响应面法优化从石榴皮制备鞣花酸的工艺研究

以石榴皮为原料,采用响应面法研究鞣花酸酸化工艺条件。以多酚提取物转化率为指标,考察硫酸浓度、酸化时间、酸化温度对鞣花酸得率的影响。在单因素实验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法,确定石榴皮鞣花酸的酸化工艺条件。结果表明,优化的鞣花酸酸化工艺为:硫酸浓度为0.83mol/L、酸化时间5h、酸化温度105℃,石榴皮多酚提取物转化率为86.38%,用无水甲醇热回流萃取4次,得到鞣花酸样品。建立了石榴皮酸化制备鞣花酸的二次多项数学模型,对石榴皮鞣花酸的制备工艺具有较好的预测作用。      

响应面法优化从石榴皮制备鞣花酸的工艺研究

以石榴皮为原料,采用响应面法研究鞣花酸酸化工艺条件。以多酚提取物转化率为指标,考察硫酸浓度、酸化时间、酸化温度对鞣花酸得率的影响。在单因素实验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法,确定石榴皮鞣花酸的酸化工艺条件。结果表明,优化的鞣花酸酸化工艺为:硫酸浓度为0.83mol/L、酸化时间5h、酸化温度105℃,石榴皮多酚提取物转化率为86.38%,用无水甲醇热回流萃取4次,得到鞣花酸样品。建立了石榴皮酸化制备鞣花酸的二次多项数学模型,对石榴皮鞣花酸的制备工艺具有较好的预测作用。     

石榴皮多酚抗肿瘤活性及其机制研究进展

现代研究表明,石榴皮多酚在预防和治疗癌症方面都表现出了良好的生物学活性,安石榴苷和鞣花酸作为其主要成分也分别具有良好的抗肿瘤活性。本文就近年来国内外对石榴皮多酚、安石榴苷和鞣花酸的抗肿瘤活性和机制研究进展进行综述,以期为石榴资源的充分利用提供参考。      

高温高压条件制备石榴皮鞣花酸的试验研究

目的:探索制备石榴皮鞣花酸新方法。方法:以高压蒸汽灭菌器为反应装置,分别研究了水解温度(压强)、水解时间和硫酸浓度(v/v)对鞣花酸得率的影响,并对工艺参数进行优化。结果:在最佳工艺条件:水解温度(压强)115℃(169 k Pa)、水解时间2 h、硫酸浓度6%(v/v)时,鞣花酸得率最高达3.09%,与常压相比得率提高了25.10%。结论:高温高压条件下水解石榴皮单宁制备鞣花酸效率较高,为生产工艺的改进提供了技术依据。      

水解法制备石榴皮鞣花酸工艺研究

建立了以60%乙醇超声提取石榴皮粉末,粗提物经石油醚萃取除去脂溶性物质,乙酸乙酯萃取,萃取物用酸水解法水解制备鞣花酸的方法。采用超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS）确定了乙酸乙酯萃取部位的主要成分为粟木鞣花素、安石榴苷、石榴亭A、鞣料云石素、石榴亭B、鞣花酸,并鉴定酸水解产物为鞣花酸。采用毛细管电泳法（CE）监测了乙酸乙酯萃取物的酸水解历程,结果表明,随着水解时间的增加,乙酸乙酯萃取物的电泳峰不断减少,而水不溶物鞣花酸的质量不断增加。正交实验考察了水解时间、水解温度、酸浓度对鞣花酸得率的影响,最优水解条件为:水解时间6h、温度100℃、硫酸浓度1.0mol/L,鞣花酸得率达32.7%。      

石榴皮多酚纯化及其抗氧化活性表征

目的：研究石榴皮多酚的纯化技术以及对石榴皮多酚提取物进行体外抗氧化活性表征。方法：选用国产10种大孔吸附树脂对超声波辅助提取所得的石榴皮粗提物进行分离纯化,并研究吸附动力学特征。采用4种常用体外抗氧化评价方法对纯化的石榴皮多酚进行活性表征。结果：大孔吸附树脂D160和XRD-6使石榴皮多酚粗提物中多酚纯度由35.05%提高到87.81%,其中,安石榴苷的纯度由原来的21.25%提高到73.96%。体外抗氧化实验表明,抗氧化活性与石榴皮提取物中多酚的纯度,尤其是安石榴苷的纯度,呈明显的剂量-效应关系;结论：大孔吸附树脂可以应用于石榴皮多酚的分离纯化;安石榴苷是石榴皮多酚中起抗氧化活性的关键成分。     

