发酵虫草菌粉对DEN致大鼠肝损伤的保护作用及TGF-β1/Smads通路的影响

目的: 探讨发酵虫草菌粉（fermented cordyceps sinensis powder,CS）对二乙基亚硝胺（DEN）诱导大鼠肝损伤的保护作用及对TGF-β1/Smads通路的影响。方法: 无特定病原体（SPF级）健康雄性Sprague Dawley（SD）大鼠48只,体质量（180±20） g,随机分为4组：对照组、模型组、CS治疗组与CS溶媒组,每组12只。模型组：灌胃给予10 mg/kg DEN每周5次共8周,构建慢性肝损伤模型;对照组：灌胃给予与模型组相同体积的生理盐水;CS治疗组：在建模4周后灌胃给予80 mg/kg CS每周5次共8周;CS溶媒组：灌胃给予与CS组相同体积的5%甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液。实验结束后,麻醉,脊椎脱臼法处死大鼠,收集血液,紫外分光光度法检测各组大鼠血清中AST、ALT以反映肝功能;H&E染色观察肝组织形态变化,Masson染色观察胶原沉积情况;改良Nycodenz法分离各组大鼠原代肝星状细胞（HSC）,RT-qPCR检测肝组织与HSC中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子（TGF）-β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达水平;Western blot检测肝组织Smad3与Smad7蛋白表达水平。结果: 与对照组相比,模型组大鼠血清中AST、ALT含量显著升高,H&E染色结果显示肝脏组织形态显著改变,Masson染色结果显示胶原沉积增多;与模型组相比,CS治疗四周能显著降低肝损伤大鼠血清中升高的AST、ALT水平,改善其肝脏病理损伤程度,减少肝脏中胶原沉积。RT-qPCR结果显示,CS可减少肝损伤大鼠组织及HSC中α-SMA、TGF-β1 mRNA表达水平,增加Smad7 mRNA表达水平;CS溶媒组各项检测指标均与模型组无差异;此外,Western blot结果显示,CS可下调肝损伤大鼠肝组织Smad3蛋白的表达,上调Smad7。结论: CS可显著改善DEN诱导的大鼠肝损伤,该作用可能与CS上调Smad7,并抑制TGF-β1/Smads通路有关。     

甘草提取物对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察甘草提取物对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞（CFs）纤维化干预作用。方法：10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型。用甘草提取物处理纤维化细胞,MTT法检测不同浓度甘草提取物对细胞增殖的影响;CCK-8检测TGF-β1诱导后,甘草提取物对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光检测平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;Western blot检测TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白及p-Smad2、p-Smad3蛋白表达水平;RT-PCR检测Smad2、Smad3、Smad4 mRNA表达水平。结果：各浓度甘草提取物处理细胞后细胞活性与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。甘草提取物各浓度组细胞增殖率显著低于TGF-β1组（P<0.05）;100 μg/mL甘草提取物对α-SMA、TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平显著低于TGF-β1组（P<0.05）。 结论：甘草提取物对TGF-β1诱导的心肌纤维细胞纤维化的发生发展具有一定改善作用,其作用机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

