酶法制备鲟鱼皮胶原蛋白多肽及其抗氧化活性研究

该研究以鲟鱼皮为原料利用碱性蛋白酶水解制备胶原蛋白肽,进行了鲟鱼皮基本成分分析,酶解条件优化和酶解产物抗氧化活性研究。结果表明,最佳酶解条件为pH 9,温度55℃,添加酶质量分数3%,酶解时间5 h时水解度为22. 0%。酶解液经超滤分离得到4种不同分子质量范围的胶原蛋白肽组分SSCP-I(分子质量>10 000 Da)、SSCP-II(分子质量=5 000～10 000 Da)、SSCP-Ⅲ(分子质量=1 000～5 000 Da)和SSCP-IV(分子质量<1 000 Da)。其中(分子质量=1 000～5 000 Da) SSCP-Ⅲ对超氧阴离子自由基的清除能力最高,其半抑制清除浓度IC50为5. 938 g/L。该研究为鲟鱼皮的综合加工和高值化利用提供了理论指导。     

双酶法制备银杏抗氧化肽工艺研究

为获得制备银杏抗氧化肽的最佳工艺,采用2709碱性蛋白酶和胃蛋白酶分步水解银杏种仁蛋白,以总还原能力为指标,考察酶用量、酶解温度、pH值和酶解时间这4个因素对银杏种仁蛋白酶解效果的影响。通过响应面试验得出2709碱性蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为6976U/g、酶解温度为55℃、pH值为8.9、酶解时间为5h,此时银杏种仁蛋白酶解液的总还原能力(A700nm)为1.278;通过正交试验,得到胃蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为9000U/g、pH值为3.0、酶解温度为50℃、酶解时间为2h,此时银杏种仁蛋白酶解液的A700nm为1.636。     

无花果蛋白酶酶解牡蛎肉的工艺优化及其抗氧化活性研究

研究无花果蛋白酶酶解牡蛎肉的工艺优化及其抗氧化活性,以氨基酸态氮含量和DPPH·清除率为指标进行单因素和正交实验,研究酶解时间、酶解温度、酶量、p H对氨基酸态氮含量和抗氧化活性的影响。正交实验确定牡蛎酶解的最佳工艺条件为:酶量5.5%,酶解温度50℃,p H6.0,酶解时间3.5 h。此工艺条件下,牡蛎酶解液氨基酸态氮的含量为0.181 g/100 m L,DPPH·清除率达71.80%,还原力为0.813,·OH清除率为16.19%,牡蛎酶解液具有较强的抗氧化活性。      

鸡内金酶解物制备工艺优化及抗氧化活性研究

目的：研究鸡内金的最佳酶解工艺条件,并分析其酶解物的氨基酸组成、分子量分布及抗氧化活性。方法：以鸡内金多肽得率、酶解液水解度为指标,采用正交试验优化鸡内金的酶解工艺条件;采用氨基酸分析仪、高效凝胶渗透色谱法测定鸡内金酶解物的氨基酸组成和分子量分布;并考察鸡内金酶解物对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除能力。结果：鸡内金最佳酶解工艺条件为以中性蛋白酶和碱性蛋白酶共同酶解,酶解温度60 ℃,酶解时间9 h,酶解pH值11,蒸煮时间6 h。该条件下鸡内金多肽得率为75.68%,水解度为14.43%;鸡内金酶解物的必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为58.56%,具有较高的营养价值;鸡内金酶解物相对分子质量＜1 000 Da所占比例为90.2%,易于消化吸收;当鸡内金酶解物质量浓度为1.5 mg/mL时,其对ABTS+自由基的清除率达到94.19%。结论：最佳酶解工艺下,鸡内金多肽得率高达75.68%,具有较好的抗氧化活性。     

酶法制备豆清液多肽工艺优化及其抗氧化活性研究

为提高大豆蛋白资源的利用率,考察了不同蛋白酶(木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶)水解豆清液制备多肽,并选择风味蛋白酶进行工艺优化.以多肽得率为评价指标,探讨酶用量、酶解温度、初始pH和酶解时间对多肽产率的影响,并通过响应面优化提取工艺参数,确定了豆清液水解的最佳工艺条件为:酶用量0.09 g、温度54℃、p...     

响应面法优化鹿骨多肽酶解工艺及其体外抗氧化活性

目的:筛选鹿骨蛋白最适提取温度和最佳酶解工艺并检测其抗氧化活性.方法:根据鹿骨蛋白的蛋白浓度筛选出最适提取温度,根据水解度(DH)通过单因素及响应面实验设计筛选鹿骨多肽的最佳酶解工艺,并通过测定鹿骨多肽对DPPH自由基、羟自由基的清除能力来评价鹿骨多肽的抗氧化活性.结果:最佳提取温度为95℃,通过响应面法优化及实际验证...     

