基质效应对六种蔬菜中啶虫脒和吡虫啉检测的影响

以番茄、黄瓜、菠菜、胡萝卜、花菜和豇豆等6种典型蔬菜为试样,使用超高效液相色谱-串联质谱在多反应离子监测(MRM)模式下快速检测啶虫脒和吡虫啉农药残留。在1、2、5、10和50ng/m L等5个浓度水平下分析6种蔬菜基质对啶虫脒和吡虫啉农药产生的基质效应。6种蔬菜对5个质量浓度下啶虫脒和吡虫啉的测定均存在不同程度的基质增强或减弱效应,其基质效应为0.32~1.26。基质效应的强弱与农药及蔬菜的种类有关。在对蔬菜中啶虫脒和吡虫啉残留检测时,建议采用基质配制的标准品进行定量检测,从而保证检测结果的准确性。     

动物源食品中β受体阻断剂残留量测定的不确定度评定

建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定动物源食品中β受体阻断剂残留量的数学模型,依据影响测量结果的不确定度来源,如标准溶液配制、样品称量、回归方程、方法重复性等,对各个不确定度分量进行评定和分析,给出了0.5μg/kg检测水平下,液相色谱-串联质谱法测定食品中β受体阻断剂残留量的相对合成标准不确定度以及扩展不确定度。通过比较各分量不确定度,发现实验过程中最小二乘法拟合带来的不确定度影响最大。     

四极杆-线形离子阱串联质谱法测量血清中万古霉素

本研究采用自主研制的QLIT-6610MD液相色谱-串联质谱系统，建立了测量血清中万古霉素的高准确度方法。样品经蛋白沉淀和液液萃取后，进入QLIT-6610MD系统分析。样本中的内源性物质在保留时间内对目标物无干扰。结果表明：在1.56～50.0 mg/L范围内，万古霉素的线性关系良好，相关系数(R²)≥0.99,检出限和定量限分别为0.19、1.56 mg/L,日内和日间精密度范围分别为1.62%～3.82%和2.07%～5.07%,血清样本的加标回收率为95.97%～97.74%,基质效应归一化因子(CV)≤7.60%,样品保存稳定性CV≤4.26%,进样长时稳定性优于2.13%。通过测定低、中、高质控品对方法进行验证，结果均在靶值范围内。采用QLIT-6610MD、AB API4000和YS EXACT 9900MD 3台液相色谱-串联质谱仪测定42例临床血清样本，经过Deming回归、Bland-Altman分析和Pearson相关性分析，结果具有良好的一致性。本研究证明了自主研制的QLIT-6610MD液相色谱-串联质谱系统能够达到三重四极杆质谱仪的定量...     

液相色谱-串联质谱生物分析方法的基质效应和对策

液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法具有高灵敏度、高选择性、高通量等特点,已经成为生物分析的主流方法,广泛应用于新药发现和开发过程中新化学实体及其代谢物的定量分析。然而,由于生物样品基质成分复杂,共洗脱物质会影响分析物的离子化,使分析物的质谱响应增加或降低,从而影响LC-MS/MS分析方法的准确度和精密度。一般而言,离子抑制较离子增强更为常见。因此,在建立LC-MS/MS法时,需要对离子抑制进行评估和校正,并采用不同的策略消除或减少基质效应的影响。本文综述了生物样品分析中基质效应的来源和评估方法,重点介绍了克服基质效应的策略。引起基质效应的物质包括磷脂、盐类、尿素、代谢物等内源性物质和赋形剂、抗凝剂、固定相释放物质及降解产物等外源性物质。目前基质效应的评价方法主要有提取后加入法和柱后灌注法。克服基质效应的策略主要有使用稳定同位素内标,将极性药物衍生化,沉淀蛋白后稀释上清液,优化样品预处理方法、色谱和质谱条件等。结合本课题组的应用实例,重点阐述了建立LC-MS/MS生物分析方法时,为减少基质效应遇到的困难及解决方法。     

串联质谱法检测洋葱中36种例行监测农药及其基质效应的探讨

建立了气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)同时测定洋葱中36种例行监测农药残留的方法。样品经过乙腈提取,异丙基键合硅胶+石墨化炭黑(NH2/Carbon)复合固相萃取小柱净化,以串联质谱作为检测器,多反应监测(MRM)模式进行测定。农药在0.020 mg/kg的添加水平时,采用基质后加标制定标准曲线校正,除甲胺磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧乐果外,农药的回收率为73.4%～110.0%,RSD(n=5)为2.8%～11.7%,检出限为0.2～11.1μg/kg。同时探讨了36种农药通过串联质谱法检测的基质效应情况,结果表明采用三种不同方式配制标准溶液,标准曲线斜率大小顺序为:洋葱基质后加标>洋葱基质前加标>试剂标样(正己烷:丙酮(9+1))。采用基质后加标,能节省标样配制时间,同时克服基质效应对校正结果的影响。     

