光动力结合环磷酰胺对小鼠移植瘤影响的实验研究

目的 :观察PDT结合环磷酰胺对小鼠移植肿瘤的杀伤效应。方法 :应用光敏剂加氩离子激光照射结合应用环磷酰胺对小鼠移植肿瘤进行治疗。结果 :激光光动力结合环磷酰胺治疗对小鼠移植瘤的杀伤作用较单独应用激光光动力或单独应用环磷酰胺的杀伤作用更明显 (P <0 0 1)。结论 :光动力结合化疗药物可作为治疗肿瘤的一种方法     

光动力法制备抗小鼠H22肝癌的肿瘤疫苗

研究了光动力疗法(PDT)制备的抗小鼠H22肝癌肿瘤疫苗的抗瘤效应.将昆明鼠60只,随机分为2组,每组30只.实验组取6~12周龄的昆明鼠背部皮下接种光动力疗法产生的疫苗,每3天注射一次,每次注射50μL(相当于3×105个细胞),连续两周.隔一周于第22天注射H22肿瘤细胞悬液0.1 mL(1×106个细胞);对照组:每周每次注射50μL生理盐水,连续两周.隔一周于第22天注射H22肿瘤细胞悬液0.1 mL(1×106个细胞).比较两组的抑瘤率、生存率以及两组之间免疫学的相关指标.结果表明,实验组小鼠具有显著的抑瘤效果,抑瘤率、生存率较对照组有显著提高.实验组肿瘤抑瘤率最高可达60%且长期有效,100天生存率达56%.说明光动力疗法产生的抗小鼠H22肝癌疫苗可以有效地抑制肿瘤生长,提高荷瘤小鼠的生存率,具有明显的抗瘤效应.该方法可能成为一种辅助性治疗肿瘤的手段而应用于临床.     

光敏剂竹红菌素HA在动物体内浓度分布实验研究

为了探讨光敏剂瘤内注射法在光动力治疗临床上的应用,本实验通过直接将竹红菌素光敏剂注入接种小鼠的肿瘤内,利用组织涂片法分析HA在动物体内浓度分布,在荧光显微镜下对吸收HA的组织细胞数进行观察和计数,同时在分光光度计下观察其光学特性.发现并总结了临床上的一些有用的数据,为局部注射光敏剂进行PDT治疗提供了科学依据.     

光动力治疗的研究进展

自从1960年R..I.Lipson和S.Schwant首次进行PDT(光动力治疗)研究以来,针对PDT的作用机制和临床应用进行了很多研究。近年,以PDT在分子水平的作用机制和新型光敏剂ALA介导的PDT的基础和临床研究引人注目,是当前光动力学领域的研究热点课题。PDT的作用机制研究进展以往研究认为PDT治疗的基本原理是:利用光敏剂和肿瘤组织具有高度亲合性的特点,用一定波长光激发滞留于肿瘤组织的光敏剂,产生单态氧,单态氧使细胞中毒而死亡。研究主要从生化和细胞水平进行。近年,随着分子生物学技术的发展,越来越多实验证据表明PDT作用可能与其调控…     

