硒化乳酸菌胞外多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞分泌NO、IL-4及IL-12的影响

目的:研究硒化乳酸菌胞外多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞分泌NO,IL-4及IL-12的影响。方法:分离制备了小鼠脾淋巴细胞,用Griess法检测NO含量,双抗体夹心酶联免疫法检测IL-4和IL-12含量。结果:当多糖质量浓度为400μg/mL时,硒化EPS对ConA刺激的T淋巴细胞NO分泌量高于EPS。培养4 h后上清液中NO浓度显著升高,培养8 h达到最高。硒化EPS可抑制小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4,400μg/mL硒化EPS对于ConA刺激的小鼠T淋巴细胞IL-12生成量影响最为显著。结论:硒化EPS在一定程度上影响小鼠脾淋巴细胞免疫功能,这可能是其免疫调控机理之一。     

槐花多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响研究

研究槐花多糖对免疫低下小鼠的免疫功能的调节作用。采用腹腔注射环磷酰胺制造免疫抑制小鼠模型,考察槐花多糖对免疫抑制小鼠脏器指数、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞增殖活性、血清IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、TNF-γ水平、溶血素水平和溶血空斑形成数量的影响。结果表明槐花多糖能明显提高免疫抑制小鼠的胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬能力、脾淋巴细胞的增殖能力、溶血素含量和溶血空斑形成数量,促进细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、TNF-γ分泌。槐花多糖具有免疫增强活性,具有良好的开发应用潜力。     

卵转铁蛋白体外免疫活性研究

研究卵转铁蛋白(OVT)的体外免疫活性。分别采用中性红吞噬法测定卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;MTT法测定卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬和脾淋巴细胞增殖作用的影响;双抗体夹心ELISA法测定卵转铁蛋白对脾淋巴细胞IL-2分泌水平的影响。结果表明,OVT能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对中性红吞噬能力(P<0.01),协同LPS促进腹腔巨噬细胞的增殖(P<0.05),并显著改善由CsA引起的对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活性的抑制作用(P<0.05);OVT能显著促进脾淋巴细胞的增殖(P<0.01),协同LPS和ConA促进小鼠脾淋巴细胞的增值(P<0.05),并能显著促进小鼠正常脾淋巴细胞IL-2的分泌(P<0.01)。在体外培养的条件下,卵转铁蛋白对正常小鼠免疫细胞的免疫能力有促进作用。     

管花肉苁蓉苯乙醇苷的巨噬细胞激活作用及其与当归、黄芪在调节免疫方面的协同作用

目的:研究管花肉苁蓉苯乙醇苷对巨噬细胞的激活作用,并筛选获得一个复方,研究其对正常小鼠的增强免疫力作用。方法:通过巨噬细胞激活实验,考察管花肉苁蓉苯乙醇苷提取物对巨噬细胞RAW264.7吞噬活性和TNF-α、IL-6等分泌的影响;研究当归、黄芪提取物的配伍对苯乙醇苷提取物的巨噬细胞激活作用的影响;据此制备复方片剂,通过ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验、迟发型变态反应试验、抗体生成细胞检测、小鼠碳廓清试验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验,评价其对正常小鼠的免疫调节作用。结果:75、100、125 g/L苯乙醇苷提取物均能提高RAW264.7细胞吞噬活性,以及NO、iNOS、TNF-α、IL-6水平,其中以100 g/L苯乙醇苷提取物效果最佳(P<0.01);并且,当归、黄芪提取物对苯乙醇苷提取物的巨噬细胞激活功能具有极显著的促进作用(P<0.01);以此为依据制备的复方片剂,0.4、1.2 g/kg·bw/d组可显著促进淋巴细胞增殖(P<0.05)、1.2 g/kg·bw/d组可显著促进细胞免疫反应(P<0.05),0.4 g/kg·bw/d组可显著促进抗体生成(P<0.05),1.2 g/kg·bw/d组可显著提高小鼠碳廓清能力和巨噬细胞吞噬能力(P<0.05)。结论:苯乙醇苷提取物可通过诱导iNOS表达,刺激巨噬细胞合成NO,同时刺激巨噬细胞释放TNF-α和IL-6,激活巨噬细胞的免疫调节功能;以其与当归、黄芪提取物制备的复方片剂,可通过调节细胞免疫、单核-巨噬细胞功能而发挥对正常小鼠的增强免疫力作用,并对体液免疫有积极影响。     

