四价流感病毒裂解疫苗中Triton X-100残留量高效液相色谱检测方法的建立、验证及与比浊法的对比

目的 建立四价流感病毒裂解疫苗中Triton X-100残留量高效液相色谱(high performance liquid chromatogra-phy,HPLC)检测方法,对方法进行验证,并与比浊法进行对比.方法 对HPLC法的流动相比例(水∶甲醇=30∶70、20∶80、10∶90)、流速(1.0、1.2、1.4...     

疫苗中甲醛残留量检测方法的研究进展

甲醛在疫苗生产中常作为灭活剂,但随疫苗注入机体后,会对机体产生一系列刺激性反应,因此需对疫苗中甲醛残留量进行严格控制。近几年随着科学技术的发展,疫苗中甲醛残留量检测方法也得到了改进。本文对近年来疫苗中甲醛残留量检测方法及其应用的研究进行了综述,涉及到的检测方法主要有乙酰丙酮法、品红亚硫酸法、变色酸法、酚试剂分光光度法、气相色谱法和液相色谱法,以期为今后的相关研究提供参考。     

TritonX-114残留量检测方法的建立及验证

目的建立测定生物制品中Triton X-114残留量的方法,并进行验证及初步应用。方法先对Triton X-114进行光谱扫描,用所得到的特异吸收峰来初步检测Triton X-114的残留量,再根据Triton X-114与苯酚发生反应并产生具有一定浊度的复合物,且浊度与Triton X-114的浓度成正比的原理,通过测定340 nm处吸光度值,建立测定Triton X-114残留量的方法,并对方法进行稳定性、准确性、精密性验证。考察核酸和蛋白对Triton X-114含量测定的影响,并分别采用紫外吸光法和建立的方法检测样品中的Triton X-114含量。结果 Triton X-114在280 nm左右有特异吸收峰,可通过测定280 nm处的吸光度值来初步测定Triton X-114的残留量;利用Triton X-114与苯酚发生反应后产物的A340值来测定Triton X-114含量的方法的线性范围为0.001%~0.007%,检测下限为0.001%;建立标准曲线后,每间隔5 min测定1次A340值,各浓度标准品A340值的变异系数(CV)均小于5%;低(0.001%)、中(0.003%)、高(0.006%)浓度Triton X-114溶液连续测定3次,每个浓度平行测定9组的CV值均<5%,回收率均>100%;核酸和蛋白对该方法测定Triton X-114的含量无影响;4份样品经两种方法检测的试验内CV值均<10%。结论可采用280 nm紫外吸收法初步测定Triton X-114的含量,但该法灵敏度低,易受干扰;而采用Triton X-114与苯酚反应后检测其产物浊度的方法来测定Triton X-114的残留量,稳定性、精密性良好,准确性高,可用于生物制品中Triton X-114残留量的检测。     

在聚乙二醇辛基苯基醚存在下,锌与5—Br—DMPAP显色反应的研究

研究了显色剂５－Ｂｒ－ＤＭＰＡＰ作为不度法测定Ｚｎ的新方法。在ｐＨ＝９．０缓冲溶液及非离子表活生剂聚乙二醇辛基苯基醚存在下,该试剂与Ｚｎ反庆生成稳定的紫红色配合物,其最大吸收波长为５５６ｎｍ,表观摩尔吸光系数为７．７２×１０＾４Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１,锌含量为０－１．２３×１０＾－５ｍｏｌ．Ｌ＾－１范围内服从比耳定律,该方法应用于人发,药品中锌的测定,结果令人满意。     

乙型肝炎疫苗中聚乙二醇6000残留量HPLC-蒸发光散射检测器检测方法的建立及其验证

目的建立测定乙型肝炎疫苗中残留聚乙二醇(PEG)6000含量的HPLC-蒸发光散射检测器(evaporative light scattering detector,ELSD)法,并进行验证。方法对ELSD条件进行优化后,按照色谱条件[色谱柱:TSK-GEL G2000-SWXL(5μm,125魡,7.8 mm×300 mm);流动相:0.025 mol/L醋酸铵溶液;流速:0.8 ml/min]上HPLC测定PEG6000标准溶液和样品中PEG6000含量,并考察该方法的线性、检出限、定量限、精密度、稳定性、回收率和适用性。结果优化后的ELSD条件为:雾化室温度40℃,漂移管温度70℃,气体流速1.20 L/min。PEG6000含量在21.6~216μg/ml范围内,该方法线性关系良好,r=0.999 5,最低检出限为2.16μg/ml,最低定量限为7.13μg/ml;PEG6000标准溶液连续检测6次,RSD为0.72%;样品溶液置不同时间检测结果的RSD2%;不同浓度PEG6000标准溶液检测结果的回收率在97.3%~107.7%之间;使用建立的方法所有样品均未检出PEG6000,样品中含有Tween-20不干扰PEG6000的测定,分离良好。结论该方法操作简便,灵敏度高,结果准确,适用于乙型肝炎疫苗中残留PEG6000的检测。     

