薯蓣皂苷糖苷酶基因的克隆及同源性分析

[目的]从分子生物学水平上研究Absidia sp.G3d产薯蓣皂苷糖苷酶,对该酶基因CDS区的序列进行调取和分析.[方法]根据薯蓣皂苷糖苷酶的N端序列设计简并引物,以总RNA为模板进行RT-PCR调取cDNA,然后采用3RACE和5RACE技术,调取CDS区基因全序列.[结果]测序得到序列长度为1 497 bp.该基因的同源性比较分析表明,薯蓣皂苷糖苷酶基因与α-鼠李糖苷酶没有同源性,与α-淀粉酶的基因序列具有很高的同源性,达到93%以上.[结论]蛋白质结构存在差异,酶反应特性不同.     

穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因的亚克隆及表达

[目的]克隆并表达穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因.[方法]将穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体 pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因.[结果]重组酵母菌在0.5%甲醇中培养144 h后,所提取的酶蛋白具有穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶的活性,经SDS-PAGE 分析,确定其相对分子质量为58 kD.[结论]穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因得到了表达.     

黑曲霉葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质研究

[目的]分离能水解獐牙菜苦苷的胞外β-葡萄糖苷酶,并研究其分子量、最适催化温度、最适pH、稳定性及催化特征.[方法]黑曲霉液体发酵3 d,收集培养液,培养液经盐析、柱分离得到1个β-葡萄糖苷酶.[结果]该β-葡萄糖苷酶的分子量的86 kD,最适pH为5.0～6.0,最适反应温度为50～60℃,在60℃以下时酶稳定;Ca2+、Zn2+、Fe3+和Cu2+能抑制β-葡萄糖苷酶的活性,而Mg2+和Mn2+能够激活β-葡萄糖苷酶的活性;纤维二糖是该β-葡萄糖苷酶的最适催化底物.[结论]该酶和大多数真菌来源黑曲霉相似,对獐牙菜苦苷的亲和性弱,对p-NPG的亲和力强.     

脂肪酶产生菌的筛选·产酶条件及酶特性研究

[目的]筛选脂肪酶高活性菌株作为脂肪酶生产菌株和脂肪酶基因的供体菌.[方法]从油脂厂等地采集26份含菌样品,采用溴甲酚紫平板对样品进行初筛,以产脂肪酶发酵培养基摇瓶复筛,获得1株产脂肪酶活性较高的菌株09-7-1,经鉴定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger).采用正交试验对影响该菌株产酶的因素进行了研究,并探讨了该菌株所产脂肪酶的性质.[结果]该菌株最佳产酶条件:碳源为0.5%的可溶性淀粉,氮源为0.2%的酵母膏,培养温度为32℃,发酵液pH为5.2,该菌株最初发酵液中酶活力为13.164 U/ml,优化后酶活力达24.112 U/ml,是最初酶活力的1.83倍.该菌株所产脂肪酶最适作用温度为30℃,最适作用pH为7.0;酶液在60℃保温90 min后,活性损失较少,pH为5.5～10.0内稳定.[结论]该研究可为脂肪酶生产和基因研究奠定基础.     

枯草芽抱杆菌产酶规律及酶学性质研究

[目的]研究浙江建德分离得到的枯草芽抱杆菌淀粉酶的产酶规律和酶学性质.[方法]将分离得到的枯草芽袍杆菌发酵培养,研究其淀粉酶产酶规律,并研究了温度、pH、金属离子对酶学性质的影响.利用双倒数曲线法获得该酶的米氏常数戈.[结果]随着发酵时间的延长,发酵液中淀粉酶的含量提高.在培养30h时,产酶量达到最高.该淀粉酶的最佳反应温度和pH分别为40℃和7.5.该酶具有一定的热稳定性,对酸碱条件较敏感.Na+、K+、Ca2+、Mg2+对该酶具有激活作用,Pb2+、Hg2+对该酶具有显著的抑制作用,Cu2+的影响不显著.该淀粉酶的米氏常数Km为2.31×10-3 mol/L.[结论]该研完对该菌株淀粉酶的开发及工业应用具有较强的指导意义.     

菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质研究

[目的]研究菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质.[方法]从一株碱性蛋白酶生产菌株I13中得到了碱性蛋白酶粗酶液,并研究了温度和pH对该酶液酶活力的影响.[结果]所产碱性蛋白酶的最适反应温度为40℃,在20～30℃范围内仍保持了最大活力的40%以上;最适反应pH为10.5,在pH 8.0-11.0范围内保持了最大活性的90%以上,有较宽的pH谱.[结论]该碱性蛋白酶具有开发成为洗衣粉添加剂的巨大潜力.     

