复合酶法提取松茸多糖及其分子量分布研究

考察木瓜蛋白酶、果胶酶和纤维素酶在不同温度、不同pH值、不同酶量、不同酶作用时间的条件下提取松茸多糖最佳工艺,并应用凝胶渗透色谱法对其分子量分布进行初步研究.结果为在纤维素酶2.0%、果胶酶2.0%、木瓜蛋白酶2.0%;温度为60℃、pH为4.0、时间80min,多糖提取收率较高,为6.5%,松茸多糖分子量分布较宽,从2ku～410 ku之间均有分布,不同分子量多糖所占比例差异较大.结果表明,采用复合酶法对松茸多糖提取是可行的,多糖组成较复杂.     

酵母细胞壁多糖的研究进展

随着科学技术的发展,多糖的活性功能已经被人们所认识.而酵母细胞壁多糖作为多糖中的一种,其研究也在不断深入.酵母细胞壁多糖具有许多活性功能,如能吸附病原菌,增强细胞免疫力,提高巨噬细胞活性,抗辐射,抗病毒,提高抗癌功能等.目前,酵母细胞壁多糖的提取方法主要是碱法、高压均质破壁法,酶法.在食品工业中,酵母细胞壁多糖能充当乳化剂、增稠剂、低热食品原料等角色.但由于提取技术的限制,其主要还是作为添加剂常见于饲料中.为了更好的利用酵母细胞壁多糖的功能价值,更充分的为人类健康服务,本文对酵母菌细胞壁多糖物质的活性功能,提取方法及其在食品中的应用进行了综述.     

铁皮石斛多糖分子量测定及其影响因素分析

目的:研究了铁皮石斛多糖的分子量及其主要的影响因素。方法:对铁皮石斛多糖进行了三次重复的提取分离,经过纤维素凝胶树脂DEAE-52和葡聚糖凝胶Sephacryl S-300柱进行纯化,得到一个多糖片段WDOPA并采用高效凝胶渗透色谱法进行多次的分子量测定。采用单因素比较的方法,分别用加热和超声的手段处理铁皮石斛多糖,考察不同的加热温度、时间及不同的超声功率、时间对铁皮石斛多糖分子量的影响。结果:该WDOPA的分子量为776054 u,RSD在10%以内,加热的温度及时间对多糖分子量的影响不明显,而超声功率、超声时间的不同对铁皮石斛多糖分子量影响较大,随着超声功率的加大及时间的延长,分子量逐渐变小。结论:该实验方法可用于测定多糖,且超声可用于改变铁皮石斛多糖的分子量,应用于筛选不同分子量的多糖片段。      

广东虫草多糖脱蛋白及凝胶渗透色谱法表征其分子量分布的研究

通过比较蛋白脱除率和多糖损失率,研究Savage法、三氯乙酸(TCA)法及盐酸法对广东虫草多糖(CGP)脱蛋白的效果,并利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定虫草多糖组分的保留时间tR、重均分子量Mw、数均分子量Mn、峰位分子量Mp、多分散性PD以及各细分的相对含量,以表征广东虫草多糖的分子量分布.结果表明:采用Savage法脱蛋白总体效果较好,处理次数3次为宜;GPC谱图分析结果表明,CGP含有三个不同分子量级别的多糖组分,其重均分子量Mw分别为2.57×106、3.84×104及5.00×103.     

广东虫草多糖的醇沉及凝胶渗透色谱法表征其分子量分布的研究

采用浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇对广东虫草多糖(CGP)进行分级醇沉(GEP)和分步醇沉(SEP)处理.并利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定各醇沉组分的保留时间1R、重均分子量Mw、多分散性PD以及各组分的相对含量,以表征不同醇沉方法所得多糖组分的分子量分布.结果表明:不同乙醇浓度醇沉得到的多糖组分的分子量大小有很大差异,且不同分子量范围的多糖在不同醇浓度下的含量也不一致;要获取更多的大分子量虫草多糖,宜采用分步醇沉法,乙醇浓度应从30%逐渐增大到70%;若采用分级醇沉法,则乙醇的浓度应选择在50%～70%.     

