HPLC法测定多产地松露中游离氨基酸的含量

建立柱前衍生化HPLC法定量测定8个产地松露中16种游离氨基酸。采用水超声法提取松露中氨基酸,以异硫氰酸苯酯作为衍生化试剂柱前衍生,高效液相色谱法测定不同产地松露中氨基酸的含量。8个产地的松露鲜品中含氨基酸约11种~13种,永仁母松露的氨基酸最高,含量6.17%。本方法简便、快速、可靠。松露中氨基酸种类齐全,含量丰富,具有很好的开发利用价值。     

高效液相色谱法检测食品中17种游离氨基酸

目的使用异硫氰酸苯酯衍生-高效液相色谱法对食品中17种游离氨基酸进行检测。方法对17种游离氨基酸及其苯胺硫甲酰基衍生物稳定性的分析,研究游离氨基酸的最佳衍生条件。同时,对盐沉淀法和C_(18)固相萃取(solid phase extraction, SPE)小柱法2种样品除杂方法的加标回收率进行测定。结果胱氨酸加热干燥5h后,回收率为68.46%±4.01%,热稳定性差;其它16种氨基酸加热1～5h后回收率均在90%～110%之间,热稳定性较好。胱氨酸的苯胺硫甲酰基衍生物,6h后回收率仅为11.04%±1.65%,稳定性差;其它氨基酸的苯胺硫甲酰基衍生物24 h后回收率均大于90%,比较稳定。另外,前处理中使用C_(18) SPE除杂时,样品中游离氨基酸的加标回收率均大于70%,而使用水杨酸和三氯乙酸除蛋白后苯胺硫甲酰基衍生物降解严重。结论除胱氨酸外,其余16种氨基酸的热稳定性均较好,且生成的苯胺硫甲酰基衍生物比较稳定,可以通过异硫氰酸苯酯衍生进行定量分析。相比于水杨酸和三氯乙酸沉淀法, C_(18) SPE柱是游离氨基酸除杂方法的首选,而无机盐影响异硫氰酸苯酯与氨基酸衍生,因此此方法不适用于含盐样品的衍生。     

明党参中游离氨基酸与核苷类成分的同时测定及品质评价

建立同时测定11种游离氨基酸与11种核苷类成分含量的超快速液相色谱-四极杆离子阱质谱联用方法,并分析明党参原植物和组织培养样品中游离氨基酸及核苷类含量。采用Waters XBridge Amide (2.1 mm×100 mm,3.5 μm)色谱柱,柱温30℃,0.2%甲酸-0.2%甲酸乙腈溶液以0.6 mL·min^-1流速梯度洗脱,以多反应监测模式进行正离子检测,结合主成分分析法和逼近理想点排序法探讨不同样品品质差异。结果表明,精密度、重复性、稳定性和回收率考察结果相对标准偏差均小于5%,加样回收率在98.62%~100.64%之间,被测成分线性关系良好,表明该检测方法准确、可行;明党参样品中游离氨基酸与核苷类成分差异较大,柄悬浮细胞测得游离氨基酸总含量(3682.01 μg·g^-1)与核苷总含量(6241.90 μg·g^-1)均为最高;分别以氨基酸和核苷为指标,主成分分析最高评分分属原植物根和柄悬浮细胞,逼近理想点排序表明柄悬浮细胞综合品质最优。本实验所建方法可用于明党参中22种游离氨基酸与核苷含量的同时快速测定,品质评价结果提示明党参根、叶、柄悬浮细胞和再生叶具开发利用价值,可为合理利用明党参资源提供参考。     

茶叶中游离氨基酸含量的荧光光度法测定

本文采用邻苯二甲醛(OPA)衍生法，OPA在β-巯基乙醇(β—MCK)存在下与第一级氨基酸迅速反应生成1—硫代—2—烷基异吲哚，此生成物具有荧光，从而利用荧光光度法测定茶叶中的游离氨基酸含量。实验对该法的精密度，准确性以及稳定性均进行探讨。在激发波长Ex为360nm，发射波长Em为420nm时，标准直线方程为Y＝1．3303X 0．2329，相关系数γ＝0．9999。结果表明：茶叶中含有丰富的游离氨基酸，总量为2．7—3.2g／100g，回收率达99．14％。     

鲜人乳和鲜牛乳中主要游离氨基酸成分的分析比较

应用日立８３５－５０型氨基酸分析仪分别测定了鲜人乳和鲜牛乳中１７种主要的游离氨基酸的含量,其中鲜人乳中游离氨基酸的含量为９３．５６ｍｇ／１００ｇ,鲜牛乳为２４．０５ｍｇ／１００ｇ,分析比较结果进一步支持了母乳喂养婴儿的建议。     

