骨髓间充质干细胞在肾衰竭治疗方面的研究进展

肾衰竭(kidney failure,KF)是临床常见肾脏疾病,常由肾毒性物质或肾脏严重缺血等因素引起,根据其发病时程,可进一步分为急性肾衰竭(acute kidney failure,AKF)和慢性肾衰竭(chronic kidney failure,CKF)。近年来,随着各项医疗技术的发展,许多疾病均得到了有效控制,但是,KF这种疾病尚未得到有效治疗,相关的死亡率也未得到明显改善,其发病率甚至有逐年增高的趋势。目前,相关研究表明,骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)对KF具有一定的治疗作用。本文就近年来BMSCs在KF治疗方面的研究进展作一综述。     

骨髓间充质干细胞对电离辐射诱发的小鼠胸腺瘤的抑制作用

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对电离辐射诱发的小鼠胸腺瘤的抑制作用。方法采用经典Kaplan法复制电离辐射诱发的小鼠胸腺瘤模型。应用全骨髓贴壁法分离培养C57BL/6小鼠MSCs,DAPI标记,经尾静脉注入荷瘤小鼠后,分别于1、5、10d处死小鼠,取胸腺组织,激光共聚焦显微镜下观察MSCs在胸腺瘤组织中的定位;第1次全身大剂量照射后6个月取胸腺组织,HE染色观察胸腺组织的病理变化,并判断成瘤情况。结果激光共聚焦显微镜下观察可见,MSCs经尾静脉输注后可迁徙至小鼠胸腺组织内;病理观察显示,胸腺组织皮髓质结构清楚,淋巴样肿瘤细胞较少,细胞形态、大小不一,偶见核分裂象;MSCs输注使辐射诱导的胸腺瘤成瘤率由57.00%±9.78%降低至37.50%±7.55%。结论已成功建立辐射诱发的小鼠胸腺瘤模型;输注的MSCs可迁徙至胸腺组织中,并降低胸腺瘤的成瘤率。     

雌激素受体信号通路与骨质疏松症相关性的研究进展

骨质疏松症是一种由于骨量减少和骨组织结构疏松导致骨脆性增加,且易发生骨折的全身性疾病。该病主要与闭经、生活方式、营养、各种激素代谢异常及遗传等因素有关。女性体内有多个部位含雌激素受体(estrogen receptor,ER),ER包括ERα和ERβ两种亚型,可与雌激素结合形成复合物二聚体,激活多种下游信号级联反应,对成骨细胞的骨形成过程和破骨细胞的骨吸收过程发挥重要调节作用,从而影响成骨分化能力。本文主要对ER信号通路与骨质疏松症相关性作一综述。     

骨髓间充质干细胞对大鼠胰腺损伤组织的修复作用

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠胰腺损伤组织的修复作用。方法应用贴壁法分离、纯化、扩增大鼠MSCs,经流式细胞仪检测其细胞周期及表面标志后,用DAPI标记,经尾静脉注入胰腺损伤模型大鼠体内,15d后,在激光共聚焦显微镜下观察MSCs在大鼠胰腺组织的定位,组织病理切片观察胰腺损伤组织的病理改变,PCR检测胰腺损伤区组织的Sry基因。结果体外纯化、扩增、富集的MSCs经流式细胞仪检测,86.67%的细胞处于G0/G1期,细胞表面CD34呈阴性表达,CD44呈阳性表达。DAPI标记的MSCs移植治疗15d后,激光共聚焦显微镜下可见,MSCs在损伤的胰腺组织中多见,在正常胰腺组织中偶见;组织病理切片可见损伤的胰腺组织结构开始恢复,胰岛再建;PCR结果显示,治疗组胰腺组织可扩增出Sry基因。结论MSCs对大鼠胰腺损伤组织可能具有修复作用。     