ZnPcS4-BSA光动力疗法治疗大鼠脉络膜新生血管的研究

目的:探讨新型光敏剂ZnPcS4-BSA(四磺酸酞菁锌与牛血清白蛋白的配合物)介导的光动力疗法对脉络膜新生血管的疗效及应用前景.方法:每只BN大鼠一眼作为实验眼,另一眼作为对照眼,在间接检眼镜下用氩激光光凝视网膜,于光凝后14、21、28天时行眼底光学相干断层扫描(OCT)和荧光血管造影(FFA)等检查.光凝21天后,进行光动力治疗(PDT),照射能量密度为50J/cm2,PDT1和PDT2两组分别以ZnPcS4-BSA和ZnPcS4为光敏剂,于治疗后24小时和7天进行眼底镜,OCT和FFA等检查,检查后作组织病理学光镜和电镜的观察.结果:光凝后14天时,OCT检查见光凝斑视网膜变薄,脉络膜反射被遮蔽,FFA见少量荧光素渗漏,光镜检查见视网膜神经层变薄.光凝21天后,OCT检查见光凝斑视网膜色素上皮(RPE)层和脉络膜毛细血管层反射光带增厚,光凝后21和28天时,FFA检查分别有55%和35%的光斑有点状荧光素渗漏,光镜检查有脉络膜新生血管形成.PDT1和PDT2组治疗后24h FFA检查CNV各有30%和25%被封闭,7天后各有60%和45%,两组间总的有效封闭率有显著性差异.光镜和电镜检查,PDT2组比PDT1组视网膜色素上皮细胞损伤更为严重.结论:ZnPcS4-BSA介导的光动力治疗一周后能有效地封闭脉络膜新生血管,比用ZnPcS4介导的光动力治疗效果更好.     

光动力学疗法与He-Ne激光照射脾区联合治疗荷瘤小鼠的实验研究

由于激光的穿透深度有限，光动力学疗法对深部及较大体积的实体瘤治疗效果不佳，目前人们致力于PDT治疗与传统治疗方法联合应用的研究：本实验以小鼠S180肉瘤为研究对象，观察PDT与He—Ne激光照射脾区联合治疗对小鼠肿瘤的抑制率和生存期的影响，结果：联合治疗组对肿瘤的抑制率最高，生存期最长。     

细菌外排泵抑制剂对光动力疗法防龋效果的影响

目的:探讨细菌外排泵抑制剂(microbial efflux pump Inhibitor,EPI)———维拉帕米对以甲苯胺蓝O(toluidine blue O,TBO)为光敏剂的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)抑制牙菌斑生物膜内主要致龋菌作用的影响。方法:以变形链球菌、血链球菌、嗜酸性乳杆菌和粘性放线菌为实验菌株,建立牙菌斑生物膜模型。以维拉帕米作为细菌外排泵抑制剂,根据在PDT过程中加入维拉帕米和光敏剂的先后顺序,实验分为5组。A组:生理盐水处理组。B组:单纯PDT处理组。C组:同时加入光敏剂和维拉帕米PDT处理组。D组:先加入维拉帕米后加入光敏剂PDT处理组。E组:先加入光敏剂后加入维拉帕米PDT处理组。平板菌落计数观察牙菌斑生物膜活性,并运用激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)对处理后的牙菌斑生物膜进行断层扫描、分析。结果:与生理盐水处理组相比,单纯PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活的数量(CFU/mL)明显减少(P<0.05),其抑菌率为81.02%;与单纯PDT处理组相比,加入维拉帕米的PDT处理组内牙菌斑内致龋菌存活数量有下降趋势。其中先加入维拉帕米后加入光敏剂PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活数量显著性下降(P<0.05),抑菌率高达93.60%;激光共聚焦显微镜观察发现菌斑生物膜发生明显的变化。结论:实验表明光动力疗法有明显的防龋效果,且细菌外排泵抑制剂对PDT防龋效果有促进作用。     

氦氖激光照射胸腺区促进荷瘤小鼠T细胞的CD59表达与活化信号转导

探讨低功率氦氖激光照射对荷瘤小鼠T细胞CD59表达及其功能的影响.将(BALB/C)小鼠分为4组:Ⅰ组不做处理;Ⅱ组仅致瘤;Ⅲ组致瘤后每日照射胸腺区;Ⅳ组致瘤后隔日照射胸腺区.致瘤后第20天处死小鼠,分离培养胸腺T细胞.采用噻唑蓝(MTT)比色法测T细胞增殖,用免疫组化和免疫荧光测T细胞CD59表达量,然后用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测T细胞活化后白介素2(IL-2)水平.用激光共聚焦测T细胞胞浆内钙离子变化,以及用流式细胞术测T细胞活化为CD+29T细胞的能力.结果表明,照射组肿瘤生长受抑;荷瘤组T细胞的CD59表达量、白介素2水平、增殖能力、钙离子浓度及活化的CD+25T细胞水平均低于正常组,但照射组明显高于非照射组.由此可见,激光照射促进了荷瘤小鼠T细胞CD59的表达,增强了其活化信号的转导.     