当归红芪超滤物对miR-21-5P靶向调控TGF-β1介导放射性心肌纤维化的干预效应

目的：揭示miR-21-5P靶向调控TGF-β1是介导心肌成纤维细胞活化的关键机制,明确当归红芪超滤物对miR-21-5P靶向调控TGF-β1机制的干预效应。方法：（1）将细胞随机分为正常组、辐照组,辐照组接受6Gry单次照射,后采用RT-PCR检测miR-21-5P,Western Blot检测α-SMA、TGF-β1的表达;（2）细胞随机分为正常组、辐照组、miR-21-5PNC+辐照组、miR-21-5Pinhibitor+辐照组,后采用RT-PCR检测miR-21-5P,Western Blot检测TGF-β1、Smad3、Smad7的表达,免疫荧光染色检测MMP-9、TIMP1表达,EDU染色检测细胞凋亡;（3）将细胞随机分为正常组、辐照组、RAS-RH+辐照组,后采用RT-PCR检测miR-21-5P,Western Blot 检测TGF-β1、Smad3、Smad7的表达,免疫荧光染色检测MMP-9、TIMP1表达,EDU染色检测细胞增殖。结果：（1）辐照组miR-21-5P、α-SMA、TGF-β1的表达明显高于正常组（P<0.01）,表明X线辐射可诱导心肌成纤维细胞活化,同时miR-21-5P、TGF-β1与心肌纤维化的发生密切相关;（2）miR-21-5Pinhibitor+辐照组中miR-21-5P、TGF-β1、Smad3、TIMP1表达明显低于辐照组、miR-21-5PNC+辐照组,MMP-9、Smad7表达明显高于辐照组,EDU染色阳性率降低、细胞数目减少,表明miR-21-5P靶向调控TGF-β1是介导心肌纤维化的关键机制;（3）RAS-RH+辐照组miR-21-5P、α-SMA、TGF-β1、Smad3、TIMP1表达明显低于辐照组,MMP-9、Smad7表达明显高于辐照组,EDU染色阳性率、细胞数目略有降低,表明RAS-RH可通过抑制miR-21-5P靶向调控TGF-β1机制干预放射性心肌纤维化的发生。结论：RAS-RH可通过抑制miR-21-5P靶向调控TGF-β1的机制干预心肌纤维化的发生。     

二甲双胍对TGF-β1诱导的大鼠肺泡上皮II型细胞间质转分化的影响

目的：观察二甲双胍（metformin, Met）对大鼠肺泡上皮II型细胞（rat alveolar epithelial type II cells, RLE-6TN）间质转分化（endothelial-mesenchymal transition, EMT）的影响及其可能的机制。方法：实验分为6组：Control组;转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1, TGF-β1）组：细胞用TGF-β1（5 ng/mL）处理48 h;TGF-β1+Met（1、10、100 μmol/L）组：细胞先用Met（1、10、100 μmol/L）预处理1 h,再用TGF-β1（5 ng/mL）处理48 h;Met（100 μmol/L）组：细胞用Met（100 μmol/L）处理48 h。CCK-8法检测细胞增殖。RT-PCR检测细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）、波形蛋白（vimentin）、E钙粘附蛋白（E-Cadherin）、紧密连接蛋白-1（zonulaoccludens, ZO-1）、I型胶原（collagen I）、III型胶原（collagen III）的mRNA表达。Western blotting检测α-SMA、vimentin、E-Cadherin、ZO-1、collagen I、collagen III的蛋白表达及Smad2/3和细胞外调节蛋白激酶1/2（extracellular regulated protein kinases 1/2, ERK1/2）的蛋白磷酸化水平。结果： 与TGF-β1组比,二甲双胍（10、100 μmol/L）可显著抑制TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞增殖（P<0.05或P<0.01）,降低α-SMA、vimentin、collagen I、collagen III的mRNA和蛋白表达及Smad2/3和ERK1/2的蛋白磷酸化水平（P<0.05或P<0.01）,增加E-cadherin和ZO-1的mRNA和蛋白表达（P<0.05或P<0.01）。结论：二甲双胍（10、100 μmol/L）对TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞EMT具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制Smad2/3和ERK1/2的磷酸化有关。     

夏枯草总三萜对乙醛刺激的肝星状细胞作用及部分机制

目的: 探讨夏枯草总三萜(TTP)对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)-T6增殖、凋亡的影响及部分作用机制。方法: 用不同浓度的TTP(10、30、100、300、1000 μg/mL)对乙醛刺激的HSC-T6进行处理,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR法检测HSC-T6中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型前胶原(ProcollagenⅠ)、TGF-β信号转导通路下游中介分子Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达。结果: TTP可抑制乙醛刺激的大鼠HSC-T6增殖,诱导其凋亡,下调HSC-T6中α-SMA、ProcollagenⅠ、Smad2、Smad3的mRNA表达,上调Smad7的mRNA表达。结论: TTP对乙醛刺激的HSC-T6增殖具有抑制作用,并能够促进其凋亡,下调α-SMA、ProcollagenⅠ表达量,其机制可能与TTP能抑制Smad2、Smad3表达,升高Smad7的表达,从而对TGF-β/Smad信号通路发挥调控作用有关。     

