固定化黑曲霉增殖细胞生产低聚果糖的研究

黑曲霉孢子经海藻酸钙包埋３３ｈ后得到的固定化增殖细胞其酶活性达到最高，机械强度仍保持较高水平（为起始时８０％），最适ｐＨ为５．０，与游离酶相同，最适温度为５５℃，比游离酶高５℃；有害离子对其影响较小，其Ｋｍ（以蔗糖为底物）为８２ｍｍｏｌ．将固定化增殖细胞装入填充式反应柱，产品中低聚果糖含量在５０％～５５％，操作一个月活性保持不变。     

共固定化生产高含量低聚果糖的研究

生产低聚果糖过程中，副产物葡萄糖抑制酶反应，降低了产物中低聚果糖的含量。本文采用两种固定化方法，通过去除或转化葡萄糖，从而制备出高含量的低聚果糖。首先以２％戊二醛和０．１％丹宁于２０℃时处理固定化黑曲霉菌体与葡萄糖氧化酶，将菌体与酶共包埋得到固定化颗粒，所得到的共包埋产物于５０℃ｐＨ５．０条件下与５０％蔗糖溶液摇瓶反应２４ｈ，得到７１％的低聚果糖；又采用固定化黑曲霉增殖细胞与固定化葡萄糖异构酶协同作用方法，将５０％蔗糖溶液通入柱式反应器，连续生产得到高含量低聚果糖，产物中低聚果糖和果糖含量分别为６３％和１６％。     

菊芋块茎制高果糖浆的研究

通过菊芋干片与菊粉提取液的制备、菊粉酶解、精制生产高果糖浆、菊粉酶解的适宜条件为：底物糖浓度１２％，加酶量２６ｕ／ｇ糖，ｐＨ５．０￣５．５，最适温度为５０℃，酶解６ｈ，底物降解率可达９８．５％，菊粉酶解液经活性炭脱色，离子交换树脂处理，减压浓缩等步骤，制得糖浆的固形物含量为７３．８％，果糖含量（占固形物）为８３．６％，同时对糖浆的ＤＥ值、色度、灰分、微生物含量等指标进行了测定。     

稻米中普鲁兰酶的纯化与性质的研究

稻米的普鲁兰酶（ＰｕｌｌｕｌａｎａｓｅＥ．Ｃ．３．２．１．４１）用ＤＥＡＥ－纤维素吸附，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤，聚丙烯酰胺盘状凝胶电泳纯化，得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的纯酶。纯酶作用的最适温度为５０℃，最适ｐＨ为５．５。以普鲁兰（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）为底物酶的米氏常数Ｋｍ为０．０１２５％，以支链淀粉为底物，酶的米氏常数Ｋｍ为２．５％，用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶层析法测得酶的分子量为７００００。     

双酶法生产高纯度低聚果糖的研究

以果糖转移酶作用于蔗糖制得的低聚果糖为原料，将葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶协同作用于３０％的总糖，在３０℃，ｐＨ５．０条件下，通气反应１６ｈ，得到纯度为８６．９２％（总低聚果糖占总糖）的低聚果糖。     

茶多酚对菠萝蛋白酶的分离及特性的影响研究

本研究用从茶叶中提取的多酚类物质分离菠萝蛋白酶、井研究了菠萝蛋白酶与茶多酚结合后的性质、结果表明,用０．５％的茶多酚提取物对菠萝蛋白酶的沉淀回收率达７８％,茶多酚与菠萝蛋白酶的结合比为１∶６４３（ｍｇ∶ｕ）。等电聚焦电泳图谱表明菠萝皮汁中有６种同工酶组份．这６种酶组份均可与茶多酚结合形成沉淀而得以分离,结合后酶的等电点（ｐＨ３．６０,ｐＨ４．９０,ｐＨ５．３５,ｐＨ６．５０,ｐＨ７．８０,ｐＨ９．２５）、最适ｐＨ值（ｐＨ６．５～８．５）以及最适温度（６０℃）不改变,但酶对底物酪蛋白的亲和力下降（游离酶Ｋｍ＝８．１×１０￣６ｍｏｌ／Ｌ,结合酶Ｋｍ＝１．３９×１０￣５ｍｏｌ／Ｌ）。酶的稳定性有明显的提高,常温下的半衰期由游离酶的５天延长至２７天。酶稳定性的提高与茶多酚的抗氧化特性有关。     

