儿茶酚氧化酶活力的测定

儿茶酚氧化酶又称酪氨酸酶、多酚氧化酶、苯酚酶、甲酚酶。可见它并不具有特殊的专一性。由于在研究该酶的时候首先使用酪氨酸为底物,所以第一个普通名就是酪氨酸酶,在国际酶学委员会的酶分类与命名方案中推荐名为儿茶酚氧化酶,系统命名为回1．2-苯二酚:氧化还原酶,编号为1、10、3、1,表明该酶属六大类酶中的第一类(氧化还原酶),第     

儿茶酚氧化酶的酶学特性

(一) 前言 儿茶酚氧化酶又称为酪氨酸酶、多酚氧化酶、苯酚酶、甲酚酶。可见它并不具有特殊的专一性,由于在研究该酶时首先使用酪氨酸为底物,所以第一个普通名就是酪氨酸酶,在国际酶学委员会的酶分类与命名方案中,推存名为儿茶酚氧化酶,编号EC 1·10·3·1,表明该酶属于六大类酶中的第一大类(氧化还原酶),第十亚类(以二     

沙棘生物活性肽的制备及功效研究

以沙棘粕为原料,制备生物活性肽;以多肽提取率为响应值,通过正交试验,研究最佳的酶解工艺;并探讨酶解液多肽粗提物的抗氧化及酪氨酸酶抑制率.结果表明:沙棘粕酶解制备多肽的最优条件为加酶量3%、液料比15:1(V:m)、酶解反应时间1 h;5 mg/Ml粗提物对DPPH清除率为68%,酪氨酸酶抑制率为76%.     

碳水化合物酶协同发酵对脱脂薏米水提取液营养品质的影响

本文以脱脂薏米为原料,研究了木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶和葡聚糖酶协同干酪乳杆菌发酵对脱脂薏米水提取液pH、可滴定酸（TTA）、游离氨基酸、多肽、多酚、抗氧化活性以及酪氨酸酶和黄嘌呤氧化酶抑制活性的影响。结果显示,与单独发酵相比,碳水化合物酶协同发酵后脱脂薏米水提取液的游离氨基酸和多肽含量显著增加（P<0.05）。协同发酵后水提取液总酚含量达到88.75-102.91 μg GAE/mL,较单独发酵组增加了8.03%-25.27%（P<0.05）。抗氧化实验显示,协同发酵较单独发酵显著增强了水提取液的FRAP和ABTS+·清除能力（P<0.05）。此外,协同发酵可显著提高水提取液的酪氨酸酶和黄嘌呤氧化酶抑制活性（P<0.05）。综合比较,葡聚糖酶较其它三种酶更有利于提高水提取液的营养品质,该研究可为脱脂薏米水提取液的开发利用提供理论参考。     

酶型时间-温度指示剂在食品包装中的应用及研究进展

酶型时间温度指示剂(TTI)具有性能稳定、成本低廉、易于控制等优点,在监测供应链中易腐食品的质量变化起着重要作用。本文对酶型TTI的最新研究进行综述,基于脂肪酶、淀粉酶、虫漆酶、脲酶、酪氨酸酶和其他酶,论述了液态酶型TTI的制备原理、优缺点及其在食品包装中的应用现状和存在的问题;基于脂肪酶、淀粉酶和酪氨酸酶,阐述了固定化酶技术在固态酶型TTI中的应用,以及使用新型载体材料对固态酶型TTI进行改进的方法。本文旨在为酶型TTI在食品包装中的应用提供理论基础和实验参考。     