光度法直接测定水溶液中微量汞的分析方法研究

在表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚TritonX-100和乙醇存在下,研究了双硫腙与水中Hg2 的显色反应,建立了简便、环保的水相中直接测定痕量Hg2 的分析方法——双硫腙水相光度法。在pH<2时该体系与水中Hg2 形成有色络合物,其λmax=495nm,在5～60μg/L范围内,吸光度与Hg2 含量成线性关系,相关系数为0.9995,摩尔吸光系数ε=4.7×104L/(mol.cm)。该方法的相对标准偏差和相对误差均小于双硫腙萃取光度法(国标法)。用活性炭粉末富集后检测下限可达1μg/L以下,铜离子有干扰。     

聚乙二醇苯基辛基醚对甲磺酸镀锡层织构的影响

通过X—射线衍射分析研究了表面活性剂聚乙二醇苯基辛基醚(OP)对甲磺酸体系锡镀层织构的影响。结果表明锡镀层的织构受溶液中OP的质量浓度和阴极电流密度的综合影响。在高OP质量浓度和低电流密度条件下,镀层以(211)和(321)晶面择优。在低OP质量浓度和高电流密度条件下,镀层以(101)和(112)晶面择优。     

两种高浓度静注人免疫球蛋白中IgA残留量检测方法的验证及比较

目的 对酶联免疫法与散射比浊法检测高浓度静注人免疫球蛋白(human immunoglobulin for intravenous inje-ction,IVIG)中IgA残留量进行验证及比较.方法 分别验证两种方法的线性范围、准确度、重复性、中间精密性、专属性,并对两种方法进行比对分析.用两种方法检测7批次高浓度IV...     

铁(Ⅲ)—苯芴酮—聚乙二醇辛基苯基醚显色反应的研究及应用

详细研究了非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚（OP）存在下铁（Ⅲ）与苯芴酮的显色反应。结果表明铁（Ⅲ）与苯芴酮形成了蓝紫色的配合物，其最大吸收波长λmax为614nm，对比度（△λ）为74nm，摩尔吸光系数ε614为6．41×104L·emol(-1)·cm(-1)，铁量在0～16μg／25mL范围内服从比耳定律。所拟方法用于磷矿样中铁的分析与邻菲罗啉法结果一致。     

电沉积条件对甲基磺酸锡镀层织构的影响

为了在实际应用中控制甲基磺酸电镀锡镀层的织构以提高镀层性能,采用X-射线衍射分析方法研究了镀锡工艺中表面活性剂浓度、电流密度和镀层厚度对镀锡层织构的影响规律,XRD分析结果显示,表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚(OP)浓度高,镀层以(211)和(321)晶面择优;OP浓度低,镀层以(101)和(112)晶面择优低电流密度有利于镀层以(211)和(312)晶面择优,高电流密度则有利于(101)和(112)晶面择优;镀层较薄时没有明显的晶面择优,(211)晶面的衍射峰强度随着镀层厚度的增加而加大,当镀层厚度超过10μm镀层以(211)和(321)晶面的衍射峰为主,且基本不随镀层厚度的增加而变化.由于晶态基底会影响镀锡层的织构和形貌,本甲基磺酸镀锡工艺以多晶紫铜化学镀非晶态镍磷合金为阴极,对非晶态基底上得到的锡镀层进行研究。     

生物制品中残留甲醛含量衍生-气相色谱检测方法的建立及初步应用

目的建立生物制品中残留甲醛含量衍生-气相色谱检测方法,并进行验证及初步应用。方法采用液体进样方式,毛细管色谱柱(SH-Rxi-5MS,30 m×0. 25 mm×0. 25μm)分离,FID检测器检测,外标法定量,测定样品中残留甲醛含量。进样前,对照品及样品使用2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenyl-hydrazine,2,4-DNPH)衍生处理,考察不同衍生条件(包括衍生时间、衍生温度和提取溶剂等)对甲醛衍生及提取效率的影响。色谱条件:初始温度为150℃,保持1 min;以20℃/min的速率升温至250℃,保持10 min;检测器温度为250℃,进样口温度为250℃,分流比为10∶1;载气为N2;进样量为1μL。对建立的方法进行重复性、准确性验证及初步应用。结果游离甲醛质量浓度在1～100μg/mL范围内时,浓度与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=3 789. 7 C-1 030. 2,相关系数为0. 999 8。用建立的方法重复检测甲醛标准液6次,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1. 73%;在百白破疫苗样品中加...     

