一株海洋红藻抑菌活性初探

以青岛沿海的多管藻为研究对象,对其乙醇提取物中抑菌活性较好的组分进行柱色谱分离得到8个化合物.以4株细菌和5株农业病原真菌为指示菌株,采用滤纸片法测定各化合物的抑菌活性,并使用生长速率法对化合物ZP-8进行了毒力研究,初步确定其对白菜黑斑病菌和葡萄白腐真菌的毒力方程和EC50,其中对白菜黑斑病菌的EC50为0.19mg/L,对葡萄白腐真菌的EC50为0.52mg/L.     

青岛海域海洋动物源真菌抑菌生物活性初探

海洋动物源真菌新资源的代谢产物研究对具有新颖结构和环境友好型农用抑菌活性物质的发现具有重要意义.从采自青岛海域的12种海洋动物中分离纯化出24株海洋内生真菌,经过优化培养、薄板层析、分别使用4株常用细菌和4株农用植物病原真菌为指示菌株进行生物活性初筛,结果发现墨斗鱼来源的菌株02-A对细菌具有广谱抑菌活性,小银鱼来源的05-A对EC具有强烈的抑制作用,抑菌圈最大为23mm(阳性对照为30mm),并对农用植物病原真菌表现出一定的抑制作用.     

清香木内生菌对酪氨酸酶活性的影响

目的:探讨清香木内生菌对酪氨酸酶活性的影响。方法:对新鲜清香木的茎和根部位进行内生真菌的分离,经显微鉴定菌株分别为木霉属、镰孢属和假丝酵母属,然后将菌株的发酵液用多孔酶标板法进行酪氨酸酶抑制活性的检测。结果:茎皮部的PZ-6-2对酪氨酸酶活性抑制作用最强,PZ-4次之;根皮部的QZ-1抑制活性也较强。结论:清香木内生菌对酪氨酸酶活性具有一定的抑制作用。     

青阳参内生真菌分离与鉴定

目的:从云南民间药用植物青阳参的根、茎和叶中分离内生真菌,并进行分类鉴定。方法:利用平板分离法分离内生真菌。通过显微形态观察分类鉴定。结果:从植物根、茎和叶中共分离获得34株内生真菌,其中25株真菌经鉴定归属为5目,7科,12个属。结论:结果表明青阳参植物内生真菌存在多样性,不同部位内生真菌的数量、组成与种群分布存有差异。     

鸭源高产L-乳酸凝结芽孢杆菌的分离与鉴定

为了获得高产L-乳酸的凝结芽孢杆菌,从河南省汝州市的肉鸭养殖场采集50份鸭肠道黏液样品。利用分离培养基对细菌进行分离和纯化,用试剂盒检测L-乳酸产量,结合菌落形态、显微形态、生理生化试验和16S r DNA序列鉴定其种属。鉴定结果表明:从50株细菌中分离得到一株高产L-乳酸的菌株BC07,L-乳酸产量为43.2 g/L。经鉴定为凝结芽孢杆菌,能形成芽孢,而且该菌株能够耐受较强的酸、胆盐和高温。     

青岛海域18株海藻内生真菌生物活性初探

海洋共生真菌的代谢产物研究对绿色农用抑菌活性物质的发现具有重要意义.从青岛海域采集的13种海洋藻类中分离纯化出18株海洋真菌,分别使用滤纸片法和平板对峙法以4株细菌和4株农用植物病原真菌作为指示菌株进行抑菌活性筛选,并以生产力和薄板层析为辅助筛选,结果发现松节藻来源的菌株21-A次级代谢产物丰富,对大肠埃希氏杆菌具有很强的抑制活性,多管藻来源的13-B、松节藻来源的21-A和裙带菜来源的22-A对植物病原菌表现出一定的抑制作用.     