广东虫草多糖的醇沉及凝胶渗透色谱法表征其分子量分布的研究

采用浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇对广东虫草多糖(CGP)进行分级醇沉(GEP)和分步醇沉(SEP)处理。并利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定各醇沉组分的保留时间tR、重均分子量Mw、多分散性PD以及各组分的相对含量,以表征不同醇沉方法所得多糖组分的分子量分布。结果表明:不同乙醇浓度醇沉得到的多糖组分的分子量大小有很大差异,且不同分子量范围的多糖在不同醇浓度下的含量也不一致;要获取更多的大分子量虫草多糖,宜采用分步醇沉法,乙醇浓度应从30%逐渐增大到70%;若采用分级醇沉法,则乙醇的浓度应选择在50%～70%。      

酵母细胞壁免疫多糖对草鱼免疫功能的影响

探讨饲料中添加酵母细胞壁免疫多糖后对混养池塘中草鱼的免疫功能增强的影响,以商品混养饲料作为对照组,在此商品饲料中添加0.5%酵母细胞壁免疫多糖作为试验组。52天的试验结果表明:试验组抽样草鱼的肝体指数、脾脏指数与对照组相比均无显著性差异;试验组草鱼血清和肝脏匀浆液中谷丙转氨酶的活性分别为(4.50±0.71)、(1.535±0.568)U/mg,显著低于对照组;试验组草鱼脾脏匀浆液总蛋白质含量为(11.04±0.905)mg/ml,免疫球蛋白的含量为(0.42±0.028)mg/dl,均显著高于对照组,血清、肝脏匀浆液中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性略高于对照组;而试验组草鱼血清和肝脏匀浆液谷草转氨酶略低于对照组,但均无显著差异。     

猴头菌细胞壁多糖的提取和其结构特征

以猴头菌子实体残渣为试验材料,研究了残渣粉粹时间及提取用溶剂对其细胞壁多糖提取得率和结构特征的影响。研究发现粉碎时间延长可增加水溶性细胞壁多糖的得率,但多糖含量会降低,粉粹时间对水溶性细胞壁多糖的绝对重均分子质量分布及单糖组成影响较大,最佳粉碎时间为15 min。Na OH浓度的增加可提高碱溶性细胞壁多糖的得率和含量,但免疫活性降低,最适的Na OH浓度为0.5 mol/L。粉碎水提、碱提两种方式得到的细胞壁多糖均能够显著刺激小鼠巨噬细胞释放NO,具有较好的体外免疫活性;比较水溶性细胞壁多糖与碱溶性细胞壁多糖的结构差异,发现水溶性细胞壁多糖绝对重均分子质量远大于碱溶性细胞壁多糖。碱溶性细胞壁多糖只含有葡萄糖,而水溶性细胞壁多糖还含有一定量的半乳糖,且葡萄糖与半乳糖之间的摩尔比值约为4∶1。优选获得了猴头菌细胞壁多糖的高效制备方法,明确了猴头菌水溶性与碱溶性细胞壁多糖结构特征间的差异。     

虎奶菇菌丝体细胞壁成分分析及多糖结构表征

该文以液态发酵的虎奶菇(Pleurotus tuber-regium,PTR)菌丝体为原料,对PTR菌丝体细胞壁(PTR-MCW)的组分进行分析,并阐明细胞壁骨架结构。采用不同提取强度的溶剂分离MCW的可溶性成分,对各组分进行含量测定、化学成分分析及基本结构表征。结果表明,PTR-MCW主要由4部分组成:热水提多糖和蛋白质复合物的外层,常温碱提的杂多糖部分,热碱提的高度支化杂多糖部分和碱不溶性多糖-几丁质复合物部分,这4种组分在PTR-MCW中的比例为2.06∶22.06∶46.97∶18.95。占主要组分的热碱提多糖经纯化后得到纯多糖MHA-I,单糖组成和甲基化分析表明其糖苷键类型包括T-木糖、T-鼠李糖、T-葡萄糖、1,3-葡萄糖、1,6-葡萄糖、1,4-葡萄糖、1,3,6-葡萄糖、1,4,6-葡萄糖、1,3,6-甘露糖,摩尔比为2.01∶1.00∶27.64∶8.19∶38.22∶20.88∶14.38∶6.98∶3.22,该多糖的分支度(degree of branching,DB)为0.45,FT-IR分析鉴定MHA-I中主要为β-糖苷键。SEC-MALLS分析表明,超支化杂多糖MHA-I的分子量为4.502×10^4 g/mol,回转半径为33.2 nm。电镜结果显示,MHA-I为具有超支化结构的多糖,在干燥的粉末状态下呈现准球形结构。该研究成果为虎奶菇多糖的开发及活性研究提供一定的理论依据。     

