河豚毒素的研究进展

河豚毒素是河豚中的有毒物质,是毒性很强的神经性毒素.对河豚毒素的性质、来源、作用机制、检测方法以及应用等几个方面做了较详细的阐述,为河豚毒素的进一步研究提供理论依据.     

水产品中河豚毒素检测技术研究进展

河豚毒素是河豚鱼及其他生物体内含有的一种内源性生物碱, 是自然界中所发现的毒性最大的神经毒素之一, 被认为是自然界中毒性最强的非蛋白类毒素。自从2016年9月有条件放开养殖红鳍东方鲀和养殖暗纹东方鲀加工经营后, 水产品中河豚毒素含量的准确测定, 已经受到了越来越多的关注。本文综述了水产品中河豚毒素含量色谱、质谱检测技术的最新研究进展, 着重总结了样品前处理技术和分析检测技术, 并对各种样品前处理技术和检测技术的优缺点进行了探讨。     

河豚毒素及其发酵生产的研究进展

河豚毒素(tetrodotoxin,TTX) 常见于河豚体内,是一种毒性很强的氨基全氢化喹唑啉化合物。它是世界上最致命的生物毒素之一,同时也是对神经有选择性作用的强效麻醉药和戒毒良药。因此,科研人员在弄清TTX的产生途径及产生菌后,正在竭力研究其生产工艺及高产方式,以使其显著的医药学价值为人类所用。本文综述TTX 的起源、理化性质及其生物活性等基本特性,并重点介绍近年的研究方向和热点问题,即TTX 的产生菌和发酵生产等方面的研究。     

河豚毒素DNA适配子的制备及应用

人工合成78 个碱基的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化技术与诱变聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）结合的方法,通过筛选富集、克隆、测序,获得了与河豚毒素（tetrodotoxin,TTX）特异结合的单克隆DNA适配子A3。DNA适配子A3的二级结构主要为茎环结构,与TTX的亲和力为1.254。对适配子和TTX结合的磷酸盐缓冲液pH值、荧光染料结合时间进行优化,结果表明,最适pH值为7.5,最佳结合时间为10 min。建立的快速筛选检测TTX的DNA适配子-荧光染料法对TTX的检出限为10－6 mo1/L。     

毒蕈中α-鹅膏毒肽的中毒机制及检测技术研究进展

α-鹅膏毒肽是毒蕈中分布广、 含量高且毒性极强的蘑菇毒素, 性质十分稳定, 一般的加热烹饪方式难以使之失活, 误食含有该毒肽的毒蕈可引发中毒效应, 具体表现为呕吐、腹泻等严重胃肠道反应甚至可导致肝肾功能衰竭, 其发病迅速且目前没有特效药可以解毒, 对食品安全和人类的生命健康安全造成了极大的威胁。 传统的检测方法存在设备不便携、成本昂贵、检测速度慢等弊端, 因此, 通过了解α-鹅膏毒肽的致毒机制和建立准确、高效、便捷的检测技术可及时检出α-鹅膏毒肽,从而有效防范毒蕈中毒事件的发生。 本文简要综述了α-鹅膏毒肽的中毒症状、 中毒机制、 现有的解毒方式, 着重阐述了α-鹅膏毒肽的检测技术研究进展, 并对未来快速免疫检测技术的发展进行了展望, 以期为治疗鹅膏毒蕈中毒和保障人类的生命健康安全提供有效的帮助。     

生物毒素和中毒控制中常见毒物快速测定技术研究简介

为改变生物毒素和中毒控制领域常见毒物的检测缺乏快速、灵敏、简便技术的现状，选择该领域有代表性的难新问题进行攻关。分别建立了检测粮油食品中AFB1的2个ELISA方法，最低检出浓度分别为0．01μg／kg和0．1μg／kg，回收率均在80％以上，同时研制出拥有我国自主知识产权的2个AFB1ELISA试剂盒，建立了2条年产量分别为1．5万盒和2000盒的生产线。建立了检测河纯鱼中河豚毒素的直接和间接ELISA方法，最低检出浓度分别为0．1μg/L和1μg／L，回收率均高于70％。研制出基于直接法的河豚毒素ELISA试剂盒，筛选出了国产可食的河纯鱼种。建立了检测粮食中伏马菌素B1的ELISA方法，最低检出浓度为5μg/L，回收率75．24％～117．65％，研制出检测伏马菌素B1的ELISA试剂盒。建立了食品和中毒样品中亚硝酸盐、甲醇等20种毒物的快速检测方法，所建方法与国标法相比检测结果差异无显性，但检测时间缩短50％以上、检测成本降低80％～95％。自行设计研制出便携式智能化微型光电比色仪和光反射传感器，与建立的20种毒物快速检测技术配套使用，实现了中毒样品的现场智能化、自动化快速定量检测。研制出携带方便、便于中毒现场使用的毒物检测箱，建立了一条年产量2000套的生产线。整个课题申请专利5项，批准2项；获奖2项；产生2项国家标准和1项企业标准。在国内外杂志上共发表章28篇。快速检测技术各项指标均达到国际同等、国内领先水平。     