黑木耳酪氨酸酶的分离纯化与酶学性质研究

本文分离纯化了黑木耳酪氨酸酶,并对酶学性质进行了研究。采用经硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100和DEAE-Sepharose-FF柱层析对粗酶液进行分离纯化,得到电泳纯的黑木耳酪氨酸酶,比活力提高了21.43倍,酶活回收率为27.41%。该酶的酶学性质研究表明:蛋白亚基分子量为12.62ku;最适pH7.0,在中性和碱性条件下稳定;最适温度为40℃,50℃以下温度条件较为稳定;以酪氨酸为底物,米氏常数K m为5.88mmol/L,V max为64.10μmol/min。实验结果表明黑木耳酪氨酸酶具有其它酪氨酸酶相似的酶学特性。      

异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制机理

异鼠李素是沙棘果实和美白类中草药白蒺藜、白鲜皮的主要黄酮类活性成分,具有广泛的药理活性。酪氨酸酶是人体细胞产生黑色素和果蔬褐变的关键酶。本文研究了异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力的抑制机理。以L-多巴为底物,测定异鼠李素对酪氨酸酶二酚酶活性的IC50、抑制类型和抑制常数。抑制类型由Lineweaver-Burk双倒数作图法来判断,并计算相应的抑制常数(KI和KIS)。实验结果显示,异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力抑制效果显著,IC50为25μmol/L,是混合型可逆抑制,抑制常数KI为20.1μmol/L,KIS为108.6 mol/L。总之,异鼠李素对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活力有很好的抑制作用,是值得进一步研究的美白类候选药物和防止果蔬褐变的食品添加剂。     

产品开发指南

防褐变优香果汁的制法 制造果汁时需将生水果切断、破碎,破坏其组织,此时由于氧化酶(多元酚氧化酶、酪氨酸酶)与多元酚类作用,产生酶促褐变,有损香味、美观和新鲜口味。 以往采取添加维生素C等的防褐变剂方法存     

基于蛋白质交联的氧化酶特性与应用

蛋白质交联属于蛋白质改性修饰的一部分,是重组食品与新型食品制造的重要内容。与化学交联、物理交联相比,酶法交联因其反应条件温和、不产生副产物、交联效果好等特点,成为最为容易接受的一种蛋白质交联方式。除谷氨酰胺转胺酶外,一些氧化酶也被证明能够在蛋白质分子间形成共价键而形成交联。介绍了目前应用较多的酚氧化酶(酪氨酸酶、漆酶)、过氧化物酶以及赖氨酰氧化酶的酶学性质、交联机制等,并对其在食品蛋白质交联中研究现状以及潜在应用进行总结与展望。     

琯溪蜜柚疏果黄酮酶法辅助提取工艺优化及其抑制酪氨酸酶活性

本论文旨在探讨β-葡萄糖苷酶法辅助提取琯溪蜜柚疏果黄酮的工艺及提取得到的黄酮对酪氨酸酶抑制作用。以总黄酮提取量为指标,采用单因素实验及响应面试验对β-葡萄糖苷酶酶活力、酶解pH、温度及时间进行优化,并研究总黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,通过单因素实验和响应面试验优化得到琯溪蜜柚疏果黄酮提取的最优条件是：β-葡萄糖苷酶酶活力0.0128 U/mL、酶解pH4.4、酶解温度35℃、酶解时间4.8 h,在该工艺条件下疏果总黄酮提取量为34.0 mg/g;该黄酮提取物对酪氨酸酶的半抑制浓度(IC₅₀)为0.31 mg/mL。本研究结果说明酶法工艺可显著提高琯溪蜜柚疏果黄酮的提取量,且琯溪蜜柚疏果黄酮具有较强的酪氨酸酶抑制作用,研究结果为琯溪蜜柚疏果黄酮提取及应用提供了参考依据,有利于促进琯溪蜜柚的高值化利用。     

