富硒大豆中蛋白提取工艺优化及HPLC-MS联用测定硒代蛋氨酸

根据Box-Behnken试验设计原理和响应面分析法确定了富硒大豆中硒蛋白提取的最佳工艺;在此条件下,获取可溶性硒蛋白中的硒代氨基酸,并采用高效液相色谱-质谱联用技术对富硒大豆可溶性蛋白中的硒代蛋氨酸进行定性定量分析。结果表明,液料比11∶1（mL/g）、提取温度 44 ℃、提取时间96 min时,可溶性硒蛋白的提取率可达到76.03%。对4 种自行种植的富硒大豆中可溶性蛋白分析可知：硒-L-蛋氨酸中硒含量与可溶性蛋白中硒含量、富硒大豆中总硒量呈正相关;实验范围内硒代蛋氨酸相对于可溶性蛋白中硒含量最高可达28.46%;说明富硒大豆中不仅含有硒代蛋氨酸,还存在其他形态的硒代氨基酸,有待于进一步研究探索。对大豆进行富硒种植,不仅能提高大豆中含硒总量,而且能通过大豆的生物代谢将其转化成安全无毒营养的有机硒。     

富硒大豆蛋白产品的功能特性

本文对富硒大豆脱脂粉、富硒大豆浓缩蛋白和富硒大豆分离蛋白的功能特性进行了测定，结果表明：这些产品具有良好的功能特性，适用于食品工业。     

富硒大豆肽的制备及体内吸收性分析

为提高硒的体内吸收速率,本实验对富硒大豆蛋白和富硒大豆肽在大鼠低硒模型的体内吸收规律进行探究。采用碱溶-酸沉法从富硒大豆中提取富硒大豆蛋白,对其酶解、超滤,制备富硒大豆肽,对所提取富硒大豆蛋白及制备的富硒大豆肽的组成、硒的分布及结合形式进行探究,分别用富硒大豆蛋白、富硒大豆肽（以硒含量18 μg/kg mb,分子质量低于3 kDa）灌胃SD雄性大鼠,于灌胃0、5、10、20、30、40、60、80、90、120 min后尾部取血,同时测定血浆硒质量浓度与氨基酸浓度,分析血硒质量浓度与血浆氨基酸浓度随时间的变化规律。结果表明：富硒大豆蛋白的主要富硒亚基分子质量为26～35 kDa,11S富硒大豆蛋白硒含量显著高于7S富硒大豆蛋白（P＜0.05）;超滤纯化得到的3 kDa以下大豆肽组分的硒含量高达110.40 μg/g,显著高于10 kDa以上与3～10 kDa组分（P＜0.05）,3 kDa以下大豆肽组分蛋氨酸含量（189.32 μmol/g）与胱氨酸含量（47.09 μmol/g）也显著高于其他组分（P＜0.05）;灌胃富硒肽与蛋白后大鼠血浆硒质量浓度和总游离氨基酸浓度均出现两个峰值,经灌胃富硒大豆蛋白后,大鼠血硒质量浓度达峰时间分别为20 min和80 min,最高血硒质量浓度可达1.070 mg/L,血浆总游离氨基酸浓度达峰时间分别为10 min和80 min,最高值可达4.172 μmol/L;而灌胃富硒大豆肽后大鼠血硒质量浓度达峰时间分别为10 min和40 min,最高血硒质量浓度可达1.338 mg/L,总游离氨基酸浓度达峰时间分别为5 min和40 min,最高值可达5.053 μmol/L,达峰时间均早于富硒大豆蛋白。研究表明富硒大豆蛋白经酶解,超滤得到富硒大豆肽可显著提高硒的体内吸收速率,具有作为口服营养功能食品开发的潜力。     

富硒平菇粉的抗癌活性评价及富硒代糖面包的研制

该研究采用不同总硒浓度的富硒平菇粉联合5-FU处理肝癌细胞HepG2,应用CCK-8法、流式细胞术双染法探讨富硒平菇粉联合5-FU的抑癌效果,并以富硒平菇粉为原料研制一款富硒代糖面包,为富硒功能食品研发提供参考依据。结果表明,富硒平菇粉对肝癌细胞HepG2增殖有抑制作用,抑制率范围为13.89%~27.39%;不同总硒浓度的富硒平菇粉联合5-FU干预HepG2肝癌细胞36 h后,凋亡细胞数量呈硒作用浓度依赖性增高（p<0.05）;总凋亡率分别是26.36%~49.72%,且凋亡率高于5-FU组（p<0.05)。富硒代糖面包的最佳加工工艺配方为：200 g面粉中富硒平菇粉添加量为0.06 g,复配代糖添加量为25 g,烘烤温度为上下火175 ℃,烘烤时间为20 min,总硒含量为（0.17±0.01）mg/kg。综上所述,采用不同总硒浓度的富硒平菇粉联合5-FU处理肝癌细胞HepG2,发现富硒平菇粉联合5-FU可抑制HepG2肝癌细胞生长,起到增效解毒的作用,并成功研制出富硒代糖面包的最佳工艺,具有较好的研究和应用价值。     