C-反应蛋白纯品的同位素稀释质谱法测定与国际比对

建立了C-反应蛋白的液相色谱-同位素稀释串联质谱检测方法。作为C-反应蛋白纯品标准物质的潜在定值方法,选取同位素标记亮氨酸和缬氨酸为内标,重量法与待测样品准确混合。利用Zorbax SB-Aq色谱柱分离,电喷雾三重四极杆串联质谱多反应监测模式(MRM)测定。对样品的测定不确定度进行计算与分析,测得结果为（41.5±0.9） mmol/kg。利用该方法参加了基于中、日、韩三国计量院合作框架下的国际比对,并取得了比对结果的等效一致。     

色质联用技术的进步与农药多残留分析方法的发展（之一）

气相色谱-质谱联用技术是农药多类多残留检测分析方法发展的起点,液相色谱-质谱联用技术的发展给极性农药、热不稳定性农药及其代谢物的检测创造了条件,高选择性、高灵敏度、高通量的色谱-串联质谱技术创建了农药的多残留检测方法。本文回顾了色质联用技术的进步及其在农药多残留分析方法发展过程中的重要作用。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定食用菌中农药多残留研究

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术,建立了同时检测食用菌中10种农药的多残留检测方法。样品经乙腈提取,氨基固相萃取柱净化,Waters HSST3超高效液相色谱柱分离,进入电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测(MRM)分析,对液质分离条件和样品前处理条件进行了优化。结果表明10种农药在10~200μg/L范围内线性良好(r≥0.9985)。在0.01、0.05mg/kg浓度范围内,平均加标回收率在80.3%~102.6%之间;相对标准偏差RSD(%)≤9.8%。该方法的最低检出限范围为1.72×10-4~9.28×10-3mg/kg。该方法简便、快速、灵敏、净化效果好,测定结果满足食用菌农药多残留的检测要求。     

食品中三聚氰胺检测方法的研究进展

本文综述了近年来食品中三聚氰胺的检测方法,主要包括气相色谱一质谱联用检测方法（GC—MS）、超高效液相色谱与质谱联用、固相萃取与高效液相色谱联用等,并指出气质联用（GC-MS）技术利用了色谱的高分离能力和质谱的高鉴别特性,可以对比较复杂的混合样品进行分离、定性、定量分析一次完成,是一种比较完美的现代分析方法。超高液相色谱一串联质谱法具有更快的分析速度、更高的分离能力和灵敏度,可以满足食品中三聚氰胺残留量的快速检测要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时检测动物源性食品中残留的35种β-受体激动剂和11种β-受体阻断剂

针对动物肌肉、肝脏等动物源性食品建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法同时检测动物源性食品中残留的35种β-受体激动剂和11种β-受体阻断剂残留量的方法。通过优化萃取溶剂、净化条件、样品基质效应的消除、色谱-质谱条件等参数,提高检测方法的灵敏度和适用性。并且对定量检测方法阿德灵敏度、准确度、精密度等指标进行了验证。结果表明:46种化合物在0.05μg/kg^10μg/kg的空白添加浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为62.31~110.52%,相对标准偏差为1.03~13.33%。该方法快速、灵敏、准确,稳定,适用于食品安全突发事件的快速应急处置工作。     

液相色谱-串联质谱技术在临床检验中的应用研究进展

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术具有高灵敏度、高特异性、高分辨率和高效率的优点。近年来随着仪器灵敏度的提高,LC-MS/MS在常规临床检验中显示出极大的潜力,并在疾病早期预防和诊断中发挥着不可替代的作用。本文对LC-MS/MS在新生儿疾病筛查、维生素D检测、内分泌激素检测、肽类和蛋白质定量分析等临床检验方面的研究进展进行综述,并讨论了未来面临的挑战。     

