食源性低聚肽的体外消化稳定性研究

利用生物酶解法制备大豆肽、卵白肽、玉米肽、乳清肽、海洋骨原肽、海洋胶原肽、海洋蛋白肽7种食源性低聚肽,对其基础理化成分和氨基酸组成进行分析。然后在模拟胃肠道消化生理条件下,对7种低聚肽经胃蛋白酶和胰蛋白酶消化处理,对消化产物进行分子质量分布的分析和基于疏水性进行分离的反相色谱的分析,评价各种低聚肽的消化稳定性。结果显示,7种低聚肽95%以上未被胃蛋白酶消化,90%以上未被胰蛋白酶消化,绝大部分将以肽的形式被直接吸收,由此确定了通过高效液相色谱评价食源性低聚肽体外消化稳定性的体系方法,证实了食源性低聚肽具有良好的体外消化稳定性。     

模拟胃肠道消化对大豆低聚肽结构及抗氧化作用的影响

大豆低聚肽是一种有益健康的功能性配料,所呈现的健康益处高度依赖于肽结构。采用紫外全波长扫描法及圆二色光谱法分析其结构是如何受胃蛋白酶、胰蛋白酶以及先胃蛋白酶后胰蛋白酶处理的影响。为探讨消化处理前、后大豆低聚肽抗氧化能力的变化规律,分别计算消化前、后大豆低聚肽的ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)和铁离子还原能力(FRAP)。结果显示:大豆低聚肽主要为分子质量<1000 u的组分,经胃蛋白酶、胰蛋白酶及先胃蛋白酶后胰蛋白酶处理后<1000 u的组分比例最大可达88.46%。在波长275 nm处均有最大吸收峰。二级结构中,4组大豆低聚肽中无规则卷曲所占比例均为30%左右,约占总二级结构组成的1/3,表明了大豆低聚肽无序性较高且结构疏松开放。大豆低聚肽的ABTS自由基清除能力和铁还原能力稳定性均较好。经胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率有所降低,氧自由基吸收能力极显著提高(P<0.01)。     

豌豆低聚肽硒螯合物的稳定性研究

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料制备豌豆低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮、分子质量分布的基础理化性质进行研究,然后以分子质量分布和硒含量为指标对螯合物的热稳定性、酸碱稳定性、消化稳定性进行考察。结果表明,豌豆低聚肽硒螯合物水分含量为(14. 17±1. 12)%(质量分数),酸溶蛋白含量为(23. 22±0. 12)%(质量分数),总氮含量为(23. 87±0. 30)%,分子质量分布在1 000 Da以下的占比超过76%。在温度25～100℃时,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于2%,硒含量变化不显著。在pH=3～11,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于3%,硒含量虽有一定变化,但含量仍在78%以上。经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和2种酶共同消化后,分子质量在1 000 Da以下的部分比例均都在90%以上,而硒含量变化不显著。这说明豌豆低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

乌鸡低聚肽铁配合物的稳定性研究

以乌鸡为原料制备乌鸡低聚肽铁配合物,以分子量分布和铁含量为指标,对乌鸡低聚肽铁配合物的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性进行了考察。结果表明:在温度为20⁸0℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为380℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为3⁹时,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到6%,铁含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有58.4%以上的铁含量;乌鸡低聚肽铁配合物经过蛋白酶消化后,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到8%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有37.6%的铁含量。这说明乌鸡低聚肽铁配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性。     

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。     

体外模拟消化对海洋鱼骨胶原低聚肽结构和抗氧化活性的影响

该研究以海洋鱼骨胶原低聚肽为研究对象,通过体外模拟肠胃液消化,分析了消化前后海洋鱼骨胶原低聚肽的分子质量分布,其中模拟先胃液后肠液消化后分子质量＜1000 u的组分和重均分子量降低最多(约23.95％),其他消化模式处理组分子质量变化较稳定;紫外全波长扫描显示,消化前后溶液中酪氨酸变化量小于5％;圆二色光谱分析结果表明...     