NADPH氧化酶NOX4抑制剂调节肝癌相关成纤维细胞的形成和机制研究

目的：研究NADPH氧化酶（NOX4）抑制剂GLX351322抑制肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）形成的作用和机制。方法：小鼠成纤维细胞NIH3T3和肝癌H22共培养,5 μmol/L（IC50）的GLX351322进行NIH3T3预处理。CCK-8法检测成纤维细胞的活力,PI染色后流式细胞术检测细胞周期的改变,免疫荧光染色检测CAFs标志物α-SMA和FAP的表达,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测CAFs标志物α-SMA、Desmin、FAP、TSP-1、FSP、CyclinD的表达水平以及TGF-β1、Smad1的表达。H22构建荷瘤小鼠模型后,GLX351322处理,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中α-SMA的表达情况以及CAFs标志物的表达水平。结果：GLX351322预处理后可以抑制NIH3T3的增殖,细胞活力下调,周期改变。同时可以下调CAFs标志物α-SMA、Desmin、FAP、TSP-1、FSP、CyclinD的表达,且TGF-β信号受到抑制。而在荷瘤小鼠模型中,GLX351322也可以显著抑制α-SMA的表达以及CAFs标志物的表达水平。结论：NOX4抑制剂GLX351322可以抑制肿瘤相关成纤维细胞的形成,其作用和TGF-β信号抑制有关。     

低分子肝素钠对小鼠实验性肝纤维化干预作用的初步研究

目的:探讨低分子肝素钠（LMWH）对四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化的干预作用。方法:将30只KM小鼠随机均分为空白对照组（腹腔注射橄榄油8周,n=10）、模型对照组（CCl4腹腔注射8周,n=10）和LMWH治疗组（CCl4腹腔注射+LMWH皮下注射8周,n=10）。8周后处死所有小鼠,收集血清及肝组织样本。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）和透明质酸（HA）水平;行HE染色、Masson三色染色和PSR染色观察肝组织病理形态及胶原纤维沉积情况;免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达量;实时聚合酶链反应（RT-PCR）检测小鼠肝组织中纤维相关因子α-SMA和Ⅰ型胶原（COL-Ⅰ）mRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,8周后模型对照组和LMWH治疗组小鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL和HA水平明显升高,肝组织胶原纤维沉积增多,肝组织α-SMA表达增多,α-SMA 和COL-ⅠmRNA表达水平显著升高（均P＜0.05）。与模型对照组比较,8周后LMWH治疗组小鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL和HA水平降低,肝组织胶原纤维沉积减少,肝组织α-SMA表达减少,肝组织α-SMA 和COL-ⅠmRNA表达降低（均P＜0.05）。结论:LMWH可抑制CCl4诱导的小鼠肝脏损害及纤维化,其机制可能与LMWH的抗凝作用有关。     

疏肝健脾方调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的：基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法：采用四氯化碳（CCl4）与橄榄油混合液背部皮下注射的方法，复制化学性肝纤维化小鼠模型。造模首日，灌胃给予疏肝健脾方，每天1次，连续12周；HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度，透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况；RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况。结果：病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊，肝细胞索排列紊乱，胶原沉积增加，焦亡小体数量明显增加，肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高。与模型组相比，疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度，抑制细胞焦亡，显著下调α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平。 结论：疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴，减少细胞焦亡，抑制肝星状细胞活化有关。     