抗菌豆豉发酵菌株的筛选及其脂肽组分鉴定和特性研究

目的:从豆豉中分离广谱抗菌活性菌株,并鉴定其发酵产物中的抗菌成分。方法:采用生理生化实验结合16SrRNA序列测定法鉴定目标分离株,通过LC-MS和ESI/CID技术对其抗菌组分进行鉴定。结果:从8个豆豉样品中分离出7株具有抗菌活性菌株,其中抗菌活性较强的分离株NT-6为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其发酵液抗菌提取物的主要成分是抗菌脂肽类物质iturin、fengycin、surfactin同系物的混合物。该提取物对供试革兰氏阳性、阴性细菌、霉菌等指示菌具有广谱的抗菌活性,在pH 2～12、121℃条件下加热30min活性不丧失,说明具有广泛的pH适应范围和良好的耐热性。结论:该菌株产生多组分抗菌脂肽,其抑菌谱宽,适应性好,显示了在食品、农业、医药等领域具有良好的应用前景。     

儿童院内和社区获得性肺炎的病原菌及耐药性对比分析

目的分析院内获得性肺炎（hospital acquired pneumonia,HAP）和社区获得性肺炎（communital acquired pneumonia,CAP）痰病原菌的分布及药敏情况,以指导临床对肺炎患儿早期合理用药。方法对2008年6月至2011年6月住院诊断为肺炎及至少一次痰培养阳性的患儿,就病原菌和耐药情况进行回顾性分析。结果267例均为同期诊断为肺炎的住院痰培养阳性患儿,其中HAP64例,CAP203例。HAP患儿分离出100株病原菌,其中革兰阳性菌15株（15．00％）,革兰阴性菌70株（70．00％）,真菌15株（15．00％）;前3位的病原体依次是肺炎克雷伯菌25株（25．00％）,鲍曼不动杆菌15株（15．00％）及凝固酶阴性葡萄球菌11株（11．00％）,混合感染占48．40％。CAP患儿分离出208株病原菌,革兰阳性菌46株（22．12％）,革兰阴性菌157株（75．48％）,真菌5株（2．40％）;前3位的病原体依次是肺炎克雷伯菌65株（31．25％）,大肠埃希菌32株（15．39％）,肺炎链球菌19株（9．14％）,混合感染占2．46％。药敏结果显示HAP病原菌对常用抗生素的耐药性多明显高于CAP（P〈0．01或P〈0．05）,但革兰阳性球菌对万古霉素均敏感,革兰阴性细菌对头孢哌酮／舒巴坦、亚胺培南及美罗培南敏感。结论HAP患儿痰培养的病原菌产酶菌株多,细菌耐药率高,治疗困难。了解肺炎患儿病原菌的分布和耐药情况．可指导临床合理用药,提高抢救成功率。     

867株血培养病原菌的分布及耐药性分析

目的:探讨该院2016年6月-2017年5月引起血液感染的常见病原菌的分布及对常见抗生素的耐药情况,为临床抗菌治疗提供科学依据。方法:用Bact/Alert 3D全自动血液培养仪对19 245份血液标本进行培养检测,阳性菌株转种后用VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪进行分离鉴定及药敏情况分析。结果:在19 245份血液培养标本中分离出病原菌867株,阳性检出率为4.51%,其中革兰阴性杆菌342株,占39.45%,革兰阳性球菌499株,占57.55%,真菌12株,占1.38%,厌氧菌14株,占1.62%;病原菌中,革兰阴性杆菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和甲型副伤寒沙门菌为主,革兰阳性球菌以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶株分别占55.98%、23.00%,且发现耐亚胺培南和美罗培南的肺炎克雷伯菌。葡萄球菌对呋喃妥因、利福平、利奈唑胺和万古霉素均高度敏感。结论:血液培养主要病原菌为革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌,分离的病原菌耐药情况严重,加强细菌耐药性的监测有助于合理使用抗菌药物。     

