固定产酸克雷伯氏菌产氢的研究

为了保持菌体固有的生物活性,使其重复使用,将产酸克雷伯氏菌(HP1,Klebsiella oxytoca)包埋在凝胶中,采用注滴法制备海藻酸钙凝胶球来固定产酸克雷伯氏菌HP1,达到截留菌体产氢的目的.结果表明,选择培养6～8 h的菌体作为海藻酸钙凝胶球包埋的菌体,Tris做培养基中的缓冲盐,当体积质量为5 g/L时,最佳产氢初始pH值为9.0,温度为37℃,采用柱反应器连续产氢7 d,平均产氢速率为3.38×10-2 moL(/L.h)-1.     

解淀粉芽孢杆菌对非洲菊切花保鲜效应的研究

以从花卉中分离得到的解淀粉芽孢杆菌液为保鲜材料,研究其对非洲菊的生物保鲜效果.通过非洲菊形态指标的测定,选取最佳保鲜液的浓度为解淀粉芽孢杆菌发酵液2d的质量百分比0.6%;并对非洲菊的生理指标中花青素含量、可溶性蛋白含量、MDA、POD进行了测量.结果表明:此保鲜液能显著增加非洲菊花瓣花青素的含量与可溶性蛋白含量,同时有效抑制MDA含量增加与POD活性降低.此保鲜液提高了非洲菊的观赏价值,具有良好的生物保鲜作用.     

鸟苷产生菌解淀粉芽孢杆菌的选育

出发菌GR001通过形态观察、生理生化实验、16SrDNA同源性序列分析及部分特异性基因序列分析鉴定为解淀粉芽孢杆菌．以GR001为出发菌,通过化学诱变选育出一株遗传标记为腺嘌呤营养缺陷、6-巯基嘌呤抗性以及蛋氨酸亚砜抗性（Ade^-＋MSO^r＋6-MP^r）的突变株GR600．以GR600为受体菌,采用原生质体转化法获得转化子GR607（Ade^-＋MSO^r＋6-MP^r＋km^r）,鸟苷产量高达20．82gm．     

土壤类芽孢杆菌POR鉴定方法的建立

以gyrB基因为靶标,设计土壤类芽孢杆菌的特异性引物,建立了土壤类芽孢杆菌的特异性PCR鉴定方法。该方法具有较高的特异性,可有效区分胶质类芽孢杆菌及其它各种细菌茵种。该PCR方法也具有较好的灵敏度,可检测只含1到10细胞之间的检测样品。     

一株降解甾体雌激素的克雷伯氏菌ZY3

为研究甾体雌激素的生物降解,从某避孕药厂污水处理站的活性污泥中分离到1株降解甾体雌激素(3-甲氧基-17β羟基-1,3,5(10),8(9)-雌甾-4-烯,简称MHE)的高效菌ZY3,根据其菌体形态、生理生化特征,并结合16S rDNA序列分析,鉴定为克雷伯氏菌属.研究结果表明,菌株ZY3利用底物MHE的最适宜生长温度为25~37℃、pH为9.0~11.0.ρ(MHE)>20 mg/L时,菌株生长受到抑制,72 h MHE最高降解率达81%.Na⁺、Mg²⁺和Ca²⁺对菌株ZY3的生长有促进作用,而Sn²⁺、Mn²⁺、Cd²⁺等重金属离子对ZY3菌株生长有较强的抑制作用.菌株ZY3对甾体化合物MHE和EE2有较强的利用能力,而以苯酚、蒽、萘等多环芳烃化合物作为唯一碳源时,菌株ZY3生长非常缓慢.     