菱角提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:研究菱角(Trapamanshurica)提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:采用菱角提取物对肝癌腹水细胞H22进行体内实验,观察菱角提取物对荷瘤小鼠生长的影响及小鼠体重的变化;采用MTT法测定淋巴细胞增殖率;将小鼠灌胃给菱角提取物,给药的第4d每只小鼠腹腔注射5%(V/V)鸡红细胞悬液(CRBC),在油镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,计算吞噬率和吞噬指数。结果:体内抗肿瘤作用显示,菱角提取物在26.25g/kg时对肿瘤的抑制率为47%;菱角提取物对荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖率为98.5%,显著高于阴性对照组;菱角提取物能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。结论:菱角能增强机体免疫功能。     

蟾酥水提取物对小鼠免疫功能的影响

研究新提取的蟾酥水提取中试产品体内外对小鼠免疫功能的调节作用。体内实验设蟾酥水提取物的高(2mg/kg)、中(1mg/kg)、低(0.5mg/kg)剂量组、左旋咪唑组和生理盐水组,连续腹腔注射给药3d后分别测定小鼠脾脏和胸腺指数、血液白细胞分类计数、血清中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ浓度和脾淋巴细胞体外增殖能力;无菌分离健康小鼠的脾淋巴细胞进行体外培养,加入不同质量浓度的蟾酥水提取物(20、10、5μg/ml),协同LPS或Con A共同孵育48h后,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖能力和ELISA法测定脾淋巴细胞上清液中的IL-2、IL-12、IL-4和IFN-γ含量。该蟾酥水提取物能协同Con A和LPS促进脾T、B淋巴细胞的体外增殖能力(P0.01),促进免疫器官生长。明显提高小鼠血清和脾淋巴细胞上清液中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ水平(P0.01)。该蟾酥水提取物中试产品通过促进小鼠免疫细胞的增殖活性和细胞因子的分泌水平而发挥其免疫调节作用。     

阿胶对小鼠免疫功能的影响

目的：探讨阿胶对小鼠免疫功能的影响。方法：小鼠连续皮下注射氢化可的松建立免疫机能低下模型,用不同剂量的阿胶灌胃小鼠28d后,分别测定小鼠的免疫器官重量、血清溶血素水平、迟发型变态反应、脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬能力、血清中细胞因子白介素-3（IL-3）、γ-干扰素（IFN-γ）和白介素-4（IL-4）水平。结果：阿胶能显著升高免疫低下模型小鼠胸腺指数（P〈0.05,P〈0.01）;显著提高小鼠血清溶血素含量（P〈0.01）;显著促进小鼠的迟发型变态反应和脾淋巴细胞的增殖能力（P〈0.05,P〈0.01）;显著升高小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数（P〈0.05,P〈0.01）;显著提高血清中细胞因子IL-3和IFN-γ水平（P〈0.05,P〈0.01）,降低IL-4水平（P〈0.05,P〈0.01）,提高IFN-γ/IL-4的比值（P〈0.01）。结论：阿胶对小鼠特异性及非特异性免疫机能具有显著调节作用。     

林蛙油蛋白中性蛋白酶水解物促进脾细胞和巨噬细胞功能

用盐析法结合超声波破碎细胞处理技术,从林蛙油中提取蛋白,并用中性蛋白酶制备林蛙油蛋白酶水解物。通过小鼠脾淋巴细胞增殖实验、脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2水平、巨噬细胞吞噬中性红实验及巨噬细胞体外释放NO实验,研究林蛙油、林蛙油蛋白及其中性蛋白酶水解物对脾细胞和巨噬细胞功能的影响。研究结果发现,林蛙油、林蛙油蛋白及其中性蛋白酶水解物均对脾淋巴细胞及巨噬细胞的免疫功能具有不同程度的促进作用,其中林蛙油蛋白中性蛋白酶水解物显示较显著的促进作用(p<0.01)。其中性蛋白酶水解物可分别增强脾淋巴细胞增殖、脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2、巨噬细胞吞噬功能及巨噬细胞产生NO功能达19.3%、104.8%、109.1%及34.9%。以上结果表明,林蛙油蛋白的中性蛋白酶水解物可显著提高脾淋巴细胞和巨噬细胞功能(p<0.01)。     

干巴菌对小鼠免疫功能影响的实验研究

探讨干巴菌醇提取物的水溶液及脂溶液对小鼠免疫功能的影响。分别用干巴菌的水溶液及脂溶液给小鼠灌胃10 d后,检测小鼠免疫器官重量、单核-腹腔巨噬细胞吞噬能力、淋巴细胞增殖转化及细胞因子的情况。脏器/体重比值测定和淋巴细胞增殖转化试验阳性,干巴菌脂溶组TNFα的浓度的均数小于对应混合组和溶剂对照组。干巴菌有增强免疫功能的作用;干巴菌可能抑制正常小鼠分泌TNFα。     