几丁质固定化无花果蛋白酶的研究

载体几丁质通过甲酸和戊二醛活化共价偶联无花果蛋白酶，固定化反应在给酶量为１．０ｍｇ／ｇ载体，ｐＨ７．５，４℃进行１５ｈ。制备的固定化酶表观Ｋｍ值（酪蛋白）为０．９５ｍｇ／ｍｌ，溶液酶的Ｋｍ值为０．３８ｍｇ／ｍｌ，固定化酶的最适ｐＨ范围变宽，由溶液酶的最适ｐＨ７．５－７．８变为在ｐＨ６－８范围内酶活性保持稳定；固定化酶的最适温度由溶液酶的６０℃变为３７℃。重复水解酪蛋白７次后，固定化酶保持原酶活性５     

酶水解法制备大豆肽的研究

采用酶水解法，由大豆分离蛋白制备大豆肽。对五种蛋白酶水解大豆分离蛋白的特性进行了比较。筛选出水解能力最强的碱性蛋白酶，其最佳水解条件为：温度５５℃、ｐＨ１０．５、酶用量５％（Ｖ／Ｗ，相对于底物蛋白）、底物浓度５％（Ｗ／Ｖ）、反应时间６ｈ。水解度可达到３０％～４０％，产物平均肽链长度２．５～４．０。水解产物经超滤膜分离后的混合物溶解性良好，ＮＳＩ值达９８％以上。水解产物有很强烈地的苦味，用２０％的活性炭粉可以有效地吸附脱苦。脱苦的最佳条件是：温度５０℃～５５℃、ｐＨ４．０～４．５、活性炭／蛋白质＝０．１～０．２／１（Ｗ／Ｖ），慢速搅拌２ｈ。     

利用重组葡萄糖脱氢酶提高低聚果糖纯度

用IPTG（诱导基因工程菌）M15／pQE31-gdh表达葡萄糖脱氢酶，纯化，该重组葡萄糖脱氢酶用于高纯度低聚果糖生产研究。以含量为51．11％（低聚果糖／总糖）低聚果糖的产品为底物，葡萄糖脱氢酶（5U／g总糖）作用2h，将低聚果糖含量提高到61，37％，消除了48，81％的葡萄糖。以30％（w／v）蔗糖为底物，利用有果糖基转移酶活性的米曲霉GX0015（15U／g总糖）作用6h后，加入葡萄糖脱氢酶（5U／g总糖）协同作用4h，得到成分为：低聚果糖含量76．87％、葡萄糖11．05％、蔗糖含量5.21％的产品。由果糖基转移酶和葡萄糖脱氢酶组成的系统能够有效降低葡萄糖含量，提高低聚果糖含量。     

菊粉酶酶解菊芋提取液的试验

报道黑曲霉ＡＬ－１５４菊粉酶产生和酶解菊芋提取液的适宜条件：５％菊芋提取液,２％玉米浆、０．３％酵母膏的基本培养基,该酶活力达１４６．４ｕ／ｍｌ,是适培养条件为：ＰＨ４．５－５．０,３０℃,时间４８ｈ,酶解菊芋提取液的最适工艺条件为：ＰＨ５．０,６０℃,底物总糖浓度为１０－２０％,酶用量３．０ｕ／ｇ菊糖,酶解时间１０ｈ,底物降解率达９７．２％,酶解产物中果糖占总糖的８６．１％。