中药材中农残检测方法探究

中药在人类疾病治疗与预防、健康与养生方面起着重要的作用,但野生的中药材资源逐渐枯竭,为保证其供给,大量人工种植的中药材出现在市场,给中药材中农残的检测带来了挑战与机遇。介绍了中药材中农残检测的一些方法,并提出了未来中药材中农残检测的相关观点。     

硫柳汞防腐剂在人用疫苗中的应用

硫柳汞是一种在疫苗等生物制品中广泛使用的防腐剂,自上世纪末开始,关于含硫柳汞疫苗的安全性问题一直存在争议。本文对人用疫苗中应用硫柳汞的安全性相关研究、权威机构的立场、去汞行动的措施及存在的问题作一综述。     

重组蛋白制品中大肠埃希菌宿主蛋白残留测定试剂盒的适用性验证

目的验证重组蛋白制品中大肠埃希菌宿主蛋白(host cell protein,HCP)残留检测试剂盒的适用性。方法对淄博云桥生物技术有限公司制备的大肠埃希菌HCP的ELISA检测试剂盒进行特异性、灵敏度、精密性、准确性验证,同时进行基质干扰试验和稀释回收试验。采用该试剂盒及一款市售进口试剂盒分别对本公司制备的3批重组碱性成纤维细胞生长因子(recombinant basic fibroblast growth factor,rbFGF)制品原液及纯化工艺中间样品的HCP残留量进行检测。结果试剂盒可特异性检测大肠埃希菌HCP残留量;线性范围为3.33~810 ng/ml;检测限和定量限均为3.33 ng/ml;试验内变异系数(CV)和试验间CV均16%;低、中、高3个浓度样品的回收率分别为113.1%、113.7%和97.5%;原液样品基质对测定基本无影响,原液基质中DTT含量5 mmol/L对测定结果的影响在可接受范围内;原液样品在测定HCP含量时存在干扰,稀释3倍时,干扰最小;该试剂盒与另一款市售试剂盒检测3批rbFGF制品原液及纯化工艺中间样品的HCP残留量基本一致。结论该试剂盒具有良好的特异性、灵敏度、准确性、精密度和线性,可用于本公司重组蛋白制品中大肠埃希菌HCP残留的检测。     

甲烷转化水碳比控制在ECS100P DCS的实现

针对甲烷转化中存在多股原料气且甲烷含量波动大的情况,分析了影响甲烷转化之水碳比的因素,设计水碳比比值控制方案时引入原料气中甲烷含量的分析信号,在ECS100P DCS中实现比值控制方案并应用于生产控制。     

ECS-100控制系统程序设计应用实例

利用ECS-100控制系统中的梯形图(LD)语言、顺控图(SFC)语言和ST语言,设计了AI信号三取中、红绿灯和四路抢答器3个实例程序,并给出了相应的分析与说明。     

Triton X-100在单菌落PCR技术中的优化作用

在利用单菌落PCR法直接筛选含有外源基因的重组质粒以及发生同源重组的重组子时,通过0.1%TritonX-100处理模板对PCR技术进行优化。以大肠杆菌DH5α、单核细胞增生李斯特菌的重组克隆为例,单菌落经Triton X-100处理后再进行PCR,琼脂糖凝胶电泳图谱的条带更清晰、杂带减少;克隆鉴定的阳性率明显提高,且在15μL的PCR反应混合液体系中的扩增效果更明显。对单核细胞增生李斯特菌的检测方法可以推广适用于多种革兰氏阳性菌。     

A novel preparation method for 5-aminosalicylic Acid loaded eudragit s100 nanoparticles

In this study, solution enhanced dispersion by supercritical fluids (SEDS) technique was applied for the preparation of 5-aminosalicylic acid (5-ASA) loaded Eudragit S100 (EU S100) nanoparticles. The effects of various process variables including pressure, temperature, 5-ASA concentration and solution flow rate on morphology, particle size, 5-ASA loading and entrapment efficiency of nanoparticles were investigated. Under the appropriate conditions, drug-loaded nanoparticles exhibited a spherical shape and small particle size with narrow particle size distribution. In addition, the nanoparticles prepared were characterized by X-ray diffraction, Differential scanning calorimetry and Fourier transform infrared spectroscopy analyses. The results showed that 5-ASA was imbedded into EU S100 in an amorphous state after SEDS processing and the SEDS process did not induce degradation of 5-ASA.     

100kt／a尿素熔融喷浆造粒复合肥装置运行中的问题和处理

介绍盘锦中润化工有限责任公司100kt/a尿基复合肥喷浆造粒装置工艺设计的基本情况(流程及主要设备规格),工艺特点;开车运行中出现的筛分、成球率低、冬季操作难度大等问题及解决措施.     

DNA聚合酶中宿主细胞核酸残留的分析

目的分析市售不同厂家DNA聚合酶中的宿主细胞核酸残留。方法根据E.coli 16S rRNA基因序列设计特异引物及探针,建立基于Taqman探针技术的Real-time PCR检测方法,检测基因工程制品中E.coli的核酸残留。结果建立的Real-time PCR法检测市售不同厂家的DNA聚合酶中均有宿主细胞E.coli核酸残留,但不同来源的DNA聚合酶其宿主细胞核酸残留量不同。结论应用PCR方法检测基因工程产品,尤其是E.coli制备的生物制品时,应注意DNA聚合酶中核酸残留对检测结果的影响;应用Real time PCR法定量检测时,建议将Ct值控制在30以内,以减小DNA聚合酶背景残留物的影响。