血卟啉单甲醚介导的光动力作用对小鼠肝癌细胞生长抑制的初步研究

目的：观察血卟啉单甲醚介导的光动力作用对小鼠肝癌H22细胞生长的抑制作用。方法：采用倒置显微镜观察和MTT法检测血卟啉单甲醚介导的光动力作用后小鼠肝癌H22细胞的生长情况。结果：血卟啉单甲醚介导的光动力作用显著抑制小鼠肝癌H22细胞的生长,在一定光能密度条件下,细胞生长抑制作用跟血卟啉单甲醚浓度间呈剂量依赖关系。倒置显微镜下观察到光动力作用组癌细胞数量显著减少,细胞固缩,而单纯光照组,单纯血卟啉单甲醚组和假照射组三组间无明显差异;MTT法示光动力组细胞抑制率显著高于单纯光照组、单纯血卟啉单甲醚组和假照射组（P〈0.05）,单纯血卟啉单甲醚组和假照射组间无明显差异（P〉0.05）。结论：血卟啉单甲醚光动力学作用对小鼠肝癌细胞H22生长抑制作用确切。     

新型光敏剂BF01光动力治疗人肝癌的实验研究

探讨光敏剂BF01光动力对人肝癌细胞株bel- 7402体外杀伤效应和体内抑瘤效 应及其作用机制。CCK-8法检测同一激光强度不同给药浓度的(0、0.8、3.2 μmol·L－1)BF01光动力(激光剂量2.4 J/cm²,光照时间 :1min/well,激光波长652 nm)处 理下对bel-7402细胞的抑制率和IC50,流式 细 胞术检测bel-7402细胞死亡方式,DAPI染色 观察细胞凋亡特征,光动力后检测bel-7402活性氧、共聚焦显微镜 观察亚细胞定位,建立 裸鼠人肝癌细胞模型,绘制肿瘤生长曲线,观察治疗效果。BF01-PDT治疗组能明显 抑制bel-7402肿瘤细胞增殖,BF01的浓度为6.4 μmol·L－1时,其杀伤率到86%,半数杀伤 浓度IC50 μmol·L－1,检测细 胞死亡方式主要是以晚期凋亡为主,BF01-PDT作用 bel-7402细胞后,经DAPI染色细胞核的形态呈现出凋亡的特征,活 性氧水平随给药浓度 增加而增加,亚细胞定位在线粒体,体内实验表明BF01-PDT可以明显抑制人肝癌肿瘤生长 。光敏剂BF01介导的光动力疗法对人肝癌细胞及小鼠体内肿瘤生长抑制作用明显,光 动力疗法以细胞凋亡为主,其机制可能与光敏剂BF01定位在肿瘤细胞的线粒体,增加 bel-7402细胞中ROS含量有关。     

电动汽车无线充电过程中电磁场对小鼠免疫特性影响

研究了电动汽车无线充电过程中电磁场对小鼠免疫特性的影响.72只小鼠随机分为对照组和处于线圈不同位置的a、b、c三个实验组,两线圈中心位置放置a组,X轴方向20 cm处放置b组,Y轴方向20 cm处放置c组.在充电频率为45 kHz、接收功率为22 kW环境下,每天全身暴露2 h,在1周、2周、4周后分别检测小鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-6、IgG含量和脾脏T细胞亚群（CD3+CD4+、CD3+CD8+）的变化,发现:1周后,c组与对照组、b组相比IL-6均有降低现象,c组与b组相比TNF-α有降低现象;2周后,a组与对照组相比TNF-α存在升高现象;4周后,a组、c组与对照组相比TNF-α均有降低现象,a组与对照组相比IFN-γ存在下降现象.以上变化均有显著性差异（P < 0.05）,但各参数数值的升高和降低都在正常值范围内.1、2、4周后a、b、c三组及对照组之间IL-12、IgG含量和各脾脏T淋巴细胞指数均无显著性差异（P>0.05）.实验结果表明,该实验条件下,不同时段的不同实验组的小鼠免疫参数均在正常范围内,搭建的无线充电环境对小鼠免疫特性没有影响.     

