樟芝深层发酵菌丝体提取物对食源性致病菌的抑制作用

樟芝是一种珍稀食药两用大型蕈菌,具有解酒保肝、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫等多种生物活性.本文以成本低廉且易获得的樟芝深层发酵菌丝体为原料,用甲醇、乙醇、乙酸乙酯及水提取樟芝菌丝体中的活性物质,采用牛津杯法检测上述4种樟芝菌丝体提取物对15株食源性致病菌的抑制作用,结果表明樟芝菌丝体甲醇提取物抑菌谱最广,对其中7株致病菌(...     

pH和无机盐对樟芝液体发酵的影响

为探讨pH和无机盐对樟芝液体发酵的影响,设置了添加KH2PO4和不加KH2PO4条件下不同起始pH、不同无机盐对樟芝液体发酵的影响。结果表明,樟芝在中性偏酸性条件下生长较好,而在中性和碱性的条件下生长缓慢;在KH2PO4存在的条件下,樟芝生长较好。另外,樟芝对不同的无机盐离子有不同的需求:对钾盐需求量大,对钠盐、铁盐、镁盐和铜盐需求量少。所以,pH和无机盐对樟芝液体发酵有一定的影响。     

牛樟树提取物促进樟芝深层发酵无性产孢及其应用

樟芝(Antrodia cinnamomea)是一种珍稀食药两用蕈菌,具有解酒保肝、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等多种生物活性。基于无性孢子接种的深层发酵技术是樟芝目前最高效、最普遍的人工培养方式,但樟芝深层发酵产孢量低,种子制备成本高,限制了樟芝深层发酵工业化生产效率及效益。为了提高樟芝深层发酵产孢效率,该文首先考察了牛樟树不同溶剂(甲醇、乙酸乙酯、石油醚及水)提取物对樟芝深层发酵无性产孢的影响,发现只有牛樟树水提物能显著促进樟芝无性产孢,且在最佳添加量(60μg/mL)下,可使樟芝产孢量较对照组提高58%左右,同时生物量提高26%左右,三萜产量提高35%左右,多糖产量提高270%左右(即产量是原来的3.7倍);随后,该文将添加牛樟树水提物促进产生的樟芝孢子接种发酵,发现其产孢性能及产胞内多糖性能均显著优于对照组(不添加牛樟树水提物发酵产生的樟芝孢子),其中最大产孢量及胞内多糖产量分别提高了28%及46%左右。该研究成果操作方便、成本低廉、效果显著,较具开发价值及应用前景。     

响应面法优化樟芝多糖提取工艺的研究

为优化樟芝多糖的提取工艺,在单因素试验基础上,采用响应面法建立了樟芝多糖提取方法的二次多项 数学模型,并验证了该模型的有效性;探讨了浸热温度、漫提时间、水料比3个因子的交互作用及其最佳水平.研究结果表明提取温度、时间和水料比显著影响樟芝多糖的提取效果,优化的樟芝多糖提取条件为浸提温度120℃,浸提时间110.4min,水料比11.89.     

樟芝发酵产品的研究进展

樟芝是我国台湾地区特有的食药两用真菌,具有极高的研究和商业价值。然而目前对樟芝发酵产品特征代谢产物的研究不够,且缺乏规范的检测和质量评价标准,这对樟芝产品的开发及应用都极为不利。分析了樟芝人工培养方式的研究现状及产品开发存在的问题,提出了进一步的解决方法,并介绍了本课题组在相关方面取得的研究进展。     

樟芝固态发酵产品活性代谢产物分析

对樟芝固态发酵产品的活性成分进行了初步分析。结果显示,樟芝固态发酵产品富含马来酸和琥珀酸衍生物、核苷类化合物、甾醇、多糖、不饱和脂肪酸等多种生理活性物质,与子实体具有一定的相似性。樟芝固态发酵产品含有护肝活性极好的两种化合物Antrodin B和Antrodin C。除此之外还含有腺苷、虫草素和Ergostatrien-3β-ol,含量分别为5.15 mg/g、0.178 mg/g和11.02 mg/g;樟芝固态发酵产品富含樟芝多糖,其中活性β-1,3-D-葡聚糖含量为102.4μg/g;此外,产品不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,相对含量为81.96%,主要为亚油酸、油酸。     

乙醇提取樟芝菌粉三萜类化合物的动力学研究

以Fick扩散第二定律为基础,建立樟芝菌粉三萜提取过程的动力学方程,并由此推算出提取的速率常数、活化能、相对萃余率、半衰期,以及内扩散系数等动力学函数值.结果表明:所得提取模型能较好地描述樟芝菌粉三萜类化合物提取的动态过程.樟芝菌粉三萜类化合物提取过程的动力学符合一级动力学方程,为内扩散控制动力学.本研究可为樟芝三萜类化合物提取的工艺设计及操作条件的选择提供有价值的理论依据.     

