响应面法优化油菜籽粕中硫苷酶解工艺及其降解产物抑菌作用的初步研究

以油菜籽粕为原料,在单因素实验基础上,选取酶解缓冲液p H、酶解温度和酶解时间为自变量,以酶解产物异硫氰酸酯含量为响应值,利用Box-Behnken中心组合设计原理和响应面分析法,研究各自变量的交互作用对异硫氰酸酯含量的影响,建立异硫氰酸酯含量的二次回归方程,并通过抑菌圈实验,分析了异硫氰酸酯对哈密瓜采后两种常见病原菌的抑制作用。结果表明:酶解缓冲液p H3.70、酶解温度45℃、酶解时间96 min,在此最优条件下异硫氰酸酯含量为3.005%。抑菌实验表明,异硫氰酸酯对镰刀菌和链格孢菌有明显的抑制作用。     

水酶法提取番木瓜籽油工艺及其氧化稳定性分析

以番木瓜籽为原料,通过单因素试验和正交试验研究不同酶种类、酶解时间、料液比、酶添加量、酶解温度等因素对番木瓜籽油提取率的影响,确定番木瓜籽油提取的最佳工艺条件,并以番木瓜籽油过氧化值为评价指标,考察温度、光照、抗氧化剂对番木瓜籽油氧化稳定性的影响。结果表明,番木瓜籽油的最佳提取条件为：选用中性蛋白酶,酶添加量2.5%、酶解时间5 h、料液比1∶7、酶解温度45 ℃。在此条件下,番木瓜籽油的提取率为85.73%。温度、光照、氧气均会引起贮藏过程中番木瓜籽油过氧化值的升高。添加抗氧化剂可明显提高番木瓜籽油的氧化稳定性,其中叔丁基对苯二酚的抗氧化效果最好。     

番木瓜籽中硫代葡萄糖苷的超声辅助降解研究

超声波辅助番木瓜籽中硫代葡萄糖苷的降解试验中,在内源酶水解硫代葡萄糖苷的基础上进行超声波辅助。在单因素基础上,对超声时间、超声功率、超声温度3个因素进行优化。以异硫氰酸苄酯得率最高为优化目标,发现超声时间、超声功率、超声温度之间具有一定的交互效应。得到的最优超声时间16.17 min、超声功率60 W、超声温度38℃,异硫氰酸苄酯的得率为0.558%,此时硫代葡萄糖苷的酶解率为63.62%。     

7 种十字花科种子中黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫苷的产物比较分析

比较7 种十字花科植物种子中的黑芥子酶的活性,利用气相色谱-质谱法（gas chromatography-massspectrometry,GC-MS）分别测定这7 种黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫代葡萄糖苷（简称硫苷）的产物组分和相对含量。结果表明：7 种来源的黑芥子酶比活力存在差异（P＜0.05）,比活力由高到低依次为西兰花籽黑芥子酶（broccoli seeds myrosinase,BSm）、油菜籽黑芥子酶（rape seeds myrosinase,RPSm）、白菜籽黑芥子酶（whitecabbage seeds myrosinase,WCSm）、萝卜籽黑芥子酶（radish seeds myrosinase,RDSm）、芥蓝籽黑芥子酶（kaleseeds myrosinase,KSm）、甘蓝籽黑芥子酶（cabbage seeds myrosinase,CSm）和芥菜籽黑芥子酶（mustard seedsmyrosinase,MSm）。GC-MS比较分析7 种黑芥子酶降解油菜籽饼粕中硫苷的产物发现,RPSm降解产物有6 种,即1-丁烯基-4-异硫氰酸酯、烯丙基异硫氰酸酯、2-苯乙基异硫氰酸酯、苯丙腈、致甲状腺肿素和2,1-苯并异恶唑。CSm降解产物中1-丁烯基-4-异硫氰酸酯含量最高（33.22%）,RPSm次之,含量为32.20%,而MSm降解产物中未检测到。WCSm、KSm、MSm和CSm降解产物中检测到新组分丁基异硫氰酸酯。与RPSm降解产物相比,其他6 种黑芥子酶降解产物中恶唑类及腈类物质种类增多,有4 种恶唑类和3 种腈类,但降解产物中未检测到2,1-苯并恶唑。不同来源的黑芥子酶在相同环境下降解油菜籽饼粕中的硫苷的产物种类和相对含量存在明显差异,虽RPSm活性低于BSm,但其降解产物中恶唑类及腈类种类最少,含量最低,是较好的降解油菜籽饼粕中硫苷的酶源。     

