两种类型MCM-41固定化效果的比较

本文研究了钠型MCM-41和氢型MCM-41介孔材料在不同固定化条件下对固定化酶活性及酶活性回收率的影响。结果表明,不同固定化条件下,以氢型MCM-41介孔材料为载体时,固定化酶活性及酶活性回收率较高,说明氢型MCM-41介孔材料相对于钠型MCM-41有较好的固定化效果。     

介孔分子筛MCM-41固定化胰蛋白酶的研究

以介孔分子筛MCM-41作为载体,戊二醛作为交联剂,对胰蛋白酶进行了固定化。研究了固定化条件对酶活及酶活性回收率的影响,并对固定化酶的热稳定性和操作稳定性做了探讨。结果表明,当每克载体的给酶量为30mg,固定化温度15℃,固定化时间3h,pH8.0,戊二醛体积分数0.4%时,胰蛋白酶的固定化效果最好,此时平均酶活性回收率达60%左右。固定化酶的热稳定性与游离酶相比有了显著的提高,并且固定化酶具有较好的操作稳定性,连续反应10批后,酶剩余活性仍保持在80%以上。      

固定化酶化学发光法测定食品中的淀粉含量

用MCM-41介孔分子筛固定α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和葡萄糖氧化酶,将其用于流动注射化学发光分析体系,可实现对淀粉的快速检测.在酶柱使用温度为55℃,淀粉溶液的酸度为pH =5.0,淀粉溶液的流速为2 r/min的条件下,体系发光强度与淀粉浓度呈良好线性关系,测定的线性范围为1～150mg/L,相关系数0.999 8,检出限为0.3 mg/L,回收率为97.2％～102.2％,连续10次测定的RSD为2.1％,单次测定能在1 min内完成.方法简便、快速、灵敏、准确,对8个样品的测定结果与国标方法的测定结果无显著性差异.     

固定化酵母细胞转化肉桂酸生产L-苯丙氨酸

建立了一套较之传统方法更为准确的测定固定化细胞生产L-苯丙氨酸(L-phe)的新方法,采用高效液相色谱法(HPLC)测定反复冲洗凝胶所得冲洗液可以更准确地测定L-phe的生成,并采用新方法研究了固定化黏红酵母细胞的活力与稳定性。复合凝胶聚乙烯醇(PVA)+琼脂糖为最适载体,最佳质量浓度为PVA 120 g/L、琼脂糖10 g/L,反复冻融4次。此法得到的固定化细胞颗粒,机械强度良好,酶活保持时间长达200 h,L-苯丙氨酸产量高。通过流化床反应器测定其半衰期为100 h,200 h后总产量为44.58 mg/10 mL,固定化细胞无崩解现象。     

介孔分子筛MCM-48固定化木瓜蛋白酶性质的研究

以介孔分子筛MCM48为载体、戊二醛作交联剂对木瓜蛋白酶进行了固定化。实验结果表明,与游离酶相比,固定化酶的热稳定性有了显著的提高,其半衰期达到了2500min以上,是游离酶(80min)的30倍以上。固定化酶的pH稳定性和储藏稳定性也有了明显改善。此外,固定化酶还具有很好的操作稳定性,经过12d的连续酶解,酶活力仍保持在初始酶活力的70%以上。     

介孔分子筛MCM-41固定糖化酶的研究

以介孔分子筛MCM-41为载体、戊二醛为交联剂,对糖化酶进行了固定化.考察了固定化温度和时间、给酶量、pH值以及戊二醛浓度等因素对固定化效果的影响,并对固定化酶的酶学性质进行了研究.结果表明,糖化酶最佳固定化条件是:酶与载体比例为50mg/g、固定化温度20℃、固定化时间8h、pH值6.1、戊二醛浓度7.5％,此条件下固定化酶的相对酶活力为47％.固定化酶的最适作用温度和最适作用pH值没有改变,同游离酶一样,分别为60℃和4.6,米氏常数Km由原来的0.031 mol/L降为0.018mol/L.     

