HT的利用率。 结果: SZ慢性给药模型大鼠mPFC区NE和5-HT浓度较对照组和SZ发育模型组显著升高(P<0.01 或 0.05),两模型组大鼠mPFC区5-HIAA浓度较对照组显著升高(P<0.01 或 0.05);与对照组和SZ慢性给药模型组比较,SZ发育模型大鼠海马MHPG浓度和MHPG/NE比值显著升高(P<0.05),5-HT和5-HIAA浓度显著降低(P<0.01 或 0.05)。 结论: 围产期MK-801重复处理诱导的SZ发育模型大鼠mPFC区和海马5-HT能递质系统功能减退,海马NE能递质系统功能减退。     

长春西汀通过Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路改善七氟醚麻醉诱导幼鼠远期学习记忆功能

目的：探讨长春西汀对七氟醚麻醉对幼鼠远期学习与记忆功能的影响及机制。方法：60只SD幼鼠,随机分为对照组、麻醉组、长春西汀低剂量组（5 mg/kg）、长春西汀高剂量组（10 mg/kg）和GSK3β抑制剂组（10 mg/kg）,每组12只。麻醉前2 h,各组幼鼠腹腔注射对应剂量药物。除对照组,各组持续吸入4%七氟醚4 h。8周后开始水迷宫实验,应用免疫荧光双染检测幼鼠脑中神经元增殖,Western blot检测海马组织中各蛋白表达。结果：训练初期各组幼鼠潜伏期没有统计学差异,第三天训练中,与对照组相比,麻醉组幼鼠到达平台潜伏期显著增加（P<0.05）;第四天训练中,与麻醉组相比,长春西汀与SB216763干预显著减少了幼鼠到达平台潜伏期（P<0.05）。且测试中,与麻醉组相比,10 mg/kg长春西汀与SB216763干预幼鼠首次达到平台潜伏期显著减少（P<0.05）,穿越平台次数显著增加（P<0.05）。与此同时,七氟醚麻醉介导了幼鼠BrdU/NeuN阳性细胞数显著减少（P<0.05）。此外,七氟醚介导海马中Wnt3a表达降低、p-GSK3β表达增加、β-catenin表达降低（P<0.05）。而长春西汀与SB216763干预显著逆转了这些细胞与蛋白表达。 结论：长春西汀通过Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路改善七氟醚麻醉诱导幼鼠远期学习记忆功能。     

加味青娥丸对2型糖尿病大鼠心肌组织的保护作用

目的:观察加味青娥丸(Modified Qing'e Pill)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型大鼠糖脂代谢及其心肌组织功能的影响,并初步探讨其可能机制。方法:将健康SD大鼠（共72只）随机分为6组（n=12）：正常组（正常喂养、未建模）、模型组、加味青娥丸低、中、高三个剂量组（剂量分别为：2.7、5.4、10.8 g/kg）、二甲双胍组（0.15 g/kg）,采取“高脂喂养”+“腹腔注射链脲菌素（STZ）”的方法进行建模。给药方式均为灌胃,频率均为每天1次,时长均为8周,其中：加味青娥丸低、中、高三个剂量组和二甲双胍组给予对应药物灌胃,而正常组和模型组则给予等量的生理盐水灌胃。由专人分别在固定时间点（给药前、第4周、第8周）观察各组大鼠精神状态、称量各组大鼠体质量、测定各组大鼠空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2PBG）;给药周期结束后2 h,对血清中相关指标（糖化血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、总胆固醇、超敏 c反应蛋白、TNF-α）进行测定;给药周期结束后2 h,对心肌组织炎症、氧化应激相关指标（MDA、SOD、GSH）进行测定。结果: 给药组相比于模型组而言,大鼠精神状态、体质量、血糖及脂质水平均有所改善。同时,给药组能够降低血清中hs-CRP、TNF-α的水平,提高心肌组织中SOD、GSH的含量,降低心肌组织中MDA的含量。结论:加味青娥丸可以改善2型糖尿病SD大鼠的糖脂代谢,通过抗炎、抗氧化改善心肌损伤,保护心肌组织。     

