烟草愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以鄂烟1号无菌苗的叶为材料进行愈伤组织的诱导,筛选出生长培养基的最佳激素配比,初步建立了烟草细胞悬浮培养体系。结果表明,愈伤组织诱导的最优基本培养基为MS培养基,以MS NAA1.0mg/L 6-BA0.5mg/L为最佳配方;愈伤组织最佳生长培养基为MS 2,4-D0.1mg/L NAA1.5mg/L 6-BA0.3mg/L,愈伤组织培养第6天进入对数生长期,第14天干重增至最初干重的12.536倍,并以此配方建立了烟草细胞悬浮培养体系。     

杜仲愈伤组织继代培养及抑制褐化的研究

对杜仲愈伤组织的继代培养及其褐化现象的抑制进行了研究,结果表明:B5培养基+0.5mg/LNAA+1.0mg/L6-BA是杜仲愈伤组织继代培养和褐化控制的适合培养基;培养基中添加0.5%活性炭(AC)能有效的抑制杜仲愈伤组织的褐化;与中强光和红光相比,蓝光和黑暗能减轻组织的褐化。     

紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累

以紫薯叶片为外植体,通过筛选培养基和培养条件建立了紫薯愈伤组织培养体系。研究6-苄基氨基嘌呤(6-BA)及萘乙酸(NAA)不同浓度组合对紫薯愈伤组织诱导的影响,之后分别考察基础培养基MS、1/2MS、B5、WPM、White及NAA、6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种激素对紫薯愈伤组织继代生长的影响。确定最适基础培养基后,对激素进行单因素实验后再做正交实验。结果表明1/2MS基本培养基中添加1.5 mg/L 6-BA和0.4 mg/L NAA适合紫薯愈伤组织诱导,诱导率为81.82%。MS为优选基础培养基,通过正交实验优化的激素配比组合为1.0 mg/L NAA,0.4 mg/L 6-BA,1.0 mg/L 2,4-D。最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+6 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,此优化激素条件下愈伤组织的生物量增长倍数为23.46倍,3-咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰宁酸、4,5-二咖啡酰宁酸三种绿原酸类化合物含量分别为0.30%、1.91%、1.10%,三者总含量3.31%,因此,通过紫薯愈伤组织培养生产绿原酸类化合物是可行的。     

苦瓜愈伤组织的诱导及培养条件优化

利用不同的激素配比,对苦瓜幼苗的各个器官进行愈伤组织诱导,比较其生长情况。通过实验得出,IAA与6-BA搭配比2,4-D与6-BA搭配对苦瓜愈伤组织的诱导及生长要好。当6-BA质量浓度较高（4 mg/L）时,利于苦瓜愈伤组织的诱导。在优化培养条件时,在MS培养基的基础上添加103.125 mg/L的硝酸铵,100 mg/L的水解酪蛋白,蔗糖质量浓度为30 g/L,激素质量浓度为0.5 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L 2,4-D时,可使苦瓜愈伤组织快速增殖。     

拳参愈伤组织的诱导及增殖效应的研究

目的研究适宜拳参愈伤细胞的诱导、组织分化及快速生长的培养基成分。方法以拳参的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加2,4-D、N A A、6-B A、K T及其组合的M S培养基上,观察拳参愈伤组织的诱导、分化及愈伤细胞的生长状态。结果MS 0.4 mg/L 6-BA 2.0 mg/L NAA对拳参愈伤组织的诱导效果最好。MS 0.2 mg/L 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D增殖培养的愈伤组织较适合于器官的分化,MS 0.2 mg/L 6-BA 4.0 mg/L NAA增殖培养的愈伤组织较适合于做细胞悬浮培养的材料。结论建立拳参愈伤组织诱导,愈伤组织分化和愈伤细胞快速增殖体系,为进一步研究药用植物拳参细胞的分子机制及次生代谢等提供资料。     

祈州漏芦的组织培养与快繁技术研究

目的：对祁州漏芦愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究,构建祁州漏芦快速繁殖体系。方法：通过筛选外植体,添加不同种类及浓度的生长调节剂对祁州漏芦进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果：诱导愈伤组织适宜培养基：MS＋0.3mg/L NAA＋3.0mg/L 6-BA;芽增殖培养以MS＋0.3mg/L NAA＋5.0mg/L 6-BA为宜;生根培养以1/2MS＋0.1mg/L NAA为佳。结论：利用组织培养技术能够实现祁州漏芦快速繁殖。     

银杏愈伤组织培养及其黄酮生物合成的初步探讨

本文采用银杏果实和植株诱发的茎尖和叶尖为原料，筛选银杏愈伤组织生长和继代培养的最佳条件和激素组合；利用继代培养愈伤组织进行细胞悬浮培养并检测黄酮的生物合成量。结果表明：（1）银杏愈伤组织的诱导及继代培养以附加NAA3.0mg/L和BA1.0mg/L的MS培养基效果最好；（2）采用0.1%浓度的植酸可以抑制褐变，并对愈伤组织的生长有促进作用；（3）在培养基中添加5％的蔗糖时愈伤组织增长倍数最高；愈伤组织继代培养40－45d时增长倍数达到最大值；（4）银杏愈伤组织细胞悬浮培养时，细胞生长速度可达6.8倍，黄酮生物合成量为68.76mg/L。     