发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的性质研究

[目的]研究发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的酶学性质.[方法]从发芽咖啡豆中提取α-半乳糖苷酶,研究不同温度和pH下的酶活,并确定该酶的最适温度和pH.研究了不同金属离子和不同离子强度(NaCl)对α-半乳糖苷酶酶活的影响.Lineweaver-Burk双倒数作图法测定该酶的Km和Vmax.[结果]α-半乳糖苷酶的最适温度和pH分别为45 ℃、6.0,热稳定温度范围为20～50 ℃,pH稳定范围为5.0～7.0.Na+、K+、Mg2+和Cu2+对α-半乳糖苷酶酶活的影响不大,Zn2+促进酶活,Ba2+对酶活稍有抑制,Hg2+强烈抑制α-半乳糖苷酶的活性.在0～0.25 mol/L离子强度(NaCI)范围内,α-半乳糖苷酶的酶活不受影响.Lineweaver-Burk双倒数作图法测定该酶的Km和Vmax 分别为0.556 mmol/L、1.19 WnoVmin,[结论]该研究为发芽咖啡豆α-丰乳糖苷酶的进一步应用提供理论指导.     

党参总皂苷的提取·分离和纯化

[目的]优化党参皂苷的提取工艺,并对皂苷进行纯化.[方法]用正交试验优化党参皂苷的提取工艺,通过考察大孔树脂类型、洗脱液pH值对党参皂苷纯度的影响,优化皂苷的纯化方法.[结果]党参皂苷提取的最佳工艺为:提取时间为36 h,提取温度为45 ℃,料液比为1:6;D101大孔吸附树脂为党参皂苷吸附的最佳树脂,洗脱液pH值为9左右时,得到的皂苷浓度最高.[结论]该试验得到了较高纯度的党参皂苷,为获得高纯度党参皂苷提供了保证.     

酶固定化技术的研究和进展

酶是一种生物催化剂,广泛用于食品加工、医药和精细化工等行业.而酶自身的缺点如稳定性差,不能重复使用而难以广泛的在工业中应用.因此,人们开始对酶的特性进行研究,通过模仿人体膜的作用机理,利用固定化技术对其加以固定改造,克服它的固有缺陷.21世纪,酶固定化技术的发展因其诸多优点,正得到全面深入的研究.     

日本刺沙蚕纤溶酶的酶学性质及其分类

目的:探讨日本刺沙蚕纤溶酶(NJF)的最适反应温度和最适反应pH 值以及金属阳离子和蛋白酶抑制剂对酶活性的影响,确定NJF的酶学分类.方法:采用偶氮酪蛋白(azocasein)水解法测定NJF的最适温度及最适pH 值;利用10种金属阳离子(Na+、K+、Cu2+、Ca2+、Zn2+、Co2+、Fe2+、Fe3+、Al3+和Hg2+)确定金属离子对NJF酶活性的影响;采用9种蛋白酶抑制剂(PMSF、EDTA、EGTA、β-巯基乙醇、苯甲脒、碘乙酸、抑肽酶、胃酶抑素A和大豆胰蛋白酶抑制剂)确定NJF的蛋白酶分类.结果:NJF具有较宽的热稳定性及pH稳定性范围,在40～80℃及pH7～11范围内有较好的稳定性,NJF酶最适温度为60℃,最适pH值为9;Hg2+能够强烈地抑制NJF的酶活性,Cu2+具有较弱的抑制作用,而其他金属阳离子对酶活性无明显抑制作用;NJF的酶活性能被典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF完全抑制.结论:NJF是一种典型的丝氨酸蛋白酶.     

Reaction Characteristics Between Sinter and Serpentine

Metallurgical and Materials Transactions B - In recent years, adding an appropriate amount of serpentine into a blast furnace (BF) is considered to be a popular countermeasure to cope with the...     

Studies on gene control regions. 2. Enzymatic joining of chemically synthesized lactose operator deoxyribonucleic acid segments

The T4 polynucleotide ligase catalyzed joining of six chemically synthesized deoxypolynucleotides corresponding to lactose operator DNA has been investigated. Joining was studied using various combinations of segments. Joining reactions involving multiple sites and the formation of duplex operator DNA were complete in a few hours. Joining reactions involving a single site and the formation of only one strand of operator DNA required several days and repeated annealing in order to go to completion. These studies have permitted the synthesis on a preparative scale (several nanomoles) of operator duplexes and operator single strands.     

Glycosidases are present on the surface of Drosophila melanogaster spermatozoa

We investigated the presence of enzymes on the surface of Drosophila melanogaster spermatozoa that might bind the carbohydrate residues of the egg shell. Spectrophotometric and fluorimetric studies were used on whole spermatozoa to assay galactosyltransferase and glycosidase activities. No galactosyltransferase is present on the sperm surface, whereas two glycosidases, beta-N-acetylglucosaminidase (GlcNAc'ase) and alpha-mannosidase (Man'ase), have been evidenced. They have an optimal pH of 6-6.5 and 4, respectively. The same glycosidases were detected as soluble forms probably secreted by the seminal vesicle epithelium. We suggest that these enzymes might be involved in the recognition of alpha-mannose and beta-N-acetylglucosamine residues present on the egg shell at the site of sperm entry.     