石榴皮多酚体外抗脂质过氧化作用研究

为研究石榴皮多酚的抗脂质过氧化作用及起关键作用的成分,采用3个脂质过氧化研究体系,即卵黄体系、低密度脂蛋白体系和大鼠肝脏匀浆体系,利用硫代巴比妥酸法测定了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷标准品和鞣花酸标准品对体外金属离子诱导性脂质过氧化的抑制作用。结果表明:安石榴苷,鞣花酸和石榴皮多酚纯化物均能有效抑制体外金属离子诱导的脂质过氧化,并且具有良好的剂量效应关系,其抗脂质过氧化的能力强弱顺序依次是:安石榴苷>鞣花酸>石榴皮多酚纯化物>茶多酚,说明安石榴苷是石榴皮多酚中抗脂质过氧化的的关键物质。     

大孔吸附树脂对石榴皮多酚的分离纯化

石榴皮中多酚含量丰富,具有抗氧化、抗衰老、抗癌防癌、抗菌、润肤美容、降血压和预防心脑血管疾病等多种生理和药理活性。在食品、医药和日用化学品等领域显示出巨大的应用价值。从XAD-16、XAD-1180、XAD-7HP、D101、DM-11、DM130、SP-700、SP-850、X-5、AB-8和H-103大孔吸附树脂中通过静态实验筛选出SP-700树脂,详细研究了其对石榴皮总单宁的静态与动态吸附和解吸性能。结果表明,SP-700树脂对石榴皮多酚的饱和吸附量为70.52mg/g(干树脂),吸附等温线符合Freundlich方程,为多分子层吸附,饱和吸附时间为5h,适宜解吸剂为体积分数70%的乙醇溶液,测定20、25、30、35℃下吸附等温线,表明最适宜的吸附温度是25℃,此时最大吸附量达到96.71mg/g(干树脂);以5mg/mL质量浓度的石榴皮提取液上柱,流速为4～4.5BV/h时,树脂的多酚穿透吸附容量65.72mg/g(干树脂),3.5BV体积分数70%的乙醇溶液可将吸附于柱上的石榴皮多酚完全洗脱。以该条件纯化石榴皮多酚提取物时,纯化样的收率为26.5g/100g(干石榴皮),多酚质量分数从48%提高到...     

响应面法优化石榴皮中鞣花酸的半仿生提取工艺

为了优化石榴皮中鞣花酸的最佳提取工艺,本研究采用响应面设计法,考察第一煎pH、第二煎pH、提取时间、提取温度四个因素对鞣花酸得率的影响,用紫外分光光度法测定鞣花酸含量。结果表明,最佳提取工艺为：第一煎pH为4．6,第二煎pH为10．5,提取时间为3．4h,提取温度63．9℃,此时鞣花酸提取得率为4．124％。由此可知,本研究确定的提取工艺方法简便,合理可行。     

Evaluation of antioxidant properties of pomegranate peel extract in comparison with pomegranate pulp extract

Pomegranate is an important source of bioactive compounds and has been used for folk medicine for many centuries. Pomegranate juice has been demonstrated to be high in antioxidant activity and is effective in the prevention of atherosclerosis. In a previous study, we found that pomegranate peel had the highest antioxidant activity among the peel, pulp and seed fractions of 28 kinds of fruits commonly consumed in China as determined by FRAP (ferric reducing antioxidant power) assay. In this study, we extracted antioxidants from pomegranate peel, using a mixture of ethanol, methanol and acetone, and the antioxidant properties of the extract were further investigated as compared with the pulp extract. The contents of total phenolics, flavonoids, proathocyanidins and ascorbic acid were also measured. The results showed that pomegranate peel extract had markedly higher antioxidant capacity than the pulp extract in scavenging or preventive capacity against superoxide anion, hydroxyl and peroxyl radicals as well as inhibiting CuSO₄-induced LDL oxidation. The contents of total phenolics, flavonoids and proathocyanidins were also higher in peel extract than in pulp extract. The large amount of phenolics contained in peel extract may cause its strong antioxidant ability. We concluded that pomegranate peel extract appeared to have more potential as a health supplement rich in natural antioxidants than the pulp extract and merits further intensive study.     