联用芝麻素和维生素E抑制PI3K/AKT信号通路改善自发性高血压大鼠的左室纤维化

目的：观察芝麻素（Ses）和维生素E（VitE）联用对自发性高血压大鼠（SHRs）左心室纤维化的影响,并探讨其可能机制。方法：14周龄雄性SHRs随机分为Ses和VitE联用组（160+10 mg·kg-1·d-1、Ses组（160 mg·kg-1·d-1）、VitE组（10 mg·kg-1·d-1）及SHRs组,另设正常对照WKY组,每组7只,1次/d持续灌胃给药10周。采用尾袖法测定大鼠给药前和给药10周后的收缩压。末次给药后取左心室,计算脏器指数,Masson染色观察胶原沉积,分析心肌胶原容积分数（CVF）,Western blot 观察Ⅰ型胶原（collagenⅠ）、Ⅲ型胶原（collagen Ⅲ）、转化生长因子β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、蛋白激酶B（AKT）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）蛋白的表达。结果：SHRs+Ses+VitE组的收缩压、HW/BW、LVW/HW、CVF明显下降,且下降幅度分别高于SHRs+Ses和SHRs+VitE组（P<0.01或P<0.05）。SHRs+Ses+VitE组的collagenⅠ、collagen Ⅲ、TGF-β1、CTGF、MMP-9、TIMP-1、p-AKT和PI3K蛋白表达明显下降,且下降幅度分别高于SHRs+Ses和SHRs+VitE组（P<0.01或P<0.05）。 结论：联用芝麻素和维生素E通过抑制AKT/PI3K信号通路的激活,减少TGF-β1、CTGF、MMP-9及TIMP-1表达,从而发挥降压和改善左心室纤维化的作用。     

中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸（果王素）在大鼠放射性肺损伤中的防治作用及其机制探索

目的：观察中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸（果王素）在大鼠放射性肺损伤中的防治作用,并通过检测肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、髓过氧化物酶（MPO）和转化生长因子-β1（TGF-β1）探讨其机制。方法：将90只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、果王素组（60、120、240 mg/kg）,每组18只。除空白组外,其余组大鼠予以6MV-X线全胸部放射（3Gy/次,2次/周,总剂量18Gy）构建放射性肺损伤大鼠模型,各果王素组在放射前一周分别按60、120、240 mg/kg果王素剂量加入0.9%氯化钠1 mL每日灌胃1次,空白组、模型组在同一时间予以0.9%氯化钠1 mL灌胃1次。各组分别于放射后14 d、28 d、56 d随机处死动物6只,取肺组织行HE染色、Masson染色观察病理学改变,并检测肺组织SOD、GSH-Px、MPO含量及TGF-β1的表达。结果：与模型组相比,60、120、240 mg/kg果王素可显著减轻肺泡炎和放射性肺纤维化程度,降低肺组织羟脯氨酸（HYP）含量,增加抗氧化酶SOD、GSH-Px含量及减少氧化酶MPO含量,下调TGF-β1的表达,且剂量越高效果越明显。 结论：果王素对放射性肺损伤具有防治作用,其机制可能与减少氧化应激损伤、下调TGF-β1表达有关。     

糖肾方抑制TGF-β1/Smad3通路促进小鼠肾小管上皮细胞胆固醇流出

目的：利用高糖诱导的小鼠肾小管上皮细胞（mouse tubular epithelial cells, mTECs）观察中药糖肾方颗粒及Smad3抑制剂SIS3对于TGF-β1/Smad3通路及细胞胆固醇流出通路的影响。方法：25 mmol/L高糖诱导mTECs细胞后，分别给予糖肾方及Smad3抑制剂SIS3干预，利用ELISA试剂盒检测细胞中脂质含量，利用Western blot和Real-time PCR检测细胞中TGF-β1/Smad3通路及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator 1α, PGC-1α）、肝脏X受体（liver X receptor, LXR）、ATP-结合盒转运蛋白A1（ABCA1）、ATP-结合盒转运蛋白G1（ABCG1）的表达。结果：糖肾方可以降低高糖诱导mTECs细胞中总胆固醇（total cholesterol, TC）、甘油三酸酯（triglyceride, TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C）含量，上调高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C）含量（P<0.05）；糖肾方及Smad3抑制剂SIS3可下调高糖诱导mTECs细胞中TGF-β1、Smad3、Collagen Ⅰ和Fibronectin的表达，上调PGC-1α、LXR、ABCA1、ABCG1的表达（P<0.05）。 结论：糖肾方可通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路促进细胞胆固醇流出，减轻肾损害。     