斜带石斑鱼幼鱼消化道与养殖水体中可培养菌群的研究

利用海水琼脂、TCBS和MRS培养基对斜带石斑鱼Epinephelus coioides幼鱼消化道和养殖水体中的细菌进行分离纯化,采用生理生化鉴定结合16S rRNA基因测序进行细菌鉴定,探讨了幼鱼消化道中的菌群与养殖水体中菌群的关系。结果表明:幼鱼消化道中可培养细菌总数(9.0×106cfu/g)高于养殖水体中可培养细菌总数(5.4×105cfu/mL),幼鱼消化道中细菌种类也明显多于养殖水体;在幼鱼消化道和养殖水体中均检测到副溶血弧菌、哈维氏弧菌、短小芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、鲍氏不动杆菌、嗜冷杆菌和洋葱伯克霍尔德菌等7种细菌。细菌系统进化分析结果表明,这些细菌隶属于β-变形杆菌纲、γ-变形杆菌纲和芽孢杆菌纲。幼鱼消化道和养殖水体的优势菌中均有芽孢杆菌和嗜冷杆菌,提示芽孢杆菌和嗜冷杆菌能通过养殖水体很好地进入消化道。3种乳酸菌(乳酸乳球菌、干酪乳杆菌和屎肠球菌)仅见于幼鱼消化道,且仅占消化道菌群数量的0.70%。弧菌在消化道和养殖水体中所占比例均很小,分别仅占细菌总数的1.07%和0.10%。     

肺部感染肺泡灌洗液中非发酵菌分布及耐药性分析

目的：对肺部感染患者支气管肺泡灌洗液（BALF）培养,分析检出非发酵菌感染及其耐药情况,以指导临床合理使用抗菌药物。方法对2008年5月至2013年6月中国人民武装警察部队陕西省总队医院检验科从BALF中分离的非发酵菌的分布及耐药性进行回顾性分析。结果共检出93株非发酵菌,检出率居前4位的依次为铜绿假单胞菌（48/93,51．61％）、鲍曼不动杆菌（31/93,33．33％）、嗜麦芽寡养单胞菌（10/93,10．75％）、醋酸钙不动杆菌（2/93,2．15％）;非发酵菌对不同抗菌药物呈多重耐药性,碳青霉烯类、头孢哌酮/舒巴坦、多黏菌素对非发酵菌的作用较好。结论肺部感染支气管肺泡灌洗液中非发酵菌具有较高的检出率和耐药性,应加强临床肺泡灌洗液的细菌学检测,按照药敏试验结果合理用药。     

婴幼儿呼吸道多重耐药菌87株分析

目的探讨婴幼儿呼吸道多重耐药菌菌株分布及耐药特点。方法对2014年1—4月深圳市儿童医院收治的83例呼吸道感染患儿痰（33份）、咽拭子（48份）及肺泡灌洗液（2份）标本培养出87株多重耐药菌菌株的临床资料进行回顾性分析,统计菌株的分布及对药物敏感情况。结果 83例患儿3种标本共分离出多重耐药菌株87株：革兰阳性菌54株（62.07%）,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌24株、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌14株、肺炎链球菌16株,革兰阴性菌33株（37.93%）,其中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶[ESBLs（＋）]11株、大肠埃希菌不产超广谱β-内酰胺酶[ESBLs（-）]8株、肺炎克雷伯杆菌12株、铜绿假单胞菌2株。48份咽拭子培养分离出48株细菌,33份痰培养分离出37株细菌,2份肺泡灌洗液培养分离出2株细菌。革兰阳性菌敏感药物为万古霉素、利奈唑胺和氧氟沙星等不良反应较大的药物,对青霉素、红霉素和氨苄西林等常用药物耐药;革兰阴性菌敏感药物为头孢他啶、美罗培南及亚胺培南等贵重药物,对氨苄西林、头孢呋辛、头孢唑林等常用药物耐药。分离出69株菌株（79.31%）的66例患儿未使用相应抗生素治疗后均痊愈出院,结合临床考虑定植菌株;分离出18株菌株（20.69%）的17例患儿根据药敏试验使用相应抗生素治疗后痊愈出院,结合临床综合考虑为感染菌株,感染发病率为20.48%。结论婴幼儿呼吸道多重耐药菌株多为革兰阳性菌,以定植菌为主,仅小部分为感染菌株致病;在结合临床考虑定植菌株时应避免滥用抗生素。     