喀什甜石榴与会理青皮石榴品质及抗氧化 活性的比较

目的 比较新疆喀什甜石榴和四川会理青皮石榴两个品种的果实品质和抗氧化活性。方法 测定了这两个石榴品种的品质、糖酸含量、总花色素苷、总酚及其抗氧化能力。结果 新疆喀什甜石榴的可溶性固形物含量、籽粒色饱和度、苹果酸含量、总花色素苷含量和总酚含量均高于四川会理青皮石榴;而四川会理青皮石榴的葡萄糖含量和果糖含量则高于喀什甜石榴;喀什甜石榴和会理青皮石榴籽粒的总抗氧化能力分别为211.25 U和178.97 U;DPPH自由基清除率分别为0.87和0.82;石榴籽粒中抗氧化活性分别与总酚、总花色素苷成正相关。结论 两个石榴品种在果实品质和抗氧化活性方面各有特点,这为石榴品种的品质评价和果实加工利用提供了参考依据。     

戊糖片球菌P36对HepG2细胞抗氧化能力影响的初步研究

目的:研究戊糖片球菌P36对HepG2细胞抗氧化能力的影响。方法:将培养的HepG2细胞分为3组:空白对照组(不加H₂O₂)、模型组(加入H₂O₂)和乳酸菌组(加入戊糖片球菌P36和H₂O₂)。细胞培养至12 h和24 h时分别测定其上清液和细胞裂解液的抗氧化活性。利用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)对HepG2细胞进行染色,在荧光显微镜下观察不同组细胞核形态的变化。结果:添加戊糖片球菌P36 12 h后,与模型组相比,细胞上清液中的总抗氧化力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力均显著提高(p<0.05)。细胞裂解液中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力也显著提高(p<0.05);与模型组相比,添加P36 24 h后,细胞上清液中的抗氧化酶活力均显著增加(p<0.05),还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量分别显著降低(p<0.05),细胞裂解液中的SOD活力显著降低了19.76%(p<0.05)。加入戊糖片球菌P36 24 h后,与模型组相比,HepG2细胞受损程度降低,大部分细胞状态趋于正常。结论:戊糖片球菌P36可以提高氧化应激状态下HepG2细胞的抗氧化能力。     

石榴皮提取物的抗氧化作用研究

分别以水、甲醇、丙酮和乙酸乙酯为溶剂,对石榴皮中的多酚进行了提取,得到4种提取物。采用油脂过氧化值(POV)法和二苯三硝基苯肼(DPPH)自由基法研究了提取物的抗氧化活性。结果显示,4种提取物均具有抗油脂过氧化和清除DPPH自由基的能力,其抗氧化活性随添加量的增加而增加。4种提取物中,丙酮提取物的抗油脂过氧化作用最大,其次为水提取物和甲醇提取物,乙酸乙酯提取物的抗油脂过氧化作用最小。当丙酮提取物添加量为猪油质量的0.1%时,其抗油脂过氧化活性接近添加量为0.02%茶多酚或BHT。4种提取物对DPPH自由基的清除能力大小顺序依次为:水提取物、丙酮提取物、甲醇提取物和乙酸乙酯提取物。浓度为0.0175 mg/mL的水提取物对DPPH自由基的清除率高达85.2%,高于BHT,但略低于茶多酚。石榴皮多酚是一种有效的天然抗氧化剂。     

辣木叶水提物对H2O2致HepG2细胞氧化损伤的保护作用

该研究从细胞水平对辣木叶水提物的抗氧化活性进行研究。以过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）诱导氧化损伤的人体肝癌细胞（Human hepatoma cell,HepG2 cell）为模型,加入不同浓度的辣木叶水提物进行保护干预,利用MTT法测定细胞存活率,同时测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）等抗氧化活性指标,探究辣木叶水提物对H2O2诱导氧化损伤细胞的保护作用。结果表明,辣木叶水提物可明显提高经H2O2诱导损伤的HepG2细胞存活率（p<0.05）,其中高浓度辣木叶水提物（500和600 μg/mL）可使细胞存活率恢复到将近100%。此外,与模型组相比,不同剂量辣木叶水提物可明显提高HepG2细胞的GSH-Px、SOD活性水平（p<0.05）和降低细胞的MDA含量（p<0.05）,其中GSH-Px含量提高了20.77%~151.74%,SOD活力提高了22.24%~139.07%,MDA含量下降了12.51%~34.04%,且其变化程度具有剂量依赖效应。综上所述,辣木叶水提物在细胞水平具有一定的抗氧化活性,研究结果可为辣木叶抗氧化功能产品的开发提供参考依据。     