中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠肾纤维化的改善作用及TGF-β1 /Smads信号通路的影响

目的: 观察中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠（SHR）肾损伤的改善作用,并探讨其可能存在的机制。方法: 14周龄雄性SHR大鼠随机分为SHR模型组（0.5%羧甲基纤维素钠,CMC-Na 5 mL/ kg）、玉夏胶囊高、中、低（0.6、0.3、0.15 g/kg）剂量组,每组7只。另设WKY（0.5%CMC-Na 5 mL/kg）正常对照组7只,每日灌胃给药一次,连续10周。于给药前及给药后每两周尾袖法测血压;末次给药后收集大鼠24 h尿液并检测尿微量白蛋白（U-mAlb）含量;腹主动脉取血测定血清β2-微球蛋白（β2-MG）、血浆及肾组织血管紧张素II(AngII)含量;HE及Masson染色观察肾脏病理组织学和胶原纤维变化;Western blot法测定肾组织TGF-β1、Smad4、Smad7蛋白含量及Smad2/3蛋白磷酸化水平表达。结果: 玉夏胶囊能明显降低SHR大鼠血压(P<0.05或P<0.01),降低U-mALb、血β2-MG含量、血浆及肾组织AngII水平(P<0.01),明显减轻肾脏病理组织损伤和胶原纤维沉积,上调肾组织Smad7蛋白表达,下调TGF-β1、Smad4蛋白表达及Smad2/3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论: 中药玉夏胶囊能有效改善SHR大鼠肾纤维化,在一定范围内呈剂量依赖性,其机制可能与降低血压,下调AngII水平,抑制过度激活的TGF-β1/Smads 信号通路有关。     

芝麻素减轻自发性高血压大鼠肾脏纤维化作用及其机制研究

目的: 探讨芝麻素减轻自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）肾脏纤维化作用与其可能存在的机制。方法: SHR雄性大鼠随机分成4组：模型组（SHR）,芝麻素低、高剂量组（80、160 mg/kg）及卡托普利组（30 mg/kg）。以同周龄雄性正常大鼠（Wistar Kyoto,WKY）为正常对照组,每日灌胃一次,12周后,检测肾功能血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）及尿微量白蛋白（U-mAlb）;测定肾脏超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量水平;HE、Masson染色观察肾组织胶原纤维等病理学变化;免疫组化法检测转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性细胞表达;Western blot法检测TGF-β₁、α-SMA、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及基质金属蛋白酶的组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达。结果: 芝麻素明显降低SHR大鼠血压,减轻肾间质纤维化,减少肾小球系膜区及肾小管胶原沉积;显著降低肾脏SCr、BUN、U-mAlb及MDA含量,提高SOD水平;明显降低TGF-β₁、α-SMA阳性细胞表达水平,下调TGF-β₁、α-SMA、MMP-9和TIMP-1蛋白表达,升高MMP-9/TIMP-1比值（P<0.05,P<0.01）。结论: 芝麻素减轻自发性高血压大鼠肾脏纤维化作用与其降压和抗氧化应激反应,抑制TGF-β₁、α-SMA过度表达,下调TIMP-1表达,上调MMP-9/TIMP-1有关。     

