新型脑受体显像剂99mTc- Memantine的制备及药盒化

合成了 N-[2-(N-(2-巯基乙基) )氨基甲酰甲基]-N-(2-巯基乙基)- 3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺（II N2S2- Memantine）,对其进行99mTc标记。用氟化亚锡作还原剂,与高锝酸钠盐溶液反应,生成的新型脑受体显像剂I 99mTc（V）- Memantine,优化标记条件,进一步研制了无菌99mTc（V）- Memantine一步法冻干药盒。薄层色谱（TLC）对标记物进行质控,检测标记物的体外稳定性。结果显示,标记物的放化纯度〉95%,稳定性好,有望成为一种新型脑受体显像剂。     

99Tcm间接标记NGR—IFN-α2a的方法研究

以双半胱氨酸(L,L-ethylenedicystein,EC)作为双功能螯合剂,MDP作为转移螯合剂,采用两步法对NGR-IFN-α2a进行~(99)Tc~m标记,制备了~(99)Tc~m-EC-NGR-IFN-α2a,并对标记和非标记的NGR-IFN-α2a进行活性鉴定。结果显示,EC-NGR-IFN-α2a合成产额为87.5%,~(99)Tc~m-EC-NGR-IFN-α2a标记率86%,放化纯度96%,在2 h内,标记物体外较稳定;EC-NGR-IFN-α2a与~(99)Tc~m-EC-NGR-IFN-α2a的活性与NGR-IFN-α2a无差异。     

4-甲基咪唑双膦酸的合成及其~(99)Tc~m标记

以4-甲基咪唑为原料,通过N-烷基化、酯水解和磷酸酰化三步反应,合成1-羟基-2-(4-甲基-1H-咪唑基)-乙烷-1,1-双膦酸(M4IDP),目标产物和重要中间体通过IR、MS及1H NMR进行结构鉴定;采用Na99TcmO4标记M4IDP,得到标记物99Tcm-M4IDP,并测定其体外稳定性。结果显示,标记物的最佳标记条件为:反应时间30 min,反应体系pH为6,SnCl2.2H2O用量100μg,配体用量5 mg。在此条件下,标记率95%,室温下存放6 h,放化纯度95%,说明99Tcm-M4IDP具有较好的体外稳定性。     

^99Tc^m标记5—HT1A脑受体显像剂的研制及其生物分布

为了寻找99Tcm标记中枢神经系统5-HT1A协同受体显像药物,合成了单齿受体配基1-(2-甲氧基苯基)-4-(2-巯基乙基)哌嗪(简称MPMEP)、三齿配体N,N-二(2-巯基乙基)-N',N'-二乙基乙二胺(简称BMPDEEDA)和N,N-二(2-巯基乙基)卞胺(简称BMPBA),其结构经IR、NMR及元素分析表征;以“3+1”混合配体进行了99Tcm标记,并确定了标记反应的最佳条件pH=6.0～7.0,60～70℃下,反应20～30min,经CH2Cl2萃取脂溶性部分后,99TcmO(MPMEP)(BMPDEEDA)和99TcmO(MPMEP)(BMPBA)的标记率分别达到95%和90%以上.采用HPLC对标记产物进行了分离和纯化,纯化后的标记物放化纯度均>98%.小鼠体内的生物分布结果表明99TcmO(MPMEP)(BMPDEEDA)和99TcmO(MPMEP)(BMPBA)配合物可以通过血脑屏障,在脑中有一定的摄取和滞留;99TcmO(MPMEP)(BMPBA)在血液中清除较快,静脉注射后2、30、60min时,脑与血摄取比分别为0.31、0.33、0.32,但血液中放射性活度仍然较高.     

NMDA受体显像剂99Tcm-NCAM的制备和受体结合分析

用99Tcm标记新的美金刚胺(memantine)衍生物N-[2(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3, 5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺(N2S2-memantine,简称NCAM),并通过优化标记条件获得放射化学纯度达95%以上的标记化合物99Tcm-NCAM.脂溶性实验测得其脂水分配系数lg P=1.90.放射性受体结合分析显示,其与N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体结合具有饱和性,根据受体B区理论编制的计算机程序求出NMDA受体结合参数最大结合容量Bmax=56.8 μmol/g,平衡解离常数Kd=706.3 nmol/L,特异性NMDA受体拮抗剂能阻断其与NMDA受体的结合.结果显示99Tcm-NCAM与NMDA受体结合具有中等程度的亲和力和结合特异性,具有较好的脂溶性,易透过血脑屏障,有可能成为一种新的NMDA受体显像剂.     

