甲胺磷残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制

研制了二种用于检测蔬菜中甲胺磷残留量的直接竞争酶联免疫测定（EusA）试剂盒，结果表明，该试剂盒的最低检测限为0．01μg/mL，线性检测范围为0．01μg／mL～100μg/mL，标准曲线的平均板内变异系数为4.05％，板间平均变异系数为13．66％，回收率的范围在93．12％～102％。试剂盒在4℃下至少可以保存6个月以上。     

毒死蜱残留检测间接竞争ELISA 试剂盒的研制

在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1000μg/L,供试样品检测结果的批内、批间变异系数均低于8%,回收率均高于85%。试剂盒在4℃或－ 20℃条件下至少可保存6 个月。     

甲拌磷残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制

研制用于检测甲拌磷残留量的间接竞争ELISA试剂盒。甲拌磷包被抗原的最佳工作质量浓度为4mg/L,抗体的最佳稀释倍数为8000,甲拌磷多克隆抗体交叉反应率小于20%,甲拌磷抑制率回归曲线为y=18.846x＋6.9949,在1～5000μg/L范围内呈线性关系,检测限为4.90μg/L,IC50为191.37μg/L。甲拌磷试剂盒的添加回收率均高于75%,供试样品检测结果的批内和批间变异系数均低于10%。试剂盒在4℃或－20℃下有效期为270d。     

己烯雌酚残留检测ELISA试剂盒的研制及应用

在实验室前期制备的己烯雌酚多克隆抗体基础上建立间接竞争ELISA检测方法,研制出己烯雌酚残留ELISA快速检测试剂盒,并对其性能参数进行测定。结果表明,所选用的抗体对己烯雌酚亲和力高,除了与双烯雌酚、己烷雌酚的交叉反应率分别为6.83%和2.56%外,与其他结构类似物或功能类似物交叉反应率均小于0.01%;己烯雌酚残留检测的标准曲线为y=-28.71x+59.37,R2为0.9895,线性范围为0.08~8.17ng/mL,检测限IC10为0.05ng/mL,灵敏度IC50为1.09ng/mL,样品的加标回收率为80.04%~107.91%,平均批内和批间变异系数分别为6.41%和8.83%;与HPLC测定方法比对具有较高的相符性,相关系数R2为0.9882;该试剂盒在4℃下至少可保存6个月,可用于批量猪肉、鸡肉、鱼肉、饲料等样品中己烯雌酚残留的检测。     

饲料中11种拟除虫菊酯农药残留的检测方法

建立了一步提取三步净化法-气质联用技术检测饲料中四氟甲醚菊酯、胺菊酯、联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯等11种拟除虫菊酯农药残留的方法。样品经乙腈-水(体积比2∶1)溶液提取,正己烷萃取,再经正己烷饱和的乙腈萃取,固相萃取三步净化过程,经DB-5MS色谱柱分离,以氦气为载气,以选择离子扫描方式(SIM)检测。结果表明,方法线性相关系数r≥0.9893,仪器定量限为0.10~5.00μg/kg。样品加标的平均回收率为82.82%~118.54%,相对标准偏差为3.11%~9.22%。     

动物源性食品检测磺胺类残留ELISA试剂盒的研制

为开发一种能够稳定快速检测磺胺类药物残留,以自制抗原和单克隆抗体为材料,建立一种ELISA试剂盒快速检测方法。结果表明,抗原包被浓度2×104倍,抗体∶酶标二抗为2×104∶2000;方法灵敏度为3. 88 ng/m L,检测范围1. 18～41. 67 ng/m L,可以检测大多数磺胺类似药物,4℃试剂盒保存180 d参数稳定。样品进行的添加回收实验,磺胺类药物及其磺胺类似物回收率在67. 4%～117%,批间变异系数10%,批内变异系数10%。     

