根结线虫生防菌SneF8代谢产物理化性质的初步研究

SneF8是沈阳农业大学北方线虫研究所从土壤中分离到的一株生防真菌,该菌株代谢产物能够有效控制南方根结线虫引起的蔬菜根结线虫病. 研究了温度及pH对该菌株发酵液中活性物质稳定性的影响;利用捷克 8溶剂系统纸色谱及pH纸色谱等方法对该菌株中活性物质的水溶性、离子特性等一些理化性质进行了早期鉴别. 结果表明:该发酵液中除了具有大量的强酸性,强极性,易溶于水等极性有机溶剂的活性物质外,还有部分的两性活性物质存在,为这一农用抗生素的进一步纯化和结构测定提供依据.     

菌株H008发酵条件的优化及其发酵液杀虫活性物质的研究

对菌株H008(Streptomyces laidensis)的发酵培养条件进行了优化,并对其发酵产物的生物学活性进行了初步研究.采用正交试验法,以菌株H008发酵液的杀虫活性为指标进行了培养条件的优化.通过正交试验确定的发酵生产工艺参数为pH值8.0、发酵温度28℃、溶解氧60%、发酵周期96 h.发酵液中该菌株的代谢产物具有杀虫活性高、热稳定性高、酸碱适应范围广、极性强等特性.     

海洋微生物来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选及性质研究

建立了α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型。10株海洋微生物经摇床培养得到发酵液,经大孔树脂吸附、甲醇洗脱得到粗提物;以阿卡波糖为阳性对照,用比色法（PNPG法）对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定,并对产生活性代谢产物的菌株做进一步研究。结果发现：有6株菌株的代谢产物均具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制作用,其中菌株N-1的代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强,每毫升N-1样品液中含有的活性代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用相当于5mg的阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用;该活性产物具有较强的酸碱耐受性及温度耐受性,在pH值1～14、50～100℃时稳定性较好;初步分析活性代谢产物的成分并非蛋白质、氨基酸、糖类及皂苷类物质。     

一株红树林内生真菌次级代谢产物中活性组分的活性跟踪法分离研究

对从广西山口红树林保护区采集的21株植物内生真菌进行了抗菌、抗肿瘤筛选,得到4株活性菌株,其中SK11菌株活性最强。采取活性跟踪方法,从SK11菌株次级代谢产物中分离到了活性成分Lichexanthone和Bikaverin,并用分子生物学方法鉴定该菌株为链格孢霉菌（Alternaria sp.）。这是首次从该属中分离得到这两种化合物。     

生防芽孢杆菌的分离筛选与初步鉴定

从不同环境中采集7份土壤样品用于芽孢杆菌的分离纯化,通过多次平板划线分离纯化得到30个菌落形态不同的菌株。以黄瓜枯萎病菌为指示菌对得到的菌株进行抑菌活性筛选,其中的4个菌株具有明显的抑菌作用。采用对峙生长法,测定4株芽孢杆菌对其它植物病原真菌的活性,结果显示4个芽孢杆菌均具有广谱抑菌性。进一步试验表明,4株芽孢杆菌的发酵液也具有明显的抑菌作用,说明对病原真菌有抑制作用的物质水溶性较大,大部分释放到发酵液中,并且发酵液可使黄瓜枯萎等植物病原真菌菌丝膨大、褐变、末端钝圆,促进镰刀菌产生小孢子。通过菌落形态特征、系列生化测定对其进行初步鉴定,结果表明其中一株为枯草芽孢杆菌。     

南极海泥来源抗肿瘤真菌的筛选与鉴定

从南极海泥样品中分离得到61株海洋真菌,先采用MTT法对其发酵液的乙酸乙酯萃取物进行体外抗肿瘤活性筛选,然后对活性较高的菌株进行分子鉴定,并进一步测定乙酸乙酯萃取物对HepG-2细胞的IC50值。结果表明:对HepG-2细胞抑制率大于60%的有27株菌,占总供试菌株的44.26%;对7901细胞具有抑制作用的有22株菌,占总供试菌株的36.07%;对116细胞抑制率大于50%的有22株菌,占总供试菌株的36.07%;菌株S45的抗肿瘤活性最强,对HepG-2细胞的IC50值为1.25μg·mL-1,经鉴定为青霉属真菌。     