海洋胶原低聚肽的制备及其稳定性研究

利用两步酶解法制备出海洋胶原低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,以分子量分布为指标,利用HPLC分子排阻的方法,研究了pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽稳定性的影响。结果显示:(1)pH分别为2,4,6,8,10和37℃水浴2h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过3%;(2)分别于20℃,40℃,60℃,80℃和100℃下水浴2 h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过2%;(3)分别经过胃蛋白酶单独消化,胰蛋白酶单独消化,先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过6%。表明pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽组分的影响很小,海洋胶原低聚肽具有良好的pH稳定性,热稳定性以及消化稳定性。     

乌鸡低聚肽的制备及其稳定性研究

以乌鸡为原料,利用两步酶解法制备乌鸡低聚肽,以分子量分布为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对乌鸡低聚肽稳定性的影响。结果表明,乌鸡低聚肽分别于20、40、60、80、100℃下水浴2 h后,各个分子量区间的比例变化不超过2%;pH值分别为2、4、6、8、10,37℃水浴2 h后,各个分子量区间的比例变化不超过2%;分别经过胃蛋白酶单独消化、胰蛋白酶单独消化、先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,各个分子量区间的比例变化不超过4%。这表明乌鸡低聚肽具有较好的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,为其在食品工业中的应用提供了一定的理论依据。     

大豆低聚肽的保健功能及应用

一、大豆低聚肽的组成和理化性质 大豆低聚肽是以分离大豆蛋白质为原料经蛋白质酶水解并精制后得到的蛋白质水解产物,它由许多种小肽分子组成,产品中还含有少量游离氨基酸、糖类、无机     

模拟胃肠消化对牡蛎低聚肽抗氧化活性的影响

以去壳牡蛎肉为原料通过酶解法制备牡蛎低聚肽,并通过体外模拟消化试验,对比消化前后牡蛎低聚肽分子量分布、DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)变化,探究牡蛎低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。试验结果显示,牡蛎低聚肽的相对分子量主要在1 000 Da以下,胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后重均分子量下降不超过8.2%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率降低分别不超过7.9%,8.7%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,·OH清除率降低分别不超过9.3%,3.8%;胃蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率降低9.2%,胰蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率提高3.6%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,ORAC值分别提高11.5%,1.3%。胃肠消化对牡蛎低聚肽的抗氧化活性评价各指标均无显著性影响(P＞0.05)。说明牡蛎低聚肽具有较好的综合抗氧化活性和稳定性。     

不同取材的食源性低聚肽嘌呤含量测定及其在痛风患者营养治疗中的应用探讨

利用高效液相色谱法对7种不同取材的食源性低聚肽样品进行嘌呤含量检测,检测结果由低到高分别为玉米蛋白低聚肽、乳清蛋白低聚肽、卵白蛋白低聚肽、大豆蛋白低聚肽、海洋蛋白低聚肽、海洋胶原低聚肽以及海洋骨原低聚肽。其中前3种为低嘌呤食物,后2种为高嘌呤食物,中间的2种为中嘌呤食物。这与各自取材原料的食品嘌呤等级相一致。鉴于上述低嘌呤肽达到低嘌呤食品的要求,结合肽自身的生理功能,探讨其在痛风患者营养治疗中的应用,认为低嘌呤肽可作为优质的蛋白补充源,缓解痛风患者的合并症,促进尿酸的排泄。     

富硒大豆低聚肽降血压作用的研究

为了研究富硒大豆低聚肽在降血压方面的作用,本研究采用5周龄SD雄性大鼠60只,随机分为4组,按设计进行饲喂实验,测定各试验大鼠的体重和血压,饲喂4周,停喂次日处死所有大鼠,测定血清和肺组织中ACE活力及血清中K、Na、Se的含量。结果显示:富硒大豆低聚肽能促进试验大鼠的体重增加,降低大鼠血清中ACE活性,但对肺组织ACE活性无显著影响,能导致大鼠血清中Na离子浓度下降、Se含量增加。说明富硒大豆低聚肽具有降低SHR血压的作用,这种作用是Se和大豆低聚肽共同作用的结果,除与ACE活力被抑制有关外,还可能与导致大鼠体内Na+浓度下降、Se含量增加有关。     