芪藤消浊颗粒介导miR-339-5p对慢性肾小球肾炎大鼠炎症指标的影响

目的：探讨芪藤消浊颗粒通过miR-339-5p对慢性肾小球肾炎（chronic glomerulonephritis, CGN）大鼠炎症指标的影响。方法：大鼠尾静脉注射阿霉素制备CGN模型，用芪藤消浊颗粒（21.6、10.8、5.4 g/kg）连续灌胃30 d，通过HE染色和电镜观察CGN大鼠肾脏组织中的病理变化情况，qRT-PCR、ELISA、Western blot检测大鼠血清及肾脏组织中的IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的含量，Western blot检测miR-339-5p、Syk、p-Syk蛋白相对表达量，qRT-PCR检测miR-339-5p mRNA及Syk mRNA的相对表达量。结果：模型组大鼠出现基底膜增厚，肾小球萎缩等病变，与正常组相比，模型组大鼠的miR-339-5p和IL-10表达明显下调，IL-1β、IL-6、TNF-α、Syk的表达显著上调，芪藤消浊颗粒组可显著降低肾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、Syk的蛋白及mRNA的表达水平。 结论：芪藤消浊颗粒治疗CGN大鼠的炎症症状可能是通过miR-339-5p下调炎症因子的表达水平。     

孟鲁司特对大鼠肠缺血再灌注继发肝损伤的保护作用研究

目的: 探讨孟鲁司特对Wistar大鼠肠缺血再灌注(intestinal ischemia reperfusion,I/R)继发肝损伤的影响及机制。方法: 30只大鼠随机分成3组：对照组、模型组和孟鲁司特组,复制大鼠肠缺血再灌注动物模型,孟鲁司特组术前1 h经胃灌注孟鲁司特（2 mg/kg体质量）,对照组和模型组灌注同等剂量生理盐水。再灌注3 h后处死大鼠,测定各组血清丙胺酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平,观察各组肝脏病理改变和评分,检测大鼠肝组织半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)蛋白和mRNA表达水平,检测肝细胞凋亡水平。结果: 与对照组相比,模型组ALT和AST均显著升高（P＜0.01）,模型组肝组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平升高（P＜0.05）,肝组织细胞凋亡指数明显升高（P＜0.05）,肝脏病理损伤明显（P＜0.05）;与模型组相比,孟鲁司特组ALT和AST均降低（P＜0.05）;肝组织病理损伤减轻（P＜0.05）,肝细胞凋亡指数降低（P＜0.05）,肝组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低（P＜0.05）;肝组织CysLTR1蛋白的表达水平与肝组织病理损伤和肝细胞凋亡指数呈正相关。结论: 孟鲁司特可以明显减轻肠I/R继发肝损伤,其机制可能与抑制CysLTR1介导的炎症反应和肝细胞凋亡有关。     

复方黄栌口服液对大鼠肝匀浆及肝组织的影响

目的：观察复方黄栌口服液对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤模型肝匀浆中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（Hyp）、超氧化物歧化酶（SOD）水平及肝组织的影响。方法：取雌雄各半的SD大鼠72只,随机分为空白组,模型组,护肝宁片组（0.675 g/kg）,大、中、小剂量复方黄栌口服液组（15、10、5 mL/kg）。采用腹腔注射50%四氯化碳橄榄油溶液1 mL/kg制备大鼠慢性肝损伤模型,2次/周,连续8周,同时第5周开始灌胃相对应的药物。末次给药24 h后,大鼠经水合氯醛腹腔注射麻醉后,经下腔静脉采血,检测肝匀浆中AST、ALT、MDA、Hyp、SOD含量,同时取少量肝组织,观察组织病理学变化。结果：大鼠慢性肝损伤模型造模成功。与模型组相比,大、中、小剂量复方黄栌口服液组和护肝宁片组均可显著降低肝匀浆中ALT、AST、MDA水平（P＜0.01）,均可显著升高肝匀浆中SOD水平（P＜0.01）,均可显著降低肝匀浆中Hyp水平（P＜0.01）,均可显著改善模型大鼠肝脏区病理损伤（P＜0.01）。结论：复方黄栌口服液对四氯化碳所致的大鼠慢性肝损伤具有较好的保护作用。     

