RP-HPLC法分析测定人参、西洋参、三七中的皂苷类化合物

利用反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)技术对人参、西洋参和三七不同方法提取物中的8种皂苷进行定量分析。采用乙醇回流、温浸法和超声辅助提取法提取3种药材中的有效成分,并结合高效液相色谱技术进行分析。结果表明:不同提取方法比较,超声辅助法所提取的3种药材中皂苷含量较高;3种五加科人参属的药材中,三七提取物中主要皂苷含量较高,人参提取物中的皂苷种类较多。     

人参与胡萝卜愈伤组织共培养的研究

本研究采用正交试验设计,对人参(Panax ginseng)和胡萝卜(Daucus carota)两种植物组织共培养的培养基和培养条件进行了优化筛选,同时比较了人参愈伤组织与共培养物的皂苷含量.结果表明,人参与胡萝卜共培养所获得的愈伤组织在23℃,10001x的条件下生长良好,最佳基质MS 2,4-D 3mg/L IBA 2mg/L KT 0.5mg/L,在培养25d时皂苷含量达到最高,浓度达到1.6mg/L.共培养物的皂苷含量比人参愈伤组织皂苷含量高出6.25%,为人参与胡萝卜原生质体融合、获得营养型蔬菜奠定了基础.     

基于改良ERIC-PCR技术快速鉴别人参和西洋参

为建立快速、准确的鉴定人参和西洋参并测定二者在混合物中含量的方法,将ERIC-PCR（Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus-Polymerase chain reaction）引物改良进行温度梯度PCR扩增,分析人参（Panax ginseng C.A.Mey,PG）和西洋参（Panax quinquefolium L.,PQ）电泳条带并寻找其特异性条带,结果发现一对特异性引物ER1和EL2,当退火温度为46.0℃时,只出现2.8 kb条带为西洋参,而出现2.8 kb和3.4 kb条带为人参。通过对混合样品中3.4 kb条带的定量分析,可以准确的定量西洋参的含量,系统误差仅为5.2%,RSD为3.5%,说明该方法可以快速、准确的鉴定西洋参和人参,并且可以准确测定混合物中西洋参的含量。      

三七的超细化及纳米化研究

简述了三七的成分、功效和临床应用,以及超微粉碎技术在中药加工中的应用优势和纳米中药与微米中药的概念。并分别采用干法球磨、气流粉碎和湿法球磨3种方法对三七进行超细化加工,结果获得了微米三七粉和三七纳米混悬剂。这为三七超细加工的规模化生产以及纳米化加工研究提供了一定的依据。     

不同冲泡条件三七花中腐霉利的溶出研究

目的探索三七花在不同冲泡条件下(冲泡时间、冲泡次数、冲泡温度)腐霉利的溶出规律。方法通过在实验室模拟冲泡过程,采用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)和选择性离子检测(selected ion monitor, SIM)对三七花浸泡液中腐霉利含量进行检测。结果不同冲泡时间下,腐霉利溶出率随着冲泡时间增加而增加;相同冲泡时间下,第1泡溶出率小于第2泡,第3泡溶出率明显减少,第4泡时几乎没有腐霉利溶出;70℃以上温度冲泡时,不同温度对溶出率影响不大。结论三七花在不同冲泡时间、不同冲泡次数及不同冲泡温度下都有不同程度的腐霉利溶出。     

三七冻干粉及其活性组分对小鼠1型辅助性T细胞分化和活性的影响

目的:观察三七冻干粉及其有效成分对小鼠CD4+T细胞向1型辅助性T(Th1)细胞分化的影响,探究三七作为药食同源药物改善机体免疫力的可能作用机制。方法:提取C57BL/6小鼠脾细胞并分选出CD4+T细胞进行培养;分为空白对照组,三七冻干粉低、中、高剂量组(160、320、640 μg/mL)和三七总皂苷低、中、高剂量组(5、10、20 μg/mL),加入对应药物48 h后,采用CCK-8法筛选三七冻干粉及三七总皂苷的最佳给药浓度并检测二者对细胞活力的影响,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中 IFN-γ的变化。结果:与对照组相比,三七冻干粉组和三七总皂苷组的细胞因子IFN-γ水平,IFN-γ mRNA和T-bet mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:三七冻干粉及其活性成分均能抑制CD4+T细胞向Th1细胞分化。     

