纳豆菌冷冻保护剂的研究

纳豆菌具有溶解血栓、调节血糖等多种营养保健功能.纳豆菌冻干菌粉的生产过程中,冷冻对菌体的存活率影响较大.在纳豆菌菌悬液冷冻过程中添加5种保护剂:乳糖、甘露醇、麦芽糊精、L-抗坏血酸钠、β-环糊精,分别采用单因素试验和正交试验,测定冷冻前后菌体存活率,筛选出最适的纳豆菌冷冻保护剂.试验结果表明:纳豆菌最适保护剂配方为乳糖浓度为1.2%,甘露醇浓度为3%,麦芽糊精浓度为4.5%,L-抗坏血酸钠浓度为2.5%;纳豆菌菌悬液与该复合保护剂混合,在-20℃下冷冻48 h,存活率达到84.25%.此配方对纳豆菌冻干菌粉的生产具有指导意义.     

正交法优化保加利亚乳杆菌冻干保护剂

通过单因素实验和正交试验设计,研究了乳糖、脱脂乳粉、蔗糖和抗坏血酸钠等4种物质对保加利亚乳杆菌的冻干存活率及菌粉活菌数的影响,确定了适合保加利亚乳杆菌的最佳冻干保护剂配方．结果表明,4种物质的保护效果依次为：蔗糖〉脱脂乳粉〉抗坏血酸钠〉乳糖;最佳保护剂的配方为：30％蔗糖＋209／6脱脂乳粉＋4．0％抗坏血酸钠＋20％乳糖．加入冻干保护剂后,保加利亚乳杆菌冻干后存活率可达94％,菌粉的活菌数达1．926×10^11 cfu／g．     

无酒精番木瓜汁发酵饮料的制备工艺

以番木瓜汁为原料制备番木瓜汁发酵饮料,研究无酒精发酵饮料的工艺条件。制备方法：先添加酵母菌,发酵2 d,灭活酵母菌后,再添加醋酸菌和乳酸菌,继续发酵,酵母菌、醋酸菌、乳酸菌接种体积比为1∶1∶1。菌种生长曲线测定结果显示各菌株的最佳接种菌龄分别为：酵母菌为20 h(2.0×10⁷CFU/mL),醋酸菌为20 h(4.0×10⁸CFU/mL),乳酸菌为12 h(1.0×10⁸CFU/mL)。正交实验结果表明：番木瓜汁发酵饮料的最佳发酵工艺为：初始SSC(可溶性固形物含量)为30%,接种量为9%,发酵周期为4 d。发酵液经杀菌,置于4℃冰箱中冷藏3 d,澄清后,弃沉淀物,取上清液,所得产品不含酒精,pH值为3.53,SSC为14%,维生素C质量浓度为31.98 mg/(100 g),羟基自由基清除率为90.1%;色泽呈橙红色,具有番木瓜浓郁香气,口感酸甜协调。     

菲牛蛭粗提物冻干粉保护剂的优化

采用L9(34)正交试验法,以不同时间和温度条件下的平均抗凝活性为指标,考察海藻糖、PEG2000和甘露醇对菲牛蛭粗提物冻干粉的保护作用.结果表明,3种保护剂中,PEG2000的活性保护作用最强,海藻糖最弱.以24 h内平均抗凝活性为考察指标时,海藻糖、PEG2000、甘露醇的质量分数的最佳组合为4％、4％、2％;以(...     

响应面法优化高产多聚谷氨酸菌株冻干保护剂的研究

采用实验室分离的一株高产γ-聚谷氨酸枯草芽孢杆菌（T1B）通过响应面法筛选优化高产γ-PGA菌株冻干保护剂配方。通过单因素试验,确定脱脂奶10%（质量分数,下同）、蔗糖10%、麦芽糖10%为T1B菌株冻干保护剂最优单因素。然后以细胞存活率为响应值确定了T1B菌株复合冻干保护剂的最优配方为:脱脂奶粉浓度为7.39%,蔗糖浓度为9.60%,麦芽糖浓度为10.71%。优化后的冻干保护剂在冻干过程中对于T1B菌体保护效果显著,菌体存活率的理论值最大为83.8%。并确定菌体最佳离心条件为7 000 r/min 5 min,复合冻干保护剂的最适pH为7.0,与菌体沉淀的最佳配比为2∶1,经验证此时菌体存活率为85.3%。     

