高渗胁迫下啤酒酵母的生理特性研究

研究了0．3mol／L、0．6mol／L、1．0mol/L的氯化钠对啤酒酵母活细胞数、细胞形态、糖代谢、pH值、菌体蛋白的影响。细胞动力学结果表明：随着NaCl浓度的增加,细胞的渗透胁迫加剧,细胞收缩。与对照组比较0．6mol／LNaCl、1．0mol／L NaCl延长细胞对数生长期,减缓葡萄糖消耗速率,且分别在2h-4h、6h-8h内出现糖代谢停滞,但并不影响细胞的增殖。在生理可接受的渗透范围内,与对照组比较0．3mol／LNaCl基本上不影响啤酒酵母的生物量、糖代谢速率和pH值。说明该菌株有较高的抗高渗能力。随着NaCl浓度的升高,渗透胁迫加剧,耐高渗有关的蛋白开始表达。     

硒对啤酒酵母细胞生长的影响

目的研究不同硒浓度对啤酒酵母细胞生长的影响，确定适宜的硒添加量。方法用分光光度计测定不同硒浓度时酵母细胞培养液在不同时间的吸收度，绘制生长曲线，比较硒浓度不同时酵母细胞的生长情况。结果亚硒酸钠的添加浓度小于20μg／mL时，有促进酵母菌生长的作用；亚硒酸钠浓度高于30μg／mL时，对酵母菌生长有明显的抑制作用；亚硒酸钠浓度在20μg／mL时酵母菌可以正常生长。结论亚硒酸钠的添加浓度应在20μg／mL左右。     

硒对啤酒酵母细胞生长的影响

目的研究不同硒浓度对啤酒酵母细胞生长的影响,确定适宜的硒添加量。方法用分光光度计测定不同硒浓度时酵母细胞培养液在不同时间的吸收度,绘制生长曲线,比较硒浓度不同时酵母细胞的生长情况。结果亚硒酸钠的添加浓度小于20μg/mL时,有促进酵母菌生长的作用;亚硒酸钠浓度高于30μg/mL时,对酵母菌生长有明显的抑制作用;亚硒酸钠浓度在20μg/mL时酵母菌可以正常生长。结论亚硒酸钠的添加浓度应在20μg/mL左右。     

啤酒酵母HD34-1乙醇脱氢酶活性的研究

菌株HD34-1是将B.sub的乙醇脱氢酶(ADH)基因转入啤酒酵母HD34而构建的无醇啤酒酵母工程菌株,该菌株的ADH基因受Gal启动子的控制,因此为了考察该菌株ADH基因的表达情况,本研究设计了半乳糖和乙醇的浓度梯度进行发酵试验并测定了相应条件下的的ADH活性,结果表明2%的半乳糖浓度,诱导16h最适宜ADH基因的表达。     

乙醇胁迫对乳酸杆菌关键酶活力的影响

分别以面包乳杆菌(Lactobacillus crustorum D2-5)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum D5-5)为研究对象,进行不同乙醇体积分数胁迫后菌体活力的对比,测定了乙醇胁迫后菌体中己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶(LDH)及ATP酶的活力变化,分析了乙醇胁迫后造成菌体失活的主要因素。结果表明:5%乙醇胁迫处理有助于提高菌体存活率,但是效果不显著;8%乙醇胁迫后的菌体存活率明显降低,面包乳杆菌D2-5和植物乳杆菌D5-5存活率依次仅为26.61%和23.50%,菌体的生长受到严重抑制,致使相关酶活力降低。乙醇胁迫对乳酸杆菌己糖激酶影响不显著,对其丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶及ATP酶具有极显著的影响。这一结果说明,丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶及ATP酶是影响乙醇胁迫损失的关键酶,酶活力变化与菌体活力相关。     

酵母耐乙醇性状及提高其乙醇耐性的途径

乙醇是酿酒酵母厌氧发酵的重要工业产物,但对酵母细胞本身在又是毒素和抑制剂,为了进一步提高酒精和啤酒等生产效率和经济效益,浓醪高乙醇发酵是大家是感兴趣并在深入研究的一个生物工程课题,本文仅就其中酵母的乙醇耐受性定义和检测,酵母乙醇耐受性生理基础及提高酵母乙醇耐受性途径作一些介绍和论述。     

