乳链菌肽发酵工艺的研究

对于乳链菌工艺,考察了发酵温度、接种量、发酵液初始pH值、发酵过程pH值变化等的影响。实验结果表明,发酵温度30℃,接种量5%~6%(vol),发酵液初始pH值7.5时,乳链菌肽发酵液效价较高。采用流加浓度为5 mol/L的NaOH溶液,将发酵液pH值控制在6.20~6.25,发酵液效价可稳定于6 500~7 500 IU/mL,是没有流加碱液发酵的2.5倍。     

发酵液中1,3-二羟基丙酮的分离提取研究

对氧化葡萄糖酸杆菌CGMCC1.23突变株GM51发酵得到的1,3-二羟基丙酮(DHA)发酵液,首先采用300mg?L?1天然高分子絮凝剂壳聚糖和3%(w/v)活性炭对DHA发酵液进行预处理,然后浓缩发酵液至含水量为10%～20%范围内,加入体积比为3:1的乙醇醇沉脱盐和蛋白杂质后,蒸发发酵液,于5℃大于90%乙醇水中结晶得到DHA产品。结果表明整个工艺过程中DHA产品的收率为72%,高效液相色谱检测DHA晶体纯度99%。本研究结果对发酵液中DHA大规模分离提取应用提供了可靠的基础。     

灵芝发酵液的成分检测及美白与抗衰老功效评价

为开发灵芝发酵液在化妆品领域的应用,使用葡萄酒酵母发酵灵芝并测定发酵液中所含有的多糖、多酚、黄酮和多肽含量。通过DPPH自由基清除实验和羟自由基清除实验对灵芝发酵液的抗氧化能力进行检测,并测定其对成纤维细胞存活率的影响以评估其可能在抗衰老方面发挥的作用。最后通过体外酪氨酸酶实验和小鼠黑色素瘤细胞内的酪氨酸酶活性及黑色素合成抑制实验对灵芝发酵液的美白功效进行评价。结果表明,灵芝发酵液富含多糖,质量浓度为9.910 g/L,多酚、黄酮和多肽的质量浓度分别为0.054,0.045和2.931 g/L。体积分数分别为25.89%和42.18%的灵芝发酵液可清除50%的DPPH自由基和羟自由基;体积分数为0.05%~0.2%范围内的灵芝发酵液可有效促进成纤维细胞增殖;灵芝发酵液对酪氨酸酶活性抑制率高达73.22%,其通过抑制酪氨酸酶活性起到抑制黑色素合成的作用。因此灵芝发酵液具有一定的抗衰老和美白功效。     

副干酪乳杆菌的发酵条件优化及其发酵液功效评价

为开发副干酪乳杆菌发酵产物在化妆品领域的应用,对副干酪乳杆菌的培养条件运用单因素实验进行优化并测定副干酪乳杆菌发酵液中多肽和总糖的含量。对副干酪乳杆菌发酵液进行DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率实验和ABTS·+抗氧化能力测定。用HaCat细胞建立UV损伤细胞模型,采用Cusabio人白介素10(IL-10)和人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫试剂盒进行检测。并测定副干酪乳杆菌发酵液对HaCat细胞溶酶体活性的影响。抗氧化实验数据结果表明副干酪乳杆菌发酵液具有DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除能力和ABTS·~+抗氧化能力。5%的副干酪乳杆菌发酵液能使IL-10表达量较模型组下降18?pg/mL,说明副干酪乳杆菌发酵液具有抗UV引起的免疫抑制的功效。10%的副干酪乳杆菌发酵液对CTSB表达的抑制作用与阳性对照组(乙酰水杨酸)相当,说明10%的副干酪乳杆菌发酵液抗炎效果与5?mmol/L乙酰水杨酸相当。在5%副干酪乳杆菌发酵液作用下,溶酶体活性较模型组提高23%,进一步说明副干酪乳杆菌发酵液具有良好的抗炎效果。     