固定化酶化学发光型葡萄糖传感器法测定食品中的葡萄糖

制成了固定化酶化学发光型葡萄糖传感器,此传感器可用于对葡萄糖的在线快速检测。用MCM-41介孔分子筛固定葡萄糖氧化酶(GOD),制成GOD酶柱,并用于流动注射化学发光分析。酶柱的使用条件为:柱温40℃,葡萄糖溶液pH=6.0,流速3 r/min。测定的线性范围为1～200 mg/L,检出限为0.2 mg/L,10次测定的RSD为1.8%,回收率在97.81%～102.0%。测定结果与国标方法的测定结果无显著性差异。     

Pt/MCM-41加氢裂化制备航空生物煤油

利用可再生资源制备液体燃料,是国家应当储备的战略技术之一。本试验以生物柴油加氢脱氧得到的生物烷烃为原料,采用Pt/MCM-41介孔分子筛为加氢裂化催化剂,制备出高转化率、较高选择性的航空生物煤油。试验以不同硅铝比MCM-41为载体,负载不同质量铂金属,制备和表征了不同组成Pt/MCM-41的催化剂;考察了不同硅铝比、反应温度、铂负载量对催化剂活性的影响。结果表明,硅铝比、反应温度和铂负载量对反应产物都有很大影响,硅铝比为10的Pt/MCM-41(Pt%=0.7%)催化剂在340℃条件下的转化率达到了98.42%,煤汽比为1.01,收率也达到了89.50%;随着温度的升高,产物转化率逐渐增加,但是煤汽比随着反应温度的升高逐渐减小;随着铂负载量的增加,转化率提高显著,煤汽比在负载量达到0.7%时才提高明显。     

介孔材料SBA-15固定化胰蛋白酶的研究

在酸性条件下以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源、非离子表面活性剂Pluronic P123为模板剂合成了介孔分子筛SBA-15,将其作为载体,对胰蛋白酶进行了固定化研究.研究了固定化条件对固定化酶量的影响,以及固定化酶的热稳定性和操作稳定性.结果表明,当酶液浓度大于5 mg/mL,固定化时间10 h时,胰蛋白酶的固定化效果最好,固定化酶量可达23.6 mg/g.固定化酶的热稳定性与游离酶相比有了显著的提高,且固定化酶具有较好的操作稳定性,连续反应6批次后,酶的剩余活性仍保持在40 %以上.     

介孔二氧化硅制备固定化菠萝蛋白酶的研究

采用经扫描电镜和透射电镜表征的介孔二氧化硅制备固定化菠萝蛋白酶,具有工艺简便、条件温和及操作方便的特点。考察了给酶量、pH和时间对固定化菠萝蛋白酶活力的影响,在酶量25mg/mL、pH5.0、固定化时间22h时,固定化酶的酶活为603U/g。介孔二氧化硅固定的菠萝蛋白酶在50℃水浴60min后,固定化酶的活力保持在92%以上,说明固定化酶的热稳定性较高。该固定酶持续操作三次后,使用活性逐渐衰减,但第3次相对酶活仍然达38.5%,反映了菠萝蛋白酶分子与载体有较强的物理吸附作用而且固定的菠萝蛋白酶有一定的可重复使用性。      

Possible regulatory role of phenylalanine ammonia‐lyase in the production of anthocyanins in asparagus (Asparagus officinalis L)