~(99)Tc~m-MPAQ的合成及其生物分布

为寻找新的^99Tc^m脑灌注显像剂，对^99Tc^m-MPBDA进行了结构修饰。在制备N-(2-巯基丙基)-1，2-苯二胺(MPBDA)基础上合成了三齿配体8-[N-(2-巯基丙基)]-氨基喹啉(MPAQ)，产物经IR，^1H NMR，MS及元素分析等表征确认。以氯离子为单齿配体，用直接标记法制备了^99Tc^m—MPAQ，确定了最佳标记条件，测定了标记物的稳定性和脂溶性。实验结果表明，^99Tc^m-MPAQ放化纯在96％以上，室温下在水溶液中稳定6h以上，脂溶性比^99Tc^m-MPBDA的大。生物分布试验结果表明，^99Tc—MPAQ生物性质没有^99Tc^m-MPBDA的好，但它可以穿过正常的血脑屏障，有-定的脑摄取(1．55％／g)和脑滞留(注射后30min仍有初始摄入量的62%).     

苯甲酰胺类多巴胺D2受体显像剂18F-FSABZM的合成和标记

将5-硝基取代苯甲酰胺类化合物经硝基还原、N-双羟乙基化、甲磺酰化等反应制备氟标记前体,用K222催化进行氟标记,合成了(S)-N-[(1-乙基-2-比咯烷基)甲基]-5-[N-(2-[18F]氟乙基)-N-甲基磺酰基]胺基-2-甲氧基苯甲酰胺(S)-N-[(1-ethyl-2-pyrrolidinyl)methyl]-5-[N-(2-[18F]fluoroethyl)-N-methylsulfonyl]amino-2-methoxy-benzamide,18F-FSABZM).标记前体、冷标记产物和各步合成中间体均经过核磁共振和质谱确证.结果显示,经HPLC检测,标记率为12%-15%,合成及纯化时间80-90 min,纯化后放化纯度大于97%,稳定性好.     

~(99)Tc~m标记多巴胺D_2受体配体的合成,标记及生物分布研究

首次合成了3种苯酰胺类D2受体配体：N-[（2-巯基）乙基]-2，3-二甲氧基苯甲酰胺（MEDM-BZM），N-[（2-巯基）乙基]-5-溴-2，3-二甲基苯甲酰胺（MEBDM-BZM），N-[（2-巯基）乙基]-3-乙氧基苯甲酰胺（MEE-BZM），光谱数据与结构相符。用配体交换法与3-硫杂-1，5-戊二硫醇共同配位合成了中性脂溶性“3 1”型混配^99Tc^m螯合物，标记率在于85%。3种配合物在小鼠脑中的初始摄取率高于文献报道值。     

新型糖基化生长抑素的合成及SUP

通过一系列氨羧缩合反应合成了双功能螯合剂硫代乙酰基-巯基乙酰-二甘氨酰-赖氨酸(S-Acetyl-MAG2Lys),并以生长抑素(somatostatin,SMS)、葡聚糖-10(Dextran10,Dx10)及S-Acetyl-MAG2Lys为原料,合成了糖基化生长抑素配体化合物(SMS-Dx10-MAG2Lys);利用酒石酸钠转换配合进行了SMS-Dx10-MAG2Lys的99Tcm标记,重点探讨了99Tcm标记条件及标记物的体外稳定性。结果表明,合成的双功能螯合剂S-Acetyl-MAG2Lys和配体化合物SMS-Dx10-MAG2Lys可成功用于99Tcm的放射标记,在最佳标记条件:0.3 g/L SnCl2,5 g/L SMS-Dx10-MAG2Lys,标记介质pH=9.5,室温下反应30 min,99Tcm-MAG2Lys-Dx10-SMS标记率约为50%,经分离纯化后,其放射化学纯度大于99%,标记物体外稳定,为进一步研究99Tcm-MAG2Lys-Dx10-SMS体内生物学特性提供了依据。     