Biological activities of endozoic fungi isolated from Biomphalaria alexandrina snails maintained in different environmental conditions

This work aims at studying Biomphalaria alexandrina snails as a source of bioactive compounds. Adult snails were maintained in plastic, mud and cement matrices. Three groups were prepared; under normal laboratory conditions, in slightly low pH conditions, and in high temperature (30°C) conditions. Nine fungal species were isolated from soft tissues of snails. Ethyl acetate and acetone extracts were prepared from each fungal species, and their biological activities were investigated. Paecilomyces variotii extracts were the most effective as antimicrobial agents, while acetone extract of Trichoderma harzianum showed high antioxidant activity. Acetone extracts of Penicillium islandicum and Aspergillus niger were highly active against hepatocellular carcinoma (HepG2) cell lines. Gas chromatography/mass spectrometry analysis of the five effective extracts showed the presence of various compounds. B. alexandrina snails may be regarded as a newly discovered source of beneficial compounds through the metabolites produced by their endozoic fungal strains.     

Detection of pathogenic Escherichia coli strains in groundwater in the Yaoundé region (Cameroon,Central Africa)

This study was aimed at assessing the prevalence of pathogenic Escherichia coli strains, relative to the total count of E. coli, faecal coliforms and other heterotrophic mesophilic aerobic bacteria (HMAB) isolated in groundwater in the equatorial region of Cameroon (Central Africa). Bacteria were isolated using standard methods. Pathogenic E. coli strains were then identified using haemagglutination and antisera tests. The maximum abundance of HMAB, faecal coliforms and E. coli strains were 4.9 × 10⁶, 5.6 × 10³ and 1 × 10³ colony‐forming units (CFU)/100 mL, respectively. The count of pathogenic E. coli strains reached 3 CFU/100 mL. The counts of commensal and pathogenic E. coli strains underwent temporal and spatial fluctuations. In 21% of sampling sites, the abundance of faecal coliforms was significantly correlated to that of E. coli (P < 0.05). However, the isolated bacterial count was not significantly correlated to that of the pathogenic E. coli strains (P > 0.05). The bacteria abundance dynamics may be impacted by many interacting factors.     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及16S rRNA甲基化酶基因检测的意义

目的：探讨多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及16SrRNA甲基化酶基因检测的临床意义,为临床合理使用抗生素和控制院内感染提供依据。方法收集2011年3月至2013年12月在南昌市第二人民医院住院的ICU患者各种临床标本分离的多重耐药鲍曼不动杆菌52株。采用纸片扩散（K-B）法对52株多重耐药鲍曼不动杆菌行抗生素药敏试验,采用聚合酶链反应（PCR）检测16SrRNA甲基化酶基因（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE和npmA基因）表达情况。结果52株多重耐药鲍曼不动杆菌对米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南和亚胺培南耐药率分别为44．2％、53．8％、75．0％和78．8％,对其余14种抗生素耐药率均在90．0％以上。52株多重耐药鲍曼不动杆菌中有38株检出armA基因表达,表达率为73．1％（38/52）;其余均未检出。结论多重耐药鲍曼不动杆菌主要携带armA型16SrRNA甲基化酶耐药基因。米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦对多重耐药鲍曼不动杆菌有较好的抗菌活性,而多重耐药鲍曼不动杆菌对其他多种抗生素呈多重耐药性。     

