低分子质量核桃多肽抗氧化及抗肿瘤活性研究

研究了核桃发酵多肽的抗氧化效果及抗肿瘤活性。结果表明,此多肽具有一定的抗氧化及抗肿瘤活性,当样品质量浓度为2 mg/mL时其DPPH自由基清除率为91.7%,对人小肠癌细胞(Caco-2)的IC_(50)值为3.67 mg/mL。对4组分发酵多肽(分子质量30、10~30、5~10 ku及5 ku)进行抗肿瘤活性的试验及筛选,发现5 ku组分有较强的抗肿瘤活性,表明低分子质量多肽对Caco-2细胞增殖具有较强的抑制作用(IC_(50)值为2.63 mg/mL),且该样品不仅抑制Caco-2细胞生长,对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖也有显著的抑制作用(IC_(50)值为3.76 mg/mL),而对非肿瘤细胞大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)未显示显著的抑制作用。以上结果表明,核桃粕发酵产生的小分子活性多肽有明显的抗氧化及抗肿瘤活性。     

南瓜籽蛋白酶解液的超滤分离及其抗氧化活性研究

采用超滤技术分离南瓜籽蛋白酶解液,通过研究操作压力、料液浓度、pH和时间四个因素对膜通量和膜效能的影响,依次得到截留分子量分别为10、4ku两次超滤的最佳工艺条件,并比较超滤前后酶解液的抗氧化活性。结果表明,截留分子量为10ku的超滤膜的操作压力为0.25MPa、料液浓度为3.0%、料液pH为7,操作时间为60min;截留分子量为4ku的超滤膜的操作压力为0.20MPa、料液浓度为2.0%、料液pH为7,操作时间为60min。经过超滤以后分子量小于4ku的组分具有更强的清除自由基的能力,其中清除50%DPPH自由基所需的多肽浓度即半抑制浓度IC50值为2.76mg/mL、清除羟基自由基（·OH）的IC50值为2.91mg/mL、清除超氧阴离子自由基（O2-·）的IC50值为23.58mg/mL,同时对铁离子还具有显著的还原能力,吸光度为0.5时所需的多肽浓度为9.43mg/mL。      

坛紫菜木瓜蛋白酶水解肽的抗肿瘤活性研究

坛紫菜是一种重要的经济海藻,营养价值极高。为了探究坛紫菜中的抗肿瘤活性多肽,本研究以坛紫菜粉末为原料,采用反复冻融法和超声波破碎法相结合提取蛋白,使用木瓜蛋白酶对粗蛋白进行酶解。初酶解物在MTT细胞增殖检测结果的指引下,结合超滤、葡聚糖凝胶Sephadex G-15的分离纯化和MALDI-TOF质谱分析,最终筛选出具有较强抗肿瘤活性的多肽。结果显示经木瓜蛋白酶酶解物（设为P,分子量0³ ku）分离纯化得到的多肽组份P2,包含5个多肽,对乳腺癌MCF-7和肝癌细胞Hep G-2的IC50值分别是63.64μg/m L和59.09μg/m L,其抗肿瘤活性均显著高于阳性对照5-氟尿嘧啶（对MCF-7和Hep G-2的IC50值分别是195.45μg/m L和122.72μg/m L）,组份P3包含11个多肽,对肝癌细胞Hep G-2的IC50值是209.09μg/m L,也具有一定的选择性抑制作用。      