苋菜芽生长中相关酶及抗氧化活性的变化

为探究苋菜芽生长过程中相关酶及抗氧化活性的变化。采用不同浓度的茉莉酸甲酯溶液（MeJA）培养苋菜种子,根据苋菜芽的生长情况及苋红素的含量确定最优培养浓度后,在最优浓度下培养苋菜芽,记录种子的发芽率、发芽势、发芽指数、种子活力指数。收取2、4、6、8 d的苋菜芽,对根长、全长、苋红素、总酚、过氧化氢含量和抗氧化酶活性进行测定。结果表明苋菜种子的最优培养浓度为100μmol/L。MeJA处理不利于种子萌发,并且明显抑制了苋菜芽的根长和全长。但与空白对照相比,经MeJA处理过的苋菜芽中苋红素和总酚含量显著增加,并通过提高超氧化物歧化酶（SOD）的活性来清除O₂^-,延缓过氧化物酶（POD）活性的升高、过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的降低来抑制的H₂O₂积累。本研究为提高苋菜芽中苋红素的含量提供了一种新的方法,并为苋菜芽生长过程中相关酶及抗氧化活性变化的进一步研究奠定了理论基础。      

Volatile aroma components and antioxidant activities of the flavedo peel extract of unripe Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata)

The flavedo peel extracts of unripe Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata) fruits were extracted using steam distillation (SD) or a cold-press (CP) system. Volatile aroma content and composition were determined using gas chromatography (GC) and each compound was identified using gas chromatography-mass spectrophotometry (GC-MS). The major constituents of the extracts were monoterpene hydrocarbons (91.75-93.75%[709.32-809.05 mg/100 g of fresh flavedo peel]) including limonene (43.08-45.13%[341.46-379.81 mg/100 g of fresh flavedo peel]), γ-terpinene (27.88-29.06%[219.90-245.86 mg/100 g of fresh flavedo peel]), and p-cymene (8.13-11.02%[61.47-97.22 mg/100 g of fresh flavedo peel]). The extraction process used was determined to be a decisive factor that affects the composition of key citrus aroma components, as well as the antioxidant activities of the Shiikuwasha fruit. Antioxidant capabilities of the extracts were examined by assay of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical-scavenging activity and β-carotene bleaching inhibition. The cold-press extraction system may better retain the total phenolic content of the flavedo peel and display superior antioxidant activities, compared to the steam distillation extraction method. PRACTICAL APPLICATION: Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata) is a type of small citrus fruit, and has been used as raw material for beverage and food additive productions in Japan. It had a unique aroma composition in which the limonene content of its peels is lower than that of other commonly known citrus peels. The present study detailed the volatile aroma composition, as well as antioxidant capabilities of Shiikuwasha peel extracts of different extraction methods, that are cold-press and steam distillation methods. The results of this study may provide a basis for selection of Shiikuwasha peel extracts in food industry for citrus flavor production.     

柠檬果皮精油的化学组成、抗氧化及抑菌活性研究

采用GC-MS法分析经水蒸气蒸馏法所提柠檬果皮精油的化学组分,并对其抗氧化与抑菌活性进行了研究。实验结果表明:鉴定出23种挥发性成分,占精油总量的94.57%,主要为dl-柠檬烯（42.93%）、γ-萜品烯（8.41%）、α-松油醇（6.39%）和E-柠檬醛（6.09%）等;柠檬精油对OH自由基有较好的清除效果,清除率可达95.14%;而对DPPH自由基的清除率在实验条件下最高为34.81%,远低于同浓度的PG和TBHQ。200mg/kg添加量的柠檬精油可延缓猪油和花生油的贮藏期,但略差于同浓度TBHQ和VE的抗氧化效果。抑菌活性实验结果表明柠檬精油对6种供试菌都有一定的抑菌作用,其中对大肠杆菌的抑菌效果最好,其最低抑菌浓度（MIC）为0.1μL/m L。      

Development of a cell-based antioxidant activity assay using dietary fatty acid as oxidative stressor

The existing cellular antioxidant activity (CAA) assays always use chemical stressors [e.g. 2,2′-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)] to initiate oxidative stress (OS), which is not accordance with the pathology of OS-related diseases. In contrast to previous cell models, an oleic acid (OA)-induced OS model of the HepG2 cells was developed in the current work. The antioxidant activities (AAs) of the 16 flavonoid standards in the CAA_OA assay were significantly different from the results of the CAA_AAPH and peroxyl radical-scavenging assays (PRSA). The AAs of these flavonoids in the PRSA were significantly associated with those of the CAA_AAPH assay (r = 0.848, P < 0.01). On the other hand, isoflavones and epicatechin could significantly attenuate the OS in the CAA_OA assay. However, the three flavonoids had no quantifiable AA in CAA_AAPH and PRSA. The aforementioned results suggest that the CAA_OA assay can probably better reflect the AAs of samples in biological systems.