酶解豆粕制备鲜味肽内切酶筛选与工艺优化

以高温豆粕为原料,以水解度和滋味稀释因子为指标,比较了内切酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶)的酶解效果,筛选出最佳内切酶,为中性蛋白酶。通过单因素试验考察其添加量、酶解pH和酶解时间3个因素对豆粕蛋白水解度和滋味稀释因子的影响;在此基础上,通过L_9(3~4)正交试验优化了中性蛋白酶酶解高温豆粕的酶解工艺,即添加量7 500 U/g、pH 5.8、酶解时间5 h,在此条件下水解度为31.16%。此次试验为高温豆粕高值化利用奠定理论基础。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

酶法提取淡水鱼内脏鱼油的工艺优化

以淡水鱼内脏为原料,以鱼油得率为评价指标,对酶法提取鱼油的工艺条件进行优化。首先采用木瓜蛋白酶,中性蛋白酶和碱性蛋白酶在各自的最佳酶活条件下提取内脏鱼油,得到最佳的水解用酶为中性蛋白酶。然后以中性蛋白酶为水解用酶,在单因素试验基础上,采用正交试验设计,分别考察pH值、中性蛋白酶添加量、酶解温度、酶解时间和料液比对鱼油得率的影响,最终得到中性蛋白酶酶解法提取鱼油的最优条件为:pH值7,酶解时间40min,酶解温度60℃,酶添加量0.50%,料液比(原料∶蒸馏水)1∶1.5。在最优条件下,鱼油得率可达35.67%。     

酶法水解玉米浆制备玉米肽的研究

文章以玉米浆为主要试验原料,进行酶法水解玉米浆制备玉米肽的研究,从酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶中筛选最适试验用酶,采用单因素试验确定最佳酶解条件,采用L_9(3~4)正交设计试验确定最佳因素组合。结果表明:以水解度(DH)为指标,中性蛋白酶水解玉米浆制备玉米肽水解度最高,当酶和底物比为3%(W/W)、pH 7.5、55℃下水解6h时,玉米浆的水解度最高,可达到44.5%。     

响应面法优化南极磷虾蛋白酶解工艺条件

以水解度(DH)为考察指标,评价了中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及碱性蛋白酶酶解南极磷虾粉的效果,并选用水解效果最好的碱性蛋白酶作为试验用酶,探讨了碱性蛋白酶酶解温度、酶解时间、加酶量以及体系初始p H对水解度的影响。在单因素试验结果的基础上,采用响应面分析法优化了碱性蛋白酶酶解南极磷虾粉工艺。结果表明,最佳酶解工艺条件为酶解温度45.68℃、酶添加量1.67%、酶解时间5.47 h、pH为8.08,此条件下,南极磷虾蛋白粉水解度可达到15.27%。     

中性蛋白酶酶解鸭肉的工艺优化

在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计对中性蛋白酶酶解鸭肉工艺中的酶解时间、pH值和酶解温度3因素的最优化组合进行了定量研究,建立并分析了各因素与水解度关系的数学模型。结果表明：最佳的酶解工艺参数为酶解时间4h、pH值7.3和酶解温度48℃,经试验验证在此条件下水解度为33.8%,与理论计算值34.8%基本一致,说明回归模型能较好地预测中性蛋白酶酶解鸭肉的水解度。     

仿刺参卵酶解工艺条件优化

以仿刺参卵为材料,优化出酶解工艺,获得高水解度、风味独特的水解产物。首先,通过实验从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶中筛选出合适的水解用酶。然后通过单因素试验与正交试验,分别考察酶解温度、加酶量及酶解时间对筛选出的各种蛋白酶水解度的影响,获得单酶的优化水解工艺条件。最后进行多酶体系综合酶解实验,综合考虑水解度、生产成本和水解液感官评定结果来确定最佳水解工艺条件。结果表明:最佳酶解条件为:以混合酶(木瓜蛋白酶与复合蛋白酶质量比1:1)在加酶量2.0%、酶解温度75℃条件下酶解4h,煮沸灭酶活后再添加1.5%风味蛋白酶,在酶解温度45℃条件下继续酶解1h,在此工艺条件下水解度达到了77.11%,并且水解液鲜香浓郁,状态均匀澄清,可用于开发风味独特的功能食品。     