LC-MS/MS和荧光偏振法监测环孢素A血药浓度的相关性研究

建立液相色谱-质谱（LC-MS/MS）监测环孢素A(CsA)血药浓度的方法,并与荧光偏振法（TDx）监测结果比较,进行统计学分析,考察2种方法的相关性。LC-MS/MS方法测定CsA血药浓度平均为（99.9±62.7） μg/L,小于TDx法测定的浓度平均值（199.7±129.1） μg/L,2种监测方法测定结果相关系数r平均为0.929,相关性较好,LC-MS/MS法和TDx法自身配对比值平均为（51.6±9.3）%,因此推测LC-MS/MS法可用于CsA血药浓度监测的治疗窗。LC-MS/MS法测定的浓度为CsA原型药物浓度,能更准确的反映原型药物在体内的准确浓度,更适用于日常血药浓度监测工作。     

Direct-EI in LC-MS: towards a universal detector for small-molecule applications

This review article will give an up-to-date and exhaustive overview on the efficient use of electron ionization (EI) to couple liquid chromatography and mass spectrometry (LC-MS) with an innovative interface called Direct-EI. EI is based on the gas-phase ionization of the analytes, and it is suitable for many applications in a wide range of LC-amenable compounds. In addition, thanks to its operating principles, it prevents unwelcome matrix effects (ME). In fact, although atmospheric pressure ionization (API) methodologies have boosted the use of LC-MS, the related analytical methods are sometime affected by inaccurate quantitative results, due to unavoidable and unpredictable ME. In addition, API's soft ionization spectra always demand for costly and complex tandem mass spectrometry (MS/MS) instruments, which are essential to acquire an "information-rich" spectrum and to obtain accurate quantitative information. In EI a one-stage analyzer is sufficient for a qualitative investigation and MS/MS detection is only used to improve sensitivity and to cut chemical noise. The technology illustrated here provides a robust and straightforward access to classical, well-characterized EI data for a variety of LC applications, and readily interpretable spectra for a wide range of areas of research. The Direct-EI interface can represent the basis for a forthcoming universal LC-MS detector for small molecules.     

测定犬血浆银杏黄酮类化合物含量的方法

To develop a reliable, reproductive hydrolysis method combined with LC-MS/MS quantification for measurement of ginkgo flavonoids, three aglycones quercetin (QCT), kaempferol (KMF) and isorhamnetin (ISR) in plasma. The newly developed hydrolytical method was evaluated in terms of hydrolysis stability, capability, matrix effect, as well as accuracy, precison, selectivity, sensitivity, and stability, which was further demonstrated its applicability in a pilot plasma pharmacokinetics study in beagle dogs receiving an single oral administration of three capsules. It was successfully applied to generate pharmacokinetic data for the disposition of flavonoids in beagles.     

AB SCIEX TripleTOF 5600在蛋白质组学研究中的应用

AB SCIEX公司最新发布全新的高分辨液相色谱质谱联用系统——TripleTOF5600是在享有盛名的API 5500三重四极杆系统和QSTAR Elite(QqTOF)系统这两个技术平台的基础上开发出来的。TripleTOF 5600高分辨液相色谱质谱联用系统能够对复杂的蛋白质组学样品进行高通量分析,并能同时提供高质量的定性和定量结果。为评估这款仪器的性能,设计基于纳升液相色谱和TripleTOF 5600联用系统的一系列实验。首先,应用这一拥有高分辨率、高灵敏度和高质量准确度的系统对酵母细胞裂解物的胰酶消化产物进行分析。实验中采用每秒最多采集50幅串联质谱谱图的信息相关采集模式,单次LC-MS/MS实验就鉴定10179条独特肽段和1174种蛋白(at 1%global false discoveryrate)。而实际达到平均每秒34幅串联谱图的采集速度是在单次实验获得如此优异的鉴定结果的决定性因素。此外,也对一组含有5种已知蛋白以及部分重同位素标记肽段的样品进行分析,以检验TripleTOF 5600的定量能力。实验中这5种蛋白质都获得很高的序列覆盖率,其中进样量仅有100amol的Peroxiredoxin 1蛋白的序列覆盖率也高达53%。而测试中得到肽段的平均质量偏差仅为1.7 ppm,展示TripleTOF 5600的高质量准确度和稳定性。此外还获得高度准确的定量结果,充分证明TripleTOF 5600能够提供三重四极杆系统级别的定量结果。     