啤酒酵母HD34-1乙醇脱氢酶浮眭的研究

菌株HD34-1是将B．sub的乙醇脱氢酶（ADH）基因转入啤酒酵母HD34而构建的无醇啤酒酵母工程菌株,该菌株的ADH基因受Gal启动子的控制,因此为了考察该菌株ADH基因的表达情况,本研究设计了半乳糖和乙醇的浓度梯度进行发酵试验并测定了相应条件下的的ADH活性,结果表明2％的半乳糖浓度,诱导16h最适宜ADH基因的表达。     

乙醇胁迫对植物乳杆菌膜生理及黏附性的影响

目的：探讨植物乳杆菌在乙醇胁迫下黏附性变化及其抗乙醇胁迫的生理响应机制。方法：用不同体积分数的乙醇胁迫植物乳杆菌,测定菌体存活率、细胞膜完整性及超微结构的变化;采用人体结肠癌细胞HT-29作为体外黏附模型,测定乙醇胁迫后菌体对HT-29细胞的黏附率;通过气相色谱-串联质谱法分析菌体细胞膜脂肪酸的变化。结果：随着乙醇体积分数的增加,植物乳杆菌的存活率逐渐下降,菌体细胞膜完整性及其表面结构遭到破坏,对HT-29细胞黏附率降低,同时,细胞膜中脂肪酸的不饱和脂肪酸比例升高。结论：乙醇胁迫可降低菌体黏附HT-29细胞的能力,植物乳杆菌细胞膜中脂肪酸的组成及其完整性在抗乙醇胁迫过程中发挥重要作用。     

蛋白酶A缺失对啤酒酵母抗逆性能的影响研究

蛋白酶A(PrA)是啤酒酵母体内一种重要的蛋白酶,参与液泡中多种酶的加工和成熟过程.本文主要研究蛋白酶A对酿酒酵母抗逆生理代谢性能抗不良环境的特性.试验结果表明蛋白酶A缺失对啤酒酵母生长性能、低氮耐受能力、抗氧化能力和高酒精度耐受能力均有显著影响.     

压力对啤酒酵母生长及某些发酵性能的影响

以气体为加压介质,研究了不同压力下酵母细胞生长及压力对酵母发酵性能的影响.高压对酵母细胞的生长代谢有明显的影响:压力使酵母细胞的比生长速率和生物量降低,细胞的倍增时间延长;电子显微镜显示,压力使酵母菌细胞的形态发生明显的改变;压力也导致酵母的发酵速度、耗糖率、乙醇生成量、双乙酰的生成和还原速率下降.     

海藻糖与酿酒酵母乙醇耐受性相关性的研究进展

为了得到具有高富锌能力的酵母菌,该研究以面包来源的酵母菌DLY28为出发菌株,重复驯化后筛选获得一株优良耐锌酵母,并通过单因素试验及响应面试验对其富锌培养基进行优化。结果表明,通过驯化筛选得到一株优良耐锌酵母S7,其富锌的最优培养基组成为蔗糖含量82 g/L、胰蛋白胨含量26 g/L、锌含量404 mg/L。在此最优条件下,富锌酵母S7的锌吸附量为18.79 mg/g,生物量（OD600 nm值）为1.49。该研究为富锌酵母的生产以及食品有机锌的开发应用提供理论依据。     

酿酒酵母工业菌株胁迫条件耐受性分析

对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）工业菌株胁迫条件，包括高浓度酒精、高渗透压、高温、营养饥饿、氧化胁迫、糠醛毒性的耐受性进行了分析，同时测定了抗生素G418对这些菌株的最低抑菌浓度。结果表明，所测定的酵母菌株对这些逆境条件的耐受性有明显差别，表现出良好耐受性的是6508和安琪酵母菌株，同时多倍性的酿酒酵母工业菌株的耐受性均比单倍性实验室菌株高。     

Effect of trehalose accumulation on response to saline stress in Saccharomyces cerevisiae

To examine the effect of trehalose accumulation on response to saline stress in Saccharomyces cerevisiae, we constructed deletion strains of all combinations of the trehalase genes ATH1, NTH1 and NTH2 and examined their growth behaviour and intracellular trehalose accumulation under non‐stress and saline‐stress conditions. Saline stress was induced in yeast cells by NaCl addition at the exponential growth phase. All deletion strains showed similar specific growth rates and trehalose accumulation to their parent strain under non‐stress conditions. However, under the saline stress condition, one single deletion strain, nth1Δ, two double deletion strains, nth1Δ ath1Δ and nth1Δ nth2Δ, and the triple deletion strain nth1Δnth2Δ ath1Δ, all of which carry the nth1Δ deletion, showed increased trehalose accumulation as compared to the parent and other deletion strains. In particular, our statistical analysis revealed that the triple deletion strain showed a higher growth rate under the saline stress condition than the parent strain. Moreover, some deletion strains showed further trehalose accumulation under non‐stress conditions by overexpression of the TPS1 or TPS2 genes encoding the enzymes related to trehalose biosynthesis at the mid‐exponential phase. Such increased trehalose accumulation prior to NaCl addition could improve the growth of these strains under saline stress. Our results indicate that high trehalose accumulation prior to NaCl addition, rather than after NaCl addition, is necessary to achieve high growth activity under stress conditions. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