燕窝饮料及游离唾液酸对小鼠免疫功能调节作用研究

以免疫低下小鼠为模型,对燕窝饮料及游离唾液酸对小鼠免疫功能的调节作用进行研究.腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下的小鼠模型,通过计算脾指数与胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、血清溶血素测定、淋巴细胞转化试验及三硝基氯苯(picryl chloride,PC)诱导小鼠迟发性变态反应,观察燕窝饮料及游离唾液酸对免疫低下小鼠...     

阿里红多糖组分对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖(Fomes Officinals polysaccharide,FOPS)及其组分FOPS-a、FOPS-b对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。方法以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象,不同浓度(50~1600μg/m L)FOPS、FOPS-a、FOPS-b干预后,用cck-8试剂盒测定细胞活力,中性红法测定其吞噬活性,NO试剂盒测定NO的含量,ELISA试剂盒测定TNF-α和IL-1β释放能力。结果 FOPS、FOPS-a、FOPS-b在一定的浓度范围内可以提高RAW264.7巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、一氧化氮以及TNF-α、IL-1β的释放量。结论 FOPS、FOPS-a、FOPS-b一定浓度范围内具有良好的增强RAW264.7巨噬细胞免疫功能的作用。     

毛蕊花糖对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的研究

目的：明确毛蕊花糖对巨噬细胞RAW264.7免疫功能的调节作用。方法：分别以质量浓度25、50、100、200、400μg/mL的毛蕊花糖对RAW264.7巨噬细胞进行培养,以10μg/mL的脂多糖(LPS)为阳性对照组、不加任何样品的培养基为空白对照组。通过噻唑蓝(MTT)实验、吞噬中性红实验、NO释放量测定及酶联免疫吸附法测定细胞因子(IL-6、IL-1β、IFN-α、IFN-γ)的分泌量,评价毛蕊花糖的免疫调节作用。结果：质量浓度为25～400μg/mL的毛蕊花糖对巨噬细胞RAW264.7作用24h后,可显著提高巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、NO释放量以及细胞因子的分泌水平,并且毛蕊花糖溶液质量浓度为200μg/mL时效果最好。结论：毛蕊花糖对小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7具有免疫调节活性,是一种良好的免疫增强剂。     

Modulation of immune function by milk fat globule membrane isolates

The nutritional value and characterization of minor milk components on mammalian immune function are not fully understood. The aim of this research was to test the ability of a milk fat globule membrane (MFGM) isolate to modulate murine immune function in vitro, by studying its effects on splenocyte proliferation, apoptosis, and cytokine production. Proliferation of spleen cells was not affected by the MFGM isolate; however, in the presence of polyclonal activators, the MFGM isolate suppressed cell proliferation. Results obtained by flow cytometry did not support programmed cell death as the cause of the MFGM immune-modulating capacity. A mode of suppression on the splenocyte activation process was suggested from a marked decrease in the production of IFN-γ and tumor necrosis factor-α cytokines, typical indicators of immune cell activation. The effect of MFGM on IL-4 secretion was significantly less than that for the other 2 cytokines. The activity exerted by the MFGM over concanavalin A-stimulated cells differed from that observed in cells treated with lipopolysaccharide, suggesting a different mode of action depending on the activator used. These results indicate the potential of MFGM extracts as functional ingredients with bioactive modulating capacity.     

北五味子多糖对RAW264.7细胞的免疫调节作用

北五味子是我国传统中药材,近年来因其具有的护肝、安神等多种功效而得到了广泛地关注和研究。本实验提取北五味子多糖并超滤处理获得不同分子质量的多糖组分Sp1(100 ku)和Sp2(10~100 ku),分别按不同质量浓度对小鼠巨噬细胞系RAW264.7孵育处理,通过检测细胞增殖活性、吞噬能力、NO分泌水平及培养基中细胞因子(细胞白介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α))的含量,并与脂多糖实验组进行对比,评价北五味子多糖在免疫调节方面的作用。结果显示,较低分子质量的Sp2组分活性较强,在500.00μg/m L以上时,可以对小鼠巨噬细胞RAW264.7的吞噬能力、NO分泌水平、IL-1β和TNF-α含量有普遍的促进作用,显现出良好的免疫提高潜力,而较高分子质量的Sp1组分活性较弱。     

