副干酪乳杆菌VL8产胞外多糖条件优化及其抗氧化性质

Viili为芬兰传统混菌发酵乳制品,具有较强的保健功能。在前期从Viili中分离得到1株副干酪乳杆菌的基础上,进一步探究营养条件和培养条件对其产胞外多糖的影响,并对胞外多糖的抗氧化性质进行研究。结果表明:优化的营养条件:果糖添加量2%,大豆蛋白胨2.5%,柠檬酸三铵0.4%,在此条件下胞外多糖的产量为193.99 mg/L,比未优化前提高2.6倍。优化的培养条件:接菌量4%、培养时间28 h、温度32℃,此条件下胞外多糖产糖量达263.74 mg/L,比之前高36%。当胞外多糖的质量浓度为200μg/m L时,对脂质过氧化的抑制率最高达24.52%,对羟基自由基的清除率达41%,与质量浓度为200μg/m L的VC的清除能力相差无几。     

冬虫夏草原生质体诱变育种研究

以冬虫夏草原生质体为材料,经紫外诱变获得了性状优于出发菌株的突变株。实验结果表明:生物量最高的再生菌株为诱变30s的8号菌株,生物量达到1.3445g/100mL,比出发菌株生物量提高55.16%;胞内多糖产量最高的再生菌株为诱变30s的3号菌株,胞内多糖产量达到54.570mg/g,比出发菌株多糖产量提高52.9%;富硒能力较高的突变菌株是诱变30s的8号菌株,富硒量达到125.8μg/g,比出发菌株提高50.11%。由结果可知,原生质体诱变技术可以用于冬虫夏草的菌种选育。     

α-萘乙酸对黑脉羊肚菌生物量、胞内多糖含量及多糖抗氧化性能的影响

在黑脉羊肚菌液体发酵培养基中添加不同浓度的α-萘乙酸(NAA),考察NAA对黑脉羊肚菌生物量及胞内多糖含量的影响,并对多糖的抗氧化性能进行了研究。结果表明:适当浓度的NAA能够提高黑脉羊肚菌生物量及胞内多糖含量,在其浓度为2.0μg/mL时,菌丝体干重和每克干菌丝体胞内多糖含量达到最大,分别为9.873 g/L和429.5 mg,与不添加NAA相比,分别增加了34.89%和15.68%;添加适当浓度的NAA也能提高胞内多糖对DPPH自由基的清除作用,但是降低了其对羟基自由基的清除作用。     

树舌富锗深层培养研究

研究了不同浓度的锗对树舌液体培养生物量、菌丝体中有机锗、胞内多糖、腺苷及胞外多糖等主要活性成分含量的影响。结果表明,锗浓度在50~250μg/mL的范围内,对树舌菌丝体主要活性成分合成有很好促进作用,在锗浓度为250μg/mL时,生物量、有机锗、胞内多糖、腺苷均达最高,分别为15.44g/L、588μg/g、24.88mg/g、1.41mg/g,分别比对照组提高了33.1%、1267.4%、73.9%、101.4%。胞外多糖含量在锗浓度为150μg/mL时达到1.12g/L,比对照组提高了31.7%。     

富锗树舌胞外多糖的体外抗氧化活性研究

利用树舌为材料通过液体深层富锗培养获得富锗胞外多糖,测定了树舌富锗胞外多糖中锗含量及其抗氧化活性,即清除氧自由基、羟自由基、DPPH自由基、亚硝酸盐的能力和总还原力,并以维生素C(Vc)作为阳性对照。实验结果表明:树舌富锗培养基内锗质量浓度为150μg/mL时,可显著提高胞外多糖的产量,使胞外多糖产量达到1.12 g/L,比对照组提高36.62%。同时胞外多糖中的有机锗含量也得到显著提高达到0.26 mg/g,比对照组提高116.67%。有机锗对提高胞外多糖清除氧自由基、羟自由基、DPPH.、亚硝酸盐的能力及总还原力有显著的促进作用,在多糖浓度为2.5 mg/mL时,分别比对照提高25.52%、31.83%、26.95%、16.38%和10.36%。富锗树舌胞外多糖抗氧化活性与多糖浓度呈明显的剂量-效应关系。     

