猪去氧胆酸与BSA相互作用研究

目的:采用荧光光谱法研究猪去氧胆酸(HDCA)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.方法:根据25℃及37℃温度下HDCA对BSA的荧光猝灭作用,通过Stern-volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数方程计算反应的猝灭常数和形成常数以判断荧光猝灭类型,采用双对数方程计算HDCA与BSA的结合常数(KA)和结合位点数(n),最后采用热力学公式计算反应前后焓变和熵变确定两者结合的主要作用力类型.结果:HDCA对BSA的荧光淬灭作用属于静态荧光淬灭.在温度25℃和37℃时,HDCA与BSA的结合常数分别为0.258×106 L·mol-1和0.453×104 L·mol-1,结合位点数分别0.92和0.62.由于热力学参数焓变(ΔH=-258.72 KJ·mol-1)和熵变(ΔS=-0.76 J·mol-1·K-1)均小于零,因此确定HDCA与BSA之间的作用力主要为氢键和范德华力作用.结论:HDCA与BSA通过氢键和范德华力形成复合物,经静态猝灭机制引起BSA内源性荧光猝灭.     

荧光光谱法研究尼麦角林与牛血清白蛋白的相互作用

目的:模拟正常人体生理条件下,采用荧光光谱技术研究尼麦角林与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的机制.方法:通过荧光光谱法确定尼麦角林对BSA荧光淬灭的机制,采用Stern-volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数方程计算反应的猝灭常数和形成常数,采用双对数方程计算两者结合常数和结合位点数,热力学公式计算反应前后焓变和熵变确定两者结合的主要作用力类型.结果:尼麦角林在0.25×l0-4².25×l0-4 mol·L-1浓度范围内,对BSA的内源荧光有较强的淬灭作用,淬灭类型属于静态荧光淬灭.在温度25℃和37℃时,尼麦角林与BSA的结合常数分别为3.499×104 L·mol-1和5.213×104 L·mol-1,结合位点数分别为1.21和1.25.由热力学参数焓变(ΔH=11.05 KJ·mol-1)大于零和熵变(ΔS=74.87J·mol-1·K-1)大于零,确定尼麦角林与BSA之间的作用力以疏水作用力为主.结论:尼麦角林与BSA通过疏水作用形成复合物,经静态猝灭机制引起BSA内源性荧光猝灭.     

异槲皮苷在大鼠血浆中的药代动力学研究

目的:对异槲皮苷的多剂量给药进行研究,初步确定其体内药动学参数。方法:建立HPLC-UV法测定异槲皮苷在大鼠血浆中浓度的分析方法,以牡荆素作为内标物,考察异槲皮苷在大鼠体内的药代动力学特征。色谱柱:Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.1%甲酸水(35∶5∶60,V/V/V)为流动相,检测波长为360 nm,柱温:30℃,流速:1 m L/min。大鼠分别给以5 mg/kg,10 mg/kg和20 mg/kg尾静脉注射异槲皮苷溶液,并于静脉注射2、5、10、15、20、30、45、60、90、120、180min后采血,分别置于预先肝素化的EP管中,样品经处理后,注入液相色谱仪进行分析。对所得结果利用3p97药代动力学软件进行拟合处理,计算其药代动力学参数。结果:三个剂量静脉给药后,异槲皮苷在0.2~80μg范围内呈良好的线性关系,r2>0.99。血浆检测限(LOD,S/N=3)及定量限(LOQ,S/N=10)分别为0.062和0.203μg/m L。日内和日间精密度(RSD)分别在2.3%~7.2%和2.8%~7.7%之间,准确度(RE)在-6.3%~7.0%和4.0%~6.2%之间。其提取回收率在91.24%~94.50%之间。三个剂量的药代动力学行为均最符合三室开放模型。在给药剂量5~10mg/kg范围内,AUC的值成比例增加。此外,药代动力学参数αhalf-life,βhalf-life,aCL,MRT0→t和MRT0→∞在20 mg/kg与其他剂量的比较中均表现出统计学差异。结论:研究建立测定大鼠血浆中异槲皮苷含量的高效液相色谱法,该法灵敏度和专属性较高,经方法学验证,精密度和准确度好、重复性高、专属性强,符合生物样品分析的要求,并将其成功的应用于多剂量静注异槲皮苷后大鼠体内的血浆药动学研究。     

红景天8种成分体外抗氧化作用比较研究

目的:比较性研究红景天中8种成分,主要包括芦丁苷、红景天苷、异槲皮苷、酪醇、莨菪亭、熊果苷、山奈酚、肉桂醇红景天,并进行体外抗氧化实验。方法:测定8种成分对二苯代苦味酰基自由基(DPPH)、超氧阴离子自由基、一氧化氮自由基、羟自由基的清除能力,以及总抗氧化能力和抑制脂质过氧化反应的能力。结果:除清除羟自由基实验外,异槲皮苷和芦丁苷作用明显强于其他化合物,其中在清除DPPH、超氧阴离子能力和抑制脂质过氧化实验中的IC50分别为6.43 mg·L-1和11.56mg·L-1,24.19 mg·L-1和37.25 mg·L-1,11.76 mg·L-1和57.24 mg·L-1;而在清除羟自由基实验中,酪醇和红景天苷的作用则强于其他化合物,IC50分别为11.76 mg·L-1和19.5 8 mg·L-1。结论:红景天中苷类及醇类成分对多种自由基具有清除作用,有良好的综合抗氧化性和开发应用前景。     

岷江柏的化学成分研究(二)

目的:研究岷江柏的化学成分.方法:反复运用正相硅胶、Sephadex LH-20柱色谱分离提纯,经理化常数测定,结合IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等现代波谱学技术确定化合物结构.结果:从岷江柏乙醇提取物中分离纯化出7个化合物,分别鉴定为β-胡萝卜苷(β-daucosteol)1,槲皮苷(quercitrin)2,木犀草素(luteolin)3,柏黄酮(cupressuflavone)4,穗花杉双黄酮(amentoflavone)5,新柳杉双黄酮(neocryptomerin)6,7-甲氧基香豆素(hemiarin)7.结论:化合物1-7为首次从该植物中分离得到.     