响应面分析法优化萝卜种子中硫代葡萄糖苷的酶解条件

为优化萝卜种子中硫代葡萄糖苷的酶解条件,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法建立硫苷酶解条件的二次多项数学模型,并验证其有效性;探讨酶解pH值和催化剂添加量2个因子的交互作用对萝卜种子中硫苷酶解产物--莱菔素得率的影响.结果表明,在酶解温度25℃,酶解时间8h,催化剂添加量0.0584mg/g,酶解pH 3.71时,响应面预测莱菔素的最大得率为3.5326 mg/g,而验证试验的莱菔素得率为3.5278 mg/g(均值),与响应面的预测值吻合.此结果比FFD的平均得率(3.437mg/g)提高了2.64%.     

响应面法优化水酶法提取番木瓜籽蛋白质工艺

以番木瓜籽为原料,以蛋白质提取率为指标,首先确定了最佳使用酶为木瓜蛋白酶,再通过单因素试验考察料液比、酶解时间、酶解温度、酶添加量和酶解pH等因素对蛋白质提取率的影响,在此基础上,利用Box-Behnken中心组合设计和分析法优化了水酶法提取番木瓜籽蛋白质的工艺条件。最终得出最佳工艺条件为:使用木瓜蛋白酶在料液比为1:19,酶添加量为2.0%,pH为7.0,温度为49℃,酶解时间为5 h,此时番木瓜籽蛋白质的提取率最高为84.96%。本研究结果可为番木瓜的综合开发高值化利用提供新的途径。     

响应面法优化西兰花种子中异硫氰酸酯的酶解制备工艺

本研究采用单因素和响应面分析法优化了西兰花种子中异硫氰酸酯（Isothiocyanates，ITCs）的酶解制备工艺，分别考察了酶与底物的质量比、酶解时间、酶解温度、pH及浸提料液比对ITCs提取率的影响，在单因素实验基础上，选取酶解时间、温度及pH进行响应面试验，并使用硫脲法和气相色谱-质谱法（Gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）进行检测分析。结果表明，ITCs的最佳酶解条件为:酶解时间3.95 h，酶解温度44.6 ℃，pH6.52，实验提取率达到8.36 mg/g，理论提取率为8.51 mg/g，相对误差为1.8%。气相色谱-质谱测得酶解主要产物包括4-（甲硫基）丁腈、1-异硫代氰酸丁酯、萝卜硫腈、噁唑烷硫酮以及萝卜硫素五种相关化合物，其中目标活性物质萝卜硫素的相对含量最高。综上，该提取工艺参数用于西兰花种子中ITCs的制备是可行的。     

响应面优化超声波辅助水酶法提取茶叶籽油工艺

利用响应面法(RSM)优化超声波辅助水酶法提取茶叶籽油工艺条件,在单因素试验基础上,选取复合酶用量、酶解pH、酶解温度、酶解时间为影响因子,茶叶籽油得率为响应值,应用Box-behnken中心组合试验设计建立数学模型,进行响应面分析。结果表明,超声波辅助水酶法提取茶叶籽油工艺优化条件为:高压蒸煮20min,超声处理20min,超声温度60℃,料液比1:5、复合酶用量1.75%,酶解pH4.6,酶解温度44℃,酶解时间6.9h。茶叶籽油得率为29.88%。     

西兰花籽中硫代葡萄糖苷酶解条件的研究

研究了时间、温度、pH、抗坏血酸的添加量对西兰花籽中硫代葡萄糖苷(简称硫苷)酶解的影响,确定了硫苷酶解的最佳条件酶解时间8 h,温度25℃,pH4,抗坏血酸的添加量0.02mg/g.并利用气相色谱/质谱联用技术分析了硫苷酶解产物,鉴定出7种化合物,占硫苷酶解产物中挥发性化合物总量的86.07%.发现硫苷酶解产物中最主要的挥发性化合物为萝卜硫素占42.23%,嚅唑烷硫酮占22.61%,萝卜硫素腈占11.00%.     