利巴韦林抗酪氨酸酶活性及其在贡梨中的保鲜应用

酪氨酸酶是果蔬褐变和黑色素生物合成过程中的关键酶,酪氨酸酶抑制剂在果蔬保鲜和医药领域具有重要意义。该文首次研究了利巴韦林的抗酪氨酸酶活性、机制及其对贡梨鲜切梨块和梨汁的保鲜效果。酶动力学实验的结果表明,利巴韦林是高效、可逆、竞争型的酪氨酸酶抑制剂,其IC₅₀为(0.3±0.05)mmol/L。荧光淬灭和非辐射能量转移实验的结果表明,利巴韦林可静态淬灭酪氨酸酶的内源荧光,且通过1个结合位点与酪氨酸酶形成“利巴韦林-酶”复合物并导致酶的构象发生改变,这一过程伴随着非辐射能量转移。分子对接的结果表明,利巴韦林可以嵌入到酪氨酸酶的活性口袋并与其B链上的6个氨基酸残基(Lys379、Gln356、Gln307、Asp312、Val313、Asn310)形成氢键。贡梨保鲜实验表明,利巴韦林可以有效减少鲜切梨块的失重率和降低梨汁的褐变度。该研究结果为开发新型的果蔬保鲜剂提供了理论依据和实践基础。     

白藜芦醇对酪氨酸酶体外抑制活性的动力学研究

在30℃,pH 6.8的Na2HPO4-NaH2PO4的缓冲体系中,采用酶促动力学方法,研究了白藜芦醇对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制作用。结果表明,白藜芦醇对酪氨酸酶、单酚酶和二酚酶均有抑制作用,对单酚酶抑制活性的IC50值(抑制率达到50%时的白藜芦醇质量浓度)约为5.1mg/mL,对二酚酶抑制活性的IC50值约为5.6 mg/mL。此外,白藜芦醇可延长单酚酶的迟滞效应,8 mg/mL的白藜芦醇能使迟滞时间从22 s延长至62 s,而对二酚酶则无此迟滞作用。Lineweav-er-Burk图分析表明,白藜芦醇对酪氨酸酶的抑制作用为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为3.4 mg/mL和35.98 mg/mL。     

多酚氧化酶的固定化及其酶学性质研究

游离多酚氧化酶在使用过程中容易流失,无法重复利用。文章主要研究了低成本、高效率的两种固定化方法:海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法,确定了其最优固定化条件,分别为海藻酸钠包埋法:2.5%CaCl₂,2.5%海藻酸钠,固定化时间2h;戊二醛交联法:1.25%戊二醛,振荡固定pH 4.5,酶与载体质量比75(mg/g),固定化反应时间6.5h。同时对游离多酚氧化酶及固定化多酚氧化酶的酶学性质进行了研究。结果表明:游离酶、海藻酸钠包埋法固定多酚氧化酶(polyphenol oxidase immobilized by sodium alginate,A-PPO)和戊二醛交联法固定多酚氧化酶(polyphenol oxidase immobilized by glutaraldehyde crosslinking,C-PPO)的比活力分别为864,490,371U/mg,A-PPO和C-PPO的酶活回收率分别为18.6%和24.0%。同时,固定化酶在pH稳定性、热稳定性上优于游离酶,戊二醛交联法固定酶的效果优于海藻酸钠包埋法。     

毛霉生长条件与儿茶酚氧化酶活力的消长

一、前言豆腐坯接种毛霉,保温培养后,加盐及酒浸泡数月,在这期间毛霉中的蛋白质水解酶系将豆腐中蛋白质水解为可溶性蛋白质、简单肽类及氨基酸,并经复杂的生化反应形成各种香气,即成为豆腐乳。豆腐乳离开汁液后便逐渐变黑,这是由于毛霉中的儿茶酚氧化酶在游离氧分子的存在下催化各种酚类氧化成醌,再经聚合成为黑色素所致。儿茶酚氧化酶又称酪氨酸酶、多酚氧化酶、苯糠酶、甲酚酶,可见它并不具有特殊的专一性,由于在研究该     