抗河豚毒素单克隆抗体联酶前纯化条件优化的研究

目的 了解不同辛酸浓度下盐析法、不同离心力对抗河豚毒素(TTX)单克隆抗体的纯化效果以及纯化后酶标抗体性能的影响,优化出纯化抗TTX单克隆抗体的方法,为免疫学方法检测TTX提供依据.方法 在传统辛酸-硫酸铵蛋白纯化方法的基础上进行改进,考察不同的辛酸浓度、不同的离心力对抗TTX单克隆抗体纯化效果的影响,并将纯化后抗体与辣根过氧化物酶(HRP)连接,用间接竞争酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测酶标抗体的生物学活性及各项性能指标并比对.结果 不同方法纯化获得的抗体及其酶结合物的各项指标参数、活性不同,当腹水稀释液与辛酸体积比为1 000∶11、纯化过程中离心力10 000 r/min时纯化获得的抗体虽然产量有所下降但纯度较高,酶标抗体的生物活性、各项指标均最优.结论 经过对抗TTX单克隆抗体纯度、抗体中蛋白含量、酶标抗体各项性能指标的对比,优化出用于抗TTX抗体纯化用腹水稀释液与辛酸比值1 000∶11 (V/V)、离心力10 000 r/min的试验条件.     

大豆皂苷化学结构及分析方法的研究进展

大豆皂苷是豆科植物特别是大豆的主要活性成分之一,目前已经应用到食品、化妆品及药品各个领域。目前根据其苷元结构类型,以C-21,C-22及C-29的官能团不同,把大豆皂苷归纳为三类,分别为A型、B型及Sg-6型。为了便于分析和归纳,本文把大豆皂苷细分为大豆皂苷A、B、DDMP、E、H、I、J等。因大豆皂苷应用广泛,分离检测手段也越来越多。根据大豆皂苷定量定性原则为基础,将分析型检测手段分为两种,一种是分离型检测型的定量手段:如包括薄层色谱(Thin Layer Chromatography)、高效液相(HighPerformanceLiquidChromatography)、超高压液相(UltraPerformanceLiquidChromatography)、气相(Gas Chromatography);另一种是基于不进行分离的定性分析的检测方法:核磁共振技术(NuclearMagneticResonance)、高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography)、质谱(Mass Spectrometry)、代谢组学指纹图谱、免疫方法分析组成。值得注意的是质谱联用技术既是重要的定性手段也是常用的定量手段。本文对大豆皂苷的化学结构、检测分析方法进行了综述研究,并对其未来的应用做出了探讨。     

建筑工程结构检测技术研究进展

随着时代的发展,我国建筑工程行业取得了飞速进步,因而建筑工程结构检测技术也有了一定的发展和突破。对于建筑检测工作来说,建筑结构检测是极其重要的一部分。以建筑物的坚韧度、稳定性以及结构强度为出发点,进而对建筑物进行检测就称之为建筑结构检测：笔者从实际情况出发对结构检测技术的发展特点进行了深入分析,并研究了当前主要结构检测技术的运用情况,最后进一步对新型的结构检测技术做了介绍。     

污染的检测和防治

微生物管理对啤酒质量有着十分重要的影响。啤酒生产中的污染微生物以微好氧和兼性厌氧菌为主。糖化过程主要污染耐热型乳酸菌；麦汁冷却过程、接种酵母初主要污染大肠菌群、醋酸菌、麦汁细菌等好氧和微好氧菌；发酵过程主要污染微好氧、兼性厌氧、厌氧菌，如各种乳酸菌、足球菌、发酵单胞菌     

Identification of Tetrodotoxin and Fish Species in an Adulterated Dried Mullet Roe Implicated in Food Poisoning

ABSTRACT: There was 1 victim of neurotoxic food poisoning from an adulterated dried mullet roe in Kaohsiung, Taiwan, in March 2001. The victim exhibited typical neurotoxic symptoms. The residue of dried mullet roe retained by the victim was assayed for toxicity and mitochondrial DNA. Its toxicity was 3450 mouse units per gram. The toxin was partially purified and identified as tetrodotoxin and derivative. The sequence of the 376‐nucleotide region in the cytochrome b gene of the mitochondrial DNA exhibited the same genotype and the same restriction site for SapI as that of the toxic puffer fish Lagocephalus lunaris.     

