一种简易的超薄切片染色器

本文介绍了一种简易的超薄切片染色器的制作和使用方法。各实验室都有制作比染色器所需的材料,其制作和使用方法简单。可进行铀、铅单、双重染色。染色效果良好。在透射电镜生物样品超薄切片染色(尤其铅染)过程中,往往由于CO_2的影响,常在超薄切片上产生碳酸铅沉淀,使切片受到污染,影响观察,严重时无法观察使之前功尽弃。我们参考LKB2160型染色机的工作原理和染色过程,结合工作中的实践,自制了一种简易的染色器,可进行铀、铅单、双重染色。使用此染色器,可使超薄切片的染色达到防污染、规格化、省时间的效果。现将其制作及使用方法介绍如下:     

电镜超薄切片真空染色法

介绍一种简便易行的超薄切片真空染色法。使用简单易得的工具及自制装置-真空保鲜盒、染色硅胶板和染色硅胶板架,能够得到较好的染色效果。结果显示,与目前现有的传统方法相比较,超薄切片真空染色法省时、省试剂,染色效果好,一次可进行大批量切片染色(一次可达200张超薄切片)。     

Sato′S铅染液的改良及长期贮存法

Ｓａｔｏ′Ｓ铅染液的改良及长期贮存法杨传红赖晃文（广州军区广州总医院医学实验科，广州５１００１０）目的：解决铅离子与空气中的ＣＯ２结合，形成铅颗粒沉淀在超薄切片上，污染超薄切片的问题。方法：使用改良后经双层微孔滤膜过滤的Ｓａｔｏ′Ｓ铅染液，并在使用前...     

一种稳定的超薄切片铅染色方法

随着电子显微镜在生物医学研究中的广泛应用,对所观察样品的制备条件的要求也越来越严格。自从Watson(1958)首先提出铅化合物可以增加超薄切片中细胞超微结构的反差以来,目前国内外多采用Reynolds(1963)介绍的柠檬酸铅作为常规铅染液。但多年来,超薄切片的铅污染却是许多实验室普遍存在的问题,它直接影响着切片的质量和电镜观察效果,原因在于过去所用的铅染液在接触空气中的二氧化碳以后常产生碳酸铅沉淀,污染切片。而且铅染液不能长期贮存,否则污染会更加严重。为了解决这个问题,我们参照Hanaichi等(1986)改进的铅数染液配方和染色方法进行染色。获得了满意的结果,特报告如下。     

透射电镜电子染色方法的改良

为提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率,在传统染色方法基础上进行改良,使用自制染色装置,在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。与传统方法相比较省时省药,减少污染机率,电镜观察的超微结构清晰,反差较好。     

基于Ansys/Flotran的夹持型超薄切片染色板优化设计

电镜超薄切片样品制备中,重金属染色是不可缺少的关键步骤.本文基于夹持型超薄切片染色板工作原理,建立4种不同染色孔形状的染色板模型(染色孔底部与侧壁夹角90°,105°,120°和135°),对水流冲洗染色板过程进行二维模拟,采用Ansys/Flotran方法计算超薄切片表面的实际冲洗液流速度和湍流动能.结果表明,随着染色孔底部与侧壁夹角的增加,超薄切片表面的水流冲洗速度逐渐增加,且不同染色孔内的湍流动能逐渐变得均匀,在染色孔的壁与底面的夹角为105°时,湍流动能最大,即水流与超薄切片表面残余的重金属染液之间交换程度最大,此结构被确定为最优化设计.根据计算流体动力学研制的产品,操作简便、安全有效,为提高透射电镜的样品染色效率和质量提供理论基础.     

微波辐射超薄切片快速染色法

本文介绍一个微波辐射超薄切片快速染色法。该方法与常规染色方法相比具有以下突出优点:染色速度快且操作简便,整个染色过程可在数分钟内完成;经微波辐射染色处理的动植物组织切片染色均匀,污染少,反差比常规染色法稍强。动植物组织切片微波辐射染色的最佳辐射时间有所不同,铀染色动植物组织切片最佳辐射时间均为30秒;铅染色动物组织切片最佳辐射时间为30秒,而植物组织切片为20秒。染色液经微波辐射后的温度应控制在20～40℃。     

电镜超薄切片批量染色的新方法

超薄切片染色是透射电镜生物样本制备中的关键环节。本文介绍了一种透射电镜超薄切片染色的新方法,利用简单自制的染色液防污存储与批量染色装置,可对超薄切片载网进行批量化染色,不但极大提高染色效率,而且减少了染色过程中染色液、样品的污染,达到染色液的重复利用,同时减少重金属对操作者的伤害和对环境的污染。     

塑料切片与电镜半薄切片多色性染色方法

塑料切片与电镜半薄切片多色性染色方法郭淑华李海伦（陕西省人民医院电镜室，西安７１００６８）多年来我室用缓冲液配制异染性甲苯胺兰近沸点染色，操作方法简单快速，不同的组织表现为多色性，细胞结构细致清晰。不但弥补了超薄切片范围局限的不足；而且在科研中应用此...     