外源激素对紫苏愈伤组织诱导及迷迭香酸积累的影响

以紫苏叶片为外植体,通过向B5培养基中添加不同浓度的激素组合,进行正交实验,研究其对紫苏叶片愈伤组织诱导率的影响。结果表明,在B5培养基中,添加2,4-D1.0 mg/L+KT0.4 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5mg/L时,愈伤组织诱导率最高。通过高效液相色谱法测定,紫苏叶片中迷迭香酸含量为0.25%,而在最佳培养基中培养40 d的愈伤组织中的含量为3.85%,有了显著的提高。研究为紫苏迷迭香酸高产细胞系的建立提供了理论依据。     

云烟87烤烟品种突变株的离体快繁技术研究

以云烟87烤烟品种突变巨型株的休眠芽为试材,对其进行了打破休眠促使萌芽、愈伤组织诱导、丛生芽增殖和生根培养的研究。结果表明:打破休眠促使其萌芽的最佳培养基配方为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA;诱导产生愈伤组织效果最佳的培养基配方为MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA;丛生芽增殖效果最佳的培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA;MS+0.6mg/L NAA对根系的生长最为有利。      

南果梨愈伤组织及花青素诱导的初步研究

通过对南果梨愈伤组织的诱导,选择形成花青素最佳的愈伤组织相关因素,为后期研究南果梨的花青素代谢调控打下基础.通过正交试验,观察花色素形成,寻找最佳外植体试材及其培养基,并且确定愈伤组织生物量周期,以及促进花色素形成的决定因素.结果表明:最佳外植体为子房,其愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L 2,4-D; 愈伤组织生物量周期为33 d,第30天时细胞生物量达到最大值,为初始生物量的6 32倍.花青素的含量也随着愈伤组织生物量的增加而积累.葡萄糖是最佳碳源.利用外植体试材在最适培养基上培养30 d,可得到最大量愈伤组织及花青素.     

苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织培养一步成苗的效应研究

本研究探明了苯乙酸(PAA)对烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的效应,发现PAA与NAA、6-BA配合使用能有效促进一步成苗的发生。试验证明PAA对一步成苗的促进效应与各种激素浓度配比和基本培养基的种类有关,与基因型的关系不明显。烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的最佳培养基配方为MS+PAA 20 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+谷氨酰胺50 mg/L+麦芽糖30 g/L。试验还证明,与2,4-D诱导产生愈伤组织途径的多级成苗培养相比,本研究建立的PAA一步成苗培养具有以下优点:1)显著提高愈伤组织的诱导率;2)显著提高愈伤组织的质量,有效提高愈伤组织分化率;3)成苗率显著高于多级成苗;4)再生植株具有更好的幼苗素质;5)再生植株的染色体数目变异率也显著低于多级成苗;6)获得双单倍体植株的频率显著高于多级成苗;7)能有效缩短培养周期、节约成本。      

紫苏细胞悬浮培养生产迷迭香酸条件研究

通过诱导紫苏下胚轴和子叶外植体产生愈伤组织,建立细胞悬浮培养体系,以提高细胞产量及细胞中迷迭香酸含量。结果表明,在MS液体培养上添加3.0mg/L 6-芐氨基嘌呤(6-BA)＋0.3mg/L萘乙酸(NAA)培养基上,下胚轴愈伤组织呈嫩黄色松散状态,出愈时间短,出愈率可达100%。紫苏细胞悬浮培养产生迷迭香酸的最佳条件为培养时间7d、接种量鲜质量浓度20g/L、摇床转速110r/min、蔗糖30g/L、L-苯丙氨酸0.15g/L,此条件下可获得高达2.283mg/g的迷迭香酸。     

不同培养条件对银杏愈伤组织生长及黄酮含量的影响

以胚为外植体,通过固体培养,研究了培养基,激素和光照对银杏愈伤组织诱导的影响,以及继代培养中激1素和活性炭对愈伤组织生长和产黄酮的影响,结果表明:愈伤组织的诱导的最佳条件为DCR培养基+1.0mg/L2,4-D+0.5mg/LBA+完全暗条件培养。继代培养过程中既能促进愈伤组织生长又使黄酮含量最高的处理为0.3mg/LBA+2.0mg/L2,4-D,活性炭抑制愈伤组织生长但能促进黄酮的积累。     

甘蔗新品种桂糖48号的组织培养技术研究

甘蔗组织培养技术是加速繁殖新品种和加快新品种大面积推广的主要手段,不同品种的离体培养中其培养基中激素配比存在差异,因此筛选合适培养基是提高品种快繁效率的关键。本文以桂糖48号为材料,以MS基本培养基加外源激素浓度梯度进行试验处理设计,对品种的愈伤组织诱导、愈伤分化、试管苗增殖和生根阶段进行培养基筛选试验,以其筛选出最合适桂糖48号的培养基配方。试验结果表明:诱导愈伤组织培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L;愈伤组织分化培养基为MS+BA 1.0 mg/L;初代增殖培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.5 g/L;继代培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;生根培养基为1/2 MS+NAA 12 mg/L。在该培养基下,生根最好,苗绿,比较高,长势好,对加快甘蔗新品种桂糖48号在广西大面积推广起到积极的作用。