西洋参水提物改善睡眠功能的研究

目的研究不同剂量西洋参水提物对小鼠睡眠功能的影响。方法根据改善睡眠功能评价方法,分别通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验判定西洋参水提物高、中、低剂量组(133.3、66.7、33.3 mg/kg·BW相当于人体剂量的20、10、5倍)是否具有改善小鼠睡眠的功能,并通过酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定小鼠脑干中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)的含量。结果西洋参水提物各剂量组均无直接睡眠作用;与空白对照相比,西洋参水提物中、高剂量组能显著延长小鼠睡眠时间(P<0.05),提高小鼠的入睡率(P<0.05),且西洋参水提物高剂量组能显著缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期,并能显著提高小鼠脑干中5-HT含量(P<0.05)。结论西洋参具有改善小鼠睡眠的作用,这可能与其提高小鼠脑干中5-HT含量有关。     

人参与胡萝卜混合培养物的代谢产物研究

本实验对人参(Panax ginseng)和胡萝卜(Daucus carota)两种植物组织进行悬浮混合培养,筛选出悬浮混合培养的最佳培养基.同时对人参愈伤组织、胡萝卜愈伤组织及其混合培养物的代谢产物进行了研究.结果表明,人参与胡萝卜悬浮混合培养的最佳基质为MS、2,4-D 2mg/L、NAA 1mg/L、KT 0.2mg/L,在培养25d时混合培养物的多糖含量达到最高,浓度达到0.203mg/g,混合培养物的皂苷含量为1.85mg/g,比人参悬浮培养物皂苷含量高出3.35%.     

西洋参中人参皂苷类HPLC测定及其指纹图谱研究

对12种西洋参中的7种人参皂苷进行HPLC同时测定，建立西洋参中人参皂苷含量测定的现代分析方法，并建立起西洋参人参皂苷类的色谱指纹图谱。HPLC测定条件：梯度洗脱，Alltima C18色谱柱，乙腈-0．05％磷酸水溶液为流动相，流速为1．2ml／min，柱温为35℃，紫外检测器，检测波长203nm。在选定的最佳色谱条件下每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性相关性，7种人参皂苷的加标回收率为94．1％-97．9％。对色谱指纹图谱进行相似度和聚类分析计算，得到了令人满意的结果。该法为西洋参样品的质量和品种鉴定提供了较全面的信息，并为HPLC应用于样品复杂组分的分析和鉴别开拓了新的领域。     

利用外转录间隔区对中国人参和西洋参进行分子鉴定

人参和西洋参是我国两种重要的中药材。两者虽然形态相似,但药性差异较大。为了建立一种简单高效的中国人参和西洋参的分子鉴别方法,作者利用从核DNA的外转录间隔(ETS)发掘的人参和西洋参单核苷酸多态性位点(SNP),分别设计了人参和西洋参的等位基因特异性引物,并利用多重PCR对人参和西洋参进行了鉴定。结果表明,作者建立的多重PCR体系可以有效地对人参、西洋参及两者的混合品进行鉴定。     

不同年生西洋参中铅、镉含量分析

采用微波消解- 石墨炉原子吸收法对不同年生、不同地块西洋参中的毒害元素铅(Pb)、镉(Cd)进行检测分析。结果表明,同一地块西洋参随着生长年份的增加,Cd、Pb 元素的含量有所提高,呈现随年份增加在根内积累的规律;不同地块,相同生长年份西洋参Cd、Pb 元素含量存在差异。方法检出限分别为Pb 3.545ng/ml,Cd0.225ng/ml;测定精密度的RSD 分别为Pb 1.5%,Cd 1.0%;回收率分别为Pb 113.57%,Cd 94.28%。     

Ginsenoside Composition and Antiproliferative Activities of Explosively Puffed Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer)