提高电镜超薄切片染色效率的自制装置

用传统的方法进行透射电镜超薄切片染色费时费工,且易造成污染,本文介绍一种自制的染色装置能很好地解决这一问题,提高染色效率,不同生物样品的超微结构保存良好、清晰.     

高分子材料的冷冻超薄切片技术

本文使用冷冻超薄切片装置对高聚物材料包括共混物的切片获得了较好结果,並介绍了作者在高分子材料的冷冻超薄切片技术方面的一些经验。     

支原体感染的不育症精子超微结构研究

生殖器官支原体感染可能是男性不育症的病因之一,为探讨不育的可能机理,本组对支原体感染的不育症患者精子的超微结构进行研究报告如下: 材料和方法:4例经支原体检查阳性的不育患者精液,1例支原体检查阴性的正常育者精液以及人型标准株支原体和解脲支原体培养物作对照。固定于成二醛的精子及支原体培养物一部分用悬滴法磷钨酸染色制备负染标本。另一部份离心成团按常规方法制备超薄切片JEM1200EX电镜观察。     

电镜超薄切片批量染色的载网固定装置改进与应用

电镜图像对生物组织、细胞形态结构的研究具有重要作用,高质量的超薄切片染色在透射电镜样本制备中起着关键作用.本文介绍了针对目前用于批量染色的载网固定方式存在的超薄切片甚至载网脱落等问题,对载网固定装置和技术进行了改进,从而明显地提高了批量染色的工作质量和效率.     

立体高压电子显微术的生物学应用

超薄切片法的局限性在于它所形成的图象只有二维性质。运用高压电镜使得观察的切片厚度大大增加成为可能。然而,切片越厚,在同一部位图象中重叠的结构也就越多,也就越难区别。选择性染色方法解决了这个问题,它对需要观察的感兴趣结构染色而其他结构相对地不染色。本文介绍了应用立体高压电镜术研究骨骼肌纤维的横管系统。     

一种减少超薄切片污染的简单方法

电镜的超薄切片在染色过程中的污染是很难避免的，用传统的染色方法进行染色，操作麻烦且易污染，虽然现在有报道介绍各种避免切片污染的染色方法，但操作程序大都比较复杂，我们经过多次试验，认为采用以下方法可以基本上避免污染，且操作程序简单方便，染色效果也有了很大提高，方法如下。     

兔病毒性急性传染病病原的电子显微镜观察

近年来,在江南一带流行的兔急性传染病,据流行病学调查及电镜观察,已确认为是一种病毒性疾病,但目前对该病毒的类属及性质尚存有不同意见。我们用人工感染致死的病兔肝组织作超薄切片及匀浆抽提液负染观察,发现有大量直径为30nm左右的颗粒存在,颗粒均位于白细胞的细胞质中,有的散在分布;有的聚集成堆;     

一种用于暗场电镜术的超薄碳膜制备方法

高分辨透射电镜术观察单个重原子和未染色生物分子,一个重要问题是底质的背景噪音。利用超薄(20—30A)碳膜做支持物和暗场电子显微术成象较好地解决了这个问题。近年来利用这种技术研究核酸、蛋白质等生物分子.获得了许多新的结构信息。一些作者应用间接蒸发碳到新劈开的云母片,制备较均匀和颗粒性小的超薄碳膜(1、2)。本文介绍了一种简易高效制备超薄碳膜的装置和方法。     

超薄切片表面高低起伏反差机制的初步探索

自AFM发明以来，用它来进行各种超薄切片表面形态学研究的报道屡见不鲜，包括形态学的比较研究、关键结构的识别、精细结构的定量化研究等等。但是长期以来一个关键性的问题就是：为什么用超薄切片法得到的各种厚度不同的超薄切片表面会存在纳米级的高低起伏?且这种起伏能够反映组     

不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响

目的:探讨不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响。方法:切取大鼠的坐骨神经及肾脏组织,经戊二醛-锇酸双重固定,乙醇、丙酮梯度脱水后,分别用Epon812和Eponate12包埋聚合,利用超薄切片机制备厚度为1.5μm的半薄切片,切片经甲苯胺蓝染色,在光镜下观察半薄切片的染色效果。结果:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后,颜色更鲜艳,微细结构更清晰,图像反差更好。结论:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后更有利于在光镜下观察组织的微细结构。     

一种用硅橡胶载网夹进行超薄切片染色的有效方法

本文介绍了一种能减少污染、省时省力的电镜超薄切片染色方法。