αvβ3受体显像剂99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)的制备及动物实验

目的 探讨99Tcm标记的小分子环形Cys-RGD肽用于αvβ3受体阳性肿瘤显像的可行性。方法 以99Tcm(N)核通过二膦基胺类化合物PNP6（PNP6＝二[二(乙氧基丙基膦)-乙基]-乙氧基乙基胺）标记环形Cys-RGD肽（c(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys)-Cys）；采用HPLC法测定标记物的放化纯，并考察标记物的体外稳定性；进行正常小鼠和荷FWK-1胰腺癌裸鼠模型的体内生物分布试验及平面显像。结果 在优化的标记条件下，标记率大于92%，且具有良好的体外稳定性；生物分布实验表明标记物在血液中清除较快，主要通过肾脏排泄，99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)在肿瘤中的摄取值为2.92±0.71% ID/g (注药后1h)，肿瘤/血和肿瘤/肉的比值分别为11.0和3.1（注药后4h）；注药后1h，肿瘤显像清晰。结论 99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)具有成为αvβ3受体阳性肿瘤显像剂的潜在应用价值。     

生长抑素-葡聚糖的99Tcm标记及体外结合分析

采用还原氨化方法，将天然生长抑素（SMS）与葡聚糖(Dx20)偶联，并以125I－奥曲肽（125I-Tyr3-Octreotide)为放射配基，进行受体竞争结合实验，测定了SMS-Dx50的IC50；以SnCl2为还原剂对SMS-Dx50进行99Tcm标记，并进行99Tcm- SMS-Dx50受体结合分析，考察其对生长抑素受体的亲合能力。结果表明：SMS-Dx50保持了对SMS 2型受体的高亲和力；其IC50与奥曲肽的IC50（0.79 nmol/L）相近,为5.95 nmol/L；99Tcm- SMS-Dx50标记率>85％, 经PD-10柱分离纯化，其放化纯度>98%；99Tcm- SMS-Dx50对生长抑素2型受体特异性结合为25%～40％，保持了较高的亲和力；SMS-Dx50适合于99Tcm标记，可用于生长抑素受体阳性肿瘤诊断的进一步研究     

99Tcm(V)-DMSA与99Tcm-MIBI亲肿瘤显像在诊断甲状腺髓样癌中的对比

对62例甲状腺髓样癌(MTC)患者手术前行SPECT亲肿瘤显像,其中99Tcm(V)-DMSA显像组32例,99Tcm-MIBI显像组30例;并对两组患者早期和延迟影像的定性和半定量分析结果进行比较.结果显示两种显像方法对MTC原发灶诊断的阳性率无显著性差异(P＞0.05),但半定量分析结果显示99Tcm(V)-DMSA对原发灶显像的早期摄取比、延迟摄取比、滞留指数明显高于99Tcm-MIBI显像,差异有显著性(P＜0.001),提示99Tcm(V)-DMSA显像更具有优越性.     

123I和99Tcm标记的吲哚类σ2受体放射性示踪剂的设计、稳定化合物的合成及体外生物评价

设计了~(123)I和~(99)Tc~m标记的吲哚类σ_2受体肿瘤放射性示踪剂,合成了其稳定化合物 (Indole-I和Indole-MAMA-Re) 和标记前体(Indole-MAMA).体外受体结合分析结果表明,化合物Indole-I对σ1和σ_2受体的抑制常数K_i值分别为(0.574±0.355) μmol/L和(0.162±0.030) μmol/L(n=3),Indole-MAMA-Re对σ1和σ_2受体的抑制常数K_i值分别为(3.75±2.22) μmol/L和(7.83±4.87) μmol/L(n=3).成功制备了~(99)Tc~m-Indole-MAMA,纯化后经高效液相色谱法(HPLC)分析其放化纯大于90%.今后可在本文化合物的基础上通过结构优化,设计合成对σ_2受体具有高亲和力和选择性的吲哚类SPECT肿瘤显像剂.     