The regulatory role of phenylalanine ammonia‐lyase (PAL) in the light‐induced accumulation of anthocyanins in the epidermis of asparagus spears has been analysed. A correlation between the stimulation of PAL activity and the rise in total anthocyanin content has been observed. Light radiation induced PAL activity, which in turn stimulated anthocyanin accumulation, a hypothesis which has been confirmed by treating asparagus spears with S‐carvone, an inhibitor of PAL activity. A marked delay was observed in the rise in PAL activity and total anthocyanin content in asparagus spears treated with this compound during light irradiation. PAL activity and anthocyanin synthesis continued when the spears were stored in darkness for 5 days after being subjected to light, but the inhibitory effect of S‐carvone remained during this storage. When the asparagus spears were immersed in water for 20 h, no PAL activity could be detected and scarcely any total anthocyanin content was measured. However, after 5 days of storage in darkness a sharp upsurge in PAL activity was found, which was not translated into a parallel increase in total anthocyanin content. Copyright © 2005 Society of Chemical Industry     

采收成熟度与冷藏枇杷果实木质化关系研究

以七成、八成和九成熟的“解放钟”枇杷(Eriobotrya japonica Lindl. cv. Jiefangzhong)果实为试材,于4℃贮藏期间测定3 种不同成熟度果实的品质指标及木质化相关酶活性的变化,确定适宜于冷藏的枇杷果实采收成熟度,以减缓冷藏期间果实木质化败坏的发生,延长其贮藏期。结果表明：果实冷藏至35d,成熟度越高,果肉木质化越严重,但七成与八成熟果实木质素含量差异不明显(P ＞ 0.05);木质化程度相对较低;八成熟果实的总糖和可溶性固形物(TSS)含量明显高于七成熟和九成熟果实(P ＜ 0.05)。不同成熟度果实可滴定酸(TA)含量以及4- 香豆酸辅酶A 连接酶(4CL)、肉桂醇脱氢酶(CAD)和过氧化物酶(POD)活性差异不显著(P ＞ 0.05),九成熟果实苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性明显高于七成和八成熟(P ＜ 0.05),PAL 活性与木质素含量之间具有较高的正相关性(r=0.89)。不同采收成熟度与冷藏枇杷果实木质化密切相关,适于冷藏的枇杷果实以八成熟采收为宜。     

Effects of gibberellic acid (GA3) on strawberry PAL (phenylalanine ammonia-lyase) and TAL (tyrosine ammonia-lyase) enzyme activities

Gibberellic acid (GA₃) treatments (30 and 60 μg litre⁻¹) were applied to young plants (Fragaria ananassa cv Chandler). Fruits were harvested at various developmental stages (14, 21, 28 and 35 days from fruit set). Weight and size, phenolic compounds (total polyphenols and anthocyanins) and enzyme activities, phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and tyrosine ammonia-lyase (TAL) were determined. Our aim was to obtain detailed information about PAL and TAL activities related to the strawberry colour during development and ripening processes and to determine the effects of exogenous treatments of GA₃ on PAL and TAL activities. Exogenous treatments of GA₃ improve weight, size and colour of strawberry fruits, and affect PAL and TAL activities. We found that the anthocyanin content and PAL activity are enhanced by the exogenous treatment of GA₃ in the range of 30 μg litre⁻¹. However, with the higher GA₃ treatment, only the anthocyanin content is affected in that way. These findings suggest that gibberellic acid effect on PAL, TAL and ultimately anthocyanin enhancement is dosage related and saturation of the response occurs at 30 μg litre⁻¹. © 1998 SCI.     

温度对黄皮果实PAL、POD和PPO活性的影响

为探明贮藏过程中温度对黄皮果实采后保鲜的效果,研究了2～4℃、6～8℃和10～12℃等不同贮藏温度对黄皮果实几种酶活性的影响。结果表明,贮藏温度在2～12℃时,贮藏温度越低,保鲜效果越好,适宜的贮藏温度为2～4℃。2～4℃贮藏的黄皮果实苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性高于6～8℃和10～12℃贮藏的果实,而过氧化物酶(POD)和多酚化物酶(PPO)活性低于6～8℃和10～12℃贮藏的果实。2～4℃贮藏能增强黄皮果实的防伤害能力,明显抑制黄皮的酶促反应,有利于贮藏期限的延长。