水酶法同时制备辣木籽油和水解蛋白的工艺研究

采用水酶法从辣木籽中同时制备辣木籽油及水解蛋白。以辣木籽油及水解蛋白的得率为指标,综合考察酶的种类、酶解时间、酶解温度、料液比、酶用量及pH对得率的影响。在单因素试验基础上,确定了酶品种为中性蛋白酶,料液比为1︰9(g/mL)后,然后以酶用量、酶解时间、酶解温度、pH为自变量,设计了四因素三水平的正交试验。结果表明,最佳工艺条件为:中性蛋白酶,料液比为1︰9(g/mL),酶用量为2.0%,酶解时间为4 h,酶解温度为45℃,pH为6。在此最佳条件下进行试验验证,平均综合评价分数为73.27,RSD=0.54%。工艺稳定可行。     

超声波-生物酶法提取锁阳多糖工艺优化及其抗肿瘤活性

为了获得较高的锁阳多糖得率,以河西锁阳为原料,采用超声波协同生物酶技术进行锁阳多糖提取工艺及活性的研究,选用单因素试验探索料液比、超声时间、超声功率及纤维素酶加酶量、酶解时间、酶解温度、pH值对锁阳多糖得率的影响,在单因素试验的基础上,采用正交试验对工艺条件进行优化,并采用四甲基噻唑蓝（methlthiazoletrazolium,MTT）法评价锁阳多糖对HeLa细胞的抗肿瘤活性。结果表明,锁阳多糖超声波-纤维素酶法提取最佳工艺为：料液比1∶10（g/mL）、超声功率300 W、酶解温度60 ℃、超声时间10 min、加酶量1.8%、酶解时间90 min、pH 5.5。最优条件下锁阳多糖得率达3.01%。MTT实验结果表明,提取多糖对HeLa细胞具有明显的抗肿瘤活性。     

120 ℃条件下模型体系烤牛肉风味的形成

以牛肉酶解液为底物,通过添加糖、氨基酸和硫胺素进行美拉德反应,研究烤牛肉风味形成的最佳酶解条件和添加物配比。通过正交试验确定牛肉最优酶解条件为：酶解温度50 ℃、酶解pH 6.5、m（风味蛋白酶）∶m（复合蛋白酶）=1∶1、加酶量质量分数8%、酶解时间50 min;析因试验确定美拉德反应模型体系最优配比为牛肉酶解液20 g、葡萄糖1.0 g、甘氨酸0.8 g、硫胺素0.3 g,120 ℃、pH 7.5条件下反应90 min。气相色谱-质谱法分析结果表明,该模型体系烤牛肉特征风味物质（2-甲基-3-呋喃硫醇、2-甲基四氢噻吩-3-酮、双（2-甲基-3-呋喃基）二硫）相对含量较高。感官评定表明,该模型体系褐变程度高,吸光度最高为0.263,且肉香纯正,烤牛肉风味浓郁。     

超声波辅助酶法提取甜玉米穗轴黄酮及抑菌性检测

以甜玉米穗轴为原料,利用超声波辅助纤维素酶法提取其中的黄酮类物质,考察纤维素酶作用的酶解时间、酶解温度、pH值以及酶用量对甜玉米穗轴中黄酮类物质提取效果的影响。结果表明：超声波辅助纤维素酶法提取黄酮类物质最佳工艺条件为：超声处理20 min后,酶解温度55 ℃、pH 4.8、纤维素酶用量0.008 g/2.0 g甜玉米穗轴、酶解时间1.5 h,此条件下甜玉米穗轴中黄酮类物质提取率0.318%。甜玉米穗轴中黄酮类物质对白葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有明显的抑制作用,最低抑菌质量浓度分别为0.5、0.25、2 mg/mL。     