叶酸在放射性核素标记研究中的应用

叶酸在人体内有重要的生理功能,它能特异性结合过度表达于许多肿瘤（卵巢癌、乳腺癌、直肠癌等）细胞膜表面的叶酸受体.在肿瘤靶向药物输运体系中,包括输运放射性核素标记的叶酸螯合物显像剂,叶酸受体是一种潜在的分子靶.近年来,有关放射性核素标记的叶酸螯合物显像剂的研究越来越多.本文着重介绍了放射性核素^111In、^67Ga和99Tc^m（Re）标记叶酸的螯合物显像剂以及它们在肿瘤诊断方面的临床应用.这些资料表明,99Tc^m标记叶酸的螯合物是一种比较有发展前途的显像剂.     

一种~(99)Tc~m标记的5-HT_(1A)受体显像剂的合成与标记

合成了一种99Tcm标记的5-HT1A受体显像剂。该显像剂先由二硫二氮与6-溴己酰氯结合,再与2-(1-哌嗪)苯甲醚结合,经还原、脱保护反应得到标记前体,再对前体进行99Tcm标记。标记率达90%以上,薄层层析测得标记物放化纯度大于95%。     

长链脂肪酸衍生物99Tcm-MAMA-(CH2)nCOOH的制备和生物分布

以短链二酸和N2S2类配体（MAMA）为起始原料，合成了4个长链脂肪酸衍生物MAMA-(CH2)nCOOH（n=14,15,16,17），通过与99Tcm-GH在沸水浴中加热30 min完成配体交换反应，实现了99Tcm的标记，其标记率均大于90%。正常小鼠的生物分布数据显示这4个标记物在心肌中均有一定的摄取（5 min时的放射性摄取百分数依次为5.73、5.52、4.82和4.03%ID•g－1），但血本底较高，而且血清除较慢，标记物能否参与脂肪酸尚需进一步研究。     

HSA微胶粒(SAA)药盒的制备及其99Tcm标记

用生理盐水将20%医用人血清白蛋白(HSA)静脉注射液稀释后,在碱性条件下加热制备HSA微胶粒(SAA),冻干制成药盒;电镜检查显示得到了粒径＜80 nm的SAA,颗粒范围适合于骨髓、淋巴和炎症显像.用Na 99TcmO4溶液对药盒进行标记,标记率＞99%,并可稳定至标记后4 h.小鼠生物分布结果提示,99Tcm-SAA主要从肾脏排泄,60 min时肝、脾和肾放射性较高;家兔显像结果显示给药后30～60 min骨髓可以清晰显影.该SAA药盒标记方法简单,质量稳定,骨髓摄取率高,有望成为一种新的胶体显像剂.     

99Tcm-MAG3-Lys-mPEG的制备及其在小鼠体内的分布

以mPEG-5000、Fmoe-Lysine和MAG3为原料，经过五步反应合成了载体MAG3-Lys-mPEG；对其进行^99Tc^m标记后，进一步研究了标记物的体外稳定性及其在小鼠体内的生物分布。结果表明，^99Tc^m-MAG3-Lys-mPEG的标记率〉98％；标记物在体外有很好的稳定性，在生理盐水中放置24h时，放化纯度〉91％；在血清中温浴16．5h时放化纯度仍〉92％；标记物在小鼠体内的血液清除较快，在肾脏中的摄取最高，标记物主要经肾脏通过尿液排出体外。mPEG有可能用作反义核酸的有效载体。     

肺癌A549细胞摄取99Tcm-DTPA-DG的实验研究

将3．7kBq^99Tc^m-DTPA-DG加入培养肺癌A549细胞中后，观察不同时间细胞的摄取率；另观察DT-PA-DG对大鼠血糖的影响。结果显示，肺癌A549细胞2h摄取^99Tc^m-DTPA-DG达高峰，30min到2h间肺癌A549细胞摄取^99Tc^m-DTPA-DG明显高于^99Tc^m-DTPA（P〈0．01）；静脉注射DTPA-DG后，大鼠血糖升高，同时注射胰岛素的大鼠，其血糖含量下降时间提前。因此^99Tc^m-DTPA-DG有望成为一种新型的肿瘤葡萄糖代谢显像剂。