生防放线菌Snea253代谢产物的理化性质

研究了温度、pH值及光对该菌株发酵液中活性物质稳定性的影响,并利用捷克8溶剂系统纸色谱及纸电泳方法对该菌株发酵液中活性物质的理化性质进行鉴定.结果表明:该发酵液中杀线虫活性物质对温度较敏感,超过50℃活性逐渐下降,过高温度则失活;该活性物质光稳定性强,在中性偏碱性环境较稳定;经Doskochilova溶剂系统层析和纸电泳初步确定该物质属于碱性水溶性物质.     

一株白骨壤内生真菌亮白曲霉CW5-7代谢产物主成分其抗氧化活性研究

利用涂布法从厦门红树林植物白骨壤根部分离得到1株内生真菌,编号为CW5-7,通过测定ITS序列鉴定该菌株为亮白曲霉(Aspergillus candidus),对亮白曲霉CW5-7在大米培养基中的代谢产物进行分离纯化,通过波谱学数据分析对主成分结构进行鉴定,并对其抗氧化活性进行评价.结果 表明,从亮白曲霉CW5-7的代...     

海洋放线菌Y-0117农用活性代谢产物的研究

在农用抗生素筛选中发现代号为Y-0117的海洋放线茵菌株所产生的代谢产物对植物病原真菌具有良好的抑制作用。对Y-0117发酵液进行萃取、硅胶柱层析、制备薄层色谱、制备HPLC,分离纯化得到两个活性组分0117A和0117B。通过紫外光谱、质谱、核磁共振等手段,确定0117A的分子式为C35H58O8,分子量为604。结构与已知化合物Bafilomycin D相同;0117 B的分子式为C42H60O12．分子量为756,结构与近期发现具有抗癌活性的已知化合物Hygrobafilomycin相同。研究发现0117B对多种植物病原真菌具有良好的抑制活性,对稻瘟病菌的最小抑制浓度为15．63μg·mL^-1。     

一株链霉菌发酵液的抗菌谱及稳定性

从土壤中分离得到一株放线菌菌株,杯碟法测定该菌株发酵液对14种植物病原真菌和两种植物病原细菌均有不同程度的抑菌活性,其中对烟草黑胫病菌和黄瓜菌核病菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达56．36mm和56．26mm。枯斑抑制法测定发酵液对TMV的抑制作用表明,发酵液对TMV有很好的钝化作用,发酵液与病毒汁液混合10min后接种,枯斑抑制率为93．88％,接种前24h处理和接种后24h处理的枯斑抑制率分别为87．93％和42．21％。通过对发酵液稳定性的初步研究,表明发酵液中的抗菌物质对温度、光照以及pH值变化都比较稳定。     

放线菌TL05-22菌株发酵液的抑菌谱及稳定性

[目的]研究放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱及稳定性。以16种植物病原真菌和6种细菌为供试菌,采用菌丝生长速率法、杯碟法测定拮抗放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱;以苜蓿尖镰孢根腐病菌为指示菌,杯碟法测定发酵液的传代稳定性、热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性。[结果]放线菌TL05-22发酵液对16种植物病原真菌和6种细菌均具有不同程度的抑菌活性,其中供试真菌以对苜蓿尖镰孢根腐病菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达33.68 mm;供试细菌中以对大白菜软腐病菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径达29.12 mm。将发酵液于60~100℃处理30、60 min,抑菌活性没有明显变化;发酵液在pH值6~14时抑菌活性未发生明显变化,但在pH<6条件下抑菌活性明显下降;连续培养10代,发酵液抑菌活性无明显变化。[结论]放线菌TL05-22的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的稳定性,具有一定开发价值。     