Nd2O3催化聚合松香酯化反应的动力学研究

研究了氧化钕、氧化钐、氧化钆、纳米氧化镧和纳米氧化铈等5种稀土氧化物催化聚合松香酯化反应的活性,Nd2O3催化聚合松香与辛醇、乙二醇和甘油进行酯化反应的动力学.结果表明,所选5种稀土氧化物均能有效地催化聚合松香的酯化反应,其中Nd2O3的催化效果最佳.在醇过量的条件下,Nd2O3催化聚合松香与辛醇、乙二醇和甘油的酯化反应是受界面化学反应扩散控制的一级反应,其动力学方程分别为k=2.74×105e-58087/RT、k=6.78×105e-60957/RT和k=8.11×106e-69279/RT.随着脂肪醇元数的增加和结构的复杂化,聚合松香酯化反应的表观活化能随之增大.     

荔枝果肉多酚氧化酶酶学性质研究

[目的]为研究荔枝果肉多酚氧化酶(PPO)的作用机制,控制荔枝果肉在贮藏和加工过程中的酶促褐变提供理论依据.[方法]从荔枝果肉中提取多酚氧化酶,并对其酶学性质进行研究.[结果]荔枝果肉PPO的最适反应温度为55 ℃,对热稳定性较强,90 ℃水浴保温30 min后剩余相对酶活为22.6%;pH值为7.0时该酶的活力最强,在pH值6.5～8.0范围内酶活力较稳定;邻苯二酚与该酶的结合能力最强,其次为4-甲基儿茶酚;谷胱甘肽为该酶的最好抑制剂,其次为半胱氨酸、抗坏血酸、NaF和亚硫酸钠;SnCl2和FeSO4对该酶活性有抑制作用,而CuSO4、MgCl2和CaCl2对其活性有促进作用.[结论]该研究确定了荔枝果肉多酚氧化酶的最适作用条件.     

电解净化废液脱硫的反应特性研究与工程化应用

探索了影响电解净化废液在低浓度二氧化硫烟气吸收脱硫过程中的关键因素,并摸索了最佳反应工艺条件,结果表明,烟气中二氧化硫初始浓度、吸收液pH、液气比和氧化反应时间等都对脱硫效率有明显的影响;在现场小试条件下,电解净化废液脱硫最佳工艺条件为:烟气中二氧化硫初始浓度≤4 000mg/m3、吸收液pH≥6、液气比(L/G)4.5L/m3、脱硫后液氧化时间控制10min。以该试验结论为依据,设计了以电解净化废液为主要脱硫介质,异常情况下氢氧化钠碱液进行保障吸收的双介质脱硫工艺,同时设计开发了具有双循环系统的脱硫塔并实施应用,吸收效果显著,尾气全时达标。     

煤水浆触变性的试验研究

煤水浆是一种具有触变性的固液两相悬浮体,鉴于过去对触变性仅能进行一般的定性研究,本文介绍了一种简便易行而且准确可靠的定量试验研究方法,分析了利用这种试验方法所得出的大量试验结果,并讨论了对煤水浆触变性有着明显影响的三种因素（剪切速率、煤水浆浓度和温度）及其具体影响规律。     

Studies on Oxygen Characteristics of YBa2 Cu3 O7-x and Its Applications to Air Separation and Gas Purification

Since the discovery of high temperature supercon ductive material YBa2Cu3O7-x ( YBCO in short ),many researchers have especially studied the relation ship between superconductivity and oxygen contents inthis oxide. It was found that the supercondu…     

FeO和V_2O_5反应机理的研究

在理论分析的基础上,通过DSC实验对FeO与V2O5发生的反应进行测定,得到各相变温度,结合高温淬火实验,运用X射线衍射分析淬火物质的物相组成,研究FeO和V2O5的反应机理。结果表明,FeO与V2O5反应的实质是V2O5分解出的V2O3与FeO发生反应生成FeV2O4;V2O5与FeO的氧化产物Fe2O3发生反应生成FeVO4;V2O3与FeO和Fe2O3发生反应生成Fe2VO4。当830℃T970℃且FeO的含量低于50%时,FeO与V2O5发生氧化还原反应,反应产物为Fe2O3和V3O5;当970℃T1 270℃且FeO的含量高于50%低于70%时,FeO与V2O5的反应产物以FeVO4的形式存在;T1 270℃且FeO的含量高于35%时,FeO与V2O5的反应产物以Fe2VO4的形式存在。     

Reaction of TiB2 with Re

Conclusions The constitution diagram constructed for the quasibinary TiB₂-Re system is of the eutectic type, with T_eut = 2500 ± 50°K. The eutectic composition is 22 wt.% TiB₂ + 78 wt.% Re. The system is characterized by small intersolubility of its components. The eutectic temperature recorded is the highest of any MeIVB₂-Re system.Translated from Poroshkovaya Metallurgiya, No. 2 (230), pp. 76–78, February, 1982.