植物细胞壁多糖降解中相关辅酶的研究

文章系统的研究了在植物细胞壁多糖支链的降解过程中起关键作用的辅酶,对辅酶的来源、分类及作用等进行了阐述,为植物细胞壁多糖的完全降解提供了理论依据。     

碱不溶性酵母胞壁多糖苯酚-硫酸测定法的研究

为了测定碱不溶性酵母胞壁多糖含量,采用硫酸溶液水解碱不溶性酵母胞壁多糖,苯酚-硫酸法测定水解液的糖含量。通过单因素和正交实验对硫酸溶液水解碱不溶性酵母胞壁多糖的条件进行了优化,优化后的水解条件为:称取碱不溶性酵母胞壁多糖10mg,加入3mol/L H2SO4溶液20m L置于100℃水浴中水解90min。水解液定容至250m L,测定其糖含量。该方法的精密度RSD为0.30%,稳定性RSD为0.67%,重现性RSD为0.29%,样品的平均加标回收率为99.87%,RSD为1.16%,是测定碱不溶性酵母胞壁多糖含量的有效方法。      

Role of pectic polysaccharides in structural integrity of apple cell wall material

Texture modulating properties of aqueous dispersions of apple cell wall material differed from those of tomato or kiwifruit, particularly under high shear. It was previously hypothesized that this may be due to the fact that the apple cell wall showed less in vivo solubilization of pectic polysaccharides during ripening compared to tomato or kiwifruit. However, in vitro solubilization of the pectic polysaccharide content of apple CWM by endo-polygalacturonase and/or extraction with 0.05 M sodium carbonate, did not affect the loss in wall integrity shown by tomato or kiwifruit CWMs under shear. In addition, the pectin-depleted residue after Na₂CO₃ extraction possessed better water retaining and viscosity generating properties than the original cell wall material. Following treatment of apple CWM with cellulase, the viscosity of suspensions decreased, emphasising the role that the cellulose–hemicellulose network plays in the water-retaining capacity of the cell wall. Residue from CWM after cellulase treatment consisted of ∼85% pectic polysaccharides. Surprisingly, the integrity of these “cellulose-free” walls was maintained after shear. It is concluded that differences in structural properties of the CWMs of apple compared to kiwifruit or tomato are not simply related to pectin solubilization but to a fundamental difference in the architecture of the apple cell wall.     

凝胶渗透-液相色谱法检测食用油中3种邻苯二甲酸酯类物质

采用凝胶渗透色谱法(GPC)将桶装食用油中的油脂与目标物质进行分离,并用液相色谱法检测了3种PAEs的含量,以了解目前食用油的污染情况,并为含油脂食品中PAEs的检测提供参考。     

羟基酪醇酶促聚合产物的表征及其抗氧化和热稳定性

利用漆酶对羟基酪醇（hydroxytyrosol,HT）进行酶促氧化聚合,运用紫外-可见分光光度计、傅里叶红外光谱、凝胶色谱和液相色谱-质谱联用对聚合产物进行表征。结果表明,形成的聚合物呈现多分散性（D=2.1）,主要生成了三聚体、四聚体、六聚体化合物。同时,以VC和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（dibutyl hydroxy toluene,BHT）为阳性对照,分别通过清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和热重-傅里叶变换红外光谱（thermogravimetry-Fourier transform infrared spectroscopy,TG-FTIR）联用的方法对其进行抗氧化性及热稳定性评价。结果表明,HT聚合物较HT和BHT具有更强的抗氧化性,分别约是其2.28?倍和5.7?倍,接近于VC（约是其72%）。基于热重微分曲线峰值温度（315.1?℃）和残余质量所占百分比（66.09%）结果可知,HT聚合物的热稳定性较VC（228.1?℃）、BHT（236.2?℃）和HT（314.9?℃）更强,且FTIR结果表明,HT聚合物及其他受试化合物均是以羟基断裂开始,脱氢形成醌式结构或脱水碳碳双键。这些数据可为HT的深加工利用提供理论和实践基础。     