克雷伯氏菌属降解羟肟酸捕收剂H_(205)的研究

采用从汽车修理厂土壤中采集的菌种,借鉴国内外对多环芳烃化合物降解菌的驯化和筛选的方法,在自然条件下驯化、分离、筛选出能降解H205的菌株。研究各单因素对此优势降解菌的生物降解特性的影响,找出此优势降解菌的最佳降解条件。结果表明,从汽车修理厂土壤驯化而来的H205降解菌是革兰氏阴性菌,经16SrRNA鉴定为克雷伯氏菌属;该菌降解H205的最佳条件为:pH 6～7,温度30℃,摇床转速150r/min,细菌接种量10%;底物浓度100mg/L;外加碳源葡萄糖、蔗糖、乙酸钠都对H205的降解有抑制作用;外加氮源酵母膏、蛋白胨对H205的降解有促进作用。     

蜡样芽孢杆菌对稻草的降解作用

为了研究一株蜡样芽孢杆菌(Bacillussp.X10-1-2)对稻草的降解作用,测定了发酵过程中发酵液的纤维素酶和半纤维素酶活、可溶性总糖和还原糖浓度以及底物残渣重、残渣结晶度、傅立叶红外光谱和表面结构的变化.发现在发酵过程中蜡样芽孢杆菌菌体产酶的过程也就是木质纤维素的降解糖化过程.上清液中的纤维素酶活和半纤维素酶活分别在发酵进行到第8 h和20 h时达到最高峰.总糖含量于4 h达到最高值,然后下降到一定程度后保持恒定.还原糖含量随发酵进行不断下降,达到一定值后保持恒定.该菌株对稻草长达5 d的降解过程中结晶度变化十分显著,第3 d时达到最高峰,而后又迅速下降.此菌株对稻草中各组分都有一定降解,其中纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为3.35%、0.91%和2.81%.该菌株主要降解稻草的薄壁细胞,使薄壁细胞发生严重皱缩.这预示,该菌株在造纸工业具有良好的应用前景.     

金属离子对枯草芽孢杆菌BS501a发酵液防治稻瘟病菌效果的影响

为提高枯草芽孢杆菌拮抗性次生代谢产物的产量,通过单因素试验研究了CaCl2、Fe-SO4、MnSO4、MgSO4、ZnSO4等金属无机盐对枯草芽孢杆菌BS501a发酵液拮抗效果的影响.结果表明:当分别向基础培养基中添加0.15%~0.2%CaCl2.2H2O、0.01%FeSO4.7H2O、0.01%MnSO4.H2O、0.05%MgSO4.7H2O和0.1%ZnSO4.7H2O时,发酵液抗稻瘟病菌活性均有不同程度提高.通过正交试验,确定各种金属无机盐的最佳组合为:0.15%CaCl2.2H2O、0.01%FeSO4.7H2O、0.01%MnSO4.H2O、0.05%MgSO4.7H2O和0.15%ZnSO4.7H2O.枯草芽孢杆菌BS501a用优化后的合成培养基发酵,发酵上清过滤液抑菌圈直径达到71.4 mm.利用枯草芽孢杆菌BS501a发酵上清过滤液室内防治稻瘟病,防治效率为63.86%.     

饲用芽孢杆菌混菌发酵产中性蛋白酶的工艺优化

为提高饲用芽孢杆菌中性蛋白酶的发酵单位,考察了多种芽孢杆菌混菌发酵产蛋白酶的协同作用效果,并在单因素试验的基础上,先后采用部分析因设计、爬坡设计及中心组合设计的试验方法对菌株配伍方式及发酵培养基组成进行了优化.通过优化构建了合适的混菌发酵体系,即芽孢杆菌A1、B1、B3菌株的混合比例为2∶3∶3;最佳发酵培养基组成(g/L)为:麦芽糖58.5、酵母膏28.6、麸皮42.5、吐温80 3.0、K2HPO43.0、CaCO33.0.在优化条件下,芽孢杆菌混菌发酵产中性蛋白酶活力单位可达到6 728 U/mL,较优化前芽孢杆菌A1的发酵活力单位提高了175.6%.     