海带酥糖的研制

利用大豆、核桃、海带等原料研制酥糖,采用正交试验确定了产品的配方为富硒粉10g/100g,核桃粉4g/100g,海带粉10g/100g,玉米粉12g/100g,还添加了饴糖、植物油、柠檬酸、VA、VC,克服了单一原料各自营养上的不足,进行互补强化,使酥糖具有保健和营养功能。     

富硒酸奶响应面工艺优化研究

以牛奶、紫阳富硒绿茶、蓝冠蓝莓、红圣女果、富硒金冠苹果为主要原料,研制一款营养丰富兼具独特风味的富硒酸奶。以感官评分为指标,通过单因素试验和响应面试验对富硒酸奶的加工工艺进行优化。所得富硒酸奶的最佳加工工艺条件：均质压力23 MPa,发酵终点酸度78°T、果酱（紫阳富硒绿茶粉：富硒金冠苹果粒∶蓝冠蓝莓汁∶红圣女果汁质量比=0.3∶5∶10∶4）添加量3%,在此最优条件下得到的富硒酸奶呈淡绿色,组织细腻,稳定性好,无乳清析出,具有茶和水果的清香味,酸甜可口,入口丝滑清爽,香浓醇厚,感官评分最高为92.33分,硒含量为75μg/kg。     

浸泡及萌发条件对大豆富硒作用的影响

为开发一种新的富硒食品,本文以亚硒酸钠为硒源,以大豆为富硒载体,通过浸泡和萌发处理,实现大豆对无机硒的吸收和转化,制备富含有机硒的大豆产品.本文研究了浸泡温度、浸泡时间、浸泡液中亚硒酸钠浓度、萌发温度及萌发时间对大豆富硒作用的影响.以单因素实验为基础,然后通过正交实验对大豆富硒的最佳工艺条件进行优化,结果表明,大豆富硒的最佳工艺条件为:浸泡时间8h,浸泡温度30℃,萌发时间36h,萌发温度25℃,亚硒酸钠浓度80μg/mL.在此条件下得到富硒大豆产品总硒含量为27.31 μg/g,其蛋白质中的硒含量可达31.95 μg/g.本研究将为富硒食品研究开发提供基础.     

营养富硒发酵型饼干的研制

本试验应用单因素试验和正交试验法结合感官评价,对影响营养富硒饼干质量的传统发酵工艺各因素进行了研究,试验结果表明:在第一次调粉时加入富硒酵母量0.56%、水29%、富硒酵母发酵时间6 h;第二次调粉时加入小苏打0.52%,食盐1.8%,饼干焙烤温度240℃。运用此最优工艺参数制得一种夹酥均匀、口感酥脆的营养富硒型发酵饼干。     

生产富硒小麦粉应注意的问题

通过对影响富硒小麦粉中硒含量因素的分析,确定了小麦种植、小麦加工以及配粉中应注意的问题,从而为富硒小麦粉的生产提供帮助。     

两阶段pH控制方式提高富硒产朊假丝酵母的性能

为了提高富硒产朊假丝酵母的性能,本文在摇瓶培养和分批培养的基础上,考察了不同pH控制方式对流加培养条件下富硒产朊假丝酵母细胞生长、谷胱甘肽（GSH）合成和有机硒转化的影响,结果发现：在12 h将pH从3.5切换至5.5（pH 3.5→5.5）的两阶段pH控制方式最有利于富硒产朊假丝酵母胞内GSH和有机硒含量的提高。在pH 3.5→5.5条件下,富硒产朊假丝酵母胞内GSH含量、有机硒含量和有机硒转化率分别达到最大值13.09 mg/g、1.88 mg/g和94.69%。通过对酵母胞内GSH合成关键酶活性、氧化还原酶活性和能量代谢物质ATP水平进行测定,发现pH 3.5→5.5两阶段pH控制方式提高了富硒酵母胞内过氧化氢酶活性,降低了丙二醛含量,为酵母进行有机硒富集与转化以及GSH合成与积累提供了合适的氧化还原环境,并最终提高了富硒酵母的性能。