衍生化气相色谱-质谱分析樟芝菌粉中脂肪酸的组成及其指纹图谱分析

目的：分析樟芝菌粉脂肪酸的组成,并建立其气相色谱-质谱指纹图谱。方法：采用超临界CO2萃取法提取 樟芝菌粉中油脂类成分,甲酯化后用气相色谱-质谱联用技术分析脂肪酸组成;以棕榈酸为参照物,测定其指纹图 谱,并作相似度评价。结果：樟芝菌粉含33 种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸有18 种,占脂肪酸含量的75.29%;初步 建立了以11 个共有峰为特征指纹信息的樟芝菌粉脂肪酸类成分指纹图谱。结论：为樟芝菌粉质量评价及其保健食 品研发提供实验依据。     

樟芝多糖的超滤分离及其免疫活性研究

利用醇沉法和超滤法分离提取经发酵后的樟芝胞内胞外多糖,通过小鼠脾淋巴细胞转化增殖实验检测分离得到的各组分多糖的免疫活性。结果显示,经超滤分级处理后,樟芝胞内胞外多糖的总得率达18.18%,相对于乙醇沉淀法多糖得率提高了56.99%,显著的提高了樟芝胞内胞外多糖的得率;小鼠实验显示,利用超滤法获得的分子量大于1000 kD、100~1000 kD以及小于100 kD的六个樟芝多糖胞内胞外组分均能显著地促进小鼠脾淋巴细胞的转化增殖作用,表明,超滤法能显著提高发酵后樟芝胞内胞外多糖提取产量,其操作简单、易行,不损害多糖活性。     

超声波辅助提取樟芝菌丝体活性物质的工艺研究

探索超声波辅助樟芝菌丝体活性物质的最佳提取工艺,为樟芝活性成分进一步深入研究提供依据。通过设置固液比、超声波功率、提取温度及提取时间4个因素,优化樟芝菌丝主要活性物质多糖和三萜化合物的提取工艺,获得超声波辅助提取的最佳条件。结果表明:樟芝菌丝多糖最佳提取条件为:固液比130(mV)、超声功率120 W、提取时间35min、提取温度55℃,该条件下菌丝多糖提取量为26.319mg/g;樟芝菌丝三萜化合物最佳提取条件为:固液比130(mV)、超声功率210 W、提取温度50℃、提取时间25min,该条件下菌丝总三萜提取量为38.624mg/g。     

樟芝多糖提取研究

乙醇浓度、醇沉时间、醇沉温度、pH值对樟芝多糖的提取有不同程度的影响,正交试验分析表明,优化组合提取条件中乙醇浓度影响极显著,醇沉时间、醇沉温度影响显著,适宜于樟芝多糖提取的工艺条件为乙醇浓度95%、醇沉温度4℃、醇沉时间10h,pH值为8.0.此条件下樟芝多糖提取量为16.32g/L.     

樟芝菌丝体胞内多糖提取条件的研究

为了提高樟芝菌丝体胞内多糖的提取率,试验采用二次通用旋转组合设计方法,研究樟芝菌丝体多糖提取工艺条件中的提取时间、料液比、提取温度对提取率的影响.建立了回归模型并进了验证.通过研究可知:当提取时间为4.7h、液固比46倍、提取温度76.8℃时,樟芝菌丝体胞内多糖提取率的理论值为8.8%.并通过试验验证最优组合.     

樟芝多糖流变特性研究

主要研究浓度、剪切力、加热时间p、H值、冻融变化、盐离子浓度等对樟芝多糖黏度的影响。试验结果表明:樟芝多糖溶液为"非牛顿流体",具有"假塑性";多糖的黏度随着浓度的增加而增加,其最佳溶解温度为40℃,加热时间以0.75 h为宜;pH、冻融变化、NaCl、蔗糖、柠檬酸对樟芝多糖溶液的黏度影响较小。     

低频交变磁场对樟芝液态发酵的影响

使用实验室自主研制的磁场设备,以樟芝为研究对象,以菌丝体生物量提高率为指标,通过单因素和正交优化试验,研究低频交变磁场对樟芝液态发酵的影响,确定最优磁场参数,并借助扫描电镜,对比常规液态发酵和磁场辅助液态发酵所得菌丝体的微观形态的差异。结果显示,当磁感应强度为80 Gs,磁处理初次介入时间为接种3 d后,每天磁处理时长为4 h时,磁场对樟芝菌丝体的生长促进作用最强。在此条件下,菌丝体生物量提高率为15.87%,多糖增长率为24.26%,总三萜增长率为26.85%。扫描电镜结果显示,磁场辅助樟芝液态发酵所得菌丝体比常规液态发酵菌丝体表面更加粗糙,结构更加松散,褶皱更为明显。实验结果表明,低频交变磁场辅助樟芝液态发酵可以提高其菌丝体生物量、多糖和三萜产量。     