Proinflammatory cytokine and nitric oxide induction in murine macrophages by cell wall and cytoplasmic extracts of lactic acid bacteria

Cells from a number of bacterial genera have been shown to possess mitogenic and polyclonal activating properties when cultured with cells of the immune system. Based on previously reported health immune-enhancing effects of fermented dairy products, we tested the potentiating effects of representative lactic acid bacteria and their extracts on leukocyte function. Specifically, the effects of in vitro exposure to heat-killed cells of Bifidobacterium, Lactobacillus acidophilus, L. bulgaricus, L. casei, L. gasseri, L. helveticus, L. reuteri, and Streptococcus thermophilus, their cell walls, and their cytoplasmic extracts on proliferation as well as cytokine and nitric oxide (NO) production were examined in the RAW 264.7 macrophage cell line. A similar strategy was applied to murine cultures composed of peritoneal, spleen, and Peyer's patch cells. Both the cell wall and cytoplasmic fractions of lactic acid bacteria were able to stimulate cloned macrophages to produce significant amounts of tumor necrosis factor-alpha, (interleukin) IL-6, and NO. Pronounced enhancement of IL-6 production by peritoneal cells was observed when cultured with those extracts, whereas, effects were not noted in spleen and Peyer's patch cell cultures from mice. Based on the results, it appears that, as a group, the lactic acid bacteria were capable of stimulating macrophages and possibly other immune cells to produce cytokines and NO, and both their cell walls and cytoplasm contributed to these capacities.     

紫苏籽蛋白对免疫力低下小鼠免疫调节功能的研究

目的:探究紫苏籽蛋白对免疫低下小鼠免疫系统的调节作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立免疫低下小鼠模型,通过灌胃人体推荐剂量换算的低、中、高剂量的紫苏籽蛋白,检测其对小鼠脏器指数、T/B淋巴细胞增殖、血清溶血素、NK细胞杀伤力、吞噬指数、血清IL-2和IgG含量的影响。结果:紫苏籽蛋白对免疫低下小鼠免疫系统的调节效果随紫苏籽蛋白浓度增加呈先增加后降低趋势,中剂量的紫苏籽蛋白提高了免疫低下小鼠T/B淋巴细胞的增殖、半数溶血值(HC₅₀)、NK细胞杀伤力、巨噬细胞吞噬能力以及增加小鼠血清细胞因子IL-2含量,与模型组相比具有极显著差异(P<0.01),高剂量的紫苏籽蛋白免疫调节效果减弱。结论:适量摄入紫苏籽蛋白能发挥较强的免疫调节作用。     

黑灵芝多糖对脂多糖诱导巨噬细胞M1/M2表型转化的影响

目的：观察黑灵芝多糖对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠腹腔巨噬细胞M1/M2表型转化的影 响。方法：中性红检测巨噬细胞吞噬;流式细胞仪检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）和甘露糖受体 （mannose receptor,MR）水平;Griess法测定NO水平;酶联免疫吸附实验测定细胞因子白细胞介素（interleukin, IL）-1β和IL-10水平。结果：与LPS组相比,黑灵芝多糖可显著降低巨噬细胞吞噬能力并抑制IL-1β、NO和ROS的生 成,提示黑灵芝多糖可抑制巨噬细胞向M1表型极化。同时,黑灵芝多糖可上调LPS处理的巨噬细胞MR表达和IL-10 水平,促进巨噬细胞向M2表型极化。在黑灵芝多糖＋LPS组中加入MR抑制剂,发现黑灵芝多糖抗LPS介导的炎症 反应有所减弱。结论：黑灵芝多糖对LPS致炎巨噬细胞极化表型具有调控作用,且其可通过MR抑制巨噬细胞向M1 表型极化而促进向M2表型极化。     

体外评估乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响

该研究以商业菌株鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）LGG为阳性对照菌,体外评估实验室保藏的5株乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7细胞活性、吞噬活性及免疫活性分子NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-10（IL-10）分泌水平的影响,以期从中筛选出具良好免疫调节作用的菌株。结果表明,鼠李糖乳杆菌260具有更优的免疫调节作用,在特定乳杆菌活菌浓度时,能显著提高巨噬细胞RAW264.7的细胞活性、吞噬活性及NO、TNF-α和IL-10的分泌水平（P＜0.05）。最高细胞增殖率为196.62%;最低乳酸脱氢酶（LDH）释放量为554.36 U/100 mL;最高吞噬活性为136.86%;最高NO分泌量为5.70 μmol/L;最高IL-10分泌量为15.56 pg/mL,最高TNF-α分泌量为50.98 pg/mL。