巴戟天炮制工艺的优化及有效成分变化分析

研究了巴戟天的炮制工艺以及利用该工艺炮制样品前后水晶兰苷和总蒽醌含量的变化情况。以巴戟天的多糖含量为评价指标,通过对氯化钠质量浓度、浸渍时间和蒸制时间3个因素进行单因素试验,根据其结果,每个因素选择3个水平进行正交试验,得到巴戟天炮制的最佳工艺为：用4%的氯化钠浸渍50 min,加热蒸制95 min,趁热除去木心。分别检测了利用该工艺得到的炮制样品和未炮制样品中的水晶兰苷和总蒽醌的含量,与原样相比,水晶兰苷的含量降低了7.18%,总蒽醌的含量降低了10.54%。试验获得了优化后的巴戟天炮制工艺,并为其炮制机制的解析提供了一定的依据。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

几种酒曲中游离氨基酸的测定

众所周知,酒曲中的蛋白酶是分解蛋白质的主要酶类;在它作用下,使蛋白质分解为氨基酸。这些氨基酸又经过不同微生物及其酶的作用,生成许多白酒中的香味成分。为了解酒曲中游离氨基酸的含量组成及在不同酒曲中的分布状况,为研究改进和提高名优白酒质量,提供分析手段。为此,进行了本项试验研究。实验部分     

酱油中游离氨基酸成分分析

采用高效液相色谱柱前衍生法对酱油中氨基酸的组成进行分析，结果表明市售酱油中氨基酸的组成与酿造酱油中氨基酸组成存在一定的差异，这是因为人为添加了鲜味剂，或者是使用植物蛋白水解液所致。经研究表明通过对酱油中氨基酸组成成分分析可以作为酿造酱油品质评价体系提供新思路。     

浅谈红葡萄酒陈酿中游离氨基酸的含量对风味的影响

本文就呈味氨基酸含理与贮存年份间的关系对红葡萄酒的风味的影响作一探讨。     

酶法辅助提取巴戟天多糖的工艺研究

应用单因素和正交试验探讨酶用量、酶解温度、时间和酶作用pH对巴戟天多糖提取率的影响.结果表明,纤维素酶能够显著提高巴戟天多糖的提取率,适宜提取工艺条件为温度55 ℃、pH 5.0、酶用量0.5%、提取时间2 h,此条件下多糖提取率为8.56%,为热水浸提法多糖提取率的1.91倍.     

树脂吸附对巴戟天多糖脱色脱蛋白的工艺研究

以脱色率、多糖保留率及脱蛋白率为指标,筛选合适的树脂对巴戟天多糖脱色脱蛋白,并进行静态及动态的工艺研究。确定最佳的工艺条件是:采用D941树脂,室温下(25℃),巴戟天多糖液pH值5.96(原液),以流速2 BV/h进行动态吸附。在此工艺条件下,脱色率为89.87%,多糖保留率81.08%,脱蛋白率50.75%,表明D941树脂具有良好的脱色效果和一定的脱蛋白能力。     

响应面法优化浙贝母氨基酸提取工艺及含量测定

采用响应面法优化浙贝母氨基酸提取条件,建立柱前衍生-超高效液相色谱法(ultra-performance liquid chromatography,UPLC)测定浙贝母鳞茎中14种氨基酸含量方法,比较不同产地栽前与栽后浙贝母鳞茎氨基酸含量差异性.采用6 mol/L HCl 8 mL,超声30 min,在110℃下水解...     

酸水解-全自动氨基酸分析仪测定方格星虫中氨基酸

目的:优化测定方格星虫氨基酸的实验条件。方法:研究以酸水解-全自动氨基酸分析仪分析法对海南东方方格星虫中18种氨基酸含量进行分析测定,为确保该实验结果的有效性与可行性,辅以线性关系,加标回收率实验,精密度实验,方法检出限的计算分析。结果:实验发现方格星虫样品中含有18种氨基酸,其中,鲜方格星虫中天门冬氨酸、精氨酸含量较高,分别为2.02%、1.26%,胱氨酸、色氨酸含量最低,分别为0.21%。方格星虫干中谷氨酸、精氨酸含量最高,分别为11.89%、7.94%,而胱氨酸、色氨酸含量最低,分别为0.45%、1.07%;结论:实验方案具备可操作性及数据有效性,仪器的精密度高,相对标准偏差在0.21%以下,检出限低,最低达到0.00000001 ng/kg,线性范围宽,且相关系数在0.9999以上,操作简便,结果令人满意。      