MDR1基因多态性及其临床相关性

P-糖蛋白作为一种广泛分布于全身各组织和器官的重要转运体,对多种药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程以及防止有害外源性物质的侵袭起重要作用。作为P 糖蛋白的编码基因,多药耐药基因(multidrug resistance-1, MDR1)的多态性在一定程度上决定了上述过程在个体与个体之间的差异,因此对许多疾病的易感性以及特定药物在体内的药动学,药效学和治疗效应均存在较大影响。本文将对MDR1基因多态性对疾病易感性和临床上药动、药效学过程的影响进行综述。     

疏肝健脾方调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的：基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法：采用四氯化碳（CCl4）与橄榄油混合液背部皮下注射的方法，复制化学性肝纤维化小鼠模型。造模首日，灌胃给予疏肝健脾方，每天1次，连续12周；HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度，透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况；RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况。结果：病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊，肝细胞索排列紊乱，胶原沉积增加，焦亡小体数量明显增加，肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高。与模型组相比，疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度，抑制细胞焦亡，显著下调α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平。 结论：疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴，减少细胞焦亡，抑制肝星状细胞活化有关。     

乳复宁颗粒调节乳腺增生症家兔激素水平以及VEGF蛋白表达变化的研究

目的: 研究乳复宁颗粒改善乳腺增生疾病症状的作用及机制。方法: 将48只家兔按体质量随机分为6组，每组8只，即正常对照组、模型对照组、乳癖消片组、乳复宁颗粒高、中、低剂量组。给予雌性未孕家兔注射苯甲酸雌二醇，建立乳腺增生病理模型，测定家兔乳房直径和乳头高度，并检测各组家兔血清中泌乳素（PRL）、雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量，镜下观察乳腺组织病理形态学变化。同时测定家兔乳腺组织中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达改变。结果: 乳复宁颗粒高、中剂量组可降低乳腺增生症家兔乳房直径和乳头高度（P<0.01），降低血清中PRL、E2的含量（P<0.01），增加血清中P的含量；减少乳腺小叶数、小叶腺泡数，减轻管腔扩张和乳腺间质纤维结缔组织增生；同时降低乳腺组织中VEGF的过度表达。结论: 乳复宁颗粒可能通过调整雌孕激素比例及降低VEGF的表达来改善乳腺增生的症状。     

大蒜素对不同年龄组小鼠血清神经递质5-羟色胺和β-内啡肽的影响

目的: 探讨大蒜素对不同年龄组小鼠神经递质5-羟色胺(5-HT)和β-内啡肽(β-EP)的影响。方法: 健康ICR小鼠60只,随机分为青年组和老年组;各组又分设对照组和实验组。老年组鼠是用D-半乳糖制备衰老模型。实验组喂食大蒜素 14 d,对照组灌服同体积生理盐水。采用ELISA法测各组小鼠血清5-HT和β-EP含量。结果: 老年组鼠的β-EP明显低于青年组(P＜0.05),而老年组鼠和青年组鼠5-HT无统计学差异(P＞0.05)。青年实验组鼠较青年对照组鼠的5-HT,β-EP水平明显增加(P＜0.05);老年实验组较老年对照组的β-EP水平明显增加(P＜0.05),而5-HT仅有增加趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05)。结论: 大蒜素对β-EP的表达有明显的上调作用,对5-HT的上调作用青年组较老年组明显。     