蚕蛹蛋白酶解工艺及其水解产物抗氧化性

以蛋白水解度为指标,利用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白。通过单因素试验和正交试验对影响蚕蛹蛋白水解度的因素进行优化试验,分析了两种蛋白酶对蚕蛹蛋白酶解效果的影响,并测定水解产物抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.2%、酶解时间3.5 h、酶解pH 10.0、酶与底物比5.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为27.38%;木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.5%、酶解时间5.0 h、酶解pH 10.0、酶与底物比9.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为18.26%。最佳工艺条件下,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解产物DPPH清除率分别为83.84%和81.24%,超氧阴离子自由基清除率分别为6.36%和9.72%,羟基自由基清除率分别为43.30%和62.24%。综上所述,木瓜蛋白酶对酶解产物的抗氧化效果较好。     

双酶分步水解酱香型白酒丢糟中粗蛋白的工艺研究

以水解度(DH)和蛋白质得率为评价指标,研究了酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶分别对酱香型白酒丢糟中粗蛋白的水解效果。结果表明:碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的水解效果最好。在碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的水解条件单因素试验的基础上进行正交优化试验,得到两种酶的最佳水解条件。为进一步提高丢糟中粗蛋白的水解度和蛋白质得率,采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对酱香型白酒丢糟中粗蛋白进行分步酶法水解。结果表明,酱香型白酒丢糟中粗蛋白的最佳水解工艺条件为先用碱性蛋白酶酶解(酶解温度为55℃,料液质量比为1︰10,加酶量[E]/[S]为2.0%,p H 8.0,酶解时间为3 h),灭酶后,再用木瓜蛋白酶酶解(其他条件不变,加酶量[E]/[S]为0.2%,酶解时间为1 h)。在此条件下得到水解度和蛋白质得率,分别为32.91%,49.16%。     

响应面法优化腊肉酶解工艺条件

为探究腊肉最佳酶解工艺,为其进一步深加工奠定理论基础。以川味腊肉为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶及动物蛋白酶对其进行酶解,以水解度(Degree of hydrolysis,DH)为测定指标,确定中性蛋白酶与风味酶的复配酶为最佳用酶;选取中性蛋白酶与风味酶的配比、料液比、加酶量、时间、p H及温度进行单因素实验,再在此基础上,以水解度为响应值,采用响应面法优化工艺条件,确定最佳酶解条件为中性蛋白酶与风味酶配比为1∶2、自然p H(5.9~6.0),加酶量0.35%、料液比1∶2(g/m L)、酶解温度47℃,酶解时间5 h。在此条件下,水解度实测值为8.77%,理论值为8.84%,实测值与理论值相差较小。     

响应面法优化玉米黄粉蛋白的酶解工艺

利用pH-stat法测定碱性蛋白酶和中性蛋白酶对玉米黄粉蛋白的水解度,通过Box-Benhnken响应曲面法优化水解条件。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以水解度为指标,采用响应面分析法确定最优水解工艺参数。结果表明：蛋白酶水解的最适条件为酶解pH11.10、酶解温度55.00℃、底物质量浓度112g/L、碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活单位比值5:1、加酶量48000U/g、酶解时间120min;在此条件下,玉米黄粉蛋白水解度实测值为30.23%,模型的预期值为30.84%。采用复合酶水解可提高玉米黄粉蛋白水解度,且工艺简单。     

酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。     

酶法提取杏仁水解蛋白工艺研究

以脱脂杏仁粕为原料,通过中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解获得杏仁水解蛋白,研究蛋白酶种类、加酶量、酶解温度、酶解时间和pH对杏仁水解蛋白提取率影响。在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验,对酶解条件进行优化研究;试验结果表明,最优酶解条件为:选用碱性蛋白酶、酶添加量([E]/[S])0.9%、酶解温度47℃,酶解时间3.5 h、pH 11.5;在此条件下,杏仁粕水解蛋白提取率可达72.3%,     

响应面法优化蚕豆蛋白酶解工艺条件的研究

考察了碱性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶对蚕豆蛋白的酶解效果,探讨了水解度(DH)与酶解产物抗氧化活性间的关系。通过单因素试验和响应面分析法,得到碱性蛋白酶酶解工艺的最佳条件。结果表明,温度50℃、p H8.0、酶底比8%、底物浓度3%条件下酶解3h,水解度0~22%内,碱性蛋白酶较胰蛋白酶和中性蛋白酶水解蚕豆蛋白效果好;DH与还原能力(R2=0.68~0.81)及ABTS清除能力(R2=0.98~0.99)具有较好的相关性,碱性蛋白酶酶解液较其他2个酶解液有较好的还原能力和ABTS清除能力;优化后的最佳酶解工艺参数为:酶底比8%,温度50℃、p H 7.6,对蚕豆蛋白还原能力的影响顺序为酶底比p H温度;在此条件下,蚕豆蛋白酶解液的还原能力理论值为0.174,验证试验测得还原能力为0.173,与理论值接近。     

