大孔吸附树脂分离魔芋飞粉中ACE抑制肽工艺研究

采用大孔吸附树脂对魔芋ACE抑制肽进行分离,比较3种大孔吸附树脂对魔芋飞粉中ACE抑制肽的静态吸附和解吸效果,从中筛选出适合该魔芋ACE抑制肽分离纯化的树脂。结果表明,DA201-C型树脂最适合魔芋飞粉中ACE抑制肽的纯化。通过对影响树脂吸附解吸的各种因素进行系统地研究,确定工艺参数。最佳工艺参数为上样浓度8 mg/mL、pH 2.0、上样量8 mL、洗脱液乙醇体积分数80%、洗脱流速1.0 mL/min、洗脱时间2 h,在此条件下,分离得到的魔芋ACE抑制肽的抑制率为95.19%。     

棉籽蛋白源ACE抑制肽的制备过程中脱盐技术的研究

综合比较了001 ×7、201 ×7离子交换树脂、MWCO100透析袋和DA201-C大孔吸附树脂对棉籽蛋白水解液的脱盐效果,分析了DA201-C树脂脱盐对棉籽蛋白水解液ACE抑制活性和氨基酸组成的影响,并对Sephadex G-25分离纯化获得ACE抑制肽各组分进行活性测定.结果表明:DA201-C大孔吸附树脂的脱盐效果最好,控制流速为3 mL/min时,脱盐率可达到94.78％,氮回收率为86.32％,脱盐后疏水性氨基酸得到了有效富集,ACE抑制率显著提高.分离纯化后的ACE抑制肽各组分中,组分Ⅲ的抑制率最高,分子质量小于1000u.     

响应面法优化大孔树脂吸附发酵羊乳ACE抑制肽

血管紧张素转换酶(ACE)的活性过高是导致高血压的重要因素之一。ACE抑制肽可有效地抑制ACE的活性。为了制备高纯度的ACE抑制肽,考查不同截留分子量超滤膜对发酵羊乳中的ACE抑制肽的分离效果,比较4种树脂(AB-8、HPD-100、DA201-C、DM130)对ACE抑制肽的纯化效果,选择最佳树脂并对其纯化工艺参数进行优化。结果表明,经超滤分离后,ACE抑制肽主要集中在M1 ku组分中,其IC50值降到了0.348 mg/mL,ACE抑制率为86.91%,比超滤前ACE抑制率提高了5.61%;大孔树脂DA201-C最佳,静态吸附最佳工艺条件为上样pH2.15、上样浓度20 mg/mL、吸附率为(72.38±1.26)%,通过大孔树脂后IC_(50)值达到0.301 mg/mL,与超滤液相比IC50降低了0.047 mg/mL。     

DA201-C大孔吸附树脂静态吸附ACE抑制肽的研究

本实验通过静态吸附量和吸附率的测定确定血管紧张素转移酶(ACE)抑制肽分离富集的最适操作条件,考察了pH 值、盐浓度和乙醇浓度对ACE 抑制肽吸附性能的影响。结果表明,上样pH2.0 对ACE 抑制肽的脱盐效果最佳,70% 乙醇作为洗脱剂时效果最好,并且原样液的盐浓度保持不变。因此DA201-C 大孔吸附树脂综合性能较好,适合于ACE 抑制肽的分离纯化。     

苋籽ACE抑制肽的大孔树脂分离纯化

比较6种大孔树脂对苋籽ACE抑制肽的吸附-解吸效果,从中筛选出合适该活性肽分离纯化的树脂,并对其吸附-解吸工艺进行优化.结果表明,DA201-C树脂最适合苋籽ACE抑制肽的纯化,在样品质量浓度10mg/mL,pH为5,上样量1BV,流速6mL/min时,树脂的吸附效果最佳,吸附率达83.69％,再用5BV体积分数75％乙醇,以5mL/min的流速进行洗脱,此时几乎把吸附的多肽全部洗脱下来,解吸率为98.69％.经树脂纯化,样品的蛋白纯度为89.47％,脱盐率为88.86％,短肽含量提高了20.96％,ACE抑制活性提高了27.91％.     

大豆肽的离子交换色谱分离及其活性评价

采用Sephadex C-25阳离子交换剂对经过DA201-C型大孔吸附树脂脱盐、乙醇梯度洗脱(75%乙醇洗脱组分)的Alcalase水解大豆肽(DH14%)进行进一步的分离纯化,并对分离得到的各组分ACE抑制活性进行了评价。试管试验确定的SephadexC-25色谱分离条件为:上样量0.004g/mLIE,起始缓冲液为1M醋酸,上样吸附率为61.19%。经SP-Sephadex C-25分离得到6个组分,其中未吸附的3个组分ACE抑制活性低,但NaCl梯度洗脱的3个组分ACE活性均为60%左右,从纯化ACE抑制活性肽的角度考虑,分离效果比SephadexG-15差。     

