甜酒酒曲根霉低聚糖酶类研究

本文综述了甜酒酒曲根霉淀粉降解酶类全酶系及其降解产物研究、低聚糖酶产生菌的选育和混合发酵制作甜酒的研究前景。     

甜酒酒曲根霉淀粉酶研究进展

本文综述了淀粉酶的分类，根霉淀粉降解酶类及其性质和作用机理，不同根霉糖化发酵糯米产物成分分析现状及研究前景。     

高产低聚糖甜酒根霉曲种的最适混合比例的研究

本文研究了RhizopusRN-1,Q303,RhizopusRA-1和RhizopusRQ-1等几种根霉之间的协同作用及其对低聚糖的影响.结果表明上述四种根霉的最适添加量分别为0.17%、0.17%、0.22%、0.12%,培养时间为48h.     

低聚糖及根霉低聚糖的生理功能

说明低聚糖的定义和应用。研制的由根霉生产的低聚糖含麦芽低聚糖类和异麦芽低聚糖。介绍了生理功能。     

酒曲根霉的诱变育种

本试验对根霉RA-1菌株进行NaNO2诱变和紫外线诱变,得到一株低聚糖酶活力较高的菌株,酶活力达到4360(U/g干曲),比出发菌株提高403.7%,液化酶比出发菌株提高到486.2%,达到1953(U/g干曲),糖化酶提高到出发菌株的567.8%,达到2.55×105(U/g干曲),将该菌株进行斜面传代,产酶稳定。     

利用根霉和假丝酵母联合发酵生产甜酒的研究

在研究从泰国优质甜酒曲中分离出来的假丝酵母菌株L1、L2和我国根霉菌株Q的生长特性的基础上,进行了不同配比的甜酒试饭试验。结果表明:当假丝酵母菌株L2接种量为1%,根霉菌株Q接种量为3%时,最有利于试饭时产糖。     

酒曲根霉的分离纯化及淀粉酶活力测定

本试验采用直接分离法和单菌落挑选法从酒曲中分离纯化得到30株根霉,测定其液化酶、糖化酶和麦芽低聚糖活力,根霉Rhizopus RN-1,Rhizopus RA-1,Rhizopus RS-1,RhizopusRQ-1具有低聚糖酶产生能力,且产糖化酶和液化酶活力比传统的Q303都高.     

甜酒曲根霉的筛选及发酵特性研究

采用马铃薯琼脂固体培养基(PDA),对贵阳及江西的地方特色甜酒曲中的根霉分离纯化,得到菌株Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）。以优良根霉菌株Q303为对照,探究其发酵性能。结果表明,Q303、Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）的糖化酶活力分别为238.6 mg/h·g、243.3 mg/h·g、195.4 mg/h·g,液化酶活力分别为0.237 g/g·h、0.253 g/g·h、0.178 g/g·h,Rhi-1的糖化力和液化力水平都高于Q303,是一株拥有良好发酵性能的菌株。将Rhi-1、Q303制成纯种根霉曲,接入蒸熟的糯米饭中,定时取样,测定不同阶段酒酿糖化酶活力、液化酶活力、总糖及总酸的变化趋势。通过GC-MS分析根霉的发酵产物发现Rhi-1的发酵产物里富含β-苯乙醇和乙偶姻,以及特征物质异己酸乙酯。     

甜酒曲华根霉淀粉酶菌株紫外线诱变育种

通过平板菌落观察和显微镜检,从甜酒小曲中分离出华根霉淀粉酶菌株,通过平板菌落初筛测变色圈直径与菌落直径的比值(HE值)和摇瓶复筛测液化力、糖化力,筛选出1株HE值最大,液化力、糖化力最强的优良出发菌株,对其紫外线诱变处理,选育到1株较出发菌株酶活力高的优良变株SCLG-华根霉28.该菌株的HE值为1.52、液化力为70 min、糖化力为520 mg/(g·h),分别较出发菌株高出8.57%、12.50%、30.00%,且遗传性能稳定.将此优良变株制作的甜酒曲用于甜酒发酵实验对照,糖化相同重量的糯米,糖化时间减少3 h～4 h,液体渗出量明显增加,所得甜酒风味更足,甜味更浓.     