超声波提取-气相色谱法同时检测白菜中拟除虫菊酯残留

建立超声提取-气相色谱法(带ECD检测器)同时检测白菜中甲氰菊酯、氯氰菊酯和溴氰菊酯残留的方法。以乙腈作为提取剂,在53 k Hz,180 W,温度30℃条件下超声提取25 min,用弗罗里矽固相萃取柱净化,在氮气作载气的条件下,采用程序升温和不分流进样模式进行GC-ECD检测。3种农药在质量浓度0.1~50μg/m L范围具有良好的线性关系,方法回收率在73.59%~96.29%之间,相对标准偏差均小于10%(0.55%~5.9%)(n=6),方法检测限在0.02~0.04μg/L之间。该方法可大大节约提取溶剂,缩短测定时间。     

沙拉沙星ELISA快速检测试剂盒的研制及性能鉴定

利用已制备的高亲和力的抗沙拉沙星的单克隆抗体,研制沙拉沙星快速检测试剂盒,并对其性能进行鉴定。结果显示:研制的沙拉沙星试剂盒的标准曲线呈S型,符合4参数logit曲线拟合,相关线性方程为y=-0.384 8x+0.736 3,R2=0.990 1,IC50为4.11 ng/m L,LOD为2.06 ng/m L。与其他药物的交叉反应率(CR%)均低于1%;鸡肝和鸡肉中添加平均回收率分别为85.3%和88.7%,且变异系数均小于15%;试剂盒在4℃条件下保存6个月后检测能力无显著变化。     

三唑磷残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用

采用包被多克隆抗体直接竞争ELISA法研制一种检测水样、蔬菜和粮食样品中三唑磷残留的酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒。将不同浓度的三唑磷添加到水样、蔬菜和粮食样品中,用制备的试剂盒检测三唑磷残留并用气相色谱分析法(GC)进行验证,结果样品的加标回收率在65%～125%之间,变异系数<15%。对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定,结果表明:研制的试剂盒最低检测限为4.13ng/mL,线性检测范围3.9～500ng/mL;在4℃或-20℃条件下试剂盒有效期可达6个月。用ELISA试剂盒检测三唑磷残留具有可批量分析样品,快速、简便、灵敏、经济的特点,可广泛应用于环境监测和安全食品的生产。     

百菌清残留阻断ELISA试剂盒的研制及鉴定

目的 研制百菌清(Chlorothalonil, CTN)残留快速检测阻断ELISA试剂盒(CTN-Kit), 并对其特性进行测定。方法 基于一株分泌抗CTN高亲和力的CTN单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb), 应用阻断ELISA试验原理研制CTN-Kit。结果 CTN-Kit的标准曲线呈典型的S型, 相关系数R2=0.9922, 符合4参数logit曲线拟合, 线性检测范围为1.03~845.46 μg/L, 灵敏度为2.5 μg/L, 半数抑制浓度(IC50)为29.44 μg/L, 检测限为3.0 μg/L; 黄瓜样和番茄样的平均添加回收率分别为92.0%、94.0%, 平均批内和批间变异系数均低于10%; CTN-Kit与五氯硝基苯的交叉反应率(CR%)为1.7%, 与其他竞争物几乎没有反应性; 试剂盒在4 ℃可保存6个月以上。结论 CTN-Kit灵敏度高、准确性、重现性好, 可用于农产品中CTN的残留检测。     

SBSE-TDS-GC-MS快速测定茶叶中拟除虫菊酯类农药残留

采用固相萃取搅拌棒(SBSE)萃取茶叶中的拟除虫菊酯类农药,再用热脱附-气质联用仪分析。研究了萃取时间、不同浓度甲醇、不同浓度NaCl对萃取效率的影响;对热脱附温度、时间及冷阱收集温度等条件进行了优化。实验结果表明,SBSE-TDS-GC-MS方法对菊酯类农残的萃取回收率在92.8%～116.65%之间,相关系数≥0.9961;检测限为2.82～10.79μg/kg;方法RSD=11%(n=6)。用此方法测定了市售红茶(滇红)和乌龙茶(铁观音)中的菊酯类农药残留,其残留量低于茶叶中MRL。     