猪皮胶原蛋白抗氧化肽的分离纯化及体外抗氧化活性研究

采用碱性蛋白酶对猪皮胶原蛋白进行酶解,制备抗氧化肽。为了得到抗氧化活性高且纯度高的抗氧化肽,本实验采用多种体外抗氧化评价体系研究超滤获得的各分子质量段猪皮胶原蛋白抗氧化肽的体外抗氧化活性;依次采用离子交换色谱、凝胶色谱对猪皮胶原蛋白酶解液进行分离纯化。结果显示:超滤分离获得5~10ku的抗氧化肽较其他分子量范围的抗氧化肽具有较好的抗氧化活性;采用离子交换色谱、凝胶色谱两种分离方法分步分离能达到较好的分离纯化效果,离子交换色谱分离得到7个组分,其中组分P1对O-2·清除率最高,多肽浓度为0.85mg/mL时,清除率为46.30%,IC50值为1.24mg/mL;该组分经过凝胶色谱分离后得到2个组分,其中组分P1-B对O-2·清除率最高,多肽浓度为0.9mg/mL时,清除率为49.43%,IC50值为0.98mg/mL。     

绿茶抗氧化肽的分离纯化与抗氧化活性研究

通过饱和硫酸铵盐析的方法从干绿茶中提取得到绿茶粗蛋白,粗蛋白透析除盐后用葡聚糖凝胶Sephadex G-75层析柱进行凝胶色谱法分离纯化,收集具有抗氧化活性的蛋白样品,并冷冻干燥,同时利用SDS-PAGE的方法对凝胶分离后收集的活性样品进行纯度的鉴定及相对分子质量的测定,并采用·OH清除法及O-2·清除法研究绿茶抗氧化多肽纯品的抗氧化活性。结果表明,绿茶抗氧化多肽经葡聚糖凝胶sephadex G-75层析柱后,得到很好的分离和纯化,在SDS-PAGE电泳图谱上只有1条条带,其相对分子质量为2¹5ku;绿茶抗氧化多肽对·OH具有很强的清除作用,其半清除浓度（IC50）为0.069μg/mL;对O-2·也具有较强的清除作用,其半清除浓度（IC50）为18.462μg/mL,与VC的清除作用（IC50为11.186μg/mL）相当。      

固态发酵核桃粕制备活性肽及其抗氧化活性的研究

为高效利用核桃粕,本研究以核桃粕为原料,采用黑曲霉固态发酵制备活性肽。考察接种量、发酵时间、发酵温度和培养基含水比例对多肽得率的影响,通过响应面实验确定最优发酵工艺条件为:接种量5.5%,发酵温度33.50℃,培养基含水比例1.00mL/g,发酵时间84h。经验证实验可知,在最优发酵条件下核桃活性肽得率可达35.68%,比优化前提高了26.7%。该活性肽具有较强的体外抗氧化活性,DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除率的IC50分别为0.15、1.75、2.4mg/mL。由此得出核桃粕是一种良好的活性肽生产原料,且该活性肽是理想的天然抗氧化产品。      

超滤对大鲵多肽抗氧化活性的影响

为了获得具有高抗氧化性的大鲵多肽,以大鲵肌肉为原料,经复合酶（风味蛋白酶和中性蛋白酶）酶解后,水解度达到44.12%,制得多肽得率为90.28%的大鲵多肽酶解液,用截留分子量分别为20、5、2、0.3 ku的超滤膜将其分离成5个分子量段,研究不同分子量段大鲵多肽对DPPH·、·OH和O-2·清除能力的影响。结果表明:不同分子量段的大鲵多肽组分的抗氧化能力大小顺序为:0.3² ku组分>2⁵ ku组分>小于0.3 ku组分>5²0 ku组分。分子量为0.3² ku的大鲵多肽抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH和O-2·的EC50分别为0.4、0.7、1.5 mg/m L。因此,采用截留分子量为2 ku和0.3 ku的超滤膜可以分离得到具有高抗氧化活性的大鲵多肽。      