苏州甜酒药中的根霉

叙述了现今苏州甜酒药中根霉的分离培养、糖化发酵力的测定、培养特征与制曲试验。     

根霉淀粉酶的分离纯化及部分性质研究

本实验对根霉RhizopusRA-1淀粉酶进行了分离纯化,经过(NH4)2SO4分步沉淀,DEAE-纤维素离子交换层析和Sephadex G-100凝胶层析等3部纯化,得到了电泳纯的糖化酶和两条紧密相连的液化型淀粉酶带,用SDS-PAGE法测得三种酶都只含有一种亚基,相对分子质量分别为78000,48000,50000。     

甜酒汁液糖分分析

根霉RhizopusRN-1,根霉RhizopusRQ-1,根霉RhizopusRA-1,根霉RhizopusRS-1是从酒曲中筛选纯化的优良菌株。用该四菌株制作甜酒,测定了其总糖和还原糖含量和低聚糖值。并对根霉RA-1糖组分进行了Sephadex G-100柱凝胶层析,分离得到四个峰。纸层析结果表明,第一峰为单糖,第四峰为低聚麦芽三糖,不同展开剂以吡啶∶正丁醇∶水=4∶6∶3效果最好。     

甜酒汁液糖分的纸色谱层析

根霉RN-1,根霉RQ-1,根霉RA-1,根霉RS-1是从酒曲中筛选纯化的高糖化力菌株。用该菌株制作甜酒糖分层析结果表明,其糖化产物主要为葡萄糖,不同展开剂以吡啶:正丁醇:水=4:6:3效果最好。     

Purification and enzymatic identification of an acid stable and thermostable α‐amylase from Rhizopus microsporus

Rhizopus microsporus, recently isolated from a solid culture of Heng‐Shui Lao‐Bai‐Gan (HSLBG, a famous distilled liquor in Northern China) was found to produce a novel extracellular acid stable and thermostable α‐amylase. This fungal α‐amylase was purified using ammonium precipitation, Sephadex G‐25 desalination and DEAE‐52 cellulose chromatography. Its molecular weight was estimated to be 75 kDa by SDS–PAGE. The optimum pH and temperature of this enzyme was pH 5.0 and 70°C respectively. Thermostability and kinetic analysis through the Arrhenius and Michaelis–Menten equations revealed that this enzyme showed an exceptional activity at low pH and high temperature. A combination of this thermostability and acid stability could be a valuable trait for the efficient hydrolysis of amylose to glucose in large‐scale biotechnology applications. Copyright © 2012 The Institute of Brewing & Distilling     

甜酒曲华根霉淀粉酶菌株产酶条件的研究

对经紫外线诱变选育的甜酒曲华根霉高产淀粉酶菌株进行产酶条件研究,通过单因素试验和正交试验得该菌株的最佳产酶条件为∶培养基中麸皮豆粕比3∶2,加水量80%,初始pH值为5.0,培养时间36h,培养温度32℃.选取最佳产酶条件培养此菌株,测得其淀粉酶活力为58.831U,比优化前提高了60.96%.该研究对实现甜酒酿造工艺现代化、产业化具有一定的意义.     

从日本根霉中提取壳聚糖的初步研究

报道了一种从日本根酶中提取壳聚糖的简单方法。正交试验研究显示,以2%淀粉为碳源,1%蛋白胨为氮源,在起始pH5.0,26℃下培养60h时产量最高,菌丝体干重为8.43g/L。经NaOH间歇处理,HCl抽提,得到天然壳聚糖为895mg/L,壳聚糖产量占菌丝体干重的10.58%。产品壳聚糖纯度为90.5%。     

根霉碱性果胶酶的酶学性质研究

采用本实验室分离保藏的根霉菌GZ-11进行液体发酵,生产碱性果胶酶。确定了发酵周期,并研究了该酶的酶学性质。结果表明:PG酶活可达186.7万U/mL,PGL酶活可达21.3U/mL。PG的最适温度是50℃,pH稳定范围是7.0～9.0,最适pH是8.6;PGL的最适温度是45℃,pH稳定范围是8.8～10.6,最适pH是9.4。