放线菌AF1发酵液提取物对病原微生物的抑菌作用和稳定性分析

对放线菌菌株AFI乙酸乙酯提取物的抑菌谱做了研究。抑菌活性试验表明:AF1发酵液提取物对8种植物病原真菌和10种革兰氏阳性病原菌都具有抑制活性,对4种革兰氏阴性致病菌无抑制作用。在供试的8种植物病原菌中,放线菌AF1发酵液提取物对香蕉枯萎病菌(fusarium oxysporum f.sp.cubense)和苦瓜枯萎病菌(fusarium oxysporum f.sp.momodicae)的抑菌率达到85%以上。稳定性试验结果表明:菌种AF1发酵液对紫外线、热和酸碱较稳定,室温至80℃时稳定,90℃时活性丧失,在pH 2~10范围内稳定,耐受紫外线照射。试验表明该菌株发酵液提取物对革兰氏阳性致病菌的抑制作用较好,有较强的稳定性,具有一定的开发价值。     

反相高效液相色谱法测定发酵液中子囊霉素含量

建立用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定发酵液中子囊霉素含量方法。采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以V(乙腈)∶V(水)=70∶30为流动相,柱温40℃,流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL。子囊霉素标准品质量浓度在0.02~2.0 mg/mL范围内线性关系良好,线性回归方程为ρ=0.003 88A-0.001 41,r=0.999 97。平均回收率为99.79%(n=9),相对标准偏差(RSD)为0.45%。     

高效液相色谱法测定发酵液中生物素含量

采用高效液相色谱法测定发酵液中生物素的含量.结果表明,样品浓度在5～150 μg·mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为0.01 μg·mL-1,精密度实验的RSD为0.21%,稳定性实验的RSD为6.6%,发酵液在15 h内检测结果无明显差别,加样回收率在95%～102%之间.该方法简便、快捷、准确、重现性好,可用于发酵液中生物素的含量测定.     

半连续发酵对提高阿维菌素放罐体积的影响

为提高阿维菌素发酵放罐体积,研究了其半连续发酵中的补料工艺。在100 L、50 L发酵罐中进行平行试验,发酵中后期分别补入体积分数15%的补料培养基和培养50 h后的发酵液,比较效价增长情况;研究分别补入体积分数为15%和8%的发酵液对效价增长的影响,并以试验效价与回归效价差的正负为确定发酵放罐时间的依据。结果表明,补入发酵液(斜率K=0.0375)较补入补料培养基(斜率K=0.0346)效价增长得更快;补入体积分数15%的发酵液(斜率K=0.0364)比补入体积分数8%的发酵液(斜率K=0.0298)效价增长更快,但同时稀释作用也更明显,宜在补入发酵液72 h后放罐;补入体积分数8%的发酵液效价增长相对较慢,但稀释作用相对不太明显,宜在补入发酵液48 h后放罐。阿维菌素发酵带放后补入培养50 h后的发酵液,可以提高设备产能,增加阿维菌素发酵放罐体积。     

高效液相色谱法检测发酵液中四氢嘧啶及羟基四氢嘧啶

为实现发酵液样品中四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶的分离检测,使用高效液相色谱（HPLC）技术建立一种测定中度嗜盐菌发酵液中四氢嘧啶及羟基四氢嘧啶含量的方法。使用乙醇抽提法提取样品,采用Vertex TM NH2 (4.6×250 mm,5μm)液相色谱柱对中度嗜盐菌发酵液中四氢嘧啶及四氢嘧啶进行了分析,选用紫外（UV）检测器,对比不同检测条件。通过色谱条件优化,选定了70%乙腈作为流动相,柱温30℃,检测波长210 nm,流速0.8 mL/min。发酵液样品中四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶在各自范围内线性关系良好,两种样品的平均回收率在99.2%～102%,精密度偏差在1%～2%范围内,检出限为1.5μg/mL,定量限为5μg/mL,分离度为1.70。该方法检测范围大,具有较好的重复性、分离度及稳定性,适用于发酵液中四氢嘧啶及羟基四氢嘧啶的分离检测。     

雪白弯颈霉C41发酵液稳定性及粗提物的抑菌活性

[目的]研究雪白弯颈霉C41菌株固体发酵粗提物的抑菌活性及其发酵液在不同条件下的稳定性。[方法]采用菌丝生长速率法,以7种植物病原真菌为供试菌,测定雪白弯颈霉C41固体发酵粗提物的抑菌活性;以玉米弯孢菌叶病菌为指示菌,测定发酵液在不同条件下的稳定性。[结果]固体发酵粗提物对玉米灰斑病、玉米弯孢菌叶斑病和玉米大斑病病菌菌丝生长均具有较强的抑制作用,抑制率分别为90%、84.38%和80%。发酵液在25~60℃范围内有较好的热稳定性,温度高于60℃则稳定性降低;有较广泛的酸碱稳定性,在pH值为6时抑菌活性最好;发酵液对日光和紫外线的稳定性较强。[结论]雪白弯颈霉C41菌株的代谢产物具有广谱的抑菌活性和较好的稳定性。     