模拟胃肠消化提高蛹虫草蛋白的体外抗氧化活性

探究模拟胃肠消化对蛹虫草蛋白质理化性质及抗氧化活性的影响。分别采用SDS-PAGE和酸水解法分析模拟胃肠消化前后的蛋白质分子量分布及氨基酸组成。通过体外化学评价方法,测定模拟胃肠消化前后蛹虫草蛋白质及其消化产物的抗氧化活性。构建H2O2诱导氧化损伤的PC12细胞模型,使用CCK-8试剂盒测定经蛹虫草蛋白质消化产物处理后细胞模型中的细胞活力。结果表明,经模拟胃肠消化后,蛋白质分子量的主要分布范围由10~120 ku变为8~15 ku;模拟胃肠消化前后DPPH自由基清除力的IC50值分别为1.55 mg/mL和1.06 mg/mL,Fe2+螯合力的IC50值分别为1.32 mg/mL和0.18 mg/mL,0.3 mg/mL样品的ORAC值分别为467.27±46.53μmol TE/g和948.80±24.02μmol TE/g;100μg/mL消化产物预保护H2O2损伤的PC12细胞后,细胞活力显著提高(p<0.05)。蛹虫草蛋白质模拟胃肠消化前后均具有较强的抗脂质过氧化能力及较低的Fe3+还原能力。蛹虫草蛋白质经模拟胃肠消化后产生了更多小分子量多肽,抗氧化活性显著提高,因此可对消化产物中的抗氧化肽进行进一步的研究和开发。     

核桃多肽-苦荞-藜麦复合粉制备工艺及体外消化和抗氧化功能特性分析

以核桃多肽、苦荞、藜麦为原料,按不同比例复配,根据氨基酸比值系数分计算方法评价3?种原料蛋白营养价值得出最佳复配比例,通过单因素及正交试验确定了苦荞、藜麦复配后最佳液化、糖化条件,再与核桃多肽按最佳复配比例混匀,经喷雾干燥得到核桃多肽-苦荞-藜麦复合营养粉,在此基础上,对复合粉进行体外消化和抗氧化功能的研究。结果表明：核桃多肽-苦荞-藜麦最佳复配比为0.7∶13∶5（质量比）,此时氨基酸比值系数分值为95.15%,接近参考蛋白模式;最佳液化条件为α-淀粉酶添加量7?U/g、温度60?℃、时间50?min,最佳糖化条件为β-淀粉酶添加量150?U/g、温度55?℃、时间2.5?h,此时还原糖质量浓度为20.03?mg/mL;体外模拟消化过程中多肽、还原糖、黄酮和多酚含量均随时间延长而升高,尤其小肠模拟消化过程中快消化淀粉质量分数高达64.19%,慢消化淀粉质量分数高达27.12%,抗性淀粉质量分数仅为8.70%,说明淀粉经过胃肠消化后水解更彻底;复合粉经实验证明表现出一定的抗氧化能力,分别为还原力（IC50=5.04?mg/mL）、DPPH自由基清除能力（IC50=0.67?mg/mL）、羟自由基清除能力（IC50=62.32?mg/mL）、O2－·清除能力（IC50=13.07?mg/mL）和总抗氧化能力（27.63?U/mL）。通过实验研制出一种富含核桃多肽、苦荞、藜麦的复合营养粉,易于消化吸收且具有一定的抗氧化活性。     

羊肚菌液体发酵培养基的优化及发酵产物抗氧化活性研究

为提高羊肚菌液体发酵产物中多酚的含量，探究发酵液的抗氧化活性，通过优化液体发酵培养基的成分及碳源、氮源和无机盐物质的添加量，采用单因素和响应面设计得到羊肚菌发酵液中多酚含量最高的发酵培养基为:0.5%土豆淀粉、4%大豆蛋白、0.3%磷酸二氢钾。在此条件下，羊肚菌发酵液中多酚含量可以达到1.02 mg/mL。采用体外抗氧化试验评价发酵产物的抗氧化活性，结果表明发酵产物具有较强的自由基清除作用及还原能力，具体表现为发酵液冻干粉对DPPH自由基清除率的IC50值为1.83 mg/mL，对ABTS自由基清除率的IC50值为4.81 mg/mL，对羟自由基清除率的IC50值为0.78 mg/mL，对铁离子的还原能力在发酵液冻干粉浓度为15 mg/mL时，FRAP值为0.75 mmol/L。研究结果为羊肚菌液体发酵产物的开发提供参考。     