大果山楂酵素的多菌种发酵工艺研究

为促进大果山楂酵素中活性成分的形成,以酵母菌、醋酸菌、乳酸菌为发酵菌种,通过单因素和正交试验分别考察酵母菌接种量、醋酸菌接种量、乳酸菌接种量、发酵温度对大果山楂酵素中总酚质量浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。结果表明:大果山楂酵素的最佳发酵工艺为酵母菌接种量1. 0%、醋酸菌接种量1. 5%、乳酸菌接种量1. 0%、发酵温度30℃。在大果山楂酵素发酵过程中,多菌种发酵的总酚质量浓度和SOD活力均比自然发酵的高,在发酵21 d时质量浓度达到最大值8. 18 mg/m L,SOD活力为17. 71 U/m L,分别比自然发酵提高了27. 2%和35. 6%。     

喷雾干燥法制备植物乳杆菌MA2发酵剂

对一株Kefir源植物乳杆菌MA2喷雾干燥法制备发酵剂的工艺进行初步研究,通过正交实验对保护剂的配方进行优化,确定保护剂的配方为：谷氨酸钠20g／L,海藻糖50g／L,乳糖50g／L,脱脂乳100g／L．通过响应面分析方法对喷雾干燥的条件进行优化,确定啧干最适条件为：进口温度151．63℃,进料流量62．07mL／h,保护剂与菌泥比例（g：L）3．38：1．按上述条件得到干菌粉的活菌数为2．11×10^9g^-1．4℃冷藏保存半年后活茵数仍能达到1．02×10^9g-1,凝乳时间14h,胆固醇移除率32．O％,为实现乳酸菌发酵剂的高效生产提供实验基础．     

脐血干细胞玻璃化冻存技术研究

以羟乙基淀粉(HES)法分离所得的脐血干细胞作为材料,进行玻璃化超低温保存,探索和建立最合适的保护剂浓度和预处理时间,以期在细胞冻融后获得较高的活率.采用系列体积分数的玻璃化冷冻保护剂(PVS2)预处理不同的时间,样品在完全浓度的玻璃化保护剂中直接存入液氮.冻融后的细胞经过噻唑蓝(MTT)法和FDA-PI双荧光染色法检测存活率,获得预处理过程的优化条件:体积分数为60%的PVS2,预处理15 min,FDA-PI值为46.43.用海藻糖取代原保护剂中的蔗糖,与同样条件下含蔗糖保护剂处理的细胞相比较,FDA-PI最大值高于后者20.25%,CD34 回收率最大值高于后者25.64%,表明含海藻糖的保护剂在该冻存技术中的保护效果明显优于含蔗糖的保仿剂.     

两株自选乳酸菌的益生特性

研究了两株自选乳酸菌的益生特性,为其应用于果蔬汁乳酸发酵的功能性饮料研制提供理论依据.以自选植物乳杆菌R23和干酪乳杆菌R35为目标菌,以德氏乳杆菌保加利亚亚种6045为对照菌,考察各菌对模拟胃液酸度和肠道胆盐的抗逆性以及凝集能力、表面疏水性等黏附性能,并评价其发酵液对超氧阴离子和羟基自由基的清除能力等体外抗氧化功能.结果表明:两菌株对酸度和胆盐的耐受能力均优于对照菌,植物乳杆菌R23的抗逆性最强,能耐受pH值2.5、胆盐质量浓度5 g.L-1.干酪乳杆菌R35的黏附能力强,而植物乳杆菌R23疏水性较强而凝集能力较弱.各菌株的胞外代谢产物均有抗氧化能力,以植物乳杆菌R23为最强,其培养24 h后的发酵液对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除率达77.8%和80.94%,分别比对照菌高36.72%和5.81%.     

脐带血干细胞玻璃化保存研究

为获得较优的脐带血干细胞 (cord blood cells, CBCs)冷冻保存效果，引入非晶态物理学玻璃化方法，进行冻存、解冻的理论和实验分析.模拟计算以Karlsson模型为基础，结果显示，近似实现脐带血干细胞玻璃化的降温速率、复温速率应分别不低于400 ℃/min和500 ℃/min；在此速率下采用两步法冷冻脐带血干细胞，冻存前后对样品细胞计数，浓度分别为1.0、1.5和1.75 mol/L的3种二甲基亚砜 (Dimethyl Sulphoxide, DMSO) 保护剂溶液，其快速冷冻脐带血的存活率对应为(86.8±2.5)%、(90.6±5.4)%和(87.5±3.4)%，即不低于80%的脐带血干细胞保持外壁光滑、形态完整，保存后具有较高的存活率.与平衡慢速冷冻法获得的60%存活率相比，降温速率、复温速率应分别不低于400 ℃/min和500 ℃/min的快速冷冻将大大提高脐带血干细胞的存活率.     