枯草芽孢杆菌对草金鱼的毒害作用

通过在基础饲料中添加不同含量的枯草芽孢杆菌,制成枯草芽孢杆菌含量分别为0cfu/g,0.45×109cfu/g、0.9×109cfu/g、1.36×109cfu/g和1.81×109cfu/g的5种试验饲料,分别用以上5种饲料饲喂均重(19.0±0.5)g,均体长(8.2±0.3)cm草金鱼5 d,评估了饲料中不同枯草芽孢杆菌添加量对草金鱼的毒害作用。结果表明:在基础饲料中添加枯草芽孢杆菌的量低于0.9×109cfu/g时,试验前期(72 h之前)对草金鱼的毒害作用表现不明显,而72 h后其死亡率才出现明显的差异(P<0.05),而枯草芽孢杆菌含量高于0.9×109cfu/g的试验组中,整个过程中,草金鱼死亡率存在明显差异(P<0.05)。在本试验条件下,枯草芽孢杆菌对草金鱼在96 h的半致死含量为1.59×109cfu/g,120 h的半致死含量为1.23×109cfu/g,安全含量为0.22×109cfu/g。     

类雌激素农药对雌性哺乳动物的生殖毒理研究

环境雌激素类化合物对生态系统和人口健康造成的危害日益受到人们的关注.农药作为环境雌激素的一大类,影响雌性哺乳动物的内分泌系统,导致生殖和发育方面的畸形.笔者介绍了环境雌激素的概念及其对雌性哺乳动物的毒性作用,并着重从雌性哺乳动物激素水平、生殖器官、胚胎三个方面阐述了环境雌激素类农药对雌性哺乳动物生殖生理的影响及其分子机理.环境雌激素类农药中有相当一部分是手性农药,因此就手性农药对雌性哺乳动物生殖毒性研究的重要性和研究现状进行了评述,并对该领域今后的研究进行了展望.     

降解AFB1的克雷伯氏菌分离、鉴定及降解机理初步研究

为了获得对黄曲霉具有降解作用的菌株,以秸秆、牛粪、土壤、发霉玉米及花生为研究对象,以香豆素为唯一碳源,筛选获得了能够降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的多个菌株.通过生理生化及16S rDNA基因序列分析确定菌株种类;通过优化获得了对AFB1具有最优降解效果的培养基组成;采用蛋白酶K和SDS处理发酵上清液,初步判断具有降解...     

微波等离子体对聚合物粘接的效应

<正> 引言聚合物的粘接有广泛的用途。有些聚合物能粘接得很牢;但有些聚合物却难以粘接。如聚乙烯,聚丙烯,尼龙6等。主要原因是这些非极性材料的表面张力值太低。粘接时,固液相之间的接触角很大,粘接剂浸润困难,所以粘接不牢。利用等离子体对高分子材料的表面改性作用,可使这些材料的粘接强度大大提高。但激发等离子体多用射频或直流电源,而且聚合物试片多处于等离子     

贝莱斯芽孢杆菌降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇及抑制禾谷镰刀菌的研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol, DON)是由禾谷镰刀菌等真菌产生的一类真菌毒素,会严重污染玉米和小麦等农产品,利用微生物降解真菌毒素是一种高效且污染小的方法。从猪肠道中分离得到1株可高效降解DON的菌株,对该菌株进行形态学、生理生化鉴定和16S rDNA序列比对分析;将该菌株与DON共同孵育,检测不同孵育时间的降解效果;取该菌株上清液、菌体细胞、胞内提取物以及经蛋白酶k、加热处理的上清液分别对DON进行降解;将菌株与禾谷镰刀菌共同培养,观察禾谷镰刀菌的生长情况。结果表明：经16S rDNA序列比对分析确定筛选得到的菌株为贝莱斯芽孢杆菌,其发酵上清液能在72 h内降解76.7%的DON,上清液经蛋白酶k、加热处理后,降解效果变弱,初步判断其中存在能降解DON的胞外酶;该菌株能够抑制禾谷镰刀菌的生长,且其发酵上清液对禾谷镰刀菌也具有很好的拮抗效果。     

产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌发酵条件的响应面优化

采用实验室前期构建的能够高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株,对其液体发酵条件进行优化。通过单因素实验和响应面Box-Behnken模型优化液体发酵培养参数,五因素三水平的响应面分析表明最佳发酵培养条件为:蛋白胨26.05 g/L,葡萄糖29.29 g/L,MgSO4 1.5 g/L,CaCl2 0.74 g/L,NaCl 10 g/L,pH 9.0,接种量3 %。在最优发酵培养条件下,纳豆激酶最高酶活达到2 186.17 IU/mL,比优化前提高了269 % ,这表明响应面法优化枯草芽孢杆菌工程菌能够明显的提高纳豆激酶活性,为该菌株规模化生产纳豆激酶提供了基础应用参考。     