气相色谱法快速测定蔬菜水果中痕量拟除虫菊酯

目的 建立一种快速、准确测定蔬菜水果中拟除虫菊酯残留量的气相色谱法,并应用于广东省食品化学污染物网络监测工作中.方法 用石油醚提取,浓缩后经Florisil固相萃取柱净化,用气相色谱-电子捕获检测器测定,色谱柱为DB-1石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm).结果 小白菜中的平均回收率为86.2%～93.4%.相对标准差为3.4%～8.6%;苹果中的回收率为87.3%～92.8%,相对标准差为2.8%～8.1%.检测了511份蔬菜水果样品中5种拟除虫菊酯的残留量,检出率为17.4%,超标率为0.59%.结论 与GB/T 5009.146-2003比较,方法快速、准确、分析成本低,能满足拟除虫菊酯类农药痕量残留快速分析的要求.     

气相色谱法快速测定茶叶中有机氯、拟除虫菊酯和有机磷农药残留

目的建立QuEChERS提取净化结合气相色谱技术同时测定茶叶中有机氯、拟除虫菊酯和有机磷66种农药残留的方法。方法 20 mL乙腈(含1%乙酸)提取溶剂与5 g干燥茶样混匀后,加入4 g无水氯化钠和1 g乙酸钠,旋涡振摇2 min后超声提取20 min,离心(8000 r/min、5 min),吸取上清液(10 mL)与净化剂(250 mg PSA、250 mg GCB、1 g MgSO_4)旋涡混合2 min后离心(8000 r/min、5 min),上清液经浓缩复溶后一部分直接注入气相色谱-电子捕获检测器检测,另一部分经气相色谱-火焰光度检测器检测。结果通过对提取溶剂种类和净化剂用量等进行优化,添加水平为0.05~0.20 mg/kg时,回收率在73.75%~117.18%之间,精密度在0.36%~9.29%之间,线性范围在0.02~4.0 mg/kg之间(R~20.99),检测限在0.001~0.024 mg/kg之间,定量限在0.003~0.08 mg/kg之间,基本满足国内外对茶叶中农药最低残留量的标准要求。结论本方法简便快速,准确性好,成本低,已用于市面上销售的茶叶产品中有机氯、拟除虫菊酯和有机磷类农药残留测定,结果均低于国家标准GB2763-2014中规定的最大残留量要求。     

食品中柠檬酸快速检测试剂盒的研制

建立了一种酶法检测食品中柠檬酸含量的快速检测方法。将6 U L-苹果酸脱氢酶、9.13 U L-乳酸脱氢酶、0.5 mg烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、2 mg硫酸镁、3.783 mg海藻糖、5 mg聚乙二醇6000在0.2 mL 0.082 g/mL双甘肽质量浓度下-60 ℃冷冻5 h,室温条件下抽真空18 h得到试剂Ⅰ,0.468 U柠檬酸裂解酶在0.2 mL水体系冷冻干燥得到试剂Ⅱ。结果表明,该方法标准曲线线性关系良好,相关系数R2=0.995,线性范围1～80 μg/L;灵敏度0.25 mg/L;检测限0.5 mg/L;各样品回收率均在90%～110%。该试剂盒方法可以在20 min实现样品中柠檬酸的快速检测,方法灵敏度高、特异性高、快速简便,适合于食品生产企业对食品中的柠檬酸进行快速检测及对食品的质量和品质进行评价。     

不同处理方式对蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留的影响

目的探究不同处理方式对蔬菜中拟除虫菊酯类农药残留的影响。方法分别于2016年10月、2017年1月、2月在济南市农贸市场随机抽样采集根茎类,叶菜类,果菜类,薯芋类蔬菜样品共34份,将样品粉碎后提取拟除虫菊酯,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,简称ELISA)检测蔬菜中拟除虫菊酯残留量。随后,分别通过碱水溶液浸泡、洗涤剂清洗的方法处理样品,检测处理后蔬菜中拟除虫菊酯残留量,评价不同处理方法对蔬菜中拟除虫菊酯类残留的影响。结果 34份蔬菜中拟除虫菊酯检出率为100%;蔬菜中拟除虫菊酯类农药的残留量随着采样时间的不同而发生变化,秋季残留量较高,冬季残留量较低;碱处理和洗涤剂洗涤对蔬菜中拟除虫菊酯无明显去除效果。结论拟除虫菊酯类农药普遍存在与蔬菜中,且经碱处理和洗涤剂处理均无法有效去除蔬菜中此类农药残留。     