中草药提取液对冬虫夏草深层培养的影响

试验了11种中草药提取液对冬虫夏草液体培养生物量和多糖产量的影响。结果得出：这11种中草药水提液除川牛膝、黄精、山药对冬虫夏草的生物量有抑制作用外，其它几种中草药均有促进作用，增幅范围在0．007-0．94倍。该11种中草药均对冬虫夏草胞外多糖的产量有促进作用，其胞外多糖增幅在0．09～0．88倍；中药醇提液除川牛膝、石斛、黄芪对冬虫夏草的生物量有抑制作用外，其它几种中药促进作用的增幅在0．16～0．67倍。除山药和黄芪外均能提高冬虫夏草胞外多糖的产量，它的增幅在0．03～0．73倍。通过比较，最后实验了当归、党参、枸杞子、川牛膝的最适添加量，前三者在150g／L，后者在50g／L。在此条件下，生物量最大分别可达26．13、22．14、23．55、15．83g／L，胞外多糖的最大产量分别达到7160．2、7580．3、6830．5、6583．6g／L。以上11种中药对冬虫夏草胞内多糖也有一定的促进作用，但增幅不大。     

树舌富锗深层培养研究

研究了不同浓度的锗对树舌液体培养生物量、菌丝体中有机锗、胞内多糖、腺苷及胞外多糖等主要活性成分含量的影响。结果表明,锗浓度在50~250μg/mL的范围内,对树舌菌丝体主要活性成分合成有很好促进作用,在锗浓度为250μg/mL时,生物量、有机锗、胞内多糖、腺苷均达最高,分别为15.44g/L、588μg/g、24.88mg/g、1.41mg/g,分别比对照组提高了33.1%、1267.4%、73.9%、101.4%。胞外多糖含量在锗浓度为150μg/mL时达到1.12g/L,比对照组提高了31.7%。      

裂褶菌胞外多糖的硫酸化修饰及红外表征

通过对提取出的裂褶菌胞外多糖的硫酸化修饰获得硫酸化多糖,用红外光谱检测硫酸化的结果。邻苯三酚自氧化法对多糖和硫酸化多糖的抗氧化活性进行了比较。随着多糖溶液浓度的增加,胞外多糖和硫酸化胞外的抗氧化活性也增强.当多糖溶液浓度为500μg/m L时,硫酸化胞外多糖对氧自由基的清除率达到32.73%,提高了28.88%。     

稀土元素镨、钕、铒对红菇多糖深层发酵的影响

研究了稀土元素镨、钕、铒对红菇深层发酵中红菇菌丝生物量、胞外多糖(EPS)、胞内多糖(IPS)、总多糖(TPS)、最终pH和多糖产率的影响。研究结果显示:稀土元素显著影响着菌丝生物量、EPS、IPS、TPS、最终pH和多糖产率;其影响水平受限于稀土元素的种类和稀土元素含量,适当剂量的稀土元素镨、钕具有促进红菇菌丝体生长作用和代谢产物的积累,而过高浓度的稀土元素则会造成对细胞生长和多糖产物抑制作用。在添加适宜的剂量稀土元素镨时能够获得较高的生物量、胞外多糖产量、胞内多糖产量、总多糖和胞外多糖产率,其分别达到24.63±0.62g/L、1.730±0.065g/L、79.03±0.00mg/g、3.511±0.028g/L、7.60%±0.15%。     