动物与临床试验——评价大豆低聚肽的降血压效果

为了检验大豆低聚肽的降血压效果,首先进行了动物试验,选择SHR(自发性高血压)大鼠30只,其中21只为雌性大鼠,9只为雄性大鼠。喂养方法:大豆低聚肽加入饮水中服用,并辅以乳粉;对照组仅给乳粉和饮水。实验期间,每天下午测定血压(SBP)。结果表明,大豆低聚肽的降血压作用很明显。服药3d后,实验组的血压与对照组的血压相比低30mmHg。剂量对降血压效应也有影响。低剂量能使血压下降到较低的值,但是随后效应有反弹;高剂量则可较早地降低血压,并且在较长的时间内保持平衡。临床实验研究按照中国高血压指南标准选择原发性高血压患者40例,平均年龄为51.66±11.35岁,分别在服用大豆低聚肽前和1个月后测定血压、心率,记录心电图等和血液中相关生化指标。研究认为,服用大豆低聚肽可能会降低原发性高血压患者的血压,其机制可能与其对血压紧张素转化酶(Angiotensinconvertingenzyme,ACE)的抑制有关。     

常见大豆制品中蛋白质的体外消化特性

本研究以常见大豆制品（大豆分离蛋白（soy protein isolate,SPI）、微波大豆、水煮大豆、豆浆、氯化钙豆腐和氯化镁豆腐）为研究对象,采用标准的静态体外消化模型——INFOGEST 2.0,测定不同时间点胃肠消化产物的完整蛋白、分子质量分布、游离氨基浓度和粒径大小,以探究大豆蛋白的消化特性。结果表明,不同加工方式均能促进大豆蛋白的消化。经过胃消化阶段后,几种大豆制品中部分蛋白被消化。而肠消化后,大豆蛋白均被彻底消化为短肽。相较于SPI,大豆经微波和水煮处理后,大豆蛋白的游离氨基浓度明显增加,但微波加热后大豆蛋白消化得更彻底;豆浆中大豆蛋白的消化程度低于氯化钙豆腐和氯化镁豆腐,两种豆腐中大豆蛋白的消化程度没有明显差异。总之,不同加工方式处理大豆均能不同程度地促进大豆蛋白的消化。本研究有助于更好地了解不同加工方式得到的大豆制品中大豆蛋白的消化特性,为人们摄取植物蛋白提供参考。     

海洋鱼蛋白低聚肽结构和抗氧化活性的体外消化稳定性

本研究通过体外模拟胃肠道消化海洋鱼蛋白低聚肽,运用高效凝胶过滤色谱、紫外全波长扫描、圆二色光谱表征其消化前后结构变化,测定其消化前后DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除能力、铁离子还原能力(FRAP)及氧自由基吸收能力(ORAC)的变化,以探究模拟胃肠道消化对海洋鱼蛋白低聚肽结构及抗氧化活性的影响。分子量分布数据揭示了海洋鱼蛋白低聚肽中分子量为150～1000u的组分为其主要组成部分,所占比例最高可达88.39%;紫外全波长扫描、圆二色光谱扫描表明海洋鱼蛋白低聚肽对胃蛋白酶有很强的抗消化稳定性以及对胰蛋白酶有较好的抗消化稳定性。在浓度1～15 mg/mL范围内,海洋鱼蛋白低聚肽的DPPH自由基清除率与其浓度成正相关,最高为67.86%;ABTS自由基清除能力、FRAP值及ORAC值三个抗氧化指标均显示海洋鱼蛋白低聚肽在消化后其抗氧化活性均有一定程度的提高,其中ORAC值在先胃蛋白酶后胰蛋白酶消化后提高最显著(p0.01)。总之海洋鱼蛋白低聚肽的结构和抗氧化活性均具有抗消化稳定性。     

大豆低聚肽营养吸收特性的研究

研究了补充大豆低聚肽和大豆分离蛋白对大鼠氮代谢的影响,并探讨了大鼠小肠对大豆低聚肽的吸收特点。将雄性SD大鼠30只,随机分为:灌喂水对照组、灌喂大豆低聚肽组和灌喂大豆分离蛋白组。大鼠在适应性喂养及膳食平衡1周后,开始进行代谢试验。结果发现,补充大豆分离蛋白后,大鼠氮平衡值、氮储存率、氮净利用率和表观消化率比补水大鼠分别增高641.03%、591.42%、553.11%和51.80%;而补充大豆低聚肽后,大鼠氮平衡值、氮储存率、氮利用率和表观消化率比补充水大鼠分别增高1061.54%、982.69%、921.20%和71.43%(P<0.05);比补充大豆分离蛋白大鼠分别增高56.75%、56.59%、56.36%和12.94%(P<0.05)。由此可得出结论,补充大豆低聚肽可显著提高机体对氮的表观消化率储存率和净氮利用率,并使机体处于较高水平的正氮平衡状态。     