一株蓝藻内生真菌的鉴定及其产物抑菌活性

从色球藻（蓝藻）的原生质体中分离出一株内生真菌DT06。形态学鉴定结果表明该真菌属于头孢属Cephalosporium,ITS测序结果显示该菌株与Simplicillium lanosoniveum(=Cephalosporium lanosoniveum)的同源性为98%,但菌株DT06的分生孢子及菌落颜色与S.lanosoniveum不同,因此DT06是S.lanosoniveum的变种,定名为Simplicillium lanosoniveum var.tianjinienssQ.L.Dong。模式标本保存在中国科学院微生物研究所菌物标本馆（HMAS）。活体模式菌种保藏在中国普通微生物菌种保藏中心（CGMCC）。进一步的实验结果表明：该真菌能产生对革兰阳性细菌有很强抑制作用的活性物质,并且该物质的合成与细胞生长部分偶联,沙保培养基有利于其抑菌物质的合成。     

Diversity and biosynthetic potential of culturable actinomycetes associated with marine sponges in the china seas

The diversity and secondary metabolite potential of culturable actinomycetes associated with eight different marine sponges collected from the South China Sea and the Yellow sea were investigated. A total of 327 strains were isolated and 108 representative isolates were selected for phylogenetic analysis. Ten families and 13 genera of Actinomycetales were detected, among which five genera represent first records isolated from marine sponges. Oligotrophic medium M5 (water agar) proved to be efficient for selective isolation, and "Micromonospora-Streptomyces" was proposed as the major distribution group of sponge-associated actinomycetes from the China Seas. Ten isolates are likely to represent novel species. Sponge Hymeniacidon perleve was found to contain the highest genus diversity (seven genera) of actinomycetes. Housekeeping gene phylogenetic analyses of the isolates indicated one ubiquitous Micromonospora species, one unique Streptomyces species and one unique Verrucosispora phylogroup. Of the isolates, 27.5% displayed antimicrobial activity, and 91% contained polyketide synthase and/or nonribosomal peptide synthetase genes, indicating that these isolates had a high potential to produce secondary metabolites. The isolates from sponge Axinella sp. contained the highest presence of both antimicrobial activity and NRPS genes, while those from isolation medium DNBA showed the highest presence of antimicrobial activity and PKS I genes.     

海洋微生物源农用抗生活性物质的筛选

对134株海洋微生物(其中49株海洋放线菌、54株海洋细菌、31株海洋真菌)进行农用抗生活性物质筛选,分别测定其发酵上清液和菌丝体浸提液的活体抗植物病源真菌、杀虫、除草活性,发现共有77株菌株具有农用抗生活性,其中7株海洋放线菌的代谢产物的活性较高:3株对植物病原真菌具有较好抑制活性的海洋放线菌代号为Y12–26、P10–16、JWH–09;两株具有较高杀蚜虫活性的海洋放线菌是P10–23、P12–21;两株除草活性较好的海洋放线菌是YY01–17和HH1901–45。     

放线菌BOS-009的分离、拮抗活性及鉴定

对从长白山不同海拔环境中分离筛选出可以产生抗菌活性物质的BOS-009放线菌菌株进行了研究,测定了该菌的抗菌谱,发现该菌株对多种植物病原性真菌及细菌有拮抗作用.通过形态特征、培养特征观察,生理生化特性及抑菌谱等系列比较.发现该菌株与链霉菌属的除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)的特征基本相符;通过16s rDAN序列比对,发现该菌株16s rDAN与除虫链霉菌的16s rDAN同源性达99%.根据多项分类原则和系统进化树的构建分析,将该菌株暂归入除虫链霉菌类.     

一株絮凝活性细菌的分离鉴定及其絮凝活性初探

絮凝剂是海水净化处理中的常用药剂,海水微生物絮凝剂是近年来崭新的课题。本研究自渤海湾采集样品,采用稀释平板法,分离菌种,运用改进的絮凝率检测方法,筛选出一株有较高絮凝活性的细菌,经16S rDNA鉴定与Biolog检测,确定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,命名为地衣芽孢杆菌dhs-36（Bacillus licheniformis dhs-36）。对该菌种培养物,发酵上清液,细胞破碎产物的絮凝活性研究显示其絮凝活性仅存在于发酵上清液中,并在菌株发酵2 d后获得最高絮凝活性。对该菌株絮凝活性的稳定性进行初步研究,发现该菌株絮凝活性易受酸碱性影响,只在pH值为6～10范围内稳定;但其絮凝活性在较宽温度范围内保持稳定。糖类、蛋白质、脂类与核酸定性反应确定该菌株产生的絮凝活性物质为蛋白质。该絮凝活性细菌絮凝活性较高,絮凝成分获得比较方便,有望未来应用于海水净化处理。     