ABSTRACT: The puffing process was evaluated as an alternative to the steaming process for producing a biologically more active ginseng product, like red ginseng, from raw ginseng. A puffing treatment of dried raw ginseng roots induced an overall increase in crude saponin content. As puffing pressure increased, the content of ginsenoside Re, Rg1, Rb1, Rc, and Rb2 decreased, while ginsenoside Rg3 increased significantly as compared to raw ginseng. The content of ginsenoside Rg3 in puffed ginseng at a pressure of 490 kPa was similar to that of red ginseng. Cancer cell lines (HeLa, MCF-7, and HepG2) showed that antiproliferative effects of saponin extract of puffed ginseng increased with an increase in puffing pressure. Ginseng explosively puffed at 490 kPa had similar saponin constituents and antiproliferative effects as those of red ginseng. Practical Application: The puffing process could provide an alternative mean to produce functional ginseng products, along with a reduction in processing time as compared to traditional red ginseng processing by steam.     

云南省三七花、三七须根中9种杀菌剂含量监测结果分析

目的 了解云南地区三七花、三七须根中丙环唑、噁霜灵、腈菌唑、醚菌酯、腐霉利、多菌灵、嘧霉胺、苯醚甲环唑、甲霜灵9种杀菌剂污染状况。方法 按照《云南省食品安全风险监测方案》中样品采集要求, 在云南8个地区采集62个样品。按照《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》对多菌灵、嘧霉胺、苯醚甲环唑、甲霜灵进行检测及国家标准GB 23200.113-2018《食品安全国家标准植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定》对丙环唑、噁霜灵、腈菌唑、醚菌酯、腐霉利进行检测。结果 9种杀菌剂中, 苯醚甲环唑、嘧霉胺、甲霜灵、多菌灵超标率较高, 分别为16.1%, 14.0%, 12.9%, 4.84%。丙环唑、噁霜灵、腐霉利超标率为3.23%, 腈菌唑、醚菌酯未超标。结论 云南地区三七花、三七须根中杀菌剂污染超标率较高, 应采取措施加以控制。     

糖水煎煮对人参化学成分的影响

目的：考察单糖、双糖、多糖水煎煮对人参化学成分的影响。方法：采用高效液相色谱法、苯酚-硫酸法及福林酚法分别测定糖水煎煮人参、单煮人参及人参生药中人参皂苷、水溶性糖和总酚等有效成分含量。结果：糖水煎煮后人参中稀有人参皂苷F1、F2、Rg3、化合物K含量及16 种皂苷单体加和值均显著增加;糖水煎煮人参中水溶性糖和总酚含量均显著高于人参生药组,且水溶性糖含量高于单煮人参组（除木糖醇组）,葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、红糖、阿斯巴甜和硫酸软骨素组总酚含量显著高于单煮人参组（P＜0.05）。结论：糖水煎煮可提高人参中稀有皂苷、水溶性糖和总酚含量。     

人参果汁浓缩液对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的：研究人参果汁浓缩液对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法：72只雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分成空白组、模型组、人参果汁浓缩液（83、166、249、332 mg/kg mb）组,每组12只。模型组和人参果汁浓缩液各剂量组自第1天开始,每日腹腔注射40 mg/kg mb环磷酰胺,连续10 d,空白组腹腔注射等量的磷酸盐缓冲液;同时自第1天开始,人参果汁浓缩液各剂量组每日给予小鼠灌胃20 mL/kg mb不同剂量人参果汁浓缩液,空白组和模型组灌胃等量的蒸馏水,连续15 d后测定小鼠体质量、脾脏和胸腺质量、白细胞数量、淋巴细胞亚群数量、细胞因子表达水平以及免疫细胞核转录因子表达水平。结果：人参果汁浓缩液可改善免疫低下小鼠的脾脏质量/指数,提高免疫低下小鼠外周血细胞数量和免疫器官中淋巴细胞亚群数量,促进免疫低下小鼠细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）-2、IL-4和IL-17的表达和抑制负调控因子转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β的表达,以及部分恢复免疫细胞核转录因子T细胞中T-box(T-box expressed in...     