葵花籽粕ACE抑制肽分离纯化及其性质研究

以葵花籽粕血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽为原料,采用DA201-C大孔吸附树脂对其进行分离纯化,并对纯化后的葵花籽粕ACE抑制肽稳定性和活性进行了分析。结果表明:葵花籽粕ACE抑制肽最优纯化工艺为乙醇浓度70%、上样p H 5、上样流速2 BV/h、洗脱流速2 BV/h,在此条件下,得率为93.26%,纯化后的葵花籽粕ACE抑制肽的抑制率为92.23%±0.48%。葵花籽粕ACE抑制肽对热和金属离子均具有良好的稳定性,模拟体内消化实验显示其活性不受胃肠酶的影响。     

燕麦ACE 抑制肽的分离纯化及其活性研究

通过对3 种大孔吸附树脂的比较,选择DA201-C 树脂对燕麦ACE 抑制肽进行纯化。纯化后的燕麦肽产物的ACE 抑制率达到92.86%,利用HPLC 测得纯化后燕麦ACE 抑制肽的分子质量分布在240.10～1292.11D 之间,这部分物质在整个纯化产物中占99.82%。采用SephadexG-15 凝胶分离燕麦ACE 抑制肽得到D峰,其IC50 为0.103mg/mL,分子质量545D。采用大孔吸附树脂及凝胶层析法能够较好地分离纯化燕麦ACE 抑制肽。     

DA201-C大孔吸附树脂对腐乳多肽脱盐作用的研究

为去除腐乳中的盐分,利于其中活性肽的分离纯化,以腐乳多肽的回收率为指标,采用DA201-C大孔吸附树脂对超滤的水溶性低聚肽的脱盐工艺进行了研究。结果表明:DA201-C大孔吸附树脂对腐乳多肽较佳的脱盐工艺条件为上样浓度45 mg/mL、洗脱流速120 mL/h、解吸剂为70%乙醇。腐乳多肽经DA201-C大孔吸附树脂处理后脱盐率达到98.19%,肽回收率大于90%,抗氧化活性得到提高。利用DA201-C大孔吸附树脂是进行腐乳多肽脱盐处理的一种简便有效方法。     

大孔树脂纯化苜蓿叶蛋白肽的工艺优化

通过对比6种大孔树脂对苜蓿叶蛋白肽吸附效果,筛选最佳大孔吸附树脂,并研究其对苜蓿叶蛋白肽的吸附—解吸特性。试验结果表明,纯化苜蓿叶蛋白肽的最适大孔吸附树脂为DA201-C型,最佳工艺条件为:上样流速0.5mL/min,上样浓度10mg/mL,75%乙醇溶液为洗脱剂,洗脱流速0.5mL/min,洗脱体积200mL。在该条件下苜蓿叶蛋白肽含量较最初提高了46.95%,糖含量降低了81.88%,盐和其他杂质含量降低了70.97%。DA201-C型大孔吸附树脂对苜蓿叶蛋白肽有较好的纯化效果。     

大孔吸附树脂纯化重组降血压肽VLPVPR的研究

考察大孔吸附树脂(DA201-CⅡ,D4020和HPD100B)对重组降血压肽VLPVPR的吸附性能及纯化效果,确立纯化VLPVPR的优化工艺。通过大孔树脂静态吸附解吸及动态吸附解吸实验,结果表明DA201-CⅡ最适于VLPVPR的纯化。最优纯化工艺为:样品pH9.8,上样流速为2mL/min,上样量为100mL,70%乙醇洗脱75mL,洗脱流速为2.7mL/min。该条件下VLPVPR的回收率为96.9%,纯度为27.4%。     

大孔吸附树脂对草鱼蛋白水解液脱盐的作用

为了脱除草鱼蛋白水解液中的盐,本研究筛选了4 种型号大孔吸附树脂DA201-C、DA201-M、SQT-67和D002,对水解液中草鱼多肽的吸附能力进行测定,并进行静态吸附和解吸实验。结果表明：大孔吸附树脂DA201-C对草鱼多肽的吸附效果较好,其吸附量随草鱼多肽质量浓度的增加而增加;体积分数75%的乙醇对大孔吸附树脂DA201-C的洗脱效果最佳;DA201-C大孔吸附树脂对水解液脱盐的最佳条件为上样流速0.5 BV/h,上样质量浓度为30 mg/mL,水清洗速率为2 BV/h,洗脱采用体积分数75%的乙醇以2 BV/h的流速洗脱,在此条件下大孔吸附树脂DA201-C对水解液的脱盐率达97.17%。     

核桃蛋白ACE抑制肽分离纯化研究

核桃ACE抑制肽经超滤后,其ACE抑制率由76.58%增至78.43%,再经DA201-C大孔吸附树脂脱盐纯化后,脱盐率达到98.70%,ACE抑制率升高至80.73%;采用Sephadex G-15凝胶分离后,核桃ACE抑制肽被分为三个组分,其中活性最大的G2组分,其ACE抑制率达83.10%,且IC50为1.308 mg/mL,G2组分主要分布在500 Da¹80 Da,系为2180 Da,系为2⁴个氨基酸残基组成小肽。     