南海红树林内生真菌ZH-3代谢产物研究

研究南海红树林内生真菌ZH-3的代谢产物。采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。从南海红树林内生真菌ZH-3的菌体中分离得到4个代谢产物,经波谱解析,分别为2-（3-chloro-2,6-dihydroxy-4-methylbenzoyl）-5-hydroxy-3-methoxybenzoate.（1）,3＇-dihydroxy-5,5＇-dimethyldiphenyl ether（2）,7,8-二甲基苯并[g]蝶啶-2,4（1H,3H）-二酮（3）,5-o-methylbostrycoidin （4）。初步药理活性显示化合物1对人体肝癌细胞hepG2抑制的IC50值为25μg·mL-1。所有化合物均首次从南海红树林内生真菌ZH-3中分离得到。     

Metallocene QACs: The Incorporation of Ferrocene Moieties into monoQAC and bisQAC Structures

Inspired by the incorporation of metallocene functionalities into a variety of bioactive structures, particularly antimicrobial peptides, we endeavored to broaden the structural variety of quaternary ammonium compounds (QACs) by the incorporation of the ferrocene moiety. Accordingly, 23 ferrocene-containing mono- and bisQACs were prepared in high yields and tested for activity against a variety of bacteria, including Gram-negative strains and a panel of clinically isolated MRSA strains. Ferrocene QACs were shown to be effective antiseptics with some displaying single-digit micromolar activity against all bacteria tested, demonstrating yet another step in the expansion of structural variety of antiseptic QACs.     

Chemical Composition and Antimicrobial Activity of the Essential Oil of Kumquat (Fortunella crassifolia Swingle) Peel

The aim of this study was to determine the main constituents of the essential oil isolated from Fortunella crassifolia Swingle peel by hydro-distillation, and to test the efficacy of the essential oil on antimicrobial activity. Twenty-five components, representing 92.36% of the total oil, were identified by GC-MS analysis. The essential oil showed potent antimicrobial activity against both Gram-negative (E. coli and S. typhimurium) and Gram-positive (S. aureus, B. cereus, B. subtilis, L. bulgaricus, and B. laterosporus) bacteria, together with a remarkable antifungal activity against C. albicans. In a food model of beef extract, the essential oil was observed to possess an effective capacity to control the total counts of viable bacteria. Furthermore, the essential oil showed strongly detrimental effects on the growth and morphological structure of the tested bacteria. It was suggested that the essential oil from Fortunella crassifolia Swingle peel might be used as a natural food preservative against bacteria or fungus in the food industry.     

3-对盖烯-1-胺及其席夫碱衍生物的抑菌活性研究

利用微量肉汤稀释法测定3-对烯-1-胺（1）及其席夫碱衍生物（2a~2l）对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌、革兰氏阴性菌肺炎克雷伯氏菌及真菌白色念珠菌的抑菌活性,并讨论了构效关系。结果表明：3-对烯-1-胺及其部分席夫碱衍生物对这3种菌具有一定的抑菌活性,其中化合物1对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,最小抑菌浓度（MIC）值为56.25 mg/L;化合物2h和2i对肺炎克雷伯氏菌的抑菌活性最强,MIC值均为112.5 mg/L;化合物2l对白色念珠菌的抑菌活性最强,MIC值为28.125 mg/L。构效关系分析结果表明：向3-对烯-1-胺席夫碱衍生物中引入Br、Cl等卤素后,能显著增强抑菌活性;含有吡啶环的3-对烯-1-胺席夫碱衍生物对真菌白色念珠菌的抑菌活性明显要高于含呋喃环、吡咯环或噻吩环的3-对烯-1-胺席夫碱衍生物。