1-甲基环丙烯对硬溶质型桃果实细胞壁多糖降解特性的影响

以硬溶质型桃"晚湖景"为试材,20℃下用1μL/L 1-甲基环丙烯(1-MCP)密闭处理24h,研究1-MCP处理对细胞壁降解过程中多糖组分变化、单糖解离特性以及细胞壁多糖降解相关酶的影响。结果表明:1-MCP处理可以明显抑制硬溶质型桃果实硬度的下降,降低乙烯释放量。1-MCP处理的硬溶质型桃果实中CDTA-2、Na2CO3、KOH和CWM-残渣组分在贮藏过程中下降速率都明显低于未处理果。1-MCP处理能延缓CDTA溶性果胶多糖的解离。同时还抑制了Na2CO3溶性果胶多糖中半乳糖醛酸和鼠李糖构成的主链和阿拉伯糖、半乳糖支链的降解,对半纤维素和纤维素多糖成分降解有一定程度的抑制作用。1-MCP处理可能通过抑制参与细胞壁多糖降解相关酶的活性,从而抑制硬溶质型桃果实细胞壁多糖降解及单糖解离,达到延缓果实软化的目的。     

碱法破壁-酶法提取葡萄酒废酵母细胞壁多糖的工艺研究

以工业发酵产生的葡萄酒废酵母泥为材料,过筛法除去葡萄果皮、果籽等杂质后,以细胞破壁液蛋白质含量、多糖提取率为评价指标,通过单因素试验和正交试验对碱法破壁-酶法提取细胞壁多糖工艺进行优化,以期提高多糖提取率。结果表明,最佳工艺条件为细胞破壁碱（KOH）处理温度为60 ℃,碱（KOH）质量浓度为70 g/L,处理时间为1.5 h,80 kHz超声辅助;酶法提取多糖最佳工艺为酶作用温度50 ℃,酶解时间1.5 h,中性蛋白酶添加量0.3%,初始pH值7.0。在此优化条件下,葡萄酒废酵母多糖提取率为21.08%。     

旋涡振荡萃取- 超高效液相色谱法检测脂肪食品模拟物橄榄油中6 种抗氧化剂

为建立高效且易于操作的脂肪食品模拟物橄榄油中抗氧化剂双酚A(BPA)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、3,5- 二叔丁基-4- 羟基苯甲醇(Ionox100)、2,6- 二叔丁基对甲酚(BHT)、2,4,6- 三叔丁基苯酚(TTBP)、2,2′- 亚甲基双(4- 乙基-6 叔丁基酚)(AO425)的测定方法,采用旋涡振荡甲醇萃取- 旋转蒸发浓缩以及旋涡振荡乙酸乙酯- 环己烷(1:1,V/V)萃取- 凝胶渗透色谱(GPC)净化浓缩两种前处理方法进行处理,采用超高效液相色谱法(UPLC)检测。结果表明：本方法具有较低的检出限(LODs 分别为0.06、0.04、0.01、0.03、0.06、0.01mg/L)、较好的线性(R2 ＞0.998)、较高的回收率(两种前处理方法平均回收率分别高于83.0%、56.8%)及较高的精密度(RSD 分别小于7.5%、8.4%)。将该方法用于食用油样品的检测,结果显示,只有BHT 被检测出,且含量低于其特定迁移限量(SML)。     

Degradation characteristics of isolated and in situ cell wall lucerne pectic polysaccharides by mixed ruminal microbes

Two pectic polysaccharide fractions were isolated form lucerne (Medicago sativa L) leaves and used in fermentation experiments with mixed ruminal microbes. Both fractions were similar in chemical composition, containing galacturonic acid (52-58 mol%) and the neutral sugars arabinose (14-18 mol%), galactose (6-8 mol%) and rhamnose (8-12 mol%). Fermentation of both fractions was rapid and complete with a half-life of approximately 4 h. Production of total volatile fatty acids matched the degradation profile reaching a maximum level shortly after the rate of degradation began to decrease. The fermentation characteristics of citrus pectin and polygalacturonic acid were similar to those of the lucerne pectic fractions but galacturonic acid was much slower in its rate of degradation while soluble arabinogalactan from larchwood was virtually undegraded. Leaves of early bud stage lucerne and lower nodes and internodes of stems from full bloom lucerne were also fermented by mixed ruminal microbes. Pectic polysaccharides were rapidly and extensively degraded from both tissues. Initial rates were faster for leaves than for stems and the extent of pectic degradation was greater in leaves (8% residual) than in stems (17% residual). Selection of forage lines with increased pectic polysaccharides would provide greater amounts of rapidly available energy that could result in more efficient utilisation of the rapidly degraded protein in lucerne.