黔产辣蓼药材质量标准研究

目的建立黔产辣蓼药材的定性、定量检测方法,并制定质量标准。方法对黔产辣蓼药材进行性状鉴别、显微鉴别,采用薄层色谱(TLC)法对其中的槲皮素进行定性鉴别,采用高效液相色谱(HPLC)法对其中的槲皮苷进行含量测定。按照《中华人民共和国药典》2015版(一部)附录方法对辣蓼药材中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定。结果薄层色谱斑点清晰,无干扰,专属性强;含量测定槲皮苷在0.462~4.158μg范围内线性关系良好,Y=79.004X+0.520,r=0.999 8,平均回收率为98.00%;初步拟定水分不得超过14.0%,总灰分不得超过14.0%,酸不溶性灰分不得超过5.0%,浸出物不得超过10.0%。结论本方法操作简单,结果可靠,可有效控制辣蓼药材的质量。     

基于液质联用技术的蒙药扑勒蒙化学成分分析与鉴定

针对蒙药扑勒蒙化学成分的快速分离与鉴定,采用液质联用技术对其乙醇提取物进行了研究,从中分离鉴定了11个化合物,其化学结构分别为咖啡酸、5,7,2’,4’-四羟基-6,5’-二甲氧基黄酮、槲皮万寿菊素、4’-羟基汉黄芩素、槲皮万寿菊素-4’-甲醚、5,6,3’-三羟基-7,4’-二甲氧基黄烷酮、圣草酚-7-甲醚、槲皮素-7-甲醚、樱花素、异樱花素和3,5-二羟基-7,4’-二甲氧基黄烷酮。     

金茵利胆口服液中柚皮苷、新橙皮苷的含量测定及初步稳定性研究

目的测定金茵利胆口服液中柚皮苷、新橙皮苷的含量,并对其初步稳定性进行研究。方法采用高效液相色谱(HPLC)法对金茵利胆口服液中柚皮苷、新橙皮苷的含量进行测定。色谱柱为Phenomenex C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为2 5℃,检测波长为254 nm。通过影响因素试验和加速试验考察其初步稳定性。结果柚皮苷和新橙皮苷的线性回归方程分别为Y=163 492X+4 625.2,r=0.999 9;Y=117 867X+8 035.9,r=0.999 8。结果表明,柚皮苷和新橙皮苷分别在0.56~5.60μg,0.38~3.80μg范围内呈良好的线性关系。柚皮苷、新橙皮苷的平均加样回收率分别为99.86%(RSD=2.04%,n=9),98.95%(RSD=2.45%,n=9)。初步稳定性试验表明,该制剂在性状、p H、相对密度、装量差异、含量测定方面均符合规定。结论该方法操作简便、可信度高,制剂质量可控,稳定性良好。     

高效液相色谱法测定慢支胶囊中柚皮苷的含量

目的制定慢支胶囊中柚皮苷的含量测量方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定慢支胶囊中柚皮苷的含量,色谱条件为:C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相为甲醇-水(40∶60),检测波长为283 nm。并对准确度、精密度、专属性等进行方法学考察。结果柚皮苷在0.1952~1.9520μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=6.466×106X+8.342×103,r=0.9999,平均回收率为98.38%,柚皮苷含量为15.05 mg/g。结论该方法灵敏、准确、重现性好、精密度高、专属性强,可作为慢支胶囊中柚皮苷的定量测定方法。     

柚皮苷联合运动对去势大鼠骨量和骨强度的影响

目的观察柚皮苷(NG)联合中强度跑台运动对去势大鼠骨质疏松模型的治疗效果。方法2月龄雌性SD大鼠80只,用随机数字法分为假手术组(SHAM)、去势组(OVX)、去势+不同浓度(40、100、200 mg/kg)柚皮苷组(OVX+NG)、去势+跑台+柚皮苷组(OVX+EX+NG)、去势+跑台组(OVX+EX)、雌激素组(OVX+E2),每组10只。大鼠切除卵巢2个月后开始给药,给药60 d后观察各组大鼠股骨骨密度(BMD),Micro-CT参数,血清生化指标及及股骨力学性能与组织学改变。结果柚皮苷与跑台运动干预60 d后,OVX+EX+NG组大鼠股骨颈力学强度、股骨BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th等均高于单纯去势组(P<0.05),OVX+EX+NG组治疗效果与柚皮苷浓度呈正相关,以200 mg/kg柚皮苷效果最佳;200 mg/kg柚皮苷联合中强度跑台运动可进一步提高治疗效果。OVX+NG组大鼠血清骨钙素升高,Ⅰ型胶原C端肽(CTX-1)降低;OVX+EX组大鼠骨钙素与CTX-1均降低;OVX+EX+NG组大鼠骨钙素水平与柚皮苷组(200 mg/kg)无差异,但高于OVX+EX。OVX+EX+NG组CTX-1水平低于单纯柚皮苷组和单纯跑台组(P<0.05)。结论柚皮苷联合中强度跑台运动可提高去势大鼠股骨BMD,增加骨小梁数目,改善骨代谢指标,提高股骨力学性能。