去上皮羊膜及其浸提液体外诱导骨髓间充质干细胞的分化

目的观察去上皮羊膜及其浸提液体外诱导骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向上皮细胞的分化,并探讨其机制。方法从胎儿四肢长骨分离BMSCs,扩增后采用流式细胞术分析第3代(P3)细胞表面抗原(CD29、CD34、CD71和HLA-DR)的表达,并用4,6-乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)标记第4代BMSCs(P4-BMSCs)。机械法去除正常胎盘羊膜上皮,制成去上皮羊膜,并制备去上皮羊膜浸提液。将DAPI标记的BMSCs接种于羊膜上,设加或不加表皮细胞生长因子(Epidermal growth factor,EGF)、类胰岛素1号生长因子(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)、羊膜浸提液诱导组及细胞爬片对照组,体外诱导培养后,采用免疫荧光组织(细胞)化学染色学法检测各组细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)、EGF-R和IGF-1-R的表达,并于诱导后第10天计算CK阳性细胞率。结果原代BMSCs呈典型旋涡状生长,P3细胞表达CD29和CD71,不表达CD34和HLA-DR。羊膜组和细胞爬片组BMSCs在加入EGF或IGF-1诱导后,表达EGF-R和IGF-1-R的时间较未加生长因子的对照组提前2～4 d,表达CK的时间提前2～6 d,单用羊膜组或羊膜浸提液组的表达时间差异无统计学意义(P>0.05);诱导第10天,单用羊膜或羊膜浸提液诱导组的CK阳性细胞表达率明显高于细胞爬片对照组(P<0.05);羊膜与EGF、IGF-1联合诱导组高于单用羊膜组(P<0.05);EGF诱导组高于IGF-1诱导组(P<0.05)。结论羊膜及羊膜浸提液、外源性EGF和IGF-1在体外均可诱导BMSCs向上皮细胞分化,羊膜可能主要通过其所含的细胞因子诱导BMSCs向上皮分化。     

昆明小鼠骨髓体外培养及生长情况的探讨

通过对昆明小鼠骨髓间充质干细胞(Mscs)的体外培养,观察细胞在一个周期内的生长情况,并绘制细胞的生长曲线,以研究其生长周期特点.方法:体外分离、纯化并培养昆明小鼠Mscs及细胞计数和细胞生长曲线的绘制.结果:昆明小鼠Mscs的培养生长曲线显示,Mscs在体外培养条件下生长经历了生长缓滞期、对数增生期和生长平稳期.结论:骨髓间充质干细胞具有高度的自我更新和多相分化潜能,具有独特的细胞增生分裂模式,使外源基因易于导入和表达,而使其成为潜在的基因治疗靶细胞,是细胞治疗的基础.     

人参皂苷对骨髓间充质干细胞分泌干细胞因子的影响

目的探讨人参皂苷对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)分泌干细胞因子的影响。方法通过密度梯度离心法从健康志愿者抗凝骨髓中分离、培养BMSC,传代3代后,采用流式细胞术鉴定其细胞表型;MTT法检测不同浓度人参皂苷(50、100、150、200、300、400 mg/ml)作用不同时间(24、48、72、96 h)对BMSC增殖活性的影响;ELISA检测200 mg/ml人参皂甙作用不同时间(24、48、72 h)对BMSC分泌干细胞因子SCF-1和干细胞衍生因子SDF-1α水平的影响;RT-PCR法检测200 mg/ml人参皂甙作用24 h对BMSCSCF-1和SDF-1αmRNA转录水平的影响。结果第3代BMSC的CD44、CD29和CD105表达阳性,而CD34、CD45和HLA-DR表达阴性,BMSC的纯度为90%;BMSC与不同浓度的人参皂苷共培养不同时间,细胞的增殖活性均明显增强(P<0.05),200 mg/ml人参皂苷作用96 h细胞的增殖活性最高(P<0.05),但无明显的时间和剂量依赖性;人参皂苷对BMSC SCF-1和SDF-1α的分泌及mRNA的转录具有明显的促进作用。结论人参皂苷能增强BMSC分泌干细胞因子,有望应用于辅助干细胞治疗。     

大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养与鉴定

目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离培养及鉴定的方法 ,为MSCs的系列研究奠定基础。方法采用全骨髓直接贴壁筛选法分离培养MSCs并传代,倒置相差显微镜下观察细胞形态,以MTT法检测细胞增殖水平并绘制生长曲线。取第3代MSCs,流式细胞术检测细胞周期和细胞表型,应用成骨细胞诱导液和脂肪样细胞诱导液诱导MSCs定向分化,鉴定其分化能力。结果全骨髓细胞培养5d,镜下可见贴壁细胞增殖明显,细胞形态较均一,大部分呈梭形,7d左右可传代,经2～3次传代后细胞呈单一梭形的成纤维样细胞,即MSCs;细胞生长曲线呈S形;经流式细胞仪检测,MSCs细胞76.01%处于G0/G1期,7.13%处于G2/M期,16.86%处于S期;MSCs表面不表达CD34;在特定诱导液作用下,MSCs可分别向成骨样细胞及脂肪样细胞分化。结论已成功建立了分离培养及鉴定MSCs的方法 ,可用来评价体外培养的MSCs。     