结直肠癌患者抗肿瘤免疫参数的比较

目的比较总淋巴细胞计数、CD4+CD25+Treg细胞、Th/Tr淋巴细胞比值、CD4/CD8比值评估结直肠癌患者抗肿瘤免疫状态的意义。方法应用流式细胞术检测60例结直肠癌患者和30例健康者外周血Th/Tr比值、CD4/CD8比值,计算CD4+CD25+Treg计数、淋巴细胞总数,并与30例健康志愿者进行比较。结果结直肠癌患者总淋巴细胞计数较健康志愿者减少,CD4+CD25+Treg较健康志愿者增多(P<0.05);有转移与无转移的结直肠癌患者总淋巴细胞计数、CD4+CD25+Treg细胞计数分别为1478±349vs1576±369(P>0.05)、121±47vs107±64(P>0.05);结直肠癌患者Th/Tr比值小于健康志愿者(P<0.01),有转移结直肠癌患者Th/Tr比值小于无转移患者(P<0.01);CD4/CD8比值在患者与健康志愿者间无统计学差异(P>0.05),且与有无转移无关。结论Th/Tr比值对结直肠癌患者抗肿瘤免疫状态的评估可能优于总淋巴细胞计数、CD4+CD25+Treg细胞计数和CD4/CD8比值。     

As2O3联合H22源exosome的抗肿瘤作用研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）联合小鼠肝癌（H22）源exosome对小鼠皮下种植性肝癌（H22）模型的抗瘤作用。方法：超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB／c小鼠皮下荷瘤模型．实验分4组：空白成瘤对照组、As2O3组、As2O3联合exoeome组和exosome组。观察As2O3、exosome、及其联合应用的体内抗瘤效应;监测在体肿瘤的生长情况;计算抑瘤率、生存率：免疫组织化学法检测肿瘤组织中浸润的CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞。结果：与空白成瘤对照组比较,As2O3组、及其与exosome联合组的肿瘤生长明显放缓（P〈0．05）。其抑瘤率分别为44．58％、66．27％。As2O3组及As2O3联合exosome组肿瘤组织中浸润的CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞明显增加（P〈0．05）。结论：As2O3与exosome联合应用对小鼠皮下种植性实体性肝癌（H22）有协同治疗效应。     

Use of monoclonal antibodies and lectins in the study of subpopulations of lymphoid cells in normal state and in leukemia

The heterogeneity of cell populations with peanut agglutinin receptors in reactive tonsilar tissue has been stated. It contains B lymphocytes (HLA-DR+, CD 10+, IPO-10+ cells), part of T-cells (CD 4+), but no CD 8+ lymphocytes. PNA+ CD 10+ cells are the normal analogues of centrocytic non-Hodgkin's lymphomas.     

PDT对SW480细胞和转染CD自杀基因的SW480结肠癌周期和凋亡的影响

目的:观察PDT对SW480细胞和转染CD自杀基因的SW480结肠癌细胞周期和凋亡的影响.方法:采用脂质体基因转移技术将CD基因转染SW480结肠癌细胞后,进行PDT处理,用流式细胞仪分析ALA-PDT结合CD/5Fc自杀基因系统对结肠癌细胞周期和凋亡的影响.结果:ALA-PDT可使SW480细胞G1,细胞比率明显降低,S期细胞比率升高;ALA-PDT不会增加SW480细胞凋亡.PDT与5-Fc结合对SW480-CD细胞各周期比率的影响与对照组相似,表明对各期细胞影响度相似;两种方法结合可以明显诱导SW480细胞凋亡.结论:静止期SW480细胞对PDT比较敏感,增殖期细胞相对不敏感.PDT与5-Fc结合对静止期和增殖期癌细胞均有杀伤作用,且可明显诱导细胞凋亡.     