苜蓿多肽制备工艺优化及其抗氧化活性

以苜蓿(Medicago sativa)为原料,对碱性蛋白酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解pH四个因素进行单因素实验,通过响应面法对苜蓿多肽的酶解工艺进行优化。结果表明,最佳酶解工艺条件为:加酶量3000 U/g,酶解pH8.79,酶解温度49.9 ℃,酶解时间4.9 h,得到多肽含量为4.94 mg·mL^-1。在该条件下,1 mg·mL^-1样品对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力较强,分别为74.61%和72.14%,对DPPH自由基清除能力较弱,为61.53%,说明苜蓿多肽具有良好的抗氧化活性,为苜蓿进一步开发利用提供理论依据。     

鹅血红蛋白抗氧化活性肽的制备及工艺研究

以新鲜鹅血为原料提取血红蛋白,利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶及风味蛋白酶来酶解鹅血红蛋白,采用甲醛滴定法测定鹅血红蛋白水解液的水解度,通过研究水解液对DPPH自由基清除能力来检测水解产物的抗氧化活性,并分析了酶解温度、时间、pH及酶与底物比对鹅血红蛋白水解产物的影响.结果表明,采用中性蛋白酶获得的酶解产物抗氧化活性最高.在中性蛋白酶的作用下,通过单因素及正交实验,优化出产物抗氧化活性较高的酶解工艺条件:温度50℃,酶解时间8h,pH7.0,酶与底物比8000U/g,在最佳酶解条件下,产物对DPPH自由基的清除率为89.6％.     

响应面优化冷榨花生粕酶法制备多肽工艺的研究

运用了Min Run Equirelicated Res Ⅳ析因设计、爬陡坡试验以及中心复合响应面设计对碱性蛋白酶酶解冷榨花生粕蛋白制备活性多肽工艺进行了优化.析因设计结果和显著性分析发现,[E]和[S]为最重要因素(P＜0.01),酶解pH和酶解时间为重要因素(P＜0.05).在析因设计、爬陡坡试验设计结果基础上应用中心复合响应面设计对[E](X1)、[S](X2)和酶解时间(X3)进行了响应面优化分析.响应面优化结果表明,在[E] =4 300 U/g[S],[S]=10.0％,酶解时间为85 min最优条件下,酶解液多肽含量达到最高,为(0.209 ±0.005)％ (n =6),与模型预测值0.207 8％接近,偏差为5.77％.试验表明,酶促水解是制备活性多肽的有效方法.     

鹅血红蛋白抗氧化活性肽的制备及工艺研究

以新鲜鹅血为原料提取血红蛋白,利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶及风味蛋白酶来酶解鹅血红蛋白,采用甲醛滴定法测定鹅血红蛋白水解液的水解度,通过研究水解液对DPPH自由基清除能力来检测水解产物的抗氧化活性,并分析了酶解温度、时间、pH及酶与底物比对鹅血红蛋白水解产物的影响。结果表明,采用中性蛋白酶获得的酶解产物抗氧化活性最高。在中性蛋白酶的作用下,通过单因素及正交实验,优化出产物抗氧化活性较高的酶解工艺条件:温度50℃,酶解时间8h,pH7.0,酶与底物比8000U/g,在最佳酶解条件下,产物对DPPH自由基的清除率为89.6%。      

鲢鱼骨胶原多肽的制备及其抗氧化活性研究

以鲢鱼骨为原料,经蛋白酶酶解、Sephadex G-25凝胶色谱分离纯化制备具有高抗氧化活性的胶原多肽。首先以胶原多肽得率和水解度为评价指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶中筛选最优酶,并采用单因素实验、响应面优化实验确定鲢鱼骨胶原多肽的最佳制备工艺;然后采用Sephadex G-25凝胶色谱进行分离纯化,得到不同分子质量多肽组分并分析其氨基酸组成;以ABTS⁺·清除能力和还原能力为指标,考察鲢鱼骨胶原多肽各组分的抗氧化活性。结果表明,酶解鲢鱼骨的最优酶为复合蛋白酶,制备胶原多肽的最佳工艺:酶添加量为8 220 U/g、酶解温度为51丈、酶解时间为4.5 h,此时胶原多肽得率为49.00%;经Sephadex G-25分离得到5个组分,其分子质量为14～9 788 Da,氨基酸组成符合胶原蛋白的特征;抗氧化实验表明组分Ⅳ具有最强的ABTS⁺·清除能力和还原能力,其IC₅₀/OD_1.0分别0.02 mg/mL和19.16 mg/mL。该研究为鱼骨资源的开发利用提供了技术参考...     

魔芋多肽酶解法制备工艺研究

采用碱溶酸沉法提取魔芋飞粉中的蛋白质,再用碱性蛋白酶对提取出的魔芋蛋白进行酶解,探究魔芋多肽的最佳制备工艺。该试验以蛋白质提取率为指标,先确定出魔芋蛋白的最佳提取工艺,再以多肽提取率(TCA–SN)和水解度(DH)为双指标,通过单因素试验和正交试验来优化魔芋多肽制备工艺。结果表明:魔芋蛋白的等电点为p H 3.8,最佳提取条件为酶解p H 8.5、酶解温度50℃、酶用量3 500 U/g、酶解时间150 min。在该组合条件下得到的多肽得率和水解度分别为11.98%和9.19%。     

