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以枯草杆菌为菌种液体培养制备碱性磷酸酶,研究确定了培养的最佳工艺条件,并对碱性磷酸酶的酶促反应动力学性质进行了初步探讨。结果表明,枯草杆菌制备碱性磷酸酶的最佳工艺条件为:40℃,pH值7.4振荡培养10h,酶活最高。对碱性磷酸酶的动力学性质研究表明,该酶催化底物磷酸苯二钠水解反应的最适pH值8.8,最适温度52℃,米氏常数Km值为2.94mmol/L。 相似文献
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新型染料配基对碱性磷酸酶的亲和纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
设计合成了一种含有碱性磷酸酶抑制剂——对氨基苯磷酸的新型偶氮染料配基并将其偶联到凝胶Sepharose CL-6B 上,制备出新型的亲和层析介质,分离纯化小牛肠中的碱性磷酸酶。通过考察不同配基密度的层析介质对碱性磷酸酶的选择性,得出配基密度为4.55mg 配基(g 湿胶)-1的层析介质选择性高。用NaCl和Na2HPO4进行阶段洗脱,可使酶的纯化倍数一步达到65倍,活力回收率达到89%。通过测定不同配基浓度下酶的动力学,发现新合成的配基是碱性磷酸酶的竞争性抑制剂,其KI为3.0×10-3mol L-1。 相似文献
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枯草杆菌蛋白酶在水相pH值小于其等电点条件下带正电,能与异辛烷中带负电的阴离子表面活性剂二辛基丁二酸磺酸钠(AOT)通过静电引力结合形成离子对进入有机相。详细研究了两相接触方式、水相初始pH值、水相离子强度等因素对酶转移率的影响。采用120 r/min磁力搅拌使两相混合能得到较好的酶转移率,作用时间为6 h。水相初始pH值5.0有利于离子对的形成及酶蛋白的转移。水相中CaCl2的加入有利于消除两相混合过程中的乳化;但是过高的CaCl2浓度会减弱酶分子与AOT间的静电引力,不利于酶分子与AOT的结合。水相中酶浓度不变,随着有机相中AOT初始浓度的增加,酶的转移率呈现增长趋势。固定异辛烷中AOT浓度,随着水相中初始酶浓度的增加,转移至有机相中酶量先增加后减少。进入异辛烷的酶分子仍旧保持活性,能催化转酯化反应的进行,但随着反应时间的延长,酶的催化效率出现下降。 相似文献
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近年来水溶性聚磷酸铵(APP)作为螯合液体肥在农业上得到了广泛关注和应用。以两种不同聚合度分布的水溶性APP为原料,系统研究了Mg2+对两种水溶性APP的水解的影响。研究结果表明:在60 ℃反应110 h后,APP2溶液中Mg2+的质量分数为0、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%时,其正磷酸铵的质量分数从未反应时的8.1%分别变为32.7%、31.3%、28.1%、30.7%、32.1%;APP8溶液中Mg2+的质量分数为0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%时,其正磷酸铵的质量分数从未反应时的13.3%分别变为53.3%、51.5%、51.6%、52.4%、46.9%。结合一级反应动力学模型,计算发现Mg2+对水溶性APP的水解具有减缓作用。不同聚合度分布的水溶性APP在相同Mg2+浓度下正磷酸铵含量的变化量有差异,针对作物需求,应该使用不同品质的水溶性APP。 相似文献
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本文采用离子色谱外标法,对水溶性染料中的微量钙镁离子进行了定量分析。测定结果表明该方法具有很高的精密度和数据重现性,不会对色谱柱造成污染。 相似文献
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合成了碱性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑([bmim]OH),研究了其在苯甲醛与氰乙酸乙酯或丙二腈的Knoevenagel反应的应用。实验结果表明:在无溶剂条件下,反应物的物质的量比为1:1,离子液体占反应物的摩尔分数为20%,室温下搅拌,反应时间只需10~30min,产率可达到85%~95%,后处理简单方便,离子液体可重复使用5次。 相似文献
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聚磷酸铵作为一种富含氮、磷元素的新型缓溶性长效氮磷肥,对微量元素具有良好的螯合能力,可有效防止土壤中金属离子被固定,从而被植物更好地利用。采用滴定分析法测定了不同聚合度的水溶性聚磷酸铵(APP)对中量元素镁离子的螯合能力,探索了水溶性聚磷酸铵对镁离子的螯合规律,为聚磷酸铵-中微量元素螯合物的制备奠定基础。实验结果显示,水溶性聚磷酸铵聚合度越高,对镁离子的螯合能力越强,且螯合能力随着pH增大先减小后增大、随着温度升高逐渐降低,在pH=6.0、温度为5 ℃时高聚聚磷酸铵对镁离子的螯合量达到8.2 g(以100 g APP计),在pH=8.0、温度为5 ℃时低聚聚磷酸铵对镁离子的螯合量达到5.6 g(以100 g APP计)。采用傅里叶变换红外光谱分析验证了螯合物的生成。 相似文献
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镁离子改性MPP对玻璃纤维增强聚酰胺66的阻燃研究 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了三聚氰胺聚磷酸盐(MPP)和镁离子改性三聚氰胺聚磷酸盐(Mg-MPP)分别对玻璃纤维增强聚酰胺66(PA66)的阻燃效果、热降解行为以及力学性能的影响。结果表明,在相同添加量的情况下,添加Mg-MPP比添加加PP有着更高的阻燃效率,氧指数提高了近16%。同时还提高了材料的热稳定性,起始分解温度提高26.5℃,残炭量增加。此外,Mg—MPP阻燃玻璃纤维增强PA66的力学性能明显优于MPP阻燃玻璃纤维增强PA66,其拉伸强度、弯曲强度和悬臂梁缺口冲击强度分别比后者提高了11.8%、6.5%和18.5%。 相似文献
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目的建立噬菌体单链抗体碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)细胞ELISA检测方法,以期排除外周血中白细胞的干扰,将筛选到的噬菌体抗体用于临床样本的检测。方法从大容量噬菌体抗体库中筛选与食管癌细胞结合的噬菌体单链抗体,制备食管癌细胞KYSE-170和EC109鉴定板及白细胞鉴定板,采用ALP细胞ELISA法分析筛选到的噬菌体抗体与两种食管癌细胞及白细胞的结合活性,同时与辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)细胞ELISA法进行比较,以抗卵清蛋白(ovalbumin,OA)为阴性对照。结果经ALP细胞ELISA法检测,筛选到的噬菌体抗体1、2、3均可与KYSE-170和EC109细胞结合,A405值在检测范围内;3个噬菌体抗体与不同食管癌细胞系的结合活性差异有统计学意义(P<0.001);抗OA抗体与两种食管癌细胞的结合活性明显低于3个噬菌体抗体,且差异有统计学意义(P<0.001);3个噬菌体抗体与白细胞结合的A405值在检测范围内,与食管癌细胞系的结合活性相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ALP细胞ELISA法可鉴定噬菌体单链抗体,并可排除白细胞的干扰,有望应用于临床样本的检测。 相似文献
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建立了盐水中钙、镁离子的分析方法并进行详细描述,利用该方法对不同取样点的盐水进行测定,证明该检测方法简便、快速、准确,能够满足生产需要。通过大量的测定数据总结出规律,减少了分析次数,降低了生产成本,并找出保证正常生产的关键因素。 相似文献