白藜芦醇对去卵巢骨质疏松大鼠Wnt/β-Catenin通路的影响

目的: 研究白藜芦醇（RES）对卵巢摘除骨质疏松大鼠Wnt/β-Catenin信号通路的影响,探索RES对卵巢摘除的骨质疏松大鼠的保护作用及机制。方法: 选用60只健康雌性SPF级大鼠,随机分为假手术组（Sham组）12只、模型组（OVX组）48只,通过摘除大鼠双侧卵巢的方法,建立骨质疏松模型。12周后,测量骨密度（BMD）,将造模成功的大鼠随机分为OVX组、白藜芦醇低（RES-L,5 mg·kg-1·d-1）、中（RES-M,15 mg·kg-1·d-1）、高（RES-H,45 mg·kg-1·d-1）剂量组,每组12只,灌胃给药,假手术组和模型组给予灌服等量的生理盐水,每天一次,连续12周。ELISA法检测血清雌激素（E2）、孕激素（P）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）水平的变化;测量各组BMD;采用RT-PCR法检测β-Catenin、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP5）及Runx2 mRNA的表达。结果: OVX组BMD较Sham组显著降低（P<0.01）,表明造模成功。药物干预12周后,与Sham组相比,OVX组的BMD显著降低（P<0.01）;而RES各组的BMD显著升高;同OVX组相比,经RES干预后,BMD、β-Catenin mRNA、LRP5 mRNA及Runx2 mRNA等在RES诱导后的OVX组中表达显著增高（P<0.01）;GSK-3β mRNA表达显著减少（P<0.05）。结论: 白藜芦醇可显著提高去卵巢骨质疏松大鼠的BMD值,其机制与上调Wnt/β-Catenin信号通路相关。     

雌激素对卒中后抑郁大鼠血清单胺类递质的影响

目的 探讨雌激素对卒中后抑郁(PSD) 大鼠的血清单胺类递质的影响。方法 选用雌性SD大鼠, 经Open-Field 行为学评分后随机分成对照组、卒中组、PSD 组、药物治疗组和雌激素干预组,所有大鼠均行卵巢切除术。对照组为常规饲养;卒中组去卵巢后7 d 采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型;PSD 组为卒中大鼠结合孤养、束缚应激制备PSD 大鼠模型;药物治疗组对PSD 大鼠模型行帕罗西汀灌胃治疗;雌激素干预组对PSD 大鼠模型皮下包埋雌激素释放管。观察雌激素对PSD 大鼠自发性行为和外周血去甲肾上腺素(NE) 和5-羟色胺(5-HT) 的影响。结果 与对照组比较, PSD 组大鼠旷场实验水平和垂直得分明显减少, 外周血NE 和5-HT 浓度明显降低, 差异有统计学意义(P <0.05)。与PSD 组比较, 雌激素干预组大鼠旷场实验得分增加, 外周血5-HT 和NE 浓度明显升高, 差异有统计学意义(P <0.05)。与药物治疗组相较, 雌激素干预组大鼠旷场实验得分、外周血5-HT 浓度差异无统计学意义(P >0.05)。结论 雌激素能够改善PSD 大鼠的行为学、增加血清5-HT 浓度, 提示对PSD 大鼠有脑保护作用。     

刺芒柄花素对去势骨质疏松大鼠P38MAPK/MMP-9信号通路的影响

目的:观察刺芒柄花素（formononetin,FOR）对大鼠去势骨质疏松的干预作用,探讨其防治骨质疏松的机制。方法:采用切除雌性大鼠双侧卵巢法复制骨质疏松大鼠模型,按随机对照分组原则将60只清洁级SD雌性大鼠分为对照组、骨质疏松模型组、雌二醇组(50 μg/kg)及刺芒柄花素高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg),每组10只,除对照组外,其他组于造模后一周给予雌二醇、刺芒柄花素治疗,每天1次,连续12周,末次给药后24 h,取大鼠血清检测酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）、Ca2+、Mg2+等指标变化;取大鼠左侧股骨采用RT-PCR检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、TNF-α、IL-6 mRNA表达;Western blot法检测骨组织总P38MAPK、磷酸化P38MAPK、MMP-9、TNF-α、IL-6蛋白表达;取右侧股骨进行骨密度(bone mineral density,BMD)测定。结果:与骨质疏松模型组比较,刺芒柄花素高、中剂量组可增加骨质疏松大鼠骨密度,降低骨质疏松大鼠血清中TRACP含量,升高血清 Mg2+、Ca2+含量,使骨组织MMP-9、TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达下调;磷酸化P38MAPK mRNA蛋白表达上调。结论:刺芒柄花素对去势骨质疏松大鼠有较好的防治作用,其机制可能与抑制骨组织MMP-9的合成和分泌、破骨细胞的骨吸收及调控P38MAPK/MMP-9 信号通路有关。