蜂胶脂质体制备工艺优化及抗氧化活性分析

[目的]提高蜂胶的水溶性及其生物利用率,扩大蜂胶在食品行业的应用范围。[方法]以胆固醇、大豆卵磷脂为壁材,蜂胶为芯材,利用薄膜分散法制备蜂胶脂质体。以包封率为检验指标,通过单因素试验及响应面分析法优化得到蜂胶脂质体的最佳制备工艺,并对其抗氧化活性进行分析评价。[结果]蜂胶脂质体的最优制备工艺为大豆卵磷脂用量2.5 g/100 mL,大豆卵磷脂与胆固醇质量比10.3∶1,蜂胶与胆固醇质量比3.8∶1,蜂胶脂质体的包封率可达93.09%。该法所得蜂胶脂质体在体积分数为50 μL/mL时,对DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基清除率分别达88.58%,61.13%,86.02%。[结论]试验制备的蜂胶脂质体包封率高,水溶性好,且具有良好的抗氧化能力。     

双酶水解玉米醇溶蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

为了制备抗氧化活性肽,利用Alcalase碱性蛋白酶和中性蛋白酶分步酶解玉米醇溶蛋白。在单因素的基础上,以1.1-二苯基苦基苯肼（DPPH·）自由基清除率、羟基自由基清除率和水解度（DH）为响应值,采用响应面（RSM）中心组合实验,选取Alcalase碱性蛋白酶加酶量、中性蛋白酶与Alcalase碱性蛋白酶活力之比、底物浓度为自变量,探讨最佳酶解工艺条件。采用Design-Expert软件,通过响应面优化确定修正后各因素的最佳工艺条件为:Alcalase碱性蛋白酶加酶量12880 U/（g底物）、中性蛋白酶与Alcalase碱性蛋白酶活力之比为1∶4,底物浓度为3.4%。在此修正条件下,DPPH·自由基清除率为42.98%,水解度为32.18%,与预测值的相对误差为1.04%。浓度为20 mg/m L时,玉米醇溶蛋白的DPPH·自由基清除率和羟基自由基清除率分别为同浓度VC的85.8%和67.0%。      

酶水解制备猪血浆蛋白抗氧化肽工艺参数的优化

对猪血浆蛋白的水解条件进行优化,并对其不同水解条件下水解物的抗氧化性进行了研究.采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶以及木瓜蛋白酶制备猪血浆蛋白水解物,用pH-Stat法测定其水解度,通过测定卵磷脂脂质氧化体系的抑制作用和亚铁还原能力,来研究水解物的抗氧化能力.结果表明,猪血浆蛋白水解物的抗氧化能力与酶的种类、底物是否经预热处理及水解度的大小有关,筛选出碱性蛋白酶为最佳用酶;通过测定不同底物浓度、不同酶与底物浓度比以及不同水解时间的水解物的TBARS值(硫代巴比妥酸值)和还原能力,得出底物浓度为4%,酶与底物浓度比为2%,水解时间5h的水解物具有较高的抗氧化能力.     

牦牛血抗氧化低聚肽制备工艺的优化及抗缺氧活性的初探

为简化牦牛血抗氧化低聚肽的制备工艺并对其抗缺氧活性进行初探,实验采用菌酶联合发酵、超滤分级制备牦牛血抗氧化低聚肽,常压耐缺氧实验以及亚硝酸钠中毒存活实验评价其抗缺氧活性。结果表明:1 k Da超滤分级得到的牦牛血抗氧化低聚肽具有良好的体外抗氧化活性,·OH清除能力、DPPH·清除能力、总抗氧化力以及脂质过氧化抑制能力均极显著优于商品化大豆低聚肽(P <0. 01);不同剂量的牦牛血抗氧化低聚肽对小鼠常压缺氧存活时间以及亚硝酸钠中毒存活时间均有不同程度的延长,并呈现剂量依赖性。综上,牦牛血抗氧化低聚肽可作为一种天然抗氧化剂,且具有提高小鼠抗缺氧应激的能力。     

双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化多肽的研究

本文以葵花籽粕蛋白粉为原料,获取双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化活性多肽的最优工艺。分别采用碱性蛋白酶等七种蛋白酶对葵花籽粕蛋白进行酶解,以抗氧化性及水解度为指标对酶制剂进行筛选。以抗氧化性为指标,通过单因素及响应面法对酶解条件进行优化,获取最佳酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶为最适酶制剂且最佳酶解工艺为:p H7.6、复合酶比例为2.5∶1、底物浓度2%、[E]/[S]为2%、酶解温度50℃、酶解时间200min,在此条件下,葵花籽粕多肽对O-2·和·OH清除能力分别为68.06%和50.12%。      

鹿血多肽的制备工艺及抗氧化能力研究

以新鲜鹿血为原料,利用胰蛋白酶水解制备鹿血多肽,以水解度为指标,在单因素和正交实验的基础上,确定酶解的最佳工艺条件,即加酶量为6%,pH为9,反应温度为37℃,反应时间为4h,水解度为46.72%±0.11%。并进一步对鹿血多肽进行抗氧化能力测定,在高浓度时多肽的羟自由基清除能力和DPPH自由基清除能力较高。