复合酶法提取石榴籽多糖的工艺优化

探讨应用复合酶法提取石榴籽多糖的最佳工艺条件。以多糖得率为考察指标,在单因素试验基础上,通过D-最优混料试验设计优化复合酶配比,Box-Behnken试验设计优化得出影响因素的最佳参数水平,进而得出最佳工艺条件。结果显示：复合酶最优配比为果胶酶24.2%、纤维素酶67.2%、甘露聚糖酶8.6%;并以此参数为基础,得到复合酶法提取石榴籽多糖的最佳工艺条件为液固比20∶1（mL/g）、介质pH 4.5、酶解温度48.5 ℃、酶解时间287 min,在此条件下,石榴籽多糖得率为2.83%。     

响应面法优化松茸多糖酶法提取工艺及其体外抗氧化性分析

为确定复合酶（纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶）提取松茸多糖的最佳工艺,并对其体外抗氧化活性进行初步研究,在单因素试验的基础上,以料液比、pH值、酶解时间和酶解温度为影响因素,利用Box-Behnken方法进行四因素三水平试验设计,以多糖提取率为响应值,进行响应面分析;分别用邻苯三酚自氧化法和对DPPH自由基的清除作用测定松茸多糖的体外抗氧化性。结果表明：多糖提取的最佳工艺为料液比1∶40（g/mL）、pH 5、酶解温度35 ℃、酶解时间71 min,松茸多糖的提取率预测值为7.06%,验证值为6.95%,与预测值相对误差为1.56%;松茸多糖对超氧阴离子自由基和DPPH自由基具有较强的清除作用,其IC50值分别为0.565 mg/mL和0.454 mg/mL。因此,复合酶法提取松茸多糖高效、简单,可用作松茸多糖的提取工艺;松茸多糖具有明显的体外抗氧化活性。     

响应面试验优化桑葚汁复合酶解制备工艺及微滤技术对其品质的影响

以新鲜成熟桑葚果实为原料,桑葚出汁率为指标,通过单因素试验及响应面试验,确定果胶酶和纤维素酶酶解制备桑葚汁的最佳工艺参数,并进一步考察非热力杀菌微滤技术对桑葚汁杀菌、澄清、褐变抑制效果以及理化指标的影响。研究结果表明,适于实际生产的最佳酶解工艺为：果胶酶添加量0.42%、纤维素酶添加量1.84%、酶解时间101.26 min、酶解温度50 ℃、酶解pH 3.5～4.0（桑葚汁自然pH值）。在此条件下,桑葚出汁率为86.37%,与理论值88.10%接近。实验表明微滤技术对桑葚汁不仅有很好的抑菌效果,且对桑葚汁的褐变具有一定的抑制作用。     

超声波辅助复合酶提取菊糖工艺优化

以菊芋块茎为原料,采用超声波辅助复合酶酶解法进行菊糖提取工艺研究。首先通过单因素试验和Plackett-Burman筛选试验确定菊糖提取工艺中影响显著的3 个因素--超声温度、超声时间和加酶量,再利用Box-Behnken试验及响应面分析法优化最佳提取工艺条件。结果表明：最佳提取工艺条件为料液比1∶20（g/mL）、超声温度51 ℃、加酶量120 μg/g（m（果胶酶）∶m（纤维素酶）=1∶4）、超声时间25 min、pH 5.5,优化后菊糖得率为72.2%。     

响应面试验优化果胶酶辅助提取锁阳原花青素工艺

利用单因素试验和响应面法优化果胶酶辅助乙醇提取锁阳原花青素工艺。通过单因素试验筛选出酶解时间、pH值、酶解温度、乙醇体积分数作为影响因素,以锁阳原花青素提取得率为响应值进行Box-Behnken试验设计,建立锁阳原花青素提取得率的二次回归方程,得到最优提取条件。响应面法分析结果表明锁阳原花青素的最佳提取工艺参数为：在果胶酶质量分数为1%时,酶解时间34 min、pH 4.8、酶解温度52 ℃、用体积分数70%乙醇溶液浸提1.5 h。该条件下,锁阳原花青素提取率达14.30%。