分光光度法测定氟硅酸钠中的硫酸盐

研究了分光光度法测定氟硅酸中硫酸盐含量的方法。SO42-与BaCl2反应生成悬胶(浮)液沉淀物BaSO4,在440 nm波长处测量其吸光值,可以准确测定出氟硅酸钠中硫酸盐的含量。硫酸盐在10~200 mg/L范围内线性关系良好,线性相关系数为0.996,回收率为97.21%~104.75%。     

反相高效液相色谱法测定人尿中多种多环芳烃代谢物

建立了用反相高效液相色谱-紫外检测法同时检测人尿中6种多环芳烃羟基代谢产物的新方法。采用DiamonsilTMC18(5μm,150 nm×4.6 nm)色谱柱分离,以V(甲醇)∶V(乙酸钠缓冲液)=66∶34为流动相,在波长280 nm检测,流速为0.95 mL/min。结果表明,当9-羟基菲、α-萘酚、β-萘酚、1-羟基芘、2-羟基芴和9-羟基芴的摩尔浓度分别为0.105~500.0μmol/L,0.106~135.0μmol/L,0.120~135.0μmol/L,0.085~50.00μmol/L,0.094~200.0μmol/L和0.101~200.0μmol/L时,峰面积与质量浓度呈很好的线性关系,相对标准偏差分别为2.5%~4.4%,2.1%~4.3%,2.3%~3.2%,1.7%~3.9%,1.9%~2.6%和1.8%~3.5%(n=6),平均回收率分别为92.6%,100.4%,101.0%,91.0%,106.7%和95.5%。方法准确可靠,用于尿样测定,结果满意。     

HPLC法测定替加氟氯化钠注射液的含量

建立了用HPLC法测定替加氟氯化钠注射液的含量的方法。采用sunfire TM C185μm 4.6×250 mm色谱柱,流动相：甲醇-乙腈-水（10∶5∶85）,流速：1.0 mL·min-1,检测波长：271 nm,柱温：30℃。结果显示：替加氟进样量在10.64~4 256 ng范围内线性良好（r=1.0000）,平均回收率为100.1%（n=9）,RSD为0.65%。该方法简便、专属、准确,可用于替加氟氯化钠注射液中替加氟的含量测定。     

Role of cytidine triphosphate and cytidine diphosphate in promoting inositol entry into microsomal phosphatidylinositol

The Mn²⁺ activated incorporation of myo-inositol-³H into subfractions of phosphatidylinositol in rat liver microsomes was studied in the presence and absence of cytidine triphosphate or cytidine diphosphate choline using phosphate buffer. The distribution of labeled inositol among molecular species of microsomal phosphatidylinositol was also investigated in vivo. In other experiments, the release of radioactivity from microsomes labeled with inositol-³H in the phospholipid was measured after the addition of Mn²⁺, unlabeled inositol, and cytidine nucleotide. Similar chase experiments were conducted with microsomes containing phosphatidylcholine-¹⁴C or phosphatidyl-ethanolamine-¹⁴C. The addition of cytidine triphosphate or cytidine diphosphate choline stimulated the rate of inositol-³H entry into microsomal phosphatidylinositol by 3.5 to 4-fold and the monoenoic plus dienoic, trienoic, tetraenoic, and polyenoic species contained 6–7, 6, 78–81, and 7–9%, of the radioactivity, respectively. These latter patterns were very similar to those observed among the corresponding molecular species when the Mn²⁺ stimulated entry of free inositol into phospholipid was studied in the absence of added cytidine nucleotide. In chase experiments, the release of radioactivity from phospholipid in the presence of cytidine triphosphate or cytidine diphosphate choline was greatly enhanced by the addition of free inositol when microsomes containing phosphatidylinositol-³H, but not phosphatidylcholine-¹⁴C or phosphatidyl-ethanolamine-¹⁴C, were employed. Therefore, under the present conditions, cytidine triphosphate and cytidine diphosphate choline appear to stimulate the entry of inositol into phosphatidyl-inositol by enhancing the Mn²⁺ activated exchange reaction in rat liver microsomes. The results suggest further that phosphatidylinositol is the preferred substrate when this reaction is stimulated by cytidine nucleotide.     