茶游离氨基酸总量测定方法的改进

对国家标准GB/T8314—2002中茶游离氨基酸总量测定方法存在的问题进行探讨,并针对存在问题从方法的原理、标准工作液配制、反应体系缓冲液的选择、加样量、样品分析中参比的选择等方面进行研究并提出改进措施。改进的游离氨基酸总量测定程序为:取茶汤或标准工作液1.0mL于25mL容量瓶中,分别加入pH6.81的1/15mol/L磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液0.5mL和20g/L茚三酮溶液0.5mL,在沸水浴中加热15min,冷却后加水定容至25mL,放置10min后,在570nm处测定吸光度。标准曲线测定以水代替标准工作液按同样操作作为参比,样品分析以水代替茚三酮溶液按同样操作作为参比。改进的方法在谷氨酸浓度为0.1～0.3mg/mL范围内呈现良好线性,精密度高、重复性好。     

游离氨基酸检测方法及其应用

游离氨基酸是动植物体中重要的活性成分和风味物质,随着现代科学技术的进步,游离氨基酸的检测方法多样且应用研究进展迅速,汇总整理各类检测方法及其相关应用不可或缺。综述了常用于检测分析游离氨基酸的分光光度法、离子色谱-积分脉冲安培法、氨基酸分析仪法、高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法5种方法,以及2种新技术,分析了各检测方法的原理及优缺点,并对各检测方法列举了相关应用研究。现代新型技术的发展和推广,多元化离子化方式、高分辨质谱、多级串联质谱等技术将会使游离氨基酸分析的灵敏度、准确度、分析速度及自动化程度均提高到一个崭新的水平,选择性好、准确度高、前处理简便的检测手段将是游离氨基酸检测分析技术的未来发展趋势。     

巴戟天多糖的理化性质及其对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响

以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,评价多糖提取物对成骨细胞增殖的影响。结果表明,巴戟天多糖属于酸性多糖,pH为6.15±0.13,相对黏度为1.26±0.12,具有糖的特性和三股螺旋结构,溶解性较好,不含蛋白质或多肽;巴戟天多糖提取物浓度为50 μg/mL时,MC3T3-E1细胞增殖率极显著增加(P<0.01),达149.67%,COLⅠ和OCN的分泌量极显著增加(P<0.01),分别增加44.98%和85.01%,ALP活性极显著提高(P<0.01),提高了258.95%。表明巴戟天多糖提取物能显著促进MC3T3-E1细胞增殖与分化。     

全自动氨基酸分析仪测定酱油中游离氨基酸的不确定度评定

该实验评定了全自动氨基酸分析仪测定酱油中游离氨基酸的不确定度。参考 CNAS-GL 006—2019《化学分析中不确定度的评估指南》和JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》中的规定与要求,分析游离氨基酸在测定过程中的各种不确定度来源。在包含因子k=2时,酱油中游离氨基酸的扩展不确定度范围为0.02～0.60 g/100 g。结果表明,影响不确定度的主要因素是仪器本身的不确定度和酱油重复性测量的不确定度。     

Influence of selected lab cultures on the evolution of free amino acids, free fatty acids and Fiore Sardo cheese microflora during the ripening

Fiore Sardo Protected Denomination of Origin is a traditional Sardinian (Italy) hard cheese produced exclusively from whole raw ovine milk and coagulated with lamb rennet paste. Currently, Fiore Sardo is still produced by shepherds at the farmhouse level without the addition of any starter culture and the cheese-making process is characterized by significant waste. The first objective of the present work was to investigate the autochthonous microflora present in milk and Fiore Sardo cheese in order to select lactic acid bacterial (LAB) cultures with suitable cheese-making attributes and, possibly reduce the production waste. Secondly, the ability of selected cultures to guarantee cheese healthiness and quality was tested in experimental cheese-making trials. In this study, we show that the typical lactic microflora of raw ewe's milk and Fiore Sardo cheese is mostly composed of mesophilic LAB such as Lactococcus lactis subsp. lactis, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus casei subsp. casei. Moreover, strains belonging to the species were selected for cheese-making attributes and used in experimental cheese-making trials carried out in different farms producing Fiore Sardo. The evolution of the cheese microflora, free amino acids and free fatty acids during the ripening showed that the experimental cheeses were characterized by a balanced ratio of the chemical constituents, by a reduced number of spoilage microorganisms and, remarkably, by the absence of production waste that were significant for the control cheeses.