单形重心设计优化面团发酵剂配比的研究

手工拉制类面条对面团的拉伸性能要求很高,乳酸菌发酵具有缓慢柔和的特点,对提高面团的拉伸性能具有很大潜力。为探究乳酸菌发酵对面团拉伸性能的影响,将筛选的3种乳酸菌(植物乳杆菌、乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌)添加到面团中进行发酵,以面团拉伸性能为考察指标,通过单形重心设计试验,得到发酵剂的最佳配比:植物乳杆菌64%、乳双歧杆菌16%、嗜酸乳杆菌20%,并测得面团在发酵4 h拉伸性能达到最佳,此时拉断力为(94.48±1.12)g,拉伸距离为(40.13±0.34)mm。该方法可进一步应用于其他混合菌发酵剂的配方优化研究中。     

乳酸菌发酵泡菜的特性研究

以萝卜为原料,用乳酸菌制备的发酵剂发酵泡菜,通过单因素试验和正交试验确定了最佳发酵条件.试验表明,影响泡菜风味的因素由大到小依次为:食盐添加量＞温度＞接种量,发酵泡菜的最佳工艺条件为:接种量4%,温度25 ℃,食盐添加量4%.在此条件下,通过试验比较了乳酸菌发酵与自然发酵方式下所得泡菜的乳酸含量和亚硝酸盐含量的变化,并对感官品质进行了比较.结果表明:乳酸菌发酵时间为4～6 d,与自然发酵相比,乳酸菌发酵缩短了发酵周期,降低了亚硝酸盐的含量,提高了泡菜汁中的乳酸含量.     

电导法测定低温保护剂浓度及其在低温保存中应用

为了解决低温保存生物样品时加载和去除过程中低温保护剂浓度的监测问题,提出采用电导法测定低温保护剂的浓度.测量不同温度(5~35℃)和低温保护剂质量分数(0~50%)下,二甲亚砜/氯化钠/水、甘油/氯化钠/水、乙二醇/氯化钠/水和丙二醇/氯化钠/水溶液(其中氯化钠质量分数为定值0.9%)的电导率,拟合得到电导率与低温保护剂质量分数和温度之间的关系式;通过实验证明电导法实时监测低温保护剂质量分数的可行性.结果表明,4种低温保护剂溶液的电导率均随低温保护剂质量分数的升高而减小,且符合二次多项式关系;随温度的升高而增大,且符合Vogel-Fulcher-Tammann(VFT)公式.     

纳豆芽孢杆菌菌剂的制备工艺

采用单因素及正交试验对纳豆芽孢杆菌发酵培养基、pH、温度、发酵时间等条件进行了考察,利用喷雾干燥法制备菌剂,考察了β-环糊精、蔗糖、可溶性淀粉及脱脂奶粉作为保护剂对菌剂制备的影响,并研究了储藏时间及条件对菌剂发酵活力的影响.研究结果表明:纳豆芽孢杆菌发酵培养基为黄豆浸汁培养基:黄豆以5倍水体积浸泡8~14h,121℃~126℃,0.1~0.15MPa处理1h,滤除黄豆,取豆水,加入5%的葡萄糖和0.02%的K2HPO4,调节pH至7.0;最优发酵工艺:初始pH7.0,37℃发酵10h;喷雾干燥最佳保护剂为5%脱脂奶粉;菌剂4℃冷藏180d以内不影响发酵活力.上述工艺下所制得的纳豆芽孢杆菌菌剂活菌数为6.5×108 CFU/g,发酵生产纳豆激酶性能良好.发酵生产纳豆激酶酶活为2 000~2 200IU/g.本研究为纳豆芽孢杆菌菌剂制备提供了一条较为合理的工艺路线.     