水炭浆成浆性能研究

研究了水炭浆的成浆条件以及浆体的基本性能。将兰炭末原料研磨筛分为三个粒度等级(D_1200目,D_2为100~200目,D_3为60~100目)。得出以木质素磺酸钠(SL)和TPEG作为分散剂,羧甲基纤维素钠(CMC)作为稳定剂,可制备出水炭浆。设定水炭浆浓度为56%,粒度组成为D_1:D_2:D_3=80%:12%:8%,添加剂的总量占干料总量的1.5%,SL:TPEG:CMC=0.74%:0.38%:0.38%时所制备的水炭浆粘度为518mPa·s,流动性良好,稳定性长达30d,是性能优良的水炭浆制品。     

Phospholipase C catalyzed formation of sphingomyelin-14C from lecithin and N-(14C)-oleoyl-sphingosine

Commercial preparations of Clostreidium perfringens were incubated with phosphatidyl choline and N-1-(-14C) oleoylsphingosine. A radioactive product was formed which cochromatogramed with spingomyelin standard in three different solvent systems. Several other phospholipases and phosphatases were unable to catalyze this reaction. Neither choline, phosphoryl choline, cytidine diphosphate choline nor p-nitrophenyl phosphoryl choline were acitve donors. Sphingomyelin was only slightly active as a phosphoryl choline donor.     

尿素嵌入法制备纤维素氨基甲酸酯的研究

探讨了尿素嵌入法制备纤维素氨基甲酸酯(CC)的生产工艺。指出:选用聚合度为450~625、α-纤维素含量大于90/的纤维素浆粕,用14/~16/的氢氧化钠溶液,于40~50℃条件下活化处理30~40min后,与尿素以1∶2~3的比例混合,在137℃的二甲苯体系中反应2~3h,便可得到含氮量为2.4/~3.5/的纤维素氨基甲酸酯产物。该产物在氢氧化钠溶液中可形成良好的稳定溶液,过滤性好,可直接用于纺丝。     

UPLC-Q-TOF-MS法同时测定配制酒中的3种甜味剂

建立了对配制酒中安赛蜜、糖精钠、甜蜜素同时测定的超高效液相色谱-四极杆高分辨飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)。样品经稀释后直接进样,采用C18色谱柱进行分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,通过Q-TOF高分辨负离子扫描模式定性,外标法定量。结果表明,3种甜味剂在10~1 000μg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数为0.998 9~0.999 5,定量限(LOQ)为80~100μg/kg。在3个水平的加标浓度下,方法的回收率为91.3%~103.7%,相对标准偏差为2.08%~5.22%。该方法简单、快速、灵敏、定性准确,适合配制酒中痕量甜味剂的大批量快速筛查。     

洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度检测研究

建立了洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度检测方法。取洛伐他汀烟酸缓释片按照《中国药典》洛伐他汀溶出度测定法进行溶出,以0．5％十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液为溶剂,转速为100r·min-1,于45rain取样,采用高效液相色谱法测定释放度。色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈一O．5％磷酸溶液（4：1）为流动相,检测波长238nm,进样量20pL。洛伐他汀浓度在0．59--40．18μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好;回收率在99．0％～101．0％之间,相对标准偏差（RSD）为0．71％。该方法重复性好、稳定性高,适合洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度的测定。     

十二烷基硫酸钠的临界胶束浓度的测定及影响分析

临界胶束浓度(CMC)是表面活性剂活性的度量。采用电导法测定表面活性剂十二烷基硫酸钠的临界胶束浓度,并探讨了温度、NaCl或乙醇等对临界胶束浓度的影响。随着温度的升高,CMC增大;NaCl的加入量增大时,CMC在较低浓度下增大,在0.2~0.8 mmol/L范围内CMC随NaCl的量增大而降低;乙醇的加入量随体积比从0%~2.5%增大时,CMC增大,并分析了SDS的CMC发生变化的原因。