骨髓间充质干细胞对胰腺损伤模型大鼠血清生化指标的影响

目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对胰腺损伤模型大鼠血清生化指标的影响。方法胰腺结扎建立大鼠胰腺损伤模型;体外分离纯化及培养大鼠的MSCs,流式细胞术检测细胞周期及细胞表面标志,经尾静脉回输治疗胰腺损伤,逐日观察,并于回输后24h、48h、7d和15d,分别采血,分离血清,检测血淀粉酶与脂肪酶含量。结果分离纯化的MSCs细胞周期中,86.67%处于G0/G1期,表达MSCs表面标志CD44,不表达造血干细胞表面标志CD34。治疗组在回输MSCs15d后,肉眼可见坏死的胰腺组织外观基本恢复正常,24h、48h和7d,血清淀粉酶含量均低于模型组,且差异有统计学意义,在15d时接近于模型组,差异无统计学意义;在24h、48h、7d和15d时,治疗组血清中脂肪酶含量均低于模型组,且差异有统计学意义;24h、48h、7d和15d,治疗组血清中血淀粉酶和脂肪酶含量仍高于正常对照组,且差异有统计学意义。结论骨髓间充质干细胞对胰腺组织损伤的模型大鼠具有治疗作用。     

基于杜仲的全生物炼制研究进展

介绍了杜仲资源的有效成分及其生物炼制的现状,重点从多级多组分分离技术和生物定向转化技术在杜仲全生物炼制的应用进行归纳和分析,并对杜仲全生物炼制的发展趋势进行了展望.     

杜仲活性成分的提取及分离纯化方法研究进展

总结了近年来杜仲活性成分的提取和分离纯化方法,对每种方法的优缺点和适用范围进行了小结;以开发杜仲活性成分为目的,提出了提取和分离纯化杜仲活性成分的几点建议。     

杜仲胶的基础与应用研究进展

杜仲胶（EUG）是从杜仲植物组织中提取的一种天然材料,是我国特有的天然高分子材料。EUG的主要成分为反式-1,4-聚异戊二烯,分子主链含有双键,EUG可进行交联与化学改性,同时因具有良好的结晶能力和独特的橡塑二重性,EUG在航空航天、国防、医疗、交通、体育和建筑等领域具有广阔的发展前景。本文介绍基于EUG的结晶特性,EUG在共混材料、自修复材料、阻尼材料、液体橡胶材料、涂料、形状记忆材料、电磁屏蔽材料、吸声材料等中的应用及其研究进展,指出EUG在新材料领域的发展方向。     

杜仲皮不同萃取部位抗氧化活性研究

以Vc为阳性对照,对杜仲皮的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物清除羟自由基(·OH)及1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(·DPPH)活性进行研究。结果表明,杜仲皮不同溶剂萃取物均有一定的抗氧化活性。     

张家界不同产地杜仲叶/皮中矿质元素含量的测定及比较

采用火焰原子吸收分光光度法测定了张家界不同产地杜仲叶及皮中Fe、zn、Cu、Mn、Mg、K、Ca等7种矿质元素的含量,结果表明杜仲叶及皮中各种矿质元素含量丰富,各元素含量的高低趋势在杜仲叶中大致为：Mg〉K〉Ca〉Zn〉Fe〉Mn≥Cu,在杜仲皮中大致为：Mg〉Ca〉K〉Fe〉Zn〉Mn≥Cu。K—S检验可以看出杜仲叶及皮中各矿质元素含量均服从正态分布,LSD检验可以得出张家界不同产地杜仲叶中Fe、Mn、Mg及杜仲皮中Fe、Mn、K元素的含量存在差异性显著。这一结果可以为不同产地杜仲叶／皮的药理活性及其品质的差异提供一定的理论依据。     

杜仲叶提取液除杂与脱色研究

以杜仲叶提取液中绿原酸含量为考察对象,对杜仲叶提取液进行了壳聚糖絮凝除杂及活性炭脱色研究.实验表明:在壳聚糖含量为0.04%、60℃下絮凝30 min,静置1 h可较好地去除杂质.向100 mL杜仲叶提取液中加入1 g活性炭,在pH值为3、60℃下脱色30 min,脱色效果较好.     

