来源于P.bacterium 1109的甘露醇脱氢酶的重组纯化及酶学性质研究

本文将来自P.bacterium 1109的甘露糖醇脱氢酶(MDH)表达并提取纯化,研究了该重组酶的酶学性质及其在甘露醇生产中的工艺条件。结果显示重组MDH是一个相对分子量为37 kDa的四聚体。氨基酸序列比对发现其与大多数MDHs的同源性小于40%。该酶的最适pH和温度分别为8.5和80℃,且当金属离子Zn2+存在时,重组MDH的活力提高到对照组的260%。此外,重组MDH在75℃孵育6 h后仍可保留超过85%的残留活性,热稳定性较高,比大多数MDHs的活性高。底物特异性研究表明其对D-果糖具有较高的专一性。重组MDH催化D-果糖的米氏常数(K_m)和催化效率(k_cat/K_m)分别为20 mmol/L和7.5 L/(mmol·min)。重组MDH在以400 mmol/L的D-果糖为底物的反应系统中,可将80%以上的D-果糖转化为甘露糖醇。通过对反应条件的优化,为后续工业化生产制备甘露醇奠定了基础。     

产骨胶原蛋白酶菌的筛选及发酵条件优化的研究

经初筛和复筛从骨骼厂土样中筛选出高产骨胶原蛋白酶的菌种MBL1,针对其产酶的最佳菌龄和发酵条件进行优化研究.结果表明,最佳接种菌的种龄选用培养24h,接种量为5%,起始pH值为7.0,150ml三角瓶最佳装液量20ml,发酵温度32℃.且在优化后的发酵条件下,该菌产酶酶活较优化前酶活提高了35%,达到49.83U/ml.     

表达金丝桃素合成酶的基因工程菌发酵工艺研究

采用摇瓶发酵试验,分别对影响工程菌生长和表达的条件：培养基初始pH值、诱导温度、诱导时间、诱导物浓度等进行了考察,优化了重组大肠杆菌的发酵条件,确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺,即工程菌在pH值为7．4、温度为25℃、IPTG（异丙基硫代-D-半乳糖）浓度为0．8mmol／L时蛋白表达量最高。     

L-精氨酸产生菌发酵培养基及发酵条件优化的初步研究

本文以钝齿棒杆菌诱变菌为实验菌株,采用摇瓶发酵的方式,研究了培养基组分（碳源、有机氮源、无机氮源及无机盐离子）与发酵培养条件（温度、接种量、初始p H及发酵液体积）对菌种产L-精氨酸的产量的影响。结果表明,该菌产L-精氨酸发酵培养基的最佳组分为:葡萄糖12%、硫酸铵4.5%、玉米浆2.5%、KH2PO40.005%、Mg SO4·7H2O0.01%、Fe Cl3·6H2O 0.01%、Mn SO4·H2O 0.05%及碳酸钙3%;最佳发酵条件是:培养温度为30℃、接种量为10%、初始p H为7.0及装液量为15m L/250m L。该菌以最优结果发酵,L-精氨酸的产量较基本培养基提高27.7%,达到了11.23g/L。      

L-精氨酸产生菌发酵培养基及发酵条件优化的初步研究

本文以钝齿棒杆菌诱变菌为实验菌株,采用摇瓶发酵的方式,研究了培养基组分(碳源、有机氮源、无机氮源及无机盐离子)与发酵培养条件(温度、接种量、初始p H及发酵液体积)对菌种产L-精氨酸的产量的影响。结果表明,该菌产L-精氨酸发酵培养基的最佳组分为:葡萄糖12%、硫酸铵4.5%、玉米浆2.5%、KH2PO40.005%、Mg SO4·7H2O0.01%、Fe Cl3·6H2O 0.01%、Mn SO4·H2O 0.05%及碳酸钙3%;最佳发酵条件是:培养温度为30℃、接种量为10%、初始p H为7.0及装液量为15m L/250m L。该菌以最优结果发酵,L-精氨酸的产量较基本培养基提高27.7%,达到了11.23g/L。     

高产SOD菌株筛选及发酵条件的研究

为了探索菌株中SOD的含量,从4种不同的菌株中筛选出1株超氧化物歧化酶（SOD）产量较高的菌株,以高产菌株作为出发菌株进行SOD活性的研究。以酶活力为指标通过三因素三水平的正交实验、极差分析和方差分析,确定出最佳的发酵培养基配方。实验结果表明：初步优化的培养基条件为25%葡萄糖、0.6%的酵母粉和0.1%的玉米浆,在此...     