复肾功方对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的: 研究复肾功方对慢性肾功能衰竭（chronic renal failure, CRF）大鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,探讨其减轻肾间质纤维化的作用机制。方法: 将55只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余四组大鼠食用含 0.5% 腺嘌呤饲料制造慢性肾功能衰竭模型,连续造模 21 d。造模成功后,所有大鼠改用常规饲料。正常组和模型组按 20 mL/kg 灌胃生理盐水,复肾功方低、中、高剂量组分别以4、8、16 g 生药/kg体质量灌胃复肾功方,1日1次,连续 30 d。实验结束后,检测各组大鼠血清血肌酐(Scr)和尿素氮（BUN）水平,Masson染色检测肾间质纤维化程度,免疫组化和Western blot 法检测α SMA蛋白的表达。结果: 与正常组比较,模型组大鼠Scr和BUN水平及肾组织α-SMA表达明显升高(P<0.05),肾间质出现明显纤维化病变。经复肾功方治疗后,各剂量组大鼠Scr和BUN水平及肾组织α-SMA表达明显降低。结论: 复肾功方能显著改善CRF大鼠肾纤维化病变,其机制可能与降低肾组织α-SMA表达有关。     

细胞焦亡介导慢性间歇缺氧大鼠肾脏损伤及依达拉奉的干预作用

目的：探究依达拉奉对慢性间歇缺氧导致大鼠肾脏损伤的保护作用及其对Caspase-1介导的细胞焦亡信号通路的影响。方法：24只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照（NC）组、间歇缺氧（IH）组、间歇缺氧+生理盐水（IH+NS）组、间歇缺氧+依达拉奉（IH+EDA）组,每组6只。将4组大鼠放置在密闭式饲养舱内造模,NC组舱内氧气浓度维持在21%左右,IH组、IH+NS组、IH+EDA组定时输入纯氧气、纯氮气、压缩空气,使舱内形成缺氧-复氧循环（60 s低氧期+60 s复氧期）,低氧期舱内氧浓度降至6%～7%,每日造模8 h（10∶00-18∶00）,同时IH+EDA组大鼠每天造模前按照5 mg/kg剂量标准予以腹腔注射依达拉奉,IH+NS组大鼠按照同等剂量标准腹腔注射生理盐水。造模8周后采集大鼠血液标本及肾脏组织标本,测定各组大鼠血肌酐（Crea）、尿素（Urea）水平;HE、Masson染色后光镜下观察肾脏病理形态变化、纤维化程度;化学法测定丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力;免疫组织化学染色法测定肾组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平;Western blot法测定肾组织Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平;RT-PCR法测定消皮素D（gasdermin D, GSDMD）、IL-18 mRNA扩增水平。结果：间歇缺氧暴露后,大鼠血清Crea、Urea明显升高（P<0.01）,肾小管发生病理损害、肾单位球囊间隙出现胶原纤维沉积,MDA含量增加、SOD活力降低（P<0.01）,Caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白表达增加（P<0.01或P<0.05）、GSDMD mRNA、IL-18 mRNA扩增增加（P<0.01）;而经过依达拉奉干预后,上述指标呈现出与间歇低氧暴露后相反的变化趋势,肾脏病理损害减轻（P<0.01或P<0.05）。 结论：慢性间歇缺氧可能通过氧化应激活化Caspase-1参与的细胞焦亡信号通路介导肾脏损伤过程,而依达拉奉可能通过清除氧自由基、下调机体氧化应激水平,抑制焦亡通路的活化,起到保护肾脏的作用。     