The expression of an antigen interacting with monoclonal antibody IB4 on the surface membranes of normal human leukocytes and in lymphoproliferative diseases

Monoclonal antibody (MAb) 1B4 of IgG3 isotype reacting with 55 +/- 10% peripheral blood lymphocytes was obtained. MAb 1B4 is bound with 100% of B and NK cells and 50-70% of T cells in blood. The most part of CD8+ cells (60-100%) and approximately 50% of CD4+ cells belong to 1B4+ population. T-ALL cells do not express 1B4 antigen. Analysis of reactivity of MAb 1B4 with transformed malignant cells has shown that 1B4 antigen appeared in the process of differentiation of B lymphocytes at the state of pre-B cells and disappeared with activation of B lymphocytes and transition to plasma cells.     

ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞凋亡的影响

目的:通过细胞学水平研究不同剂量ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞凋亡的影响。方法:以不同剂量的ALA(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)与C6胶质瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果:对照组没有细胞凋亡,ALA-PDT组随着剂量的增加细胞凋亡数增加。尤其晚期凋亡数明显增加,用药剂量增加至40μg/cc才能达到活细胞少于50%,即使剂量增加到160μg/cc,还是有19.7423的活细胞存在。结论:单纯用ALA激光PDT治疗不能达到完全将肿瘤细胞杀灭,ALA40mg/kg激光光动力学治疗才能得到明显的治疗效果。     

光动力疗法对Louis肺癌鼠的杀伤及免疫效应

应用光动力疗法对 30只接种Louis肺癌瘤株的昆明小鼠作杀伤实验研究。对实验组与对照组荷瘤鼠抑瘤曲线、抑瘤率及免疫学指标进行检测。结果表明 ,两组肿瘤生长曲线存在明显差异 (P<0 0 5 )。两组肿瘤生长体积和肿瘤重量均存在明显差异 (P <0 0 1)。实验组瘤体积抑制率为 5 2 94 % ,瘤重量抑制率为 37 2 4 %。各免疫指标与对照组差异有显著性。说明光动力疗法对肿瘤细胞具有杀伤和抑制生长作用 ,并且对荷瘤小鼠的免疫功能有调节作用     

Interfering with Lactate‐Fueled Respiration for Enhanced Photodynamic Tumor Therapy by a Porphyrinic MOF Nanoplatform

Lactate is a prominent energy substrate for oxidative tumor cells. Interfering with the lactate‐fueled respiration of oxidative tumor cells would be a promising therapeutic strategy for cancer treatment. In this study, α‐cyano‐4‐hydroxycinnamate (CHC) is incorporated into a porous Zr (IV)‐based porphyrinic metal‐organic framework (PZM) nanoparticle, to reduce the lactate uptake by inhibiting the expression of lactate‐proton symporter, monocarboxylate transporter 1 (MCT1) in tumor cells, thus transform lactate‐fueled aerobic respiration to anaerobic glycolysis. The alteration in energy supply can also decrease the oxygen consumption in tumor cells, which would facilitate the photodynamic therapy (PDT) in cancer treatment. Moreover, hyaluronic acid (HA) is coated on the surface of PZM nanoparticles for CD44‐targeting and hyaluronidase‐induced intracellular drug releasing. Both in vitro and in vivo studies confirmed good biocompatibility and enhanced PDT efficacy of the HA‐coated PZM nanoparticles (CHC‐PZM@HA) in tumor cells. The CHC‐PZM@HA platform will provide a new perspective in cancer therapy.