北京协和医院外科住院患者细菌耐药性监测

【摘要】 目的 了解北京协和医院外科住院患者临床分离细菌分布及对抗菌药物的耐药性。方法 收集2012年1月1日?至2013年12月31日北京协和医院外科住院患者临床分离的3084株非重复细菌，采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验，按美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)2013年版标准判读药敏结果，采用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 3084株非重复细菌中10个最常见的细菌依次为鲍曼不动杆菌（14.1％）、大肠埃希菌（12.4％）、铜绿假单胞菌（12.4％）、肺炎克雷伯菌（11.8％）、金黄色葡萄球菌（8.9％）、粪肠球菌（5.4％）、凝固酶阴性葡萄球菌（5.3％）、阴沟肠杆菌（3.7％）、嗜麦芽窄食单胞菌（3.6％）和屎肠球菌（3.2％），其中革兰阴性菌占71.6％（2208株），革兰阳性菌占28.4％（876株）。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（methicillin-resistant coagulase negative Staphylococcus，MRCNS）的检出率分别为42.7％（117/274）和77.3％（119/154）。MRS葡萄球菌（MRSA和MRCNS）对β内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于MSS葡萄球菌（MSSA和MSCNS）。MRSA中80.3%菌株对磺胺甲噁唑-甲氧苄啶敏感，MRCNS中95%菌株对利福平敏感。未发现对万古霉素，替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌，后者对氯霉素的耐药率仅为4.3%。分别发现1株和5株万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌，根据表型推测为VanA 型耐药；未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases, ESBLs）的大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌的检出率分别为56.7％、23.8％和22.8%。产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物仍高度敏感，总耐药率1.6%～3.3%。泛耐药肺炎克雷伯菌的检出率为0.8%（3/363）。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为19.5％和15.0％，对阿米卡星的耐药率最低（8.6％）；鲍曼不动杆菌对上述两种抗菌药物的耐药率分别为74.1％和74.0％，对头孢哌酮－舒巴坦和米诺环素的耐药率最低(51.5％和28.9％)。泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的检出率分别为44.3％和0.8%。结论 定期进行耐药性监测有助于了解细菌耐药性变迁，为临床经验用药提供依据。     

L-苏糖酸阿奇霉素抗菌效应及急性毒性研究

目的观察L-苏糖酸阿奇霉素的抗菌效应及其急性毒性。方法肉汤稀释法检测药物对临床分离的常见致病菌最小抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）以评价其体外抗菌作用。以金黄色葡菌球菌及耐甲氧西林金黄色葡菌球菌感染小鼠建立动物模型,阿奇霉素灌胃给药对感染动物进行治疗评价其体内抗菌作用并测定小鼠LD50评价其急性毒性。结果体外实验显示L-苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素对革兰阳性球菌、革兰阴性球菌和革兰阴性杆菌的MIC50、MIC90、MBC50和MBC 90基本一致,均对耐药菌无效;低剂量（37.5mg.kg-1）L-阿苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素对金黄色葡萄球菌敏感株感染小鼠的保护率分别为55%和15%,经χ2检验差异有统计学意义（P〈0.05）;小鼠腹腔注射L-苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素的LD50分别为（1 308.6±203.2）mg.kg-1和（1 193.1±161.4）mg.kg-1,经t检验差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 L-苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素体外抗菌活性相似,低剂量L-苏糖酸阿奇霉素对金葡菌感染小鼠有更强的保护作用且对小鼠的急性毒性小于乳糖酸阿奇霉素。     

Isolation, molecular characterization and antimicrobial resistance patterns of Salmonella and Escherichia coli isolates from meat-based fast food in Lebanon

