PCR技术在转基因食品检测中应用

该文在简述转基因食品安全性基础上,提出其检测方法—PCR技术,重点介绍PCR技术在转基因食品检测上应用及发展趋势。     

转基因油菜籽PCR检测技术研究

以转基因抗草甘膦油菜籽F4—27和转基因抗草丁膦油菜籽T—21为材料,通过使用特异性引物,对转基因油菜籽常见启动子、终止子、筛选标记基因和转入目的基因等多个外源转基因元件进行采用PCR检测,以期建立一套快速、准确、高效转基因油菜籽筛查鉴定技术。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳在转基因大豆检测中的应用

利用PCR技术，对转基因大豆中CaMV35S启动子、NOS终止子、CP4-EPSPS和大豆凝集素基因进行了定性检测，并且以大豆凝集素基因为内置标准检测了CaMV35S启动子。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳对PCR扩增产物进行分析，并对两种电泳进行了比较。聚丙烯酰胺凝胶电泳有利于提高定性PCR筛选方法的准确性。     

用PCR检测熟食中的转基因Bt-玉米

用8种已知并已发表的PCR（聚合酶链反应）引物组进行比较，用以测定熟食中转基因Bt“极产”玉米“event 176”的zein(玉米醇溶蛋白－－泽注）基因，crylA(b)基因，bla基因、bar基因和35S cauliflower mosaic virus promoter(花椰菜马赛克病毒启动区－－译注）。以转基因爆玉米花、粟粉粥、酥饼作样品。粟粥粉和酥饼用含有不同百分率（100％，1％，0．1％，w/w)的转基因玉米粉制作。在不同熟时间从样吕提取的DNA，其平均DNA碎片长度逐渐下降，但仍能通过PCR扩增。试验的几种引物组，以Cyr 03/04表现最好，可以检测出仅含0．1％Bt-玉米DNA的熟食中的转基因DNA。     

转基因稻米加工食品的PCR检测技术研究

本文对转基因稻米及其加工食品进行了针对标记基因bar、CaMV35S启动子和Nos终止子DNA序列的PCR检测.结果表明,改良SDS法适于提取转基因稻米以及经过蒸煮、微波膨化加工后稻米食品中的DNA并能够满足PCR检测的需要.食品加工使稻米基因组DNA降解为较小的片段,但不影响PCR检测效果,PCR技术能够检测稻米加工食品中的转基因成分.     

实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立

采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10 0倍     

多重PCR 检测转基因水稻的转基因成分

以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR检测体系。结果表明：建立的七重PCR体系能有效检测出水稻及其他作物(大豆、玉米、棉花籽、菜籽粕)中的转基因成分,检测过程简便、特异性好。     

转基因食品的定量PCR检测方法

近年来转基因食品定性检测方法发展迅速,然而目前转基因成分(GMO)的准确定量检测在国际贸易中日趋重要.我们这里介绍三种定量检测方法半定量PCR法,定量竞争PCR(QC-PCR)法和实时定量PCR法.半定量PCR法比较简单,但结果不是很精确.定量竞争PCR的特点是含有内部标准子.近来开展的实验室合作研究表明,与定性PCR法相比,定量竞争PCR降低了实验室之间的误差.而实时定量PCR法可在提取DNA后3h内,测出每克起始样品的总DNA量及2pg转基因成分的量,但这套PCR系统目前价格昂贵.     

利用荧光定量PCR技术快速检测转基因产品的研究

针对转基因植物普遍含有的35S启动子进行了通用引物和Tapman荧光探针的设计合成,利用荧光定量PCRfluorescencequantitativepolymerasechainreactionFQ-PCR技术对转基因大豆、玉米和辣椒进行非特异性检测,结果显示出转基因样本有阳性扩增条带,非转基因样本呈现阴性。实验表明,荧光定量PCR检测较普通的检测方法具有高效、准确的特点,在转基因产品的分析检测方面提供了一个实用的方法。      

利用荧光定量PCR技术快速检测转基因产品的研究

针对转基因植物普遍含有的35S启动子进行了通用引物和Tapman荧光探针的设计合成,利用荧光定量PCRfluorescencequantitativepolymerasechainreactionFQ-PCR技术对转基因大豆、玉米和辣椒进行非特异性检测,结果显示出转基因样本有阳性扩增条带,非转基因样本呈现阴性。实验表明,荧光定量PCR检测较普通的检测方法具有高效、准确的特点,在转基因产品的分析检测方面提供了一个实用的方法。     

农产品防霉变方法的研究现状

农产品因在田间生长期携带有各种病菌,在贮存过程中容易引发霉变而造成大量的损失,目前消毒杀菌方法多用化学试剂,近年来出现了一种新的方法——电子束辐照技术,该技术具有常温、低能耗、不损伤种子组织结构等优点,是一种具有很好发展前景的技术。     

基于模糊综合评判的农产品冷链物流质量安全评价研究

为了对农产品冷链物流质量安全进行评价,根据农产品特性,综合农产品冷链物流所需的特殊条件和设备建立了全面反映农产品物流环境、设施设备、作业流程、人员素质特征的指标体系。运用三角模糊层次分析法确定各指标的权重,并结合模糊综合评判构建了评价农产品冷链物流质量安全模型。最后,通过农产品冷链物流的实证分析验证了模型的有效性。     

HPLC-波谱联用技术在农产品中氨基甲酸酯类农药残留分析的应用

农产品中氨基甲酸酯类农药(NMCs)残留问题越来越受到人们的重视.综述了氨基甲酸酯类农药的种类及其毒理学特性,重点介绍了其高效液相色谱(HPLC)与紫外(UV)、荧光(FC)、质谱(MS)三种联用检测技术及其应用情况,旨在提高我国农产品中残留NMCs类农药的分析水平.     