河鲀毒素生物传感器的研究

基于河鲀毒素(TTX)对细胞膜Na+通道的阻断作用,建立一种检测TTX的简易组织生物传感器。组织生物传感器由pNa电极、青蛙膀胱膜、电位计等构成。在pNa电极顶端用两层醋酸纤维薄膜包裹,中间夹入青蛙膀胱膜,构成感受器。将电极插入pNa=4的NaCl溶液中,使电极输出信号趋于稳定。将TTX被测液注入感受器系统,测定感受器输出量的抑制值。每次测定只需5min。最低检出限为0.002MU/ml(3.56×10-3μg/ml)。用0.003%Na3N保存,可连续使用250h。以生物传感器和小鼠生物试验法比较,建立了工作曲线,便于在餐饮企业对原料鱼进行检测和应用。     

Identification of Toxin and Fish Species in Cooked Fish Liver Implicated in Food Poisoning

ABSTRACT: The cooked fish liver retained by the victims was assayed for toxicity and mitochondrial DNA. Meanwhile, 8 live specimens of puffer Takifugu niphobles were also assayed. The toxicity of cooked fish liver was 280 ± 20 mouse units per gram (MU/g). All specimens of T. niphobles showed high toxicity (more than 850 MU/g) in the liver. The toxin from cooked fish liver and liver of T. niphobles was identified to be tetrodotoxin. The cooked fish liver and fresh liver of T. niphobles showed the same sequence genotype and the same single restriction site for Bsa I. Therefore, the species of cooked fish liver was suggested as T. niphobles.     

抗炎低聚糖的制备及其抗炎机制研究进展

炎症是机体对各种致炎因素及损伤的一种防御反应,也是许多慢性疾病发生的关键因素.研究表明低聚糖具有抗炎、抗菌、抗氧化和抗癌等多种生理活性.作为新型功能性糖源,低聚糖具有低热量、高溶解度、促进双歧杆菌增殖等特点.本文对近年来具有抗炎活性低聚糖的种类和制备方法进行介绍,并从炎症介质和炎症信号通路两方面对其抗炎机制进行综述,以...     

鼠李糖乳杆菌对河豚毒素的免疫活性消减作用方式

为探究鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)对河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)免疫活性的消减作用方式和可能作用位点,分别采用活化、热灭活和破碎的鼠李糖乳杆菌以及去除胞外多糖、原生质体、细胞壁和肽聚糖的分离样品,与TTX标准品在37℃孵育1h,使用竞争性酶联免疫吸附法分析作用前后TTX...     

河豚毒素DNA适配子的筛选与结构分析

人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和二级结构,并测定克隆子与河豚毒素的亲和力。结果表明:与河豚毒素结合力高的DNA适配子经过10轮筛选后得到富集,成功筛选到最高亲和力的DNA适配子G10。     

亚硝酸盐致小鼠急性中毒肝损伤机理探讨

目的：研究探讨亚硝酸盐急性中毒小鼠肝损伤作用及机理。方法：将小鼠随机分为正常对照组、亚硝酸盐低、中、高剂量组。采用分光光度法测定小鼠肝组织的丙二醛(MDA)、谷光甘肽(GSH)的含量以及谷丙转氨酶(ALT)的活性;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果：与正常对照组比较,亚硝酸盐各组小鼠肝脏MDA含量明显增高,以中、高剂量组差异显著(p＜0.05和p＜0.01);转氨酶ALT活性均明显降低(p＜0.01),GSH含量均有所增高,以低剂量组差异显著(p＜0.01),结果呈现随亚硝酸盐剂量增加MDA含量增高、ALT活性及GSH含量下降的趋势。同时SOD、LDH的同工酶电泳结果显示, SOD和LDH的酶活随着亚硝酸盐剂量增高而明显下降。结论：亚硝酸盐急性中毒,可导致小鼠肝组织受损,其损伤程度随剂量增加而加重,损伤机理与肝脏严重缺氧和自由基增多有关。     

发酵牛肉中金黄色葡萄球菌食物中毒缺失机制研究进展

本文介绍发酵牛肉金黄色葡萄球菌食物中毒缺失机制这一现象,国内外关于这种机制已经进行过部分研究,但是并没有作明确的解释,仍有待深入探讨。研究这一机制对于预防金黄色葡萄球菌食物中毒具有重大现实意义。     

番茄红素标准品的制备

采用番茄酱作原料,经0.5 mol/L NaOH溶液40℃皂化,体积分数95%乙醇洗涤,乙酸乙酯40℃提取,得到番茄红素提取液。提取液经40℃减压浓缩,0℃结晶和重结晶,每千克番茄酱可得到纯度>99%的番茄红素标准品100mg左右。该标准品制备方法操作简单,有助于番茄红素高效液相色谱测定法的普及和推广。