克百威残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研究

在多克隆抗体的基础上研制了一种适用于检测水样、土样和蔬菜样品中克百威残留的直接竞争酶联免疫吸附测定法(FLISA)试剂盒,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法相比较和验证将克百成添加到水样、土样和蔬菜样品中,用所制备的试剂盒和HPLC分析方法检测样品中的克百威残留,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定结果表明:研制的试剂盒最低检测限为0.01mg╱L,线性检测范围为0.01～10mg/L,供试样品检测结果的批内、批间、整体变异系数均低于8％,回收率均高于90％,符合农药残留分析要求。试剂盒在4℃或-20℃下至少可保存6个月用ELISA试剂盒检测杀虫剂克百威残留较常规的仪器分析具有操作简便、灵敏度高、特异性强、快速等特点,并能批量地分析样品,值得在安全食品的生产与环境污染监测中推广应用。     

蔬菜有机磷和拟除虫菊酯类农药残留研究

对460份蔬菜进行抽样监测,结果显示禁用农药氧化乐果和非禁用农药百菌清在蔬菜上使用频繁,不同种类蔬菜中以豆类农药残留枪出率最高平均为48.8%,不同季节中以7月份蔬菜农药残留检出率最高平均为36%,不同蔬菜来源中以超市蔬菜农药残留不合格率最高平均为13.3%.     

茶鲜叶中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法

拟除虫菊酯农药用量少,杀虫效果好,广泛应用于茶园害虫的控制,是我国出口茶叶中必检的农药。为实现茶叶生产危害分析关键控制点(HACCP)体系中农药残留的源头控制,提供农残源头监督检验方法依据,避免大量使用农药对茶园土壤环境造成的污染,开发茶鲜叶中菊酯类农药的多残留检测方法有重要的实践意义。本实验用V(石油醚)∶V(丙酮)=1∶1混合溶剂提取,经弗罗里硅土柱层析净化除去干扰物质,采用气相色谱,微电子捕获检测器(μECD)测定茶鲜叶中主要的6种拟除虫菊酯类农药残留量。方法最低检出浓度为0.005～0.01mg/kg;茶鲜叶中拟除虫菊酯农药的添加浓度为0.05、0.2、1.0mg/kg,其回收率在83.6%～104.5%,相对标准偏差(RSD)为2.7%～10.2%,符合农药残留分析要求。     

牛奶中抗生素残留检测试剂盒的研制及应用

对嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢的生成、营养基质、各成分添加比例等条件进行了研究,研制出检测牛奶中抗生素残留的96孔板试剂盒。此试剂盒对牛奶中青霉素G的检测极限为3ng/mL,阿莫西林的检测极限为4ng/mL,头孢匹林的检测极限为8ng/mL。同一批奶样检测结果证明,此试剂盒与西班牙ZEU-INMUNOTEC公司同类试剂盒产品质量相当,灵敏度高于国标TTC法,适于推广应用。     

牛奶中抗生素残留检测试剂盒的研制及应用

对嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢的生成、营养基质、各成分添加比例等条件进行了研究,研制出检测牛奶中抗生素残留的96孔板试剂盒。此试剂盒对牛奶中青霉素G的检测极限为3ng/mL,阿莫西林的检测极限为4ng/mL,头孢匹林的检测极限为8ng/mL。同一批奶样检测结果证明,此试剂盒与西班牙ZEU-INMUNOTEC公司同类试剂盒产品质量相当,灵敏度高于国标TTC法,适于推广应用。