The aim of this study was to characterize at the molecular level the different stains of Salmonella spp. and Escherichia coli that were isolated from meat-based fast food in Lebanon. In addition, this study evaluated the resistance of those strains to different antimicrobials that are commonly used. The foods included were Lahm-bi-Ajeen (LBA, meat pies) and Shawarma (Lebanese meat sandwiches similar to Gyros and Donairs, containing meat, vegetables, and sesame seeds-oil-based sauce). Polymerase chain reaction (PCR) was used to characterize and identify the strains of both bacteria. Salmonella species characterization was performed using rfb genes cluster genetic marker, while that of E. coli strains were carried out based on stx1, stx2, eaeA, fliC, and ehlyA virulence markers. The characterized strains were then tested for their response to various antimicrobials. The results showed that the tested foods were contaminated with Salmonella paratyphi (serogroup A) and Shiga Toxin (Stx)-producing E. coli (STX-EC). The PCR showed that 75% of E. coli tested strains was positive in PCR performed with stx1 primers, one of which was eaeA positive. Two of the tested strains were positive using PCR with fliC primers. The resistances of the various strains were evaluated using the following antimicrobials: Oxacillin, Teicoplanin, Trimethoprim/sulfamethoxazole, Gentamicin, Clindamycin, Cefotaxime, Cefuroxime, Erythromycin, and Vancomycin. Bacteria were highly resistant to one or more of the tested antimicrobials. Approximately 69% of E. coli and 77.8% of Salmonella spp. exhibited resistance. Salmonella spp. were shown to be 100% resistant to four antimicrobials: Oxacillin, Teicoplanin, Clindamycin, Vancomycin, and Erythromycin, while E. coli was 100% resistant to Teicoplanin and Trimethoprim/sulfamethoxazole. The most interesting findings were the high susceptibility of the E. coli to Gentamicin (100%). Highest resistance in the case of Salmonella spp. was seen against Cefotaxime (74%). Those two antimicrobials are commonly used for the treatment of enteric infections caused by gram-negative bacteria. The results showed that meat-based fast foods in Lebanon could be a public health hazard, especially Shawarma, as they may act as a potential vehicle for many antimicrobial-resistant pathogenic organisms. Improper hygienic standards and indiscriminate use of antimicrobials are two of the main causes for the prevalence of these pathogenic resistance strains in Lebanon. These results will emphasize the need to implement protective measures and more emphasis will be placed on the application of hygienic practices to reduce the levels of food contamination.     

小鼠肺组织中肿瘤坏死因子α水平的变化与真菌机会性感染的关系

目的探讨小鼠肺组织中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平的变化与肺组织真菌机会性感染的关系。方法将70只小鼠按数字表法分为2组：A组25只和B组45只。B组小鼠腹腔注射环磷酰胺（Cyclophosphamide,CY）80 mg.kg-1.d-1,A组小鼠腹腔注射等量的生理盐水。2组于8、24、48 h杀死小鼠,分离肺组织。Western Blot法检测2组小鼠肺组织胞浆中TNF-α的表达;比色法检测肺组织中髓过氧化物酶（My-eloperoxidase,MPO）的活性。A组小鼠注射无菌生理盐水24 h后、B组小鼠腹腔注射CY后8、24、48 h分别鼻吸入烟曲霉菌孢子,各组小鼠分别在感染24、96 h处死,匀浆肺组织培养,计数菌落数。结果 B组CY处理后8、24、48 h肺组织TNF-α水平分别为0.152±0.011、0.314±0.029和0.631±0.035,显著低于A组小鼠肺组织中TNF-α水平（0.812±0.043）（P〈0.01）。B组3个时间点的TNF-α水平比较差异有统计学意义（P〈0.01）。B组小鼠8、24、48 h肺组织中MPO活性均显著低于A组[（0.028±0.007）、（0.075±0.004）、（0.125±0.009）U.g-1vs（0.218±0.015）、（0.208±0.036）、（0.211±0.012）U.g-1,均P〈0.01]。A组烟曲霉菌菌落数在24、96 h时均显著低于B组（均P〈0.01）。结论小鼠肺组织TNF-α表达下调,降低了肺组织MPO活性水平,导致抗感染天然免疫抑制,是机体发生机会性真菌感染的机制之一。