多功能针式过滤器-高效液相色谱法快速检测豆芽中的吲哚乙酸

基于Qu ECh ERS原理,该研究建立了多功能针式过滤器-高效液相色谱法快速检测豆芽中的吲哚乙酸。样品经1%乙酸乙腈和1 g氯化钠、2 g硫酸镁提取,多功能针式过滤器快速净化后,采用ZORBAX SB-C₁₈(4.6×250 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈和0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温:35℃,检测波长:267 nm,对提取净化液中吲哚乙酸含量进行高效液相色谱检测。吲哚乙酸在豆芽基质中基质效应较小,故使用纯溶剂配制的标准曲线进行定量。结果显示,吲哚乙酸在0.05~10.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9999。在0.1~5.0mg/kg的加标水平范围内得到的平均回收率为80.6%~105.3%,相对标准偏差(RSD)是2.3%~4.6%。检出限为0.03μg/kg,定量下限为0.1μg/kg。该方法操作简单、准确可靠,适用于豆芽中吲哚乙酸残留量的快速检测。     

果味冬虫夏草饮料的研制

冬虫夏草深层发酵菌丝体粉水提液抗氧化活性低、口味差,限制其在营养保健型饮料中的应用.采用添加0.02g/L异抗坏血酸钠增加抗氧化活性,0.15g/L葡萄香精调节口感,开发一种冬虫夏草饮料.感官分析表明:该饮料呈浅棕黄色、酸甜适中,具有葡萄汁的香味、无异味.抗氧化活性测试表明:其清除DPPH自由基的能力和还原力均高于韩国冬虫夏草饮料.     

富锌冬虫夏草菌丝体有机化程度及氨基酸含量分析

对冬虫夏草进行液体富锌培养 ,结果表明 ,培养基中适宜添加锌浓度为 1 5 0 μg/mL ,此时菌丝体生物量达到 1 0 7g/L ,菌丝体含锌量为 4875 1 μg/g ,富锌率为 3 4 0 5 % ,有机化程度达到76 3 3 %。分析氨基酸含量 ,富锌冬虫夏草菌丝体中氨基酸含量比对照明显增加 ,说明锌能促进其氨基酸生物合成。     

蛹虫草子实体中类胡萝卜素的提取及抗氧化活性

在比较蛹虫草子实体类胡萝卜素的溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、酸热提取法的基础上,对蛹虫草子实体中类胡萝卜素的提取工艺进行了优化,并分析了类胡萝卜素的体外抗氧化活性。实验结果表明:酸热提取法是几种常见提取方法中类胡萝卜素提取得率最高的一种方法;酸热法最优提取工艺为:盐酸浓度为1 mol/L,盐酸用量为20 m L/g,酸浸时间为30 min,热处理时间为5 min,蛹虫草中类胡萝卜素的得率达到1387μg/g。抗氧化实验结果显示:蛹虫草子实体中类胡萝卜素具有较好的体外抗氧化活性,在0~10 mg/m L的浓度范围内抗氧化能力随着类胡萝卜素浓度的提高而增加。4 mg/m L类胡萝卜素的DPPH自由基清除率达到96.57%,类胡萝卜素对铁离子螯合能力的EC50值为3.26 mg/m L,且还显示出了较好的还原能力。      

柠檬明串珠菌TD1产胞外多糖条件的响应面法优化及其抗氧化性研究

以柠檬明串珠菌（Leuconostoc citreum）TD1为供试菌,采用响应面法优化该菌株产胞外多糖（EPS）条件,并对其胞外多糖的 抗氧化性进行研究。 结果表明,菌株TD1产胞外多糖的最优条件为蔗糖109 g/L、Ca2+ 0.2 mmol/L、无水乙酸钠6.7 g/L。 在此优化条件 下,EPS含量为（57.58±2.04） g/L,是优化前（32.71 g/L）的1.76倍。分别测定上述发酵条件获得的粗EPS的抗氧化能力,结果表明,菌株 TD1所产的胞外多糖具有良好的体外抗氧化活性,随着浓度的增加清除能力亦增强,对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由 基和NO2清除率分别为（55.23±2.18）%、（95.34±2.33）%、（56.61±3.09）%和（5.32±0.18）%。     