肉桂腈抑制酪氨酸酶活性的动力学研究

在30℃、pH6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了肉桂腈对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学。实验结果表明,肉桂腈对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用,对单酚酶和二酚酶活力的相对抑制率达到50%的肉桂腈浓度(IC50)分别为0.13mmol/L和0.62mmol/L。肉桂腈能延长单酚酶的迟滞时间,0.2mmol/L肉桂腈能使迟滞时间由2min延长至2.7min。Lineweaver-Burk图显示肉桂腈对二酚酶的抑制作用表现为非竞争性可逆抑制,表观米氏常数(Km)为0.90mmol/L,抑制常数(KI)为0.64mmol/L。     

2种食品添加剂对酪氨酸酶的抑制作用

通过酶动力学研究探索2种食品添加剂(没食子酸丙酯和L-抗坏血酸棕榈酸酯)对酪氨酸酶的抑制作用,并借助分子对接技术探究二者与酪氨酸酶间的结合方式。结果表明:没食子酸丙酯对酪氨酸酶是可逆混合型抑制,其IC50=(18.036±0.823)mmol/L;L-抗坏血酸棕榈酸酯为可逆反竞争性抑制,其IC50=(2.806±0.082)mmol/L。分子对接结果表明,2种食品添加剂与酪氨酸酶间主要以氢键、范德华力相互作用。本试验拓展了酪氨酸酶抑制剂的研究方向,并为食品添加剂在酶抑制剂领域的应用提供参考。     

大豆多酚氧化酶、过氧化酶的酶学特性研究

对大豆氧化还原酶系中的多酚氧化酶和过氧化物酶的酶学特性进行了较深入系统地研究,其中包括酶活力、酶热稳定性、pH值的影响,以及大豆卵磷脂、二巯基丙醇对酶活力的抑制作用。结果表明多酚氧化酶在120℃时,酶活力值已达到不可逆失活状态,pH6－7时酶活力最大当二巯基内醇的浓度为1．5mmol／L时其酶活力降至6％以下。过氧化物酶具有较高的耐热性,酶活力最适的pH值为5．5左右,大豆卵磷酯浓度达到80mg／L时其酶活力可降至20％左右。     

影响荔枝果肉酶促褐变主要酶性质的比较研究

比较研究了在荔枝果肉酶促褐变过程中,多酚氧化酶和过氧化物两种酶的性质。在荔枝果肉中过氧化物酶的活性远远大于多酚氧化酶的活性。但是PPO的热稳定性高于POD的热稳定性,应以多酚氧化酶作为灭酶的指标;并且有化学抑制剂可以完全抑制过氧化物酶活性,但对多酚氧化酶却具有抑制暂时性。p H对多酚氧化酶和过氧化物酶的稳定性影响基本一致,在p H小于5的酸性条件下活性和稳定性下降,因而在酸性条件下,可有效抑制酶促褐变。     

烟草中多酚氧化酶的酶学特性研究

从新鲜的烟叶中提取多酚氧化酶,该酶在55℃时经过10分钟酶的活性就达到高峰,但持续的时间很短,热稳定性差;在40℃时经过20分钟酶的活性才达到高峰,但持续的时间较长,具有良好的热稳定性。烟草中的多酚氧化酶在 pH 值为6时,酶的活性最高:pH 值高于6或低于6,活性均下降。烟草中的多酚氧化酶与焦儿茶酚(二元酚)的结合力最强,三元酚次之,一元酚不作用。烟草中的多酚氧化酶是一种含酮的蛋白质,增加铜离子的浓度能增强多酚氧化酶的活性;EDTA、亚硫酸氢钠、硼酸、柠檬酸都是烟草多酚氧化酶的良好抑制剂。     

漆酶来源及绿色化学应用探析

漆酶又称其为酚酶、漆酚氧化酶等,属于一种多铜氧化酶。尽管漆酶的研究历史可以追溯至一百年前,但是在研究过程中一些新功能不断被挖掘出来。本文就针对漆酶的来源其及在绿色化学中的应用进行综述。