Preparing oligopeptides from broken rice protein by ultrafiltration-coupled enzymatic hydrolysis

The resource of broken rice is quite abundant, but its exploiting and comprehensive utilization has not been achieved effectively. Producing rice oligopeptides is thought to be a promising way because of their high nutrition value and great health function. At present, the preparation of rice peptides mainly use batch enzymatic hydrolysis. Due to its uncontrollable hydrolysis process, not only oligopeptides but also large quantities of non-oligopeptides were produced. In this study, a manner of ultrafiltration-coupled enzymatic hydrolysis, combining enzymatic hydrolysis with ultrafiltration, was attempted and compared with the batch manner. Moreover, a strategy of pre-hydrolysis was used to solve the conflict between the dissolving pH of rice protein and the optimal pH of enzymatic hydrolysis. The result demonstrated that the ultrafiltration-coupled enzymatic hydrolysis manner had great advantages in producing oligopeptides, increasing the content of oligopeptides remarkably to above 60 % from below 40 % by batch enzymatic hydrolysis, displaying excellent stability in the molecular weight distribution of harvested peptides at different hydrolysis time and obtaining more antioxidant activity than batch enzymatic hydrolysis. This study made a successful attempt and laid the foundations for further studies of applying this method in the actual production technology of rice oligopeptides.     

阿胶低聚肽的成分分析及其抗氧化活性

采用复合酶解法制备阿胶低聚肽,分析阿胶低聚肽的营养成分、氨基酸组成和分子量分布,并比较阿胶与阿胶低聚肽清除自由基和防护H₂O₂诱导成纤维细胞氧化损伤的能力。结果表明,阿胶低聚肽含有8种人体必需氨基酸和2种半必需氨基酸,疏水性氨基酸占比较高,约占氨基酸总量的46.23%。阿胶低聚肽的相对分子质量主要集中在900 Da以下,约83.87%。阿胶和阿胶低聚肽对DPPH、ABTS自由基清除率的IC₅₀值分别为1.89和1.39、3.33和2.06 mg/mL。10 mg/mL阿胶和阿胶低聚肽的预处理可使H₂O₂诱导损伤的成纤维细胞存活率分别提高了6.72%和14.34%,SOD的活性分别提升了178.04%和497.88%,减少了细胞内ROS水平。表明,阿胶和阿胶低聚肽均可清除DPPH、ABTS自由基和减轻H₂O₂诱导的成纤维细胞的氧化损伤,且阿胶低聚肽的效果优于阿胶。     

胃蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

采用胃蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解,随着酶解时间的延长,蛋白质的水解度逐渐增大,水解6h,DH为7.90%。采用分子筛凝胶过滤色谱(SE-HPLC)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对不同的酶解时间下大豆分离蛋白酶解物的分子结构进行表征,结果表明,胃蛋白酶选择性地酶解大豆11 S球蛋白。大豆分离蛋白经胃蛋白酶水解6 h后,分子量大于10 ku的部分占21.34%,其中主要是7 S球蛋白;分子量小于5 ku的部分所占比例为68.30%。对酶解物中的游离巯基和二硫键含量测定结果表明,随着酶解的进行,游离巯基的含量呈现先增大后减小的趋势,二硫键的含量总体变化不大。该研究旨在更好地了解胃蛋白酶水解大豆分离蛋白的机理,并为开发大豆分离蛋白酶解物产品提供理论依据。     

豌豆低聚肽硒螯合物的体外抗氧化作用

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料,经螯合工艺制得豌豆低聚肽硒螯合物,研究其水分、粗蛋白、酸溶蛋白、分子质量分布情况,然后从DPPH自由基、OH自由基清除能力和还原能力3个方面对螯合原料和螯合物进行抗氧化功能评价与对比。结果表明,螯合得率为27.87%,水分含量为(14.17±1.12)%,酸溶蛋白占粗蛋白的比例为97.28%。分子质量分布在1000 u以下的比例占93.45%。螯合原料中亚硒酸钠仅对OH自由基有较强清除能力;豌豆低聚肽对DPPH和OH自由基清除的IC50=(3.39±0.02)mg/mL和(23.55±0.07)mg/mL,并具有一定的Fe3+还原能力。豌豆低聚肽硒螯合物清除DPPH自由基、OH自由基能力及还原能力均比豌豆低聚肽有所提高。