天然杜仲胶的改性及应用研究进展

杜仲胶（EUG）主要由反式聚异戊二烯组成,是一种具有良好生物相容性、橡塑二重性和优异力学性能的天然高分子材料。近年来,EUG在新型生物基材料领域备受瞩目。EUG在室温下结晶度高,表现为刚性塑料状态,极大程度限制了其在功能材料领域的应用。因此,将EUG进行物理或化学改性,进而拓宽其应用范围已成为近年来的研究热点。本文详细介绍了EUG分子链结构特点,随后从物理改性和化学改性两个方面系统论述了EUG常见的改性方法及机理,如通过与其它材料共混或环氧化改性、硫化改性等改变EUG的硬度及弹性。对EUG在绿色轮胎与公路建设、形状记忆与自修复材料、减震与吸声材料、医用材料、生物降解复合材料等新型功能材料领域的最新研究进展进行了综述,并在此基础上展望了EUG在生物基高性能材料领域的发展前景。     

An oligodeoxynucleotide that induces differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells to osteoblasts in vitro and reduces alveolar bone loss in rats with periodontitis

To investigate the effect of oligodeoxynucleotides (ODNs) on the differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) to osteoblasts, in order to find a candidate ODN with potential for the treatment of periodontitis, a series of ODNs were designed and selected to test their effect on the promotion of the differentiation of BMSCs to osteoblasts in vitro and on the repair of periodontal tissue in rats with periodontitis. It was found that MT01, one of the ODNs with the sequences of human mitochondrial DNA, stimulated the proliferation of BMSCs, the differentiation of BMSCs to osteoblasts and mRNA expression of bone-associated factors including Runx2, Osterix, OPG, RANKL and collagen I in vitro. In vivo study showed that MT01 prevented the loss of alveolar bone in the rats with periodontitis and induced the production of proteins of OPG and Osterix in the bone tissue. These results indicated that MT01 could induce differentiation of BMSCs to osteoblasts and inhibit the alveolar bone absorption in rats with periodontitis.     

The Influence of Strontium on Bone Tissue Metabolism and Its Application in Osteoporosis Treatment

Osteoporosis is a chronic disease characterized by low bone mass caused by increased bone turnover and impaired bone microarchitecture. In treatment, we use antiresorptive or anabolic drugs, which usually have a unidirectional effect, i.e., they inhibit the activity of osteoclasts or stimulate the effect of osteoblasts. Strontium ranelate is an anti-osteoporosis drug with a unique mechanism of action (used primarily in postmenopausal women). Unlike other medicines, it has a multidirectional effect on bone tissue, intensifying osteoblastogenesis while inhibiting osteoclastogenesis. It turns out that this effect is demonstrated by strontium ions, an element showing physical and chemical similarity to calcium, the basic element that builds the mineral fraction of bone. As a result, strontium acts through the calcium-sensing receptor (CaSR) receptor in bone tissue cells. In recent years, there has been a significant increase in interest in the introduction of strontium ions in place of calcium ions in ceramics used as bone replacement materials for the treatment of bone fractures and defects caused by osteoporosis. The aim of this study was to summarize current knowledge about the role of strontium in the treatment of osteoporosis, its effects (in various forms), and the ways in which it is administered.     

The Role of Marrow Microenvironment in the Growth and Development of Malignant Plasma Cells in Multiple Myeloma

The development and effectiveness of novel therapies in multiple myeloma have been established in large clinical trials. However, multiple myeloma remains an incurable malignancy despite significant therapeutic advances. Accumulating data have elucidated our understanding of the genetic background of the malignant plasma cells along with the role of the bone marrow microenvironment. Currently, the interaction among myeloma cells and the components of the microenvironment are considered crucial in multiple myeloma pathogenesis. Adhesion molecules, cytokines and the extracellular matrix play a critical role in the interplay among genetically transformed clonal plasma cells and stromal cells, leading to the proliferation, progression and survival of myeloma cells. In this review, we provide an overview of the multifaceted role of the bone marrow microenvironment in the growth and development of malignant plasma cells in multiple myeloma.     

Cu~(2+)、Zn~(2+)和Pb~(2+)对绿原酸与牛血清白蛋白结合作用的影响

以杜仲绿原酸(CA)为原料,在模拟人体生理条件下,采用荧光光谱和紫外吸收光谱等方法,考察Cu2+、Zn2+和Pb2+对CA与牛血清白蛋白(BSA)相互作用产生的影响。结果表明,金属离子的存在不会改变CA对BSA的猝灭类型,但对其猝灭速率常数(kq)、结合常数(K)以及结合位点(n)会有不同程度的影响;CA与BSA之间的反应属于自发型,主要以范德华力和氢键为主,Zn2+和Pb2+的存在不会改变其作用力类型,Cu2+则会使作用力变为以静电吸引力为主;Zn2+和Pb2+会将供体与受体之间的结合距离分别减小1.975%和14.07%,Cu2+的干扰使CA与BSA之间的结合距离增大11.58%;同步荧光光谱显示CA与BSA中的酪氨酸残基和色氨酸残基都有相互作用,三维荧光测定结果进一步表明猝灭剂对BSA构象及微环境会引起变化。