复合酶分步酶解法提取牛骨胶原蛋白工艺的研究

以牛骨胶原蛋白初步酶解产物为研究对象,以水解度为指标,采用甲醛滴定法监测深度酶解的进程,对比分析不同的酶解条件对水解度的影响,确定了中性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的酶解条件。通过正交试验结果表明:采用中性蛋白酶和风味蛋白酶加酶量分步水解牛骨蛋白的最佳条件为物料比1∶750,起始pH值是6.5,先用中性蛋白酶55℃酶解3h后,再用风味蛋白酶于55℃继续酶解2h。此时水解度达到63.6%。     

海参蒸煮废液多肽提取响应面优化及抗氧化研究

以海参蒸煮废液为原料,采用蛋白酶酶解法提取废液中的海参多肽,筛选出水解海参蛋白的最适蛋白酶。通过单因素试验,研究了加酶量、酶解pH、酶解温度和酶解时间四个因素对水解度的影响,并通过Box-Benhnken中心组合试验及响应面分析法对酶解条件进行优化。结果表明,中性蛋白酶水解效果最好,其最优酶解工艺条件为:酶解时间4 h,加酶量3.85%,温度45℃, pH 7.0。在此条件下海参蛋白水解度为44.5%。制得的海参多肽对羟自由基和超氧自由基具有较强的清除能力, IC_(50)值依次为6.901和8.804 mg/mL。     

分步酶解法制备菜籽降血压肽

以菜籽蛋白为原料,用两种蛋白酶将其分步水解制备降血压肽。从4种酶的两两组合中筛选出了最佳酶组合碱性蛋白酶和中性蛋白酶,采用紫外检测法对酶解产物中血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽活性进行测定。对酶解工艺进行优化,在单因素试验的基础上采用Box-Behnken模型响应面设计试验,运用Design-Expert软件处理,建立制备菜籽降血压肽的三元二次回归正交模型。结果确定最佳酶解条件为:碱性蛋白酶和中性蛋白酶为分步水解的酶、底物的质量浓度5.65g/100mL、加酶量6.5%、酶解温度54.9℃,ACE抑制率理论值为50.303%,在此条件下进行验证实验制备出ACE抑制率为50.12%的菜籽降血压肽。     

文蛤肉复合酶分步酶解工艺的研究

本实验探讨了中性蛋白酶和胰蛋白酶的复合酶与风味蛋白酶分步酶解文蛤肉的技术。 通过q检验法确定中性蛋白酶和胰蛋白酶最佳的复合比例,再通过正交试验探讨复合酶与风味蛋白酶二段酶解的最佳工艺参数,并以水解度、水解得率及风味评分值为指标对分步酶解工艺的最佳条件进行比较验证。结果表明,胰蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3:1,风味蛋白酶二段酶解的最优工艺参数为水解温度55℃、水解时间5.0h、加酶量1000 U/g(原料)、pH值(5.00±0.05),所得文蛤肉水解液中水解度、水解得率及风味评分值分别为55.97%、87.14%及230.98。     

均匀设计法优化罗非鱼肉富肽酶解液制备工艺

为得到高肽含量罗非鱼肉酶解液,以水解度及肽含量为指标,从胃蛋白酶、胰蛋白酶、Alcalase 2.4L、中性蛋白酶及木瓜蛋白酶中筛选出中性蛋白酶为最适用酶。在单因素试验的基础上,采用均匀设计试验优化中性蛋白酶酶解条件。得到最高肽含量酶解条件为:加酶量1.38%,料液比1∶3(g/mL),温度50℃,自然pH,时间7 h,此时肽含量(以每克鱼肉计)为(37.71±0.11)mg。     

酶法水解蟹壳蛋白的工艺研究

以蟹壳为原料,对酶法水解蟹壳蛋白的工艺进行了研究,并采用柱前衍生高效液相法对蟹壳中氨基酸含量进行了分析。以蛋白脱除率为指标,从酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶中筛选出水解蟹壳蛋白较优酶,进行单因素试验,并通过响应面分析法对酶解工艺进行优化。最终获得优化酶解工艺条件:料液比1:50、酸性蛋白酶(E)与底物(S)质量比15%、酶解时间4.7 h、酶解温度40℃、pH3.7,在此条件下酶解获得较高的蛋白脱除率(38.4%)。