红霉素高产突变菌株发酵工艺优化

以红色糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)高产突变株N5为研究对象,通过单因素及正交试验结果确定发酵培养基最佳组成为:葡萄糖3%,淀粉3%,玉米浆0.15%,硫酸铵0.7%,豆油0.3mL/25mL。此外,培养条件优化结果为:发酵的最佳接种量10%;最佳装液量50mL/250mL;最佳初始pH值为6.5;最佳培养温度33℃;发酵时间156h。     

固定化葡萄糖异构酶活化条件对其酶活的影响

固定化葡萄糖异构酶在使用前需先进行活化,从而使酶发挥其最佳催化功效。本文从糖液浓度、温度、pH、活化时间和金属离子五个方面研究了活化条件对GENSWEETTMIGI-SA固定化葡萄糖异构酶酶活的影响。该酶的最适活化条件为:葡萄糖液浓度60%、温度55℃、pH7.5、时间4h。经此条件活化之后,其酶活达815U/g,与常规活化条件相比,酶活提高了40%以上。固定化葡萄糖异构酶活化时不宜加入Mg2+、Co2+、Mn2+和Zn2+。      

耐酸性α-淀粉酶高产菌株发酵条件优化

对耐酸性α-淀粉酶高产菌株ASA-UD86进行发酵条件优化,研究发现该菌株适宜的发酵工艺条件为培养基以麦麸为主要原料,加入豆饼粉补充氮源,麦麸:豆饼粉为1:0.5,料水比为1:1.2,培养温度为30℃,发酵时间60h￣72h,初始pH值自然。     

脂肪酶产生菌NJY-1-7的选育及发酵条件的研究

从云南省福贡县的玉米地土壤样品中筛选到一株耐高温产碱性脂肪酶的菌株NJY-1-7,通过16SrDNA鉴定该菌株为伯克氏菌(Burkholderia cenocepacia)。对其发酵条件进行研究结果表明:该菌株产酶的最适培养时间为48h,酶促反应的最适作用pH值为9.0,最适作用温度为50℃,摇瓶发酵最适产酶条件为橄榄油1%,MgSO4.7H2O 0.05%,可溶性淀粉0.3%,酵母膏0.5%,单蒸水70mL。在此条件下发酵脂肪酶酶活力为42.00U/mL。     

The anaerobic conversion of methanol under thermophilic conditions: pH and bicarbonate dependence

The thermophilic (55 degrees C) anaerobic conversion of methanol was studied in an unbuffered medium (pH 4+/-0.2) and in a phosphate buffered medium (pH 6.4+/-0.1), in both cases without bicarbonate addition. Our cultivated sludge consortium was unable to degrade methanol under acidic conditions. During the 160 d of continuous operation of an up-flow anaerobic sludge blanket (UASB) reactor (R1), at an organic loading rate (ORL) of 6 gCOD/(l.d) and pH around 4, only 5% of the applied methanol load was consumed and no methane (CH4) was detected. However, hydrogenotrophic methanogens were found to be resistant to exposure to such conditions. At the end of the trial, the hydrogenotrophic methanogenic activity of the sludge was 1.23+/-0.16 gCOD/(gVSS.d) at neutral pH. With methanol as the test substrate, the addition of bicarbonate led to acetate accumulation. A second reactor (R2) was operated for 303 d at OLRs ranging from 5.5 to 25.4 gCOD/(l.d) in order to assess the conversion of methanol at neutral pH (phosphate buffered) in a bicarbonate deprived medium. The reactor performance was poor with a methanol-COD removal capacity limited to about 9.5 gCOD/(l.d). The system appeared to be quite susceptible to any type of disturbance, even at low OLR. The fraction of methanol-COD converted to CH4 and acetate was found to be unaffected by the OLR applied. At the end of the trial, the outcome of the competition was about 50% methanogenesis and 50% homoacetogenesis.