Microbial bioconversion of ginsenosides in Panax ginseng and their improved bioactivities

Several studies have investigated the pharmaceutical activity of ginseng. More recent studies have focused on the bioconversion of ginseng using microbial or recombinant enzymes to convert ginseng constituents into molecules with enhanced bioactivity. This review focuses on the bioconversion of Panax ginseng using whole cell preparations instead of isolated enzymes. During fermentation with microorganisms, ginsenosides are converted to various ginsenoside types, whereas, during reaction with isolated enzymes, ginsenosides are converted only to specific ginsenosides. These bioconverted ginsenosides are known to have greater bioactivities such as antioxidative, anti-carcinogenic, anti-inflammatory, and anti-hyperglycemic activity than non-fermented ginsenosides. This review suggests that various microbial bioconversed ginsenosides in ginseng can be used as major compounds in the functional food and pharmaceutical industry.     

根际-非根际土壤砷形态与三七根部砷赋存形态的相关性研究

本研究选取云南省典型砷污染土壤,以盆栽试验的方式,采用土壤砷形态分级连续浸提法和植物砷形态分级提取法,对三七生长的根际-非根际土壤中砷形态及三七中砷的赋存形态相关性进行研究。结果表明：(1)根际-非根际土壤中各砷形态含量由高到低的总体趋势为：残渣态＞结晶铁锰或铁铝水化氧化物结合态＞无定形和弱结晶铁铝或铁锰水化氧化物结合态＞专性吸附态＞非专性吸附态,残渣态所占比重最大,可达62%～86%。受根部活动的影响,非专性吸附态砷的含量均为根际土＞非根际土。(2)三七根部砷的赋存形态为F_r最高,含量为4.12mg/kg～7.60mg/kg。F_HAc和F_HCl虽迁移活性较弱但其所占的比例却不容忽视,最高可达25%。(3)根际-非根际土壤中不同砷形态与土壤总砷均呈正相关,其中残渣态R^₂=0.976。根际土中活性较强的非专性吸附态砷R^₂=0.499。(4)高砷土壤中砷形态与三七根部砷赋存形态间呈极显著相关,R^₂=0.992。中高砷土壤和中度砷土壤非根际土壤中的砷形态与三七根部砷赋存形态的相关系数较根际土有所升高,具有潜在砷毒害风险。     

菊花和三七对乙醇氧化损伤小鼠的保护作用

目的 探究菊花提取物和三七提取物对乙醇氧化损伤小鼠的作用。方法 实验小鼠被随机分组,分别是空白对照组、模型对照组、低、中、高菊花提取物组,低、中、高三七提取物组。对小鼠进行灌胃,连续30d后,除空白对照组的小鼠,其他各组小鼠一次性灌胃体重质量1.2%的乙醇溶液(浓度为50%),建立乙醇氧化损伤小鼠模型。检测各组小鼠肝脏和脑组织细胞中的抗氧化物质(超氧化物歧化酶,SOD)、自由基氧化还原反应参与物质包括谷胱甘肽(GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),同时测定血清中的肝损伤检测指标,其中包括了丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及蛋白质羰基(PC)的水平,研究菊花和三七的体内抗氧化活性。通过观察小鼠皮肤和肝组织的病理变化,研究菊花提取物和三七提取物对乙醇氧化损伤小鼠的作用。结果 由机体抗氧化的指标可见,三七提取物和菊花提取物能够有效降低小鼠肝脏及脑组织中的MDA、PC含量以及ALT、AST、TC和TG在血清中的水平,提高肝脏和脑组织中SOD、GSH-Px和GSH的含量。小鼠皮肤HE染色结果表明,与模型组相比,各剂量组小鼠皮肤因乙醇氧化损伤所致组织病理改变均有所减轻。小鼠肝组织HE染色结果表明,乙醇氧化后的小鼠分别通过菊花提取物、三七提取物处理后,其肝组织的组织病理改变与模型组相比有所减轻急性毒性实验显示,菊花提取物、三七提取物对小鼠没有毒害作用。结论 菊花提取物和三七的提取物对小鼠乙醇氧化损伤模型有保护作用。     

3种拟青霉发酵三七及其产物检测

采用3种拟青霉:蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)、蛹草拟青霉(Paecilomyces militaris)和蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)分别发酵三七药材,并检测发酵产物的功效成分。结果显示,蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉能有效地将人参皂苷Rb1转化为Rd,从而高产稀有人参皂苷Rd,同时合成甘露醇、虫草素和腺苷。表明药用微生物与植物药相互作用可获得丰富的、新的药用资源。