大孔树脂对罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽脱盐作用的研究

为了探索罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳脱盐工艺,本文采用DA201-C大孔吸附树脂对抗氧化肽进行脱盐试验。结果表明:DA201-C大孔吸附树脂对抗氧化肽的静态吸附率和吸附量分别为82.56%和54 mg/g;动态吸附和解吸最佳的上样浓度为60mg/mL,最佳上样流速为1 mL/min,解吸剂为75%乙醇。抗氧化肽经过DA201-C大孔吸附树脂处理后脱盐率为97.13%,回收率为81.16%,质量浓度为0.245 mg/mL时对ABTS自由基的清除率提高至39.58%。采用DA201-C大孔吸附树脂对罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽进行脱盐处理是一种简便有效的方法。     

4种大孔吸附树脂对阿胶低聚肽的脱苦效果研究

阿胶水解所得阿胶低聚肽具有极强的苦味严重影响其口感。为降低阿胶低聚肽苦味,采用AB-8、DA201-C、DA-201C和D101等4种不同规格大孔吸附树脂对阿胶低聚肽进行脱苦研究,经静态、动态吸附和解吸试验考察4种树脂对阿胶低聚肽的吸附、解吸和脱苦效果,并研究分离前后样品氨基酸组成和分子量分布的差别。结果表明:DA201-C型大孔吸附树脂对阿胶低聚肽的脱苦效果优于其他3种树脂,且用体积分数为25%的乙醇洗脱组分苦味较分离前显著降低,洗脱组分得率为91.07%;且分离后的阿胶低聚肽组分中疏水性氨基酸的百分含量与分离前相比降低,分子质量分布在87.56 Da~1 874.85 Da之间。综合评价DA201-C大孔吸附树脂综合对阿胶低聚肽苦味脱除性能较好,适合阿胶低聚肽的脱苦。     

大孔吸附树脂对酪蛋白非磷肽吸附性的研究

从12种大孔吸附树脂中筛选出一种对酪蛋白非磷肽(NPP)吸附性能强的树脂DA201-C,利用这种树脂研究了从缓冲液中纯化酪蛋白非磷肽。研究结果表明,NPP溶液的pH、NPP溶液流过吸附柱的速度、洗脱剂乙醇的浓度等因素都对NPP的回收率有影响。采用DA201-C大孔吸附树脂纯化NPP,回收率可达95.51%。     

利用大孔吸附树脂纯化花生水解蛋白

以水酶法制油工艺得到的花生水解蛋白为原料,从5种大孔吸附树脂中筛选出对花生水解蛋白中可溶性肽有较好吸附效果的DA201-C作为纯化树脂对其进行纯化。静态吸附试验表明,DA201-C对花生水解蛋白中可溶性肽有较好的吸附作用,能有效除去糖类杂质。DA201-C对可溶性肽吸附平衡时间为3 h,75%的乙醇解吸效果最好,解吸率为83.24%。动态试验结果显示,以pH为3的稀HAc溶液配制花生水解蛋白液能提高吸附率;解吸时,先用5BV去离子水洗去糖类杂质,再收集6BV75%乙醇洗脱的肽,水解蛋白中肽回收率为79.24%,除糖纯化后水解蛋白含量提高了近20%。     

大孔吸附树脂对麦胚肽的吸附特性研究

从大孔吸附树脂对麦胚肽的静态吸附率与解吸率考察了9种树脂的吸附性能，DA201—C大孔吸附树脂吸附特性优于其它8种树脂；吸附流速、麦胚肽的浓度及不同离子强度的样品溶液等对大孔吸附树脂动态吸附性能有影响；DA201-C大孔吸附树脂对麦胚肽的脱盐率为92．13％，麦胚肽的回收率为78．55％：利用不同浓度乙醇可将麦胚肽段按疏水性大小进行初步分离纯化，具有最大疏水性值的75％乙醇洗脱组分清除超氧阴离子自由基（听）的能力最强，其IC50为490．49μg/mL。     

采用大孔树脂纯化燕麦酶解产物的研究

利用DA201-C大孔吸附树脂对燕麦肽酶解产物进行脱盐及糖原分离纯化。结果表明,用25%乙醇洗脱时效果较好,过程较容易控制;通过测定凝胶层析色谱分析纯化前后样品的分子量的分布状态,验证了大孔吸附树脂DA201-C较好的脱盐及脱糖效果。最后,使用高效液相色谱精确测定纯化后产物的分子量在438.56至1301.01之间。     

薏苡仁肽纯化的初步研究

研究了由蛋白酶酶解薏苡仁得到多肽,然后通过对DA201-C、XAD-1600、XAD7HP三种树脂在静态吸附过程中对薏苡仁酶解产物的吸附率随时间的变化规律进行测定,可知最大吸附率分别达到46·06%、36·93%、16·93%。在树脂的动态吸附过程中以1BV/h上样时的纯化效果最好,吸附率达到97·6%。因此,可以确定以DA201-C大孔树脂纯化薏苡仁酶解产物的效果最佳。最佳动态解吸条件:上样液pH为5,上样流速1BV/h,75%乙醇作为解吸液。然后利用HPLC测定树脂纯化后薏仁肽的相对分子质量分布,确定了纯化后的薏苡仁肽的分子量分布在278·61～943·32之间。