PCR技术检测啤酒中腐败菌的研究进展

对传统方法和PCR技术检测啤酒中腐败菌的原理进行了分析和比较,对传统检测方法更有优势的PCR检测技术进行了综述。综合分析了目前国内外PCR技术检测的最新研究,重点讨论了标志性基因（抗酒花基因）和引物设计在PCR检测技术中应用,并对PCR技术检测啤酒中腐败菌的应用前景进行了分析。     

石墨炉原子吸收光谱法测定农产品中铊的含量

应用石墨炉原子吸收光谱法测定了薏苡仁、白菜及蓝莓中铊的含量。称取样品(5.00 g),加入硝酸-高氯酸(4+1)混合酸20 m L进行湿法消解。采用灰化温度为700℃,原子化温度为1 700℃,铊的质量浓度在0μg/L~80μg/L范围内与其吸光度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 8,检出限(3s/k)为2.98μg/kg。方法用于芹菜、大葱、菠菜等标准物质的分析,测定结果与标准值一致,相对标准偏差(n=7)在1.38%~4.71%之间。     

酶法模拟生产啤酒玉米糖浆的研究进展

啤酒玉米糖浆在国内外逐渐受到重视,具有广阔的发展空间。对啤酒玉米糖浆的应用情况及生产技术进行了综合分析,同时对啤酒糖浆未来的应用作出了展望。     

桔子果醋的研制

本文介绍了用桔子汁为原料,经酒精发酵和醋酸发酵生产果醋的工艺及其产品的质量特点。     

建设基于供应链的食用农产品安全信息管理系统——全程保障食品安全

本文阐明了建设食用农产品安全信息管理系统的原则、思路及实施的关键,食用农产品安全信息管理系统可采用GPS(全球定位系统)、GIS(地理信息系统)和RFID(无线射频身份识别技术)为主要技术支撑,依靠EAN·UCC国际通用规范对食用农产品进行跟踪与追溯,实现对供应链的所有环节包括生产、加工、包装、流通、储藏和消费环节的可靠性识别和信息传输。建立完善的数据系统,将供应链上各个环节的数据和信息汇总到统一的管理平台,使监管部门可以在这个平台上对全过程进行监管;企业能利用该平台加强微观安全管理,并确保整个产、储、运、销过程的透明化,消除和减少信息的不对称,满足了消费者知情权和选择权,从而提高农产品信息化水平和生产效率,保障食用农产品从农田到餐桌的全程安全。     

Multimycotoxin Determination in Tunisian Farm Animal Feed

Mycotoxins presence was evaluated in animal feed marketed in Tunisia for the first time ever. A QuEChERS method was performed to analyze the natural copresence of 22 mycotoxins (enniatins, beauvericin, ochratoxin A, aflatoxins, alternariol monomethyl ether, alternariol, tentoxin, zearalenone, deoxynivalenol, 3‐acetyldeoxynivalenol, 15‐acetyldeoxynivalenol, nivalenol, neosolaniol, diacetoxyscirpenol, T‐2 toxin, and HT‐2 toxin) in 122 Tunisian marketed feed samples, intended for poultry (n = 43), cattle (n = 35), rabbit (n = 12), sheep (n = 16), and horse (n = 16). Analytes detection and quantification were done using both liquid chromatography and gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry. The analytical method showed good linearity (R > 0.996) and sensitivity, the limits of quantification ranged from 0.1 ng/g (enniatin A1) to 225 ng/g (3‐acetyldeoxynivalenol). Eighty‐five percent of the analyzed samples were positive. Poultry (n = 43) and rabbit (n = 12) feed samples were the most contaminated. Enniatin B was the most prevalent mycotoxin with values ranged between 0.5 ng/g for horse feed and 40 ng/g for poultry feed, followed by deoxynivalenol detected from 16 ng/g in cattle feed to 250 ng/g in poultry feed. None exceeded the limits set by EU recommendations for animal feed. Mycotoxins co‐occurrence was observed at most by five different mycotoxins (26%) and up to eight mycotoxins was recorded in 5% of samples. Furthermore, a relatively high copresence rate of different fusariotoxins was registered. Even if no toxicological concern was clearly revealed, the contamination is a real fact and will probably present influence on meat production and on food safety.     

能源甜菜发酵生产酒精的工艺研究

利用ADY(Saccharomyces cerevisiae)对能源甜菜NY0503进行酒精发酵.应用Plackett-Burman设计法从底物浓度、料液比、加菌量、营养盐、加磷量、pH、转速、发酵温度和发酵时间9个因素中筛选出加磷量、发酵温度和底物浓度为主要影响因素.应用响应面分析法求得回归方程,得出最佳工艺为加磷量1.88%、发酵温度30.66℃、底物浓度11.53%,此工艺条件下酒精的最高理论转化率为96.54%.优化后按下列条件:底物浓度12%、料液比1∶1、加菌量15%、营养盐0.5、加磷量1.9%、pH5.0、转速130 r/min、发酵温度31℃和发酵时间44 h进行5批次验证实验,酒精的平均转化率为95.48%,与模型的理论值96.54%的差值仅占理论值的1.09%,进一步说明所建立的模型是切实可行的.