响应面法优化樟芝真菌发酵培养条件研究

借助于SAS8.0软件,对樟芝真菌进行发酵工艺条件的优化研究。首先利用Plackett Burman试验设计筛选出影响樟芝真菌发酵的3个主要因素,即接种量、培养温度和葡萄糖添加量。在此基础上用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法进行回归分析。结果表明,接种量与樟芝菌体产量存在极显著的相关性,通过求解回归方程得到优化主要发酵条件,接种量15%、培养温度26.1℃、葡萄糖添加量3.9%。经培养验证,预测值与验证试验平均值接近,此优化条件下樟芝菌体产量可达到7.06 g/L。     

响应面法优化樟芝固态发酵产安卓奎诺尔

以樟芝菌固态发酵生产活性代谢产物安卓奎诺尔为目标物,采用Box-Behnken原理进行响应面分析,对樟芝固态发酵产安卓奎诺尔条件进行优化,结果表明：接种量为296.80 mL/kg、Triton X-100添加量为1.10 mL/kg、辅酶Q0的添加量为0.23 g/kg时,理论上樟芝固态发酵培养基安卓奎诺尔产量的最大值为865.85 mg/kg。经验证,安卓奎诺尔实际产量为865.32 mg/kg,表明实验建立的模型能较好地预测实际发酵产安卓奎诺尔的情况。通过优化,樟芝固态发酵安卓奎诺尔产量比优化前（260.57 mg/kg）提高了232.09%。     

3，5 -二硝基水杨酸法测定樟芝中多糖的含量

建立樟芝粗多糖的含量测定方法。以葡萄糖为对照品,采用3,5-二硝基水杨酸比色法,测定樟芝中还原糖和总糖的含量,并计算出总多糖的含量。研究结果表明多糖含量在0.25 mg/m L~1.00 mg/m L范围内标准曲线具有良好的线性关系,测得回归方程y=0.597 9x-0.037 8(R~2=0.999 6)。还原糖和总糖的平均加样回收率分别为101.65%(RSD=1.89%)和100.92%(RSD=2.45%)。樟芝中总多糖含量为129.5 mg/g~148.1 mg/g。本方法灵敏、稳定、重复性好,有助于樟芝质量控制方法的研究。     

微波法提取樟芝真菌胞内多糖

研究了微波处理前浸润时间、微波时间、微波功率、固液比例对樟芝胞内多糖提取量的影响,利用Box-Behnken试验设计进行三因素三水平的响应面分析试验,得出微波提取樟芝多糖的最佳工艺条件为:微波提取时间15 min,微波功率400 W,固液比例1∶20(g/mL),此条件下,樟芝多糖提取最大值为13.95 g/100 g。经验证实验,理论预测值与实际测定值相差1%。     

响应面法优化樟芝液态发酵产Antrodin C

分析樟芝液态发酵菌丝体中的活性代谢产物Antrodin C,并以此化合物为目标,采用Plackett-Burman设计和Box-Behnken中心组合响应面分析,对樟芝液态发酵产Antrotin C培养基进行统计学筛选和优化。结果表明：葡萄糖、黄豆粉和MgSO4对Antrodin C的合成影响最为显著。在葡萄糖 72.0g/L、黄豆粉 5.91g/L、MgSO4 0.614g/L时,樟芝液态发酵产Antrodin C最大预测值为178.59mg/L。验证实验Antrodin C实际产量达到(177.83±0.32)mg/L,表明实验建立的模型能较好地预测实际发酵产Antrodin C情况。通过对培养基的优化,樟芝液态发酵Antrodin C产量比优化前(95.72mg/L)提高了85.8%。     

金属离子促进樟芝深层发酵无性产孢

樟芝(Antrodia cinnamomea)是一种珍稀药食两用蕈菌，其目前最主要的人工培养方式是基于无性孢子接种的深层发酵。为了提高樟芝深层发酵的产孢量及产孢速度，进而提高其种子制备效率及工业化生产效益，该文首先采用单因素法筛选出能显著促进樟芝无性产孢的金属离子，再采用响应面法优化金属离子组合的最佳添加浓度。结果表明，在培养基中单独添加1.0 mmol/L的Ca²⁺、0.1 mmol/L的Fe²⁺及0.1 mmol/L的Zn²⁺可使樟芝最大产孢量较对照组分别提高87.21%、72.39%及35.05%;同时添加0.149 mmol/L的Fe²⁺、2.01 mmol/L的Ca²⁺及0.135 mmol/L的Zn²⁺可使樟芝深层发酵最大产孢量达8.67×10⁷个/mL,较对照组提高133.62%,同时使樟芝无性孢子产量达到最大值的时间缩短24 h。该研究操作方便、成本低廉、效果显著，具有较好的开发价值及应用前景。