一株同型乳酸发酵芽孢杆菌的分离和鉴定

从奶粉中分离一株同型乳酸发酵杆菌，编号ＴＱ３３，主要特点：生产芽孢，生长温度范围（２０～６３）℃最适生长温度（４５～５０）℃接触酶试验阳性，通气条件下生长良好，厌氧条件下发酵葡萄糖产不产气，主要产Ｌ（＋）乳酸，菌体（Ｇ＋Ｃ）为（３２．４５）％，生理生化性质特殊，据以上特点，将ＴＱ３３菌株鉴定为凝结芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｏａｇｕｌａｎｓ）ＬＤ５０试验表明，菌体和代谢产物属无毒物质。     

一株海洋芽孢杆菌对亚甲基蓝的吸附作用

从深海环境样品中分离并筛选出了一株对亚甲基蓝染料具有较高吸附能力的芽孢杆菌Bacillus sp. LM-24,优化了其吸附条件并选用硅胶和大孔树脂两种载体对其进行固定化。3种吸附剂最适吸附剂浓度分别为1.216、3、10 g·L^-1;最佳pH分别为9.0、9.0、8.0;最适吸附温度分别为30、25、25℃,最佳吸附时间分别为0.5、1、2 h,对10 mg·L^-1亚甲基蓝去除率分别为88%、90%、99%。动力学与等温线实验表明：3种吸附剂均存在物理与化学吸附,固定化吸附剂表面为非匀相吸附。固定化LM-24的吸附性能要优于游离微生物LM-24,对亚甲基蓝溶液具有快速且稳定的吸附作用,可作为偶氮脱色染料的潜在菌株。     

产直链脂肽类抗菌物质枯草芽孢杆菌HS-A38的生物学特性

以从海参肠道中筛选的枯草芽孢杆菌HS-A38为目的菌株,分析了其生长特性、产酶特性、抑菌活性及其产生抗菌活性物质的能力。结果表明,培养时间为36~38h时芽孢出芽率最高,该菌株具有较强的抑菌作用,并具有产生蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和果胶酶的能力。从该菌株的发酵后上清液中提取得到2种具有抗菌活性的化合物,初步推断这2种物质为直链脂肽类抗菌物质。     

芽孢杆菌B15对棉花枯萎病菌的拮抗性能

考察B15菌株对棉花枯萎病菌——尖孢镰刀菌的抑制效果，并对B15的抗菌谱、菌种稳定性、在土壤中菌数及拮抗活性变化以及液体培养基进行研究。结果表明：芽孢杆菌B15对棉花枯萎病菌有较强的抑制作用，抑菌圈达30mm。B15抗菌谱广，拮抗性能稳定，经转接传代10次后无明显衰退。在4℃、28℃、55℃的土壤中放置30d，最高存活率达55．5％，拮抗性能与对照相当。加有黄豆粉的培养基有利于B15增殖和芽孢形成。研究结果表明：B15是一株极具开发潜力的生防菌株。     

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的纯化和性质

本文以魔芋粉为碳源培养枯草芽孢杆菌S-88获得一种β-甘露聚糖酶粗酶液,粗酶液通过硫酸铵梯度盐析、超滤、HiprepTM 26/10脱盐柱脱盐、HiprepTM 16/10 DEAE FF阴离子树脂和G-75凝胶柱的纯化,该枯草芽孢杆菌S-88产的甘露聚糖酶的酶活力达到61697.52 IU/mL。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纯化后酶的分子量为30 kda,比其它细菌产的β-甘露聚糖酶分子量(50 kda)小。β-甘露聚糖酶在pH 6.0和50℃的酶活性最大。它在pH 4.4~6.8之间有很好的稳定性,37℃水浴2 h酶活保持在80%以上。55℃以下水浴2 h,酶活力保持在90%以上,该酶有较好的耐热性,煮沸80 min该酶活力才能基本上消失。