The effect of ethanol and specific growth rate on the lipid content and composition of Saccharomyces cerevisiae grown anaerobically in a chemostat

The effects of produced ethanol and specific growth rate on the lipid content and composition of Saccharomyces cerevisiae CBS 2806 were studied using anaerobic chemostat cultures. The cells adapted to increased concentrations of produced ethanol by increasing the proportion of ergosterol at the expense of lanosterol, by increasing the proportion of phosphatidylinositol at the expense of phosphatidylcholine, and by increasing the amount of C_18:0 fatty acids in total phospholipids at the expense of C_16:0 fatty acids. The produced ethanol had no effect on the phospholipid content nor on the proportion of unsaturated fatty acids in the phospholipids. The specific growth rate had no effect on the phospholipid content, the sterol composition, the phospholipid composition, the fatty acid composition of total phospholipids, or on the proportion of unsaturated fatty acids in the phospholipids of S. cerevisiae. It was not possible to separate the effects of produced ethanol and growth rate on the ergosterol content of the chemostat-grown S. cerevisiae cells.     

魔芋飞粉蛋白酶解物对酿酒酵母生长的影响

以魔芋飞粉蛋白酶解物为研究对象,利用静态激光光散射测定其分子量后,考察了其对酿酒酵母菌落大小、出芽率、菌体数量及代谢产物影响.实验结果表明添加6218u蛋白酶解物对酿酒酵母生长有明显的促进作用,培养液中还原糖转化率得以提高,乙醇含量明显增大.     

酿酒酵母SOD1、SOD2基因缺失对胁迫耐受性的影响

以sod1Δ、sod2Δ、sod1Δsod2Δ酿酒酵母基因缺失菌株为遗传材料,采用休止细胞梯度生长法,分析SOD1和SOD2基因缺失对高温、乙醇毒性、高渗透压、高盐、乙酸毒性及营养饥饿胁迫条件耐受性的影响。结果显示,与野生型菌株相比,sod1Δ菌株对高温、高渗透压和乙酸胁迫的耐受性降低;sod2Δ菌株耐受性无明显变化;sod1Δsod2Δ双缺失菌株对高温、乙醇毒性、乙酸毒性、高渗透压和高盐的耐受性均下降,表明酵母超氧化物歧化酶基因与多种胁迫耐受性密切相关。     

绿色木霉和酿酒酵母降解稻草转化为乙醇的研究

以稻草作为碳源、污泥作为氮源,利用绿色木霉（Trichoderma viride）和酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）降解稻草转化为乙醇,并对该过程中影响乙醇产量的因素进行优化。结果表明,当预处理稻草与预处理污泥质量比为1∶10（g∶g）、降解培养基初始pH值为7、绿色木霉和酿酒酵母的接种量分别为4%和3%、降解温度为37 ℃和降解时间为48 h时,可得到乙醇的含量为49.25 mg/L。     

发酵工业中酿酒酵母耐性机制的研究进展

由于工业生产条件和成本的限制,发酵过程中酿酒酵母会经受多种不同环境胁迫因子的影响。研究不良环境中酿酒酵母的耐性机制,旨在为提高产品质量、降低生产成本以及相应的基因改良提供理论依据。文中主要综述了酿酒酵母耐受高渗、氧化和乙醇等胁迫因素的机理以及海藻糖对酵母细胞的保护作用。      

双亲灭活原生质体融合选育高性能酒精酵母菌的研究

为了选育高性能的酒精酵母菌,利用双亲灭活和PEG诱导,对酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体细胞进行了原生质体融合。从42株融合子中筛选得到了2株融合菌株RH3和RH5,分别适合于木薯粉和甘蔗汁酒精发酵,且较好的保持了亲本的特性。其中RH3在耐酸能力上,RH5在酒精耐受能力上要优于亲本,RH3的遗传稳定性要优于RH5。