干酪乳杆菌KW3产胞外多糖的研究

从西藏农家开菲尔粒中筛选出1株高产胞外多糖(EPS)的乳酸菌KW3,生理生化试验和16S rDNA测序结果经鉴定其为干酪乳杆菌,在乳清培养基中的胞外多糖产量达到178mg/L。体外抗氧化试验表明:KW3胞外多糖总还原力达到(138.28±5.35)mgVC/g;当其质量浓度达到200μg/mL时,对DPPH自由基的清除率37.53%,FRAP值为(600.16±15.23)FeSO4.7H2Oμmol/L。体内抗氧化试验显示KW3胞外多糖可显著降低衰老小鼠血清、肝和脑组织中的MDA含量,提高其SOD活性和GSH-Px活性。     

冬虫夏草液体发酵产多糖条件优化及饮料研制

研究了培养时间、初始pH值、乙醇浓度、二次补糖等因素对冬虫夏草菌丝生长和产糖的影响,得出了最佳培养时间为6d,初始pH为5.5,乙醇浓度为1.0%,二次补糖为复合碳源葡萄糖+甘露糖+半乳糖(3:4:2)1.2g/100ml,发酵液胞外多糖产量和菌丝干重最高分别可达5949.6mg/L和17.35g/L。功能性虫草饮料以添加枸杞+党参(2:1)15g/100ml发酵的配伍最佳。最优饮料配方:发酵液:水=70:30、蔗糖7%、柠檬酸0.1%、稳定剂0.15%。     

虫草液体发酵的非营养条件优化与免疫功能研究

采用中心组合设计,以菌丝体生物量为考察指标对虫草液体发酵的非营养条件进行优化,同时对菌丝体提取物的免疫功能进行了探讨。研究结果表明:当培养温度为22.64℃、pH为6.18、培养时间为7.36d时,菌丝体产量达到21.73g/L;并发现其水提取物在50～200μg/mL的剂量范围内,能够提高巨噬细胞吞噬能力和促进小鼠脾细胞的增殖,具有一定的免疫调节作用,是一种潜在的具有免疫调节功能的食品资源。     

原生质体诱变选育高富硒量冬虫夏草菌株的研究

以冬虫夏草菌丝体为材料,经原生质体诱变获得了生物量和富硒能力均高于出发菌株的无性型菌株。实验结果表明:经紫外线诱变的8号再生菌株的生物量和富硒能力分别是13.445mg/mL和125.8μg/g,分别比出发菌株提高55.16%和50.12%。     

Optimization of medium on exopolysaccharides production in submerged culture of Cordyceps militaris

Statistical experimental design strategy (SES) was applied to optimize the medium for the exopolysaccharides (EPS) production of Cordyceps militaris by submerged culture in shaker flask. A significant influence of the glucose and peptone on the EPS production was first evaluated by using a Plackett-Buman design. Then, steepest ascent method was employed to approach the experimental design space. Last, these factors were further optimized using central composite design (CCD) and response surface methodology (RSM). A quadratic model was found to fit the EPS production. The optimum values of the tested variables for the production of EPS were 48.67 g/L glucose, 12.56 g/L peptone, 1 g/L KH₂PO₄, 10 g/L yeast extract, and 0.5 g/L MgSO₄·7H₂O. Under optimization of culture conditions, the EPS production was enhanced from 0.78 to 1.96 g/L. In comparison with that of original culture conditions, 2.5 fold increase was obtained.     

冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性

研究了人工培养冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性。通过体外抗氧化模型和分光光度法研究了5种胞外多糖级分在不同体系中对超氧阴离子和羟自由基的清除作用、Trolox等价抗氧化能力。结果表明:胞外多糖各级分均能较好的清除O2-.、.OH和ABTS+.自由基,且级分EPS-1A-F3的作用效果强于其他各级分,进一步揭示其在膳食和理疗上具有潜在的应用价值。