大果榕果实乙醇提取物抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性

研究大果榕果实的多酚含量及其抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性,为其进一步开发利用奠定基础。以采自海南保亭七仙岭的大果榕果实为实验材料,用体积分数65%的乙醇提取大果榕果实多酚,采用Folin-酚法测定总酚含量。对获得的大果榕果实多酚进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基、羟自由基(·OH)清除率以及α-葡萄糖苷酶抑制活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明:大果榕果实多酚含量较高,达1.92 mg/g(以干质量计),其对DPPH自由基、ABTS+·和·OH均具有显著的清除活性,且呈质量浓度依赖性,IC50值分别为141.25、91.20、45.71μg/m L;大果榕果实多酚对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,且呈现明显的质量浓度依赖性,IC50值为102.33μg/m L;同时大果榕果实多酚对乙酰胆碱酯酶也具有一定的抑制活性,IC50值为4.9 mg/m L。研究结果表明大果榕果实多酚具有良好的抗氧化性、α-葡萄糖苷酶抑制活性和一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。     

酿酒酵母的β-葡萄糖苷酶活性及氧气对酵母产酶的影响

利用4-硝基苯基-β-D吡喃葡萄糖苷为底物测定酵母中的β-葡萄糖苷酶,研究8株酿酒酵母在上清液、壁膜间隙和细胞内的β-葡萄糖苷酶活性及氧气对酿酒酵母产β-葡萄糖苷酶的影响.结果表明β-葡萄糖苷主要位于细胞间隙和细胞内,酿酒酵母M4产β-葡萄糖苷酶最高,为4.1μmolpNP·mL-1·h-1.氧气显著促进酿酒酵母合成β-葡萄糖苷酶,且相对于厌氧条件,有氧条件下酿酒酵母M4的β-葡萄糖苷酶增加了4.51倍.     

Antioxidative properties of bee pollen in selected plant species

Phenolic constituents (total phenols, phenylpropanoids, flavonols and anthocyanins) and antioxidant ability were determined in bee pollen of 12 plant species. Antioxidant ability was measured as total antioxidant activity, radical-scavenging activity and activity against free hydroxyl radical. Great variability of phenolic contents was observed in the pollen of investigated species. Total antioxidant activity differed considerably (0.8–86.4% inhibition of lipid peroxidation), however, in most of the examined pollens, it was high and corresponded with the phenylpropanoid level.     

功能山杏整仁的酶法制备条件优化及功能评价

本研究对完整形态的山杏整仁进行酶解,使之释放出具有功能活性的短肽,以强化或赋予其保健功能,拟开发出具有降血糖和抗氧化活性的功能山杏仁产品。在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化脱苦山杏整仁的酶解条件,得到的最佳酶解参数为：温度50 ℃、pH 7.0、加酶量6.0%、酶解时间8.0 h;同等条件下进行验证实验,得到山杏整仁的水解度为26.43%,与理论模型预测值27.85%基本相符。脱苦山杏整仁水解物表现出了良好的体外抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性。当质量浓度为10.00 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、超氧阴离子自由基（O2－·）和羟自由基（·OH）的清除率分别为50.44%、65.22%、22.78%;当质量浓度为160.00 mg/mL时,其总还原力（吸光度）为1.072;通过超滤分离得到≤5、5～10、10～30、≥30 kD这4 组不同分子质量组分,当质量浓度为10.00 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为3.65%、4.43%、7.94%、10.00%;选取抑制效果最好的≤5 kD组分经凝胶层析进一步分离得到3 个洗脱峰,质量浓度为10.00 mg/mL时,3 个洗脱峰的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为11.52%、10.65%、9.67%。结果表明：脱苦山杏整仁酶解后产生了具有良好抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶活性的多肽,与未经酶解的山杏整仁相比,其保健活性显著提高。     