仪器对液相色谱-同位素稀释质谱测试结果的影响

以同位素稀释质谱法测定奶粉中氯霉素为例，比较了近几年商品化的API5000、Q-trap5500、Agilent 6490、Waters XEVO TQS 4种高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪（LC-MS/MS）的关键指标，并重点研究了由于离子源设计导致的样品基质中残留化合物对氯霉素及其氘代同位素试剂测量的基质效应差异。通过比较测量氯霉素的线性、灵敏度和精密度等指标，发现这4种仪器测量氯霉素的线性和检测灵敏度差异不大。在0.2~1.0 ng/g痕量浓度范围分析时，在低浓度点时，不同仪器上两种化合物的离子化差异较大，测量精密度在1.0%~9.8%之间；在高浓度时，仪器对目标物响应的影响较小。考察了各仪器对不同基质溶液所产生的基质效应，发现在所有仪器上被测物与其同位素稀释剂的响应均存在差异，且随浓度增大差异越来越明显；不同预处理方法下得到的样品基质溶液，在不同仪器可能出现抑制或增强两种相反的基质效应现象，且强度差异也较大。表明基质中不同类型的干扰物在不同类型的离子源上的离子化模式与机理可能存在较大差异，从而导致同位素试剂之间响应的差异，在准确测量中必须分别进行基质效应的验证与确认。     

基于FPLC-LC-MS/MS分析嗜盐古菌Haloarcula hispanica胞内类泛素化底物

本研究结合SLIC克隆技术和快速蛋白质液相色谱-高效液相色谱-串联质谱(FPLC-LC-MS/MS)法,对嗜盐古菌Haloarcula hispanica类泛素蛋白ThiS的泛素化底物和缀合位点进行鉴定分析。采用SLIC克隆法构建类泛素蛋白ThiS表达质粒/整合质粒,经转染后的菌株在DMSO呼吸作用诱导下表达并纯化His6-ThiS蛋白缀合体。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,质粒型类泛素ThiS的表达远远高于基因型菌株的表达量,而通过定点突变,将ThiS的第89号位点突变成赖氨酸K和精氨酸R,进而使用胰蛋白酶对ThiS肽段上的赖氨酸残基-双甘氨肽标签进行酶切处理,采用LC-MS/MS法鉴定其底物和底物修饰位点。鉴定得到钼喋呤合成酶MoaE,蛋氨酸亚砜还原酶MsrA和其同系物MsrB,以及Fe-S簇组装蛋白SufB等4种底物蛋白。该方法通过结合蛋白位点突变和质谱检测,能够准确、有效地检测泛素/类泛素蛋白的修饰底物及其修饰位点,为深入泛素的生物性功能研究提供了切入点。     

液相色谱-质谱联用技术在中药农药残留分析中的应用进展

液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术在农药残留分析领域的研究已经显示出极大的发展潜力。本文阐述LC-MS/MS法在农残分析中的研究进展,特别强调了该技术在中药农残分析中的应用现状和发展前景。由于样品前处理是农残分析中耗时最多、最易引起误差的关键环节,本文也讨论了最近发展和广泛应用的前处理技术,分析了不同方法的特点,从而为我国中药行业在农药残留方面的监测工作提供参考。     

AB SCIEX TripleTOF 5600在蛋白质组学研究中的应用

ABSCIEX公司最新发布了全新的高分辨液相色谱质谱联用系统，TripleTOF5600。这一新产品是在享有盏名的API5500三重四极杆系统和QSTAR Elite（QqTOF）系统这两个技术平台的基础上开发出来的。这一全新的TripleTOF5600高分辨液相色谱质谱联用系统能够对复杂的蛋白质组学样品进行高通量分析，并能同时提供高质量的定性和定量结果。为了评估这款仪器的性能，我们设计了基于纳升液相色谱和TripleTOF5600联用系统的一系列实验。首先，我们应用这一拥有高分辨率、高灵敏度和高质量准确度的系统对酵母细胞裂解物的胰酶消化产物进行了分析。实验中采用了每秒最多采集50幅串联质谱谱图的信息相关采集模式，单次LC-MS／MS实验就鉴定了10，179条独特肽段和1174种蛋白（at 1％global false discoveryrate）。而实际达到了平均每秒54幅串联谱图的采集速度是在单次实验获得如此优异的鉴定结果的决定性因素。此外，我们也对一组含有五种已知蛋白以及部分重同位素标记肽段的样品进行了分析，以检验Triple TOF 5600的定量能力。实验中这五种蛋白质都获得了很高的序列覆盖率，其中进样量仅有1OOamol的Peroxiredoxin1蛋白的序列覆盖率也高达55％。而测试中得到肽段的平均质量偏差仅为1．7ppm，展示了Triple TOF 5600的高质量准确度和稳定性。我们还获得了高度准确的定量结果，充分证明了TrIple TOF 5600能够提供三重四极杆系统级别的定量结果。