黑木耳寡糖在嗜酸乳杆菌微胶囊中的作用

对黑木耳低聚糖在嗜酸乳杆菌包埋过程及其对嗜酸乳杆菌的保护作用进行了研究。结果表明:黑木耳低聚糖对嗜酸乳杆菌具有较好的益生作用;以黑木耳低聚糖和乳清蛋白为壁材,采用转谷氨酰胺酶诱导的乳化凝胶法制备得到的嗜酸乳杆菌微胶囊,呈现不规则球型聚集态,平均粒径约为41.7μm,嗜酸乳杆菌的包埋率为86.8%;和包埋前相比,壁材中加入黑木耳低聚糖能够明显增加嗜酸乳杆菌微胶囊的包埋率,嗜酸乳杆菌微胶囊中的活菌在体外模拟胃肠液中或4,25℃下贮藏时的存活率显著提高:在模拟胃液中2 h,活菌数下降了30.6%,在模拟肠液中4 h,活菌数下降了8.4%;微胶囊冻干粉在4,25℃条件下储藏35 d,活菌数分别为8.5,6.3 log CFU/g,均达到了益生菌类保健食品中的指标。     

响应面法优化啤酒污染乳酸菌的培养条件

利用响应面法对一株啤酒污染植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum XLL 0095)的富集培养条件进行优化。采用MRS液体培养基培养,探索其24h内富集增菌的最优条件。生长因子、摇床转速和初始pH的单因素试验结果显示,这3个因素对乳酸菌的富集起显著作用。采用Box-Behnken试验设计和响应面分析确定了污染菌富集的最佳条件:摇床转速为153r/min,初始pH为7.57,生长因子添加量为11.8%(体积比)。在此条件下,污染菌24hOD600数值最大,为2.215,比优化前(0.786)增加182%。     

微生物发酵对双孢菇菌糠品质的影响研究

以双孢菇菌糠为基质,探讨了微生物发酵对双孢菇菌糠饲料品质的影响。实验选用L9(34)正交试验,测定混菌发酵双孢菇菌糠的碳源、氮源以及发酵时间三个因素对双孢菇菌糠营养价值的影响。结果表明,双孢菇菌糠进行混菌发酵的最佳工艺条件为:葡萄糖4%、尿素3%、发酵时间3.5 d,对其发酵结果的影响程度依次为:尿素发酵时间葡萄糖。研究发现,经过混菌发酵后的双孢菇菌糠的营养成分与发酵前相比有明显提高,粗蛋白含量由原来的12.74%增加到22.05%,粗脂肪含量由原来的8.88%增加到11.14%。因此,通过微生物发酵能够提高双孢菇菌糠的品质,发酵产品烘干后即可用于饲料原料的制备。     

三种食物中乳酸菌的亲缘关系及抗氧化活性研究

从鲜牛奶、西红柿和酸菜3种不同来源中分离得到52株乳酸菌,通过进一步实验发现,32株菌具有抗氧化活性。其中乳酸菌的超氧自由基清除力为3.19%~25.24%,羟自由基清除范围为11.00%~83.58%,脂质过氧化物的抑制能力在0.39%~53.70%。利用随机扩增DNA多态性指纹技术对32株菌进行聚类分析,结果表明相同来源的乳酸菌其亲缘关系相近,相似系数在40%以上。本研究表明该3种食物可以提供较好的乳酸菌资源,并具有较好的抗氧化性,有望开发为天然抗氧化剂。     

左卡尼汀合成工艺改进

以4-氯乙酰乙酸乙酯为原料,乙醇为反应溶剂,采用手性还原剂Ru(OCOMe)_2[(S)-BINAP]不对称氢化得到(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,收率为98.0%,旋光纯度为99%.再采用氢氧化钾和质量分数为25%的三甲胺水溶液的混合物在室温条件下"一锅法"进行胺化、水解制备左卡尼汀,总收率为88.3%.目标化合物经过比旋、熔点和色谱-质谱联用方法确认了结构.经过实验证明,该制备工艺所用原料易得、环保,产品质量好,适合工业化生产.     

浓香型白酒窖泥中主要产香菌的鉴定及正交试验优化产己酸工艺

浓香型白酒的窖泥中含有大量的对酒的风味的形成具有重要作用的细菌,如己酸菌、丙酸菌、丁酸菌、乳酸菌等。其中己酸菌产生己酸与酒中的乙醇形成的己酸乙酯是浓香型白酒的主要香味成分,与一定量的乙酸乙酯、丁酸乙酯等共同组成复合香气。对从成熟窖泥里分离纯化己酸菌、丙酸菌和丁酸菌进行了16S r DNA鉴定,然后将纯种的己酸菌、丙酸菌、丁酸菌与富集复合液进行正交试验,以不同比例的纯种己酸菌、丙酸菌、丁酸菌与混合液进行L9(3^3)正交试验,确定其最佳配比。当配比为己酸菌液25%、丙酸菌液25%、丁酸菌液15%、复合液45%时,己酸产量最高,为4.021g/L,将己酸的产量增加了近一倍。