微生物源菊粉酶的研究进展

菊粉作为新资源食品和食品原料,近年来以菊粉为目标,开展微生物源菊粉酶生产高果糖浆、低聚果糖和酒精研究成为热点。本文综述了近几年来国内外微生物源菊粉酶的研究现状,主要论述了产酶微生物菌株的筛选、产酶条件、工程菌株的构建及应用等研究的进展。     

花生醋浸过程中蛋白质、多酚及其抗氧化性的变化

研究了山西老陈醋浸渍过程中花生蛋白质、多酚含量及其抗氧化性的变化.结果表明,花生在醋浸过程中,粗蛋白、可溶性蛋白含量显著降低,浸泡结束分别降低了32％和41％左右;多酚含量的变化较为复杂,但总体上呈降低趋势,而多肽含量在陈醋浸渍过程中呈增加趋势,其多肽质量分数增加了40.8％.在醋浸前期花生多酚提取物对DPPH、ABTS自由基的清除能力显著增加,在浸渍第10天,花生多酚提取物对DP-PH、ABTS自由基的清除能力分别增加了69.5％和95.3％,而到浸渍后期趋于稳定.     

薏苡功能活性及应用研究进展

薏苡是一种历史悠久的保健品和中成药,营养丰富且均衡,富含碳水化合物,蛋白质,脂肪,粗纤维,磷、钙、铁等微量元素,以及多种人体所需的必需氨基酸,且不饱和脂肪酸含量较高,有"世界禾本科植物之王"之称。现代药理学研究表明,薏苡中含有脂类、酚类、醇类、酸类、醛酮类、木脂素类、腺苷等70余种生物活性物质,具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节、抗病毒、降血糖等生理活性,因此有加工成具有食用和药用价值保健产品的潜力,具有广阔的发展前景。本文综述了近年来国内外关于多酚、黄酮、多糖等多种薏苡生物活性物质在其功能活性及应用方面的研究进展,通过本文综述,以期推进薏苡高值化利用,促进薏苡深加工产业发展,进一步为功能食品开发和农产品深加工提供理论依据。     

绿豆发芽过程中多酚组成及抗氧化活性的变化

为研究绿豆芽长对多酚组成及抗氧化活性的影响,以绿豆为原料,提取绿豆发芽过程中多酚化合物并测定其含量及抗氧化活性,利用高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术分析绿豆发芽过程中多酚组成的变化.研究数据表明:芽长4～5 cm时的绿豆芽多酚含量达到最高,较未发芽前提高了38％,在此时期绿豆芽多酚化合物种类最为丰富,大豆苷元、...     

蜂蜜中β-葡萄糖苷酶活性测定及来源分析

以对硝基苯基β-D- 葡萄糖苷(pNPG)为底物,对蜂蜜中β- 葡萄糖苷酶活性测定条件进行研究。结果表明：蜂蜜中β- 葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件为以柠檬酸- 磷酸氢二钠缓冲液为提取液,pH5.0,温度60℃,底物浓度30mmol/L。酶促反应在2.5h 和37℃时酶促反应曲线线性关系最好。研究还发现,β- 葡萄糖苷酶可能是蜜蜂在采集加工过程中加入进去的,同时,该酶活性还可能与蜂蜜的新鲜度相关。     

β-伴大豆球蛋白天然活性亚基的分离纯化

本研究将离子交换层析和金属螯合亲和层析方法相结合,建立了系统的分离纯化β-伴大豆球蛋白天然状态亚基的方法,通过梯度脲透析复性,使纯化亚基恢复天然构象。利用β-伴大豆球蛋白免疫动物制备抗血清对纯化亚基的免疫活性进行检测。结果表明：离子交换层析结合金属螯合亲和层析方法可以有效地纯化β-伴大豆球蛋白的α、α＇和β亚基,该方法产率高,制备的亚基纯度好,而且能与抗β伴大豆球蛋白血清特异性结合,表明提纯的亚基具有免疫活性。