miR-29a/HMGB1信号通路在高糖高脂诱导的心肌细胞纤维化中的作用

目的：探究miR-29a/HMGB1信号通路在高糖高脂（hyperglycemia and hyperlipidemia, HGHL）诱导的H9C2细胞纤维化过程中的作用。方法：使用含葡萄糖（33 mmol/L）和棕榈酸酯（500 μmol/L）的DMEM培养基干预H9C2细胞24 h用于后续实验。共有8个实验分组,分别为NC组、HGHL组、miR-NC组、mimics组、inhibitor组、pc-HMGB1组、si-HMGB1组和miR-29a mimics+pc-HMGB1组。流式细胞术检测各组H9C2细胞的凋亡率。Western blot实验检测各组H9C2细胞内转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（PPARγ）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的表达量。RT-qPCR检测各组细胞中miR-29a以及TGF-β1、CTGF、MMP-9、PPARγ、HMGB1 mRNA的表达水平。划痕实验检测各组H9C2细胞的迁移能力。结果：HGHL干预后,H9C2细胞的凋亡率显著增加（P<0.05）,细胞迁移能力显著增强（P<0.05）,细胞内TGF-β1、CTGF和MMP-9 mRNA表达水平显著增加（P<0.05）,PPARγ mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）,相应蛋白的表达量也随mRNA的变化发生改变（P<0.05）,此外H9C2细胞内miR-29a的表达水平也显著降低（P<0.05）。转染miR-29a mimics后,H9C2细胞因HGHL干预引起的凋亡率增加受到显著抑制（P<0.05）,细胞的迁移能力也受到显著抑制（P<0.05）,细胞内TGF-β1、CTGF和MMP-9蛋白表达量和mRNA表达水平相较于HGHL组显著降低（P<0.05）,PPARγ蛋白表达量和mRNA表达水平显著增加（P<0.05）。转染miR-29a inhibitor后促进了HGHL诱导的H9C2细胞纤维化过程。miR-29a负调控HMGB1蛋白及其mRNA在H9C2细胞内的表达,双荧光素酶报告基因实验结果显示HMGB1是miR-29a的下游靶基因。转染si-HMGB1与转染miR-29a mimics对HGHL诱导的H9C2细胞纤维化作用类似。同时转染miR-29a mimics与pc-HMGB1对HGHL诱导的H9C2心肌细胞纤维化无显著影响。 结论：HGHL干预后显著增加H9C2细胞的凋亡率,增强其迁移能力和纤维化的过程。同时HGHL干预显著下调miR-29a在细胞内的表达水平,miR-29a通过负调控HMGB1在细胞内的表达进而影响HGHL诱导的H9C2细胞纤维化。     

右美托咪定对脓毒症大鼠肾功能及血清炎症因子的影响

目的：探讨右美托咪定（Dex）对脓毒症大鼠肾功能及血清炎症因子的影响。方法：选取60只雄性SD大鼠为实验对象,采用随机数字法将其分为空白组、模型组以及Dex组（n=20）,空白组不采取任何措施,模型组及Dex组采用静脉注射脂多糖制备脓毒症大鼠模型。随后Dex组泵注右美托咪定注射液7 μg·kg-1·h-1,15 min后剂量降低至5 μg·kg-1·h-1,持续泵注30 min,模型组泵注等体积生理盐水。术后12 h、24 h、48 h,每组各取6只大鼠,取腹腔静脉血,应用比色法测定三组血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平,免疫酶联吸附实验（ELISA）测定三组血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平。取血后处死大鼠,取右侧肾脏,采用HE染色观察肾组织病理改变情况。结果：术后12 h、24 h、48 h,模型组、Dex组血清Scr、BUN水平均高于空白组（P<0.05）,Dex组低于模型组（P<0.05）;术后12 h、24 h、48 h,空白组Scr、BUN水平差异无统计学意义（P>0.05）,模型组及Dex组Scr、BUN水平依次增加（P<0.05）。术后12 h、24 h、48 h,模型组、Dex组血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均高于空白组（P<0.05）,Dex组低于模型组（P<0.05）;术后12 h、24 h、48 h,空白组血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平差异无统计学意义（P>0.05）,模型组及Dex组血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平依次增加（P<0.05）。术后12 h、24 h、48 h,HE染色病理切片显示,空白组未见肾脏组织异常改变,模型组与Dex组可见病理改变,且随着时间增加逐渐加重,Dex组各时间点病理改变均较模型组减轻。结论：右美托咪